一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法

摘要

本发明公开了一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法，其步骤为：1、取空心莲子草药材用乙醇回流提取；2、将醇提液减压回收，并将药液稀释后过滤；3、滤液通过D101大孔吸附树脂柱吸附并用蒸馏水和不同浓度的乙醇洗脱；4、将洗脱液减压回收，浓缩至相对密度1.01-1.10，干燥即得。本发明得到空心莲子草有效部位群提取物产品中总黄酮含量可达3-5wt%，转移率为50-70%；总皂苷含量可达15-18wt%，转移率为40-60%。本发明所得有效部位群提取物的制备工艺国内外未见相关资料报道。其提取纯化工艺简单，有效物质含量较高，降低了生产成本，节约了能源，减少了生产中的安全隐患，符合中药产业现代化的要求。

说明书

技术领域

本发明属于中药有效部位群的提取纯化技术领域，更具体涉及一种空心莲子 草有效部位群提取物的制备方法，该方法能有效提取出空心莲子草中的总黄酮和 总皂苷。

背景技术

空心莲子草[Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb]为苋科 (Amaranthaceae)莲子草属(Alternanthera)多年生宿根草本植物，曾收载于《中 国药典》1977年版一部，具有清热解毒、凉血利尿的功效。近20年的文献报道， 空心莲子草具有抗病毒、调节免疫、抗肝损伤等作用，临床上用于治疗荨麻疹、 流行性感冒、乙型脑炎、流行性出血热等病毒性疾患。莲子草属植物含有多种化 学成分，迄今已从中分离鉴定的化学成分包括：三萜类、黄酮类、生物碱、内酰 胺、有机酸类、植物甾醇类、氨基酸和无机盐等。本实验室近20多年对空心莲 子草的抗病毒研究表明，乙酸乙酯部位和正丁醇部位为主要活性部位。因此，开 发空心莲子草有效部位群提取物具有重要意义。

目前关于空心莲子草的药效物质的提取纯化方法仅收载于1977年版《中国 药典》，其方法为水提醇沉，并用醋酸铅沉淀，再用硫化氢脱铅。此方法工艺落 后，质量不可控，并且非常容易引起铅中毒，因此日后的药典中并未将此制备工 艺收录其中。目前关于空心莲子草的药效物质的提取纯化方法尚未见报道，而国 内外有效抗病毒药物较少，抗病毒药物仍是国内外学者研究的热点。空心莲子草 的自然资源十分丰富，具有广谱抗病毒作用，而且积累了一定临床用药经验，因 此其开发应用前景广阔。

发明内容

针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供了一种空心莲子草有效 部位群提取物的制备方法。

为了实现上述目的，本发明采用的技术措施如下：

一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法，其步骤如下：

a.称取空心莲子草[Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb]药材 (水生空心莲子草干燥后粉碎成段，长度约1cm)，每次按照其重量的6-10倍加 入50-70v/v％乙醇先浸泡0.5-2小时，再加热回流提取1-3小时后过滤得乙醇提 取液，提取1-3次后合并乙醇提取液；

b.将合并的乙醇提取液减压回收乙醇，然后将剩余药液用蒸馏水稀释至以 生药量计浓度为0.1-0.2g/ml，静置过滤后，得到滤液；

c.滤液以每小时0.5-3倍柱床体积的流速通过径高比为1∶4-1∶12的D101 大孔吸附树脂柱(树脂重量：药材重量＝1∶0.4-1∶0.6)，然后先用2-5倍树脂质 量的水以每小时0.5-3倍柱床体积的流速进行洗脱并弃去水洗液，再用2-4倍柱 床体积的10-30v/v％的乙醇以每小时0.5-3倍柱床体积的流速进行洗脱并弃去 醇洗液，最后再用2-6倍柱床体积的40-90v/v％的乙醇以每小时0.5-3倍柱床 体积的流速洗脱树脂上的有效物质并收集此部分乙醇洗脱液；

d.将步骤c收集的乙醇洗脱液进行减压浓缩回收乙醇，浓缩至相对密度为 1.01-1.10，浓缩液经喷雾干燥，即得到空心莲子草有效部位群的提取物。

上述提取方法的优选条件为：

步骤a中，每次按照药材重量的6-10倍加入60v/v％乙醇浸泡1小时，然后 回流提取，提取次数为3次，第一次为2小时，第二次为1小时，第三次为1 小时；

步骤b中，将合并的乙醇提取液减压回收，然后将剩余药液稀释至以生药量 计浓度为0.15g/ml；

步骤c中，首先将滤液以每小时2倍柱床体积的流速通过径高比为1∶8的 D101大孔树脂进行吸附，然后用4.5倍树脂质量的水以每小时2倍柱床体积的 流速洗脱并弃去水洗液，再用2倍柱床体积的20v/v％的乙醇以每小时2倍柱床 体积的流速洗脱并弃去醇洗液，最后用4倍柱床体积的70v/v％的乙醇以每小时 2倍柱床体积的流速洗脱树脂上的有效物质并收集此部分乙醇洗脱液；

