用于治疗癌症的作为WNT信号通路抑制剂的基于吡啶和嘧啶的化合物

摘要

本发明涉及基于吡啶和嘧啶的化合物、包含这些化合物的药物组合物以及它们作为治疗和/或预防癌症的治疗剂的潜在用途。

说明书

发明领域

本发明涉及化合物及其治疗用途，特别是治疗、预防癌症或延缓其进展的用途。

背景技术

Wnt信号通路的致癌性失调是许多组织中引发癌症的引发因素，其中所述的组织包括结肠、乳腺和肝脏(例如，参见，Barker等，“挖掘用于癌症治疗的Wnt通路(Mining the Wnt pathway for cancer therapeutics)”，Nature Reviews Drug Discovery，2006年12月，Vol.5，997)。现仍需要有效的抗癌剂，尤其是Wnt信号通路的抑制剂。

WO 01/27107公开了可用于治疗心血管疾病的杂环的钠/质子交换抑制剂。其包括了被咪唑基哌啶基取代的嘧啶化合物。

发明概述

根据本发明，提供了式(I)化合物

其中，

W、X和Y各自独立地是CH、C(R⁴)或N；

Z是C(R⁶)或N；

R¹和R²各自独立地是氢或C_1-6烷基；或R¹及R²与其连接的碳原子一起可形成5-或6-元碳环或杂环，它们中的任意一个任选被1、2、3、4或5个R^a取代；

R³和R⁴各自独立地是卤素或选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、碳环基和杂环基的基团，所述基团中的任何一个任选被1、2、3、4或5个R^a取代；

当Z是N时，R⁵是R⁷、-C(O)R⁷、-C(O)OR⁷-、-S(O)_lR⁷、-C(O)N(R⁷)R⁸、-C(S)N(R⁷)R⁸-、-S(O)_lN(R⁷)R⁸或任选地被1、2、3、4或5个R^a取代的杂环基；

当Z是C(R⁶)时，R⁵是H、CN、C(O)OH、-C(O)R⁷、-C(O)OR⁷-、-S(O)_lR⁷、-N(R⁶)R⁷、-C(O)N(R⁷)R⁸、-C(S)N(R⁷)R⁸-、-S(O)_lN(R⁷)R⁸、-N(R⁷)C(O)R⁸、-N(R⁷)S(O)_lR⁸或任选地被1、2、3、4或5个R^a取代的C_1-6烷基或杂环基；

R⁶是氢、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-OH、R⁵、(CH₂)_mR⁵或-N(R⁷)R⁸；

或R⁵和R⁶与其连接的碳原子一起可形成任选被1、2、3、4或5个R^a取代的5-或6-元杂环；

R⁷和R⁸各自独立地是氢或选自以下的基团：任选地含有1、2或3个选自N、O和S的杂原子的C_1-6烷基，碳环基和杂环基，其任何一个任选地被1、2、3、4或5个R^a取代；

或R⁷和R⁸可以相连接从而与它们所连接的原子一起形成任选地被1、2、3、4或5个R^a取代的5-或6-元杂环；

每一个R^a独立地选自卤素、三氟甲基、氰基、氧代、硝基、-OR^b、-C(O)R^b、-C(O)OR^b、-OC(O)R^b、-S(O)_lR^b、-N(R^b)R^c、-N(R^b)C(O)R^c、-C(O)N(R^b)R^c、-S(O)_lN(R^b)R^c和R^d；

R^b和R^c各自独立地是氢或R^d；

R^d选自烃基(例如，C_1-6烷基)、碳环基、碳环基-C_1-6烷基和杂环基，其任何一个任选被1、2、3、4或5个独立地选自卤素、氰基、氨基、羟基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基的取代基所取代；

l是0、1或2；并且

m和n各自独立地是1、2或3；

或其可药用盐、N-氧化物或前药。

在另一方面，本发明提供了用于治疗、预防癌症或延缓其进展的式(I)化合物

其中，

W、X和Y各自独立地是＝CH-、＝C(R⁴)-或＝N-；

Z是C(R⁶)或N；

R¹和R²各自独立地是氢或C_1-6烷基；或R¹和R²与其连接的碳原子一起可形成5-或6-元碳环或杂环，其任何一个任选被1、2、3、4或5个R^a取代；

R³和R⁴各自独立地是卤素或选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、碳环基和杂环基的基团，所述基团中的任何一个任选被1、2、3、4或5个R^a取代；

当Z是N时，R⁵是R⁷、-C(O)R⁷、-S(O)_lR⁷、-C(O)N(R⁷)R⁸、-S(O)_lN(R⁷)R⁸或任选地被1、2、3、4或5个R^a取代的杂环基；

当Z是C(R⁶)时，R⁵是H、-CN、C(O)OH、-C(O)R⁷、-S(O)_lR⁷、-N(R⁶)R⁷、-C(O)N(R⁷)R⁸、-S(O)_lN(R⁷)R⁸、-N(R⁷)C(O)R⁸、-N(R⁷)S(O)_lR⁸或任选地被1、2、3、4或5个R^a取代的杂环基；

R⁶是氢、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-OH、R⁵或-(CH₂)_mR⁵；

或R⁵和R⁶与其连接的碳原子一起可形成任选地被1、2、3、4或5个R^a取代的5-或6-元杂环；

R⁷和R⁸各自独立地是氢或选自以下的基团：任选地含有1、2或3个选自N、O和S的杂原子的C_1-6烷基，碳环基和杂环基，其任何一个任选地被1、2、3、4或5个R^a取代；

