一种可利用木糖发酵生产光学纯L-乳酸的工程菌及其构建

摘要

本发明公开了一种可利用木糖发酵生产光学纯L-乳酸的工程菌及其构建方法与应用，该工程菌由以下步骤构建得到：合成卡那抗性基因，并将其插入到大肠杆菌和嗜热厌氧杆菌穿梭载体中；扩增乙酸激酶编码基因的某一段序列，为pta-up序列；再将pta-up序列插入到大肠杆菌和嗜热厌氧杆菌穿梭载体中，构建得到自杀载体1；扩增磷酸转乙酰酶编码基因的某一段序列，为ack-down序列；再将ack-down序列插入到自杀载体1中，获得自杀载体pPuKAd；将自杀载体pPuKAd转化入嗜热厌氧杆菌，并经抗性筛选后得到可利用木糖发酵生产光学纯L-乳酸的工程菌。用本发明的工程菌进行乳酸的发酵生产，不产生乙酸，碳代谢流进行了重新分配，促进了目标产物L-乳酸的大量积累，所得L-乳酸的光学纯度达99.5％以上。