步骤d中，喷雾干燥条件为：进风口温度为175℃，出风口温度为85℃，雾 化盘转速为20000转/分钟。

利用本发明方法制备得到的提取物中总黄酮的含量可达3-5wt％，转移率为 50-70％；总皂苷的含量可达15-18wt％，转移率为40-60％。

与现有技术相比，本发明方法具有以下优点：

1.本发明采用乙醇作为空心莲子草的提取溶媒，提取液用D101大孔吸附树 脂纯化得到总黄酮和总皂苷提取物，工艺流程简单，有效物质含量较高，生产成 本低，节约了能源，控制了环境污染，减少了生产中的安全隐患，符合中药产业 现代化的要求。

2.本发明采用D101大孔吸附树脂技术提取纯化有效部位群，具有工艺简 单，成本低的优点，树脂可反复使用，适合工业生产的特点。与77年版《中国 药典》的铅盐沉淀法相比，用药更安全，质量更可控。而且本发明方法中的相关 技术参数进行了细致周密的考察，优选出最佳条件，并进行了中试验证，证明可 过渡到产业化，提高了有效物质的纯度。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明方法做进一步的详细说明。

实施例1

一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法，步骤如下：

a、称取空心莲子草药材，按照其重量的6-10倍加入浓度为60v/v％的乙醇 先浸泡1h，然后回流提取，共提取三次，合并三次提取液，得乙醇提取液；

第一次提取时60v/v％的乙醇加入量为药材重量的10倍，第二次为药材重 量的8倍，第三次为药材重量的6倍；

第一次回流提取的时间为2小时，第二和第三次回流提取的时间均为1小时。

b、将乙醇提取液减压回收乙醇，剩余的药液稀释至以生药量计浓度为 0.15g/ml，静置后过滤，得到滤液；

c、滤液首先以每小时2倍柱床体积的流速通过径高比为1∶8的D101大孔 吸附树脂柱进行吸附(树脂重量∶药材重量＝1∶0.5)，先用4.5倍树脂质量的水 以每小时2倍柱床体积的流速进行洗脱并弃去水洗液，再用2倍柱床体积的 20v/v％的乙醇以每小时2倍柱体积的流速洗脱并弃去醇洗液，最后再用4倍柱床 体积的70v/v％的乙醇以每小时2倍柱床体积的流速洗脱树脂上的有效物质并收 集此部分乙醇洗脱液；

d、将步骤c收集的乙醇洗脱液进行减压浓缩回收乙醇，药液浓缩至相对密 度为1.05，浓缩液经喷雾干燥，得到空心莲子草有效部位群提取物；

喷雾干燥条件为：进风口温度为175℃，出风口温度为85℃，雾化盘转速为 20000转/分钟。

得到的提取物中总黄酮的含量达5wt％，转移率为65％；总皂苷的含量达 17wt％，转移率为57％。

实施例2中试放大试验

一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法，步骤如下：

a、称取12Kg空心莲子草药材，每次加6-10倍药材重量的60v/v％乙醇先 浸泡1小时后，再加热回流提取，一共提取三次，合并三次提取液，得乙醇提取 液；

第一次提取时60v/v％乙醇加入量为药材重量的10倍，第二次为药材重量的 8倍，第三次为药材重量的6倍；

第一次回流提取的时间为2小时，第二和第三次回流提取的时间均为1小时；

b、将乙醇提取液减压回收乙醇，剩余药液稀释至体积为80L(以生药量计 浓度为0.15g/ml)，抽滤得上样药液；

c、将24Kg药用级D101型大孔吸附树脂用适量乙醇浸泡，湿法装柱，处理 后备用。以2Bv/h的加样流速进行吸附，树脂床径高比为1∶8，吸附完毕后， 用4.5倍树脂质量的蒸馏水以2Bv/h的流速洗脱并弃去水洗液，再用2倍柱床体 积20v/v％的乙醇以每小时2倍柱床体积流速进行洗脱并弃去醇洗液，最后再用4 倍树脂柱体积的70v/v％乙醇以2Bv/h的流速进行洗脱，收集此部分乙醇洗脱液；

d、将步骤c收集的乙醇洗脱液减压浓缩回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05， 然后将浓缩液喷雾干燥(进风口温度为175℃，出风口温度为85℃，雾化盘转速 为20000转/分钟)，得到空心莲子草有效部位群提取物。

采用紫外-可见分光光度法测量提取物中有关物质的含量，计算转移率(转 移率＝提取物中的含量/原药材中的含量×100％)和收膏率(收膏率＝提取物总 重量/原药材总重量×100％)。

采用上述方法，取12Kg空心莲子草药材，共3批，进行空心莲子草有效部 位群提取纯化中试放大试验，结果见下表。

中试试验结果

结果表明：提取物中总黄酮和总皂苷含量之和可达22wt％，总黄酮和总皂苷 转移率均在55％以上。表明本试验研究的工艺参数可行，工艺条件经中试进一步 调整后，可过渡到产业化生产。