每一个R^a独立地选自卤素、三氟甲基、氰基、氧代、硝基、-OR^b、-C(O)R^b、-C(O)OR^b、-OC(O)R^b、-S(O)_lR^b、-N(R^b)R^c、-N(R^b)C(O)R^c、-C(O)N(R^b)R^c、-S(O)_lN(R^b)R^c和R^d；

R^b和R^c各自独立地是氢或R^d；

R^d选自烃基和杂环基，其任何一个任选地被1、2、3、4或5个独立选自卤素、氰基、氨基、羟基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基的取代基所取代；

l是0、1或2；并且

m和n各自独立地是1、2或3；

或其可药用盐、N-氧化物或前药。

本发明还提供了包含式(I)化合物或其可药用盐、以及可药用载体或赋形剂的药物制剂。

另一方面，本发明涉及式(I)化合物或其可药用盐在制备用于治疗、预防癌症或延缓其进展的药物中的用途。还提供了治疗、预防癌症或延缓其进展的方法，其包括向个体施用治疗有效量的本发明化合物。

本发明化合物可作为不同的形式(例如游离酸、游离碱、酯、N-氧化物和其他前药、盐和互变异构体)存在，并且本发明包括所述化合物的所有变体形式。

应当理解，就本发明的特定方面、实施方案或实施例描述的特征、整数、特性、化合物、化学部分或基团可适用于本文描述的任何其他方面、实施方案或实施例，除非与其不相容。

各实施方案的描述

定义

烃基

本文所使用的术语“烃基”是指仅由氢和碳原子组成的基团；此类基团可包括脂肪族和/或芳香族基团。该基团例如可包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个碳原子。烃基的实例包括C_1-6烷基(例如，C₁、C₂、C₃或C₄烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基)；被以下基团取代的C_1-6烷基：芳基(例如，苄基)或环烷基(例如，环丙基甲基)；环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基或环己基)；烯基(例如，2-丁烯基)；炔基(例如，2-丁炔基)；芳基(例如，苯基、萘基或芴基)等。

烷基

本文使用的术语“烷基”和“C_1-6烷基”是指具有1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链烷基基团。该术语包括例如以下的基团：甲基、乙基、丙基(正丙基或异丙基)、丁基(正丁基、仲丁基或叔丁基)、戊基、己基等。特别是，烷基可具有1、2、3或4个碳原子。

烯基

本文所使用的术语“烯基”和“C_2-6烯基”是指具有2、3、4、5或6个碳原子并且还具有至少一个双键(在适当时为E或Z立体化学的)的直链或支链烷基基团。这一术语包括诸如以下的基团：乙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、1-己烯基、2-己烯基和3-己烯基等。

炔基

本文所使用的术语“炔基”和“C_2-6炔基”是指具有2、3、4、5或6个碳原子并且还具有至少一个叁键的直链或支链烷基基团。这一术语包括诸如以下的基团：乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、1-己炔基、2-己炔基和3-己炔基等。

烷氧基

本文所使用的术语“烷氧基”和“C_1-6烷氧基”是指-O-烷基，其中烷基为直链或支链的，并且包含1、2、3、4、5或6个碳原子。在一类实施方案中，烷氧基具有1、2、3或4个碳原子。这一术语包括诸如以下的基团：甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。

环烷基

本文所使用的术语“环烷基”是指具有3、4、5、6、7或8个碳原子的脂环基团。该基团可以是桥连的或多环的环系统。更通常的环烷基是单环的。这一术语包括诸如以下的基团：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、降冰片烷基(norbornyl)、二环[2.2.2]辛基等。

芳基

本文所使用的术语“芳基”是指包含6、7、8、9或10个环碳原子的芳香环系统。芳基通常是苯基，但可以是具有两个或多个环并且至少一个环是芳族的多环系统。这一术语包括诸如苯基、萘基等的基团。

碳环基

本文所使用的术语“碳环基”是指具有3、4、5、6、7、8、9或10个环碳原子的饱和(例如，环烷基)或不饱和(例如，芳基)的环基团。特别是，碳环基包括3至10元环或环系统，并且特别是5或6元环，其可以是饱和的或不饱和的。碳环基团例如选自：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、降冰片烷基、二环[2.2.2]辛基、苯基、萘基等。

杂环基

本文所使用的术语“杂环基”是指含有3、4、5、6、7、8、9或10个环原子的饱和(例如，杂环烷基)或不饱和(例如，杂芳基)的杂环基团，其中至少一个环原子选自氮、氧、磷、硅和硫。特别是，杂环基包括3至10元环或环系统，并且更特别为5或6元环，其可以是饱和的或不饱和的。

杂环基基团例如选自：环氧乙烷基、吖丙因基、1，2-氧硫杂环戊烷基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、四氢呋喃基、吡喃基、噻喃基、噻蒽基、异苯并呋喃基、苯并呋喃基、色烯基、2H-吡咯基、吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑烷基、苯并咪唑基、吡唑基、吡嗪基、吡唑烷基、噻唑基、异噻唑基、二噻唑基、唑基、异唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哌啶基、哌嗪基、哒嗪基、吗啉基、硫代吗啉基尤其是硫代吗啉代、吲嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、苯并咪唑基、cumaryl、吲唑基、三唑基、四唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、八氢异喹啉基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、苯并噻吩基、二苯并噻吩基、酞嗪基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、萘嵌二氮杂苯基、菲咯啉基、呋咱基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩嗪基、色烯基、异色满基、色满基等。

杂环烷基

本文所使用的术语“杂环烷基”是指具有3、4、5、6或7个环碳原子和1、2、3、4或5个选自氮、氧、磷和硫的环杂原子的饱和杂环基。该基团可以是多环的环系统，但更通常是单环的。这一术语包括诸如以下的基团：吖丁啶基、吡咯烷基、四氢呋喃基、哌啶基、环氧乙烷基、吡唑烷基、咪唑基、吲哚里西啶基(indolizidinyl)、哌嗪基、噻唑烷基、吗啉基、硫代吗啉基、喹诺里西啶基(quinolizidinyl)等。

杂芳基

本文所使用的术语“杂芳基”是指具有5、6、7、8、9或10个环原子的芳香杂环，其中至少一个环原子选自氮、氧和硫。该基团可以是具有两个或更多个环(其中至少一个环为芳香族的)的多环环系统，但更通常是单环的。这一术语包括诸如以下的基团：嘧啶基、呋喃基、苯并[b]噻吩基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡咯烷基、吡啶基、苯并[b]呋喃基、吡嗪基、嘌呤基、吲哚基、苯并咪唑基、喹啉基、吩噻嗪基、三嗪基、酞嗪基、2H-色烯基、唑基、异唑基、噻唑基、异吲哚基、吲唑基、嘌呤基、异喹啉基、喹唑啉基、蝶啶基等。

卤素

本文所使用的术语“卤素”是指F、Cl、Br或I。特别是，卤素可以是F或Cl，其中F是更常用的。

取代的

本文所使用的术语“取代的”，当论及基团时，是指所述基团中的一个或多个、尤其是至多5个、更尤其是1、2或3个氢原子彼此独立地被相应数目的所述取代基替换。本文所使用的术语“任选取代的”是指取代的或未被取代的。

当然，应当理解取代基仅位于它们在化学上可能的位置，本领域技术人员不需要过多的努力即能确定(实验地或理论地)特定的取代是否是可能的。例如，如果与具有不饱和(例如，烯属)键的碳原子结合，则具有游离氢的氨基或羟基可能是不稳定的。此外，当然还应当理解本文描述的取代基本身可被任何取代基取代，但要受到前述的合适取代的限制，如本领域技术人员所知的那样。

可药用的

本文所使用的术语“可药用的”涉及在可靠医学判断范围内适于与人类或动物的组织接触，而没有过多的毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，并具有合理的益处/风险比的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。这一术语包括对于人用和兽用目的是可接受的。

独立地

当两个或多个基团被描述为“各自独立地”选自原子或基团列表时，这是指所述基团可以是相同或不同的。因此，每一个基团的身份(identity)独立于一个或多个其它基团的身份。

化合物

本发明提供了式(I)化合物及其可药用盐、N-氧化物和前药：

其中，W、X、Y、Z、R¹、R²、R³、R⁵、m和n如本文所定义。

以下描述了本发明的各实施方案。应当理解，每一实施方案中具体描述的特征可与其它具体说明的特征组合，从而提供其它实施方案。

在一个实施方案中，m和n各自独立地选自1或2。

在一个实施方案中，m和n是1。

在一个实施方案中，m和n之一是1，且另一个是2。

在一个实施方案中，m和n每一个都是2。

在一个实施方案中，R¹和R²各自独立地是氢或甲基；或R¹和R²与它们连接的碳原子一起形成含有选自O和N的环杂原子的5-或6元杂环。

在一个实施方案中，R¹和R²各自独立地是氢或甲基。

在一个实施方案中，R¹和R²每一个都是氢。

在一个实施方案中，X和Y各自独立地选自CH和C(R⁴)，并且W选自CH、C(R⁴)和N。

在一个实施方案中，X和Y每一个都是CH；并且W是CH、C(R⁴)或N。

在一个实施方案中，W是CH、C(R⁴)或N。在一特别的实施方案中，W是C(R⁴)或N。在另一实施方案中，W是C(R⁴)。特别提及的是其中R⁴是卤素(例如氯或溴)的化合物。

在一个实施方案中，式(I)中显示的杂芳基环含有至少一个作为N-氧化物形式的环氮原子。合适地，在此类实施方案中，原子X和Y之间的氮原子为N-氧化物的形式。

在一个实施方案中，R³是卤素(例如，氯或溴)或选自C_1-6烷基、芳基和杂芳基的基团，所述基团中的任何一个任选地被1、2、3、4或5个R^a取代。例如，每一个R^a可独立地选自卤素、氰基、氨基、羟基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基。

在另一实施方案中，R³是卤素(例如，氯或溴)或选自C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基以及5-或6-元杂芳基的基团，其任何一个任选地被1、2或3个R^a取代。例如，每一个R^a可独立地选自卤素、氰基、氨基、羟基、三氟甲基、C_1-4烷基、NH(C_1-4烷基)、N(C_1-4烷基)₂、-S(O)_lC_1-4烷基(其中l是0、1或2)和C_1-4烷氧基。

在一个实施方案中，R³是卤素(例如，氯或溴)或选自C_1-6烷基(例如，甲基或乙基)、苯基、吡唑基、三唑基、唑基、异唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基和噻吩基的基团，其任何一个任选地被1、2、3、4或5个R^a取代。例如，每一个R^a可独立地选自卤素、氰基、氨基、羟基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基。在一个实施方案中，R³是卤素。在一个实施方案中，R³是C_1-6烷氧基。

在一个实施方案中，R³是卤素(例如，氯或溴)或选自C_1-6烷基(例如，甲基或乙基)、C_3-6环烷基(例如，环丙基)、苯基、吡唑基、三唑基、唑基、异唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基和噻吩基的基团，其任何一个任选地被1、2或3个R^a取代。例如，每一个R^a可独立地选自卤素、氰基、氨基、羟基、三氟甲基、C_1-4烷基、NH(C_1-4烷基)、N(C_1-4烷基)₂、-S(O)_lC_1-4烷基(其中l是0、1或2)和C_1-4烷氧基。

在一个实施方案中，R³是卤素。在一个实施方案中，R³是C_1-6烷氧基。在一个实施方案中，R³是氯、溴或苯基。在一个特别的实施方案中，R³是氯或溴。

在一个实施方案中，R⁴是卤素(例如，氯或溴)或选自C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基和5-或6-元杂芳基的基团，其任何一个任选地被1、2或3个R^a取代。在另一实施方案中，R⁴是卤素(例如，氯或溴)或选自C_1-6烷基(例如甲基或乙基)、C_3-6环烷基(例如，环丙基)、苯基、吡唑基、三唑基、唑基、异唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基和噻吩基的基团，其任何一个任选地被1、2或3个R^a取代。例如，R^a可独立地选自卤素、氰基、氨基、羟基、三氟甲基、C_1-4烷基、NH(C_1-4烷基)、N(C_1-4烷基)₂、-S(O)_lC_1-4烷基(其中l是0、1或2)和C_1-4烷氧基。

在一个实施方案中，Z是C(R⁶)。需特别提及的是其中R⁶是氢、甲基、甲氧基或甲氧基甲基的化合物。在一个实施方案中，R⁶选自氢、甲基或-N(R⁷)R⁸。在一特别的实施方案中，R⁶选自氢、甲基或-NH-苯基。在一特别的实施方案中，R⁶选自氢或甲基。在另一实施方案中，R⁶是氢。

在一个实施方案中，R⁵是H、CN、-C(O)OH、-C(O)OR⁷-、-C(O)N(R⁷)R⁸或杂环基。在另一实施方案中，R⁵是-C(O)OH或-CN。在另一实施方案中，R⁵是-CN。在一个实施方案中，R⁵是-C(O)N(R⁶)R⁷。特别提及的是其中R⁵是-C(O)NH₂的化合物。

在一个实施方案中，R⁵和R⁶与它们连接的碳原子一起形成任选地被1、2、3、4或5个R^a取代的杂环。在一特别的实施方案中，R⁵和R⁶与它们连接的碳原子一起形成包含环酰胺基团的杂环，例如唑烷酮或2-氧代吡咯烷，其中所述的杂环任选地被1、2、3、4或5个R^a取代。例如，每一个R^a可独立地选自卤素、氰基、氨基、羟基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基。

在一个实施方案中，R⁵不是任选取代的咪唑基。

在另一实施方案中，当Z是N时，R⁵是R⁷、-C(O)R⁷、-C(O)OR⁷-、-C(O)N(R⁷)R⁸或任选地被1、2、3、4或5个R^a取代的5-或6-元杂环基。在另一实施方案中，当Z是N时，R⁵是任选地被一个或多个R^a取代的C_1-6烷基、-C(O)R⁷或-C(O)N(R⁷)R⁸。

在一个实施方案中，当Z是C(R⁶)时，R⁵是H、CN、C(O)OH、-C(O)R⁷、-C(O)OR⁷-、-S(O)_lR⁷、-N(R⁷)R⁸、-C(O)N(R⁷)R⁸、-C(S)N(R⁷)R⁸、-S(O)_lN(R⁷)R⁸、-N(R⁷)C(O)R⁸、-N(R⁷)S(O)_lR⁸，或任选地被1、2、3、4或5个R^a取代的C_1-6烷基、苯基或5-或6-元杂环基。

在另一实施方案中，当Z是C(R⁶)时，R⁵是H、CN、C(O)OH、-C(O)R⁷、-C(O)OR⁷-、-N(R⁷)R⁸、-C(O)N(R⁷)R⁸、-C(S)N(R⁷)R⁸、-S(O)_lN(R⁷)R⁸、-N(R⁷)C(O)R⁸、-N(R⁷)S(O)_lR⁸，或任选地被1、2或3个R^a取代的C_1-6烷基或者5-或6-元杂环基。

在另一实施方案中，当Z是C(R⁶)时，R⁵是CN、C(O)OH、-C(O)R⁷、-C(O)OR⁷-、-N(R⁷)R⁸、-C(O)N(R⁷)R⁸、-C(S)N(R⁷)R⁸-、-N(R⁷)C(O)R⁸，或任选地被1、2或3个R^a取代的C_1-4烷基或5-或6-元杂环基。

在一个实施方案中，R⁵和R⁶相连接从而与它们连接的碳原子一起形成任选地被1、2或3个R^a取代的5-或6-元杂环。在一个实施方案中，R⁵和R⁶一起形成基团-C(O)-N(R⁷)-(CH₂)_q-，其中q是2或3。

在一个实施方案中，R⁷和R⁸各自独立地是氢或选自C_1-6烷基、碳环基和杂环基的基团，其任何一个任选地被1、2、3、4或5个R^a取代。

在另一实施方案中，R⁷和R⁸各自独立地是氢或选自C_1-6烷基、苯基和5-或6-元杂环基的基团，其任何一个任选地被1、2或3个R^a取代。在另一实施方案中，R⁷和R⁸至少之一是氢。

在一个实施方案中，R⁷和R⁸连接到同一氮原子，并且它们相互连接从而与它们所连接的氮原子一起形成任选地被1、2、3、4或5个R^a取代的5-或6-元杂环。在一特别的实施方案中，R⁷和R⁸相连接从而与它们所连接的氮原子一起形成任选地被1、2或3个R^a取代的吡咯烷、哌啶、哌嗪或吗啉环。

在一个实施方案中，每一个R^a基团独立地选自卤素、三氟甲基、氰基、氧代、硝基、-OR^b、-C(O)R^b、-C(O)OR^b、-OC(O)R^b、-S(O)_lR^b、-N(R^b)R^c、-N(R^b)C(O)R^c、-C(O)N(R^b)R^c、-S(O)_lN(R^b)R^c和R^d。在另一实施方案中，每个R^a基团独立地选自卤素、三氟甲基、氧代、-OR^b、-C(O)R^b、-S(O)_lR^b、-N(R^b)R^c、-N(R^b)C(O)R^c、-C(O)N(R^b)R^c和R^d。

在一个实施方案中，R^d选自C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基和5-或6-元杂环基，其每一个任选地被1、2、3、4或5个独立地选自卤素、氰基、氨基、羟基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基的取代基取代。

在另一实施方案中，R^d选自C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基和5-或6-元杂环基，其每一个任选地被1、2或3个独立地选自卤素、氰基、氨基、羟基、C_1-4烷基和C_1-4烷氧基的取代基取代。

在一个实施方案中，所述化合物是下式化合物：

其中T是键或-CH₂-。

在一个实施方案中，所述化合物是下式化合物：

在一个实施方案中，所述化合物是下式化合物：

在一个实施方案中，所述化合物是下式化合物：

在一个实施方案中，所述化合物是下式化合物：

在一个实施方案中，所述化合物是下式化合物：

在一个实施方案中，所述化合物是下式化合物：

其中

W是＝C(R⁴)-或＝N-；

Z是C(R⁶)；

R¹和R²每一个都是氢；

R³和R⁴各自独立地是卤素或选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、碳环基和杂环基的基团，其任何一个任选地被1、2、3、4或5个R^a取代；

R⁵是H、CN、-C(O)OH、-C(O)N(R⁷)R⁸或杂环基；

R⁶是氢、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-OH、R⁵；或(CH₂)_mR⁵；

或R⁵和R⁶与它们所连接的碳原子一起形成任选地被1、2、3、4或5个R^a取代的5-或6-元杂环；

R⁷和R⁸各自独立地是氢或选自任选地含有1、2或3个选自N和O的杂原子的C_1-6烷基、碳环基和杂环基；

每一个R^a独立地选自卤素、三氟甲基、氰基、氧代、硝基、-OR^b、-C(O)R^b、-C(O)OR^b、-OC(O)R^b、-S(O)_lR^b、-N(R^b)R^c、-N(R^b)C(O)R^c、-C(O)N(R^b)R^c、-S(O)_lN(R^b)R^c和R^d；

R^b和R^c各自独立地是氢或R^d；

R^d选自烃基和杂环基，其任何一个任选地被1、2、3、4或5个独立地选自卤素、氰基、氨基、羟基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基的取代基取代；

l是0、1或2；并且

m和n各自独立地是1或2；

或其可药用盐、N-氧化物或前药。

在另一方面，本发明提供了所附实施例中所列出的任一个化合物。

本发明化合物可以为可药用盐的形式。本发明的可药用盐可通过常规化学方法从含有碱性或酸性基团的母体化合物合成。一般来讲，可通过使这些化合物的游离酸或游离碱形式与化学计量的合适的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应而制备此类盐；一般来讲，优选非水介质，例如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。合适的盐的列表可在Remington’s Pharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，US，1985，p.1418中找到，将其公开内容在此引入作为参考；还参见Stahl等编辑的“Handbook of Pharmaceutical Salts Properties Selection and Use”，Verlag Helvetica Chimica Acta and Wiley-VCH，2002。

本发明因此包括所公开的化合物的可药用盐，其中通过制备其酸或碱盐例如从无机或有机酸或碱形成的常规的无毒的盐或季铵盐来修饰母体化合物。此类酸加成盐的实例包括醋酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、顺丁烯二酸、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐以及十一酸盐。碱盐包括铵盐、碱金属盐诸如钠和钾盐、碱土金属盐诸如钙和镁盐、与有机碱形成的盐诸如二环己基胺盐、N-甲基-D-葡糖胺盐和与诸如精氨酸、赖氨酸的氨基酸形成的盐，等等。此外，含有碱性氮的基团可被诸如以下的物质季铵化：低级烷基卤化物，诸如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸酯，例如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸酯，长链卤化物，诸如癸基、十二基、十四烷基和十八烷基(stearyl)氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物，如苄基和苯乙基溴化物等。

本发明包括本发明的活性药物物质的前药，例如其中一个或多个官能团被保护或衍生化，但可在体内转变为所述的官能团，如可在体内转化为游离酸的羧酸酯的情况，或可转化为游离氨基的受保护的胺的情况。本文所使用的术语“前药”特别表示例如通过在血液中水解在体内迅速转化为母体化合物的化合物。T.Higuchi和V.Stella，作为新递送系统的前药(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)，A.C.S.Symposium Series第14卷；Edward B.Roche，编辑，药物设计中的生物可逆载体(Bioreversible Carriers in Drug Design)，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987；H Bundgaard，编辑，前药设计(Design of Prodrugs)，Elsevier，1985；和Judkins，等，Synthetic Communications，26(23)，4351-4367(1996)中提供了详细的讨论，将其每一个均在此引入作为参考。

因此，前药包括具有已被转化为其可逆衍生物的官能团的药物。一般来讲，此类前药通过水解而转化为活性药物。此类基团的实例包括羧基(可逆衍生物包括酯，例如酰氧基烷基酯，以及酰胺)；醇基(可逆衍生物包括硫酸酯、磷酸酯和羧酸酯)；胺基(可逆衍生物包括酰胺、氨基甲酸酯、亚胺和烯胺)；以及羰基，例如醛基和酮基(可逆衍生物包括亚胺、肟、缩醛/缩酮、烯醇酯、唑烷和噻唑烷)。

前药还包括可通过氧化或还原反应转化为活性药物的化合物。作为氧化活化的实例可提及N-和O-脱烷基化、氧化脱氨反应、N-氧化和环氧化。作为还原活化的实例可提及的是偶氮还原、亚砜还原、二硫化物还原、生物还原烷基化和硝基还原。

作为前药代谢活化还可提及核苷酸活化、磷酸化活化和脱羧活化。对于其它信息，参见：药物设计和药物作用的有机化学(“The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action”)，R B Silverman(尤其是第8章，第497至546页)，引入本文作为参考。

保护基团的使用详细地描述于：“有机化学中的保护基团”(Protective Groups in Organic Chemistry)，J W F McOmie编辑，Plenum Press(1973)，和“有机合成中的保护基团”(Protective Groups in OrganicSynthesis)，第二版，T W Greene & P G M Wutz，Wiley-Interscience(1991)中。

因此，本领域技术人员能够理解，尽管本发明化合物的保护的衍生物其本身可能不具有药理学活性，但它们可被例如肠胃外地或口服施用，并且在此之后在体内代谢形成有药理学活性的本发明化合物。因此此类衍生物是“前药”的实例。所述化合物的所有前药也包含在本发明的范围之内。

本文提及的一些基团(尤其是含有杂原子和共轭键的那些)可以以互变异构形式存在，并且所有这些互变异构体均包含在本发明的范围内。更一般来讲，许多种类可平衡地存在，例如在有机酸和它们的抗衡阴离子的情况下；因此本文提及某种类时，包括提及其所有的平衡形式。

本发明化合物还可含有一个或多个不对称碳原子，并且因此可显示出光学和/或非对映异构体。可应用常规技术例如色谱法或分步结晶分离所有的非对映异构体。可通过应用常规技术例如分步结晶或HPLC分离化合物的外消旋或其它混合物而分离各种立体异构体。或者可通过如下方式制备期望的光学异构体：使合适的光学活性原料在不引起外消旋或差向异构的条件下反应；或例如应用纯手性酸衍生化，随后通过常规方法(例如，HPLC、硅胶色谱法)分离非对映的衍生物。所有的立体异构体均包含在本发明的范围内。在公开了单个的对映异构体或非对映异构体时，本发明还覆盖了其它的对映异构体或非对映异构体，以及外消旋体；就此来讲，尤其涉及本文列出的具体化合物。

本发明化合物还可能存在几何异构体。本发明考虑到各种几何异构体及其混合物，所述几何异构体是由于碳-碳双键周围取代基的排布而产生的，并且将此类异构体标记为Z或E构型，其中术语“Z”表示取代基在碳-碳双键的同侧，并且术语“E”表示取代基位于碳-碳双键的相反侧。

因此本发明包括了所定义的化合物的所有变体形式，例如所定义的化合物的任何互变异构体或任何可药用盐、酯、酸或其它变体，以及它们的互变异构体以及这样的物质，即施用后，所述物质能直接或间接地提供如上所定义的化合物，或提供能与此类化合物平衡存在的种类。

合成

可根据本文描述的方法制备本发明化合物。应当理解，这些方法仅用于阐述本发明的目的，而不能理解为限制性的。利用了本领域技术人员公知的相同或类似试剂和/或条件的方法也可用于获得本发明化合物。

任何所获得的终产物或中间体的混合物可基于各组分物理-化学差异用已知的方法分离为纯的终产物或中间体，例如通过色谱法、蒸馏、分步结晶，或在合适或可能时形成盐来分离。

施用和药物制剂

可通过口服、静脉内、皮下、经颊、经直肠、经皮、经鼻、经气管、经支气管、通过任何其它肠胃外途径例如口或鼻喷雾或通过吸入而正常地施用本发明化合物。可作为药物制剂的形式施用所述化合物，所述药物制剂在可药用剂型中包含前药、或作为游离化合物或例如作为可药用无毒有机或无机酸或碱加成盐的活性化合物。取决于待治疗的疾病和患者以及施用的途径，所述组合物可以以不同的剂量施用。

一般来讲，因此可口服地或肠胃外地(本文所使用的“肠胃外的”是指包括静脉内、肌内、腹膜内、胸骨内、皮下和关节内注射和输注的施用方式)将本发明的药物化合物施用至宿主。在较大动物的情况下，诸如人类，化合物可单独施用或作为与可药用稀释剂、赋形剂或载体联合的组合物施用。

本发明的药物组合物中活性成分的实际剂量水平可不同，因此获得能有效实现对特定患者、组合物和施用模式而言的期望治疗反应的活性化合物的量。所选择的剂量水平将取决于特定化合物的活性、施用途径、所治疗疾病的严重程度、以及疾病和所治疗患者的治疗史。然而，以低于实现期望治疗效果所需水平的化合物作为起始剂量，并且逐渐升高剂量直到达到期望的效果，这为本领域公知的。

在某些实施方案中，合适的剂量水平一般为每kg患者体重每天约0.01至500mg，其可作为单剂量或多剂量施用。在一特别的实施方案中，剂量水平是每天约0.1至约250mg/kg；更优选每天约0.5至约100mg/kg。合适的剂量水平可以是每天约0.01至约250mg/kg、每天约0.05至约100mg/kg、或每天约0.1至约50mg/kg。在这一范围内，剂量可以是每天0.05-0.5、0.5-5或5-50mg/kg。对于口服施用，可以以片剂的形式提供组合物，所述片剂含有1.0至1000毫克活性成分，尤其是1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0和1000.0毫克活性成分，用于根据待治疗患者的症状调整剂量。可根据每天1至4次的方案施用所述化合物，例如每天一次或两次。可调节该剂量方案以提供最佳的治疗反应。

根据本发明的另一方面，因此提供了药物组合物，其包含与可药用辅助剂、稀释剂或载体混合的本发明化合物。

用于肠胃外注射的本发明药物组合物适当地包括可药用无菌水性或非水溶液剂、分散制剂、混悬剂或乳剂，以及用于在使用前即刻重构为无菌可注射溶液剂或分散制剂的无菌粉末。合适的水性和非水载体、稀释剂、溶剂或溶媒的实例包括水、乙醇、多元醇(诸如，甘油、丙二醇、聚乙二醇等)，及其合适的混合物，植物油(诸如橄榄油)和可注射有机酯诸如油酸乙酯。可通过如下方式保持合适的流动性：例如使用诸如卵磷脂的包被材料；在分散制剂的情况下维持所需的颗粒大小；以及使用表面活性剂。

这些化合物还可含有辅助剂，诸如防腐剂、湿润剂、乳化剂以及分散剂。可通过包含各种抗菌或抗真菌剂确保阻止微生物的活性，所述抗菌或抗真菌剂例如是：对羟苯甲酸酯、氯代丁醇或苯酚山梨酸。还可预期包含等渗剂，例如糖或氯化钠。可通过包含延缓吸收的物质(例如单硬脂酸铝和明胶)而实现可注射药物形式的延长吸收。

在一些情况下，为了延长药物的效果，需要减缓从皮下或肌内注射的药物吸收。这可通过使用具有较差水溶性的结晶或无定形材料的流体混悬液来实现。于是药物的吸收速率取决于其溶解速率，而其溶解速率又可能取决于晶体大小和晶形。或者，通过将药物溶解或悬浮于油溶媒中实现肠胃外施用药物形式的延缓吸收。

通过形成在生物可降解聚合物(例如，聚交酯-聚乙醇酸交酯)中的药物的微胶囊基质可合适地制备可注射贮库(depot)形式。取决于药物与聚合物之比以及所应用的特定聚合物的性质，可以控制药物释放的速率。其它生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。贮库注射制剂还可通过使药物包埋入与身体组织相容的脂质体或微乳液中而制备。注射制剂可例如通过细菌截留滤器过滤、或通过将灭菌剂掺入无菌固体组合物形式(其可在即将使用之前溶解或分散于无菌水或其它无菌注射介质中)中而进行灭菌。

用于口服施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，通常将活性化合物与至少一种惰性、可药用赋形剂或载体混合，所述可药用赋形剂或载体诸如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或以下一种或多种：a)充填剂或填料，诸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；b)粘合剂，诸如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)湿润剂，诸如甘油；d)崩解剂，诸如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂，诸如石蜡；f)吸收加速剂，诸如季铵化合物；g)润湿剂，诸如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸收剂，诸如高岭土和膨润土；和i)润滑剂，诸如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠及其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可包含缓冲剂。类似类型的固体组合物还可用作软和硬填充明胶胶囊中的填充剂，其中所述胶囊例如应用诸如乳糖(lactose)或乳糖(milk sugar)以及高分子量聚乙二醇的赋形剂。

合适地，口服制剂含有溶解助剂。溶解助剂不受限制，只要其是可药用即可。实例包括非离子型表面活性剂，诸如蔗糖脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、失水山梨糖醇脂肪酸酯(例如，失水山梨糖醇三油酸酯)、聚乙二醇、聚氧化乙烯氢化蓖麻油、聚氧化乙烯失水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧乙烯烷基醚、甲氧基聚氧化乙烯烷基醚、聚氧化乙烯烷基苯基醚、聚乙二醇脂肪酸酯、聚氧化乙烯烷基胺、聚氧乙烯烷基硫醚、聚氧化乙烯聚氧化丙烯共聚物、聚氧化乙烯甘油脂肪酸酯、季戊四醇脂肪酸酯、丙二醇单脂肪酸酯、聚氧化乙烯丙二醇单脂肪酸酯、聚氧化乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、脂肪酸烷基醇酰胺(alkylolamides)以及烷基胺氧化物；胆汁酸及其盐(例如，鹅胆酸、胆酸、脱氧胆酸、脱氢胆酸及其盐，及其甘氨酸或牛磺酸缀合物)；离子表面活性剂，诸如十二烷基硫酸钠、脂肪酸肥皂、烷基磺酸盐、烷基磷酸盐、乙醚磷酸盐、碱性氨基酸的脂肪酸盐；三乙醇胺肥皂，以及烷基季铵盐；和两性表面活性剂，诸如甜菜碱和氨基羧酸盐。

片剂、糖衣剂(dragees)、胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型可用包衣材料和外壳诸如肠溶衣以及其它药剂领域公知的包衣材料制备。它们任选地含有遮光剂并且还可以是仅仅或优选地在肠道的特定部分释放和/或以延缓的方式释放活性成分的组合物。包埋组合物的实例包括聚合物和蜡。

如果合适的话，活性化合物可以是与一种或多种上述赋形剂的微胶囊化形式。

活性化合物可以是以微粉化的形式，例如，它们可以被微粒化。

用于口服施用的液体剂型包括可药用乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。除活性化合物外，液体剂型还可含有本领域常用的惰性稀释剂，诸如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，诸如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃甲醇、聚乙二醇、失水山梨糖醇的脂肪酸酯，及其混合物。除惰性稀释剂之外，口服组合物还可包含辅助剂，诸如润湿剂、乳化剂和助悬剂、增甜剂、调味剂和芳香剂。除活性化合物之外，混悬剂还可含有助悬剂，诸如乙氧基化异硬脂醇、聚氧化乙烯山梨糖醇和失水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂以及黄蓍胶及其混合物。

用于直肠或阴道施用的组合物优选为栓剂，其可通过使本发明化合物与合适的非刺激性赋形剂或载体混合而制备，其中所述的赋形剂或载体诸如是可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡，其在室温下是固体，但在体温下是液体，并且因此在直肠或阴道中融化且释放活性化合物。

本发明化合物还可作为脂质体的形式施用。如本领域公知的那样，脂质体通常衍生自磷脂类或其它脂质。脂质体由分散于水性介质中的单或多层水合液态晶体而形成。可使用能够形成脂质体的任何无毒、生理上可接受且可代谢的脂质。除了本发明化合物之外，脂质体形式的本发明组合物还可含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂质是磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)，其可以是天然的或合成的。形成脂质体的方法是本领域公知的，例如，Prescott，编辑，细胞生物学中的方法(Methods in Cell Biology)，第XIV卷，Academic Press，New York，N.Y.(1976)，第33页起。

本发明化合物的局部施用剂型包括粉剂、喷雾剂、软膏和吸入剂。在无菌条件下将活性化合物与可药用载体和任何需要的防腐剂、缓冲剂或可能需要的抛射剂混合。眼用制剂、眼药膏、粉剂和溶液剂也包括在本发明的范围内。

用途

本发明化合物可用于治疗各种疾病和病症。所述治疗的个体可以是人或动物。本发明化合物可显示出预期的效力、选择性和微粒体稳定性。

具体地，本发明化合物可用于治疗或预防癌症，诸如结肠癌、乳腺癌或肝癌。

以下实施例阐释了本发明。

一般合成

根据以下反应流程制备实施例化合物。

经3步方法以高产率提供酰胺类似物A，所述3步方法由以下步骤组成：利用HATU作为偶联剂使N-Boc-4-哌啶甲酸与一系列胺偶联，在酸性条件下将得到的哌啶脱保护，随后进行微波介导的S_NAr偶联。

试剂和条件：a)RR’NH，HATU，DIPEA，DMF；b)4M HCl-二烷，MeOH 1∶1；c)3，4，5-三氯吡啶，NEt₃，NMP，220℃，60min

4-氯吡啶和3，4-二氯吡啶均可作为其盐酸盐商购获得。应用过量的4-哌啶甲酰胺在水中进行反应，导致很好地转化为期望的产物B和C。发现将反应混合物冷却至0℃时，产物结晶。

首先合成哌啶的酰胺化合物，然后与吡啶片段偶联。因此，将1-Boc-4-氨基哌啶与羧酸偶联，以得到酰胺。N-脱保护产生游离的哌啶化合物，其与3，4，5-三氯吡啶进行S_NAr偶联，得到类似物D。

试剂和条件：a)RCO₂H，HATU，DIPEA，DMF；b)4M HCl-二烷，MeOH 1∶1；c)3，4，5-三氯吡啶，NEt₃，NMP，220℃，60min

通过3，5-二甲基吡啶的选择性氯化合成中间体4-氯-3，5-二甲基吡啶，如Wurster等(J.Med.Chem.2006，49，6351)报道的那样。

中间体4-氯-3-甲基吡啶可作为其盐酸盐商购获得。

然后使吡啶化合物与4-哌啶甲酰胺在水性条件下偶联，从而经良好产率得到类似物E和F。

可应用Caron等(Tetrahedron Lett.2000，41，2299)开发的用于氧化缺电子吡啶化合物的条件实现吡啶环的氧化。从过氧化氢-尿素复合物和三氟乙酸酐原位产生高反应性的氧化剂过三氟乙酸。

使N-Boc-哌嗪与苯甲酸偶联以产生酰胺，然后将其进行脱保护并与3，4，5-三氯吡啶偶联，得到H。类似地，将3，4，5-三氯吡啶与分别与可商购获得的N-乙酰、N-甲基和N-乙基哌嗪偶联，获得I、J和K。

该流程用于合成衍生自乙二胺的酰胺类似物。在偶联反应期间热移除叔丁氧基羰基保护基，得到双偶联的产物L。

根据以下的流程合成羧基苄基衍生物M，然而，试图通过氢化脱保护导致氯基团的氢化，得到N。

为了这一目的，应用Stammer等(J.Chem.Soc.，Chem.Comm.1979，495)报道的路易斯酸介导的裂解条件采用三甲基碘硅烷选择性地裂解保护基团，以良好产率得到O。

然后应用不同的醛类将化合物O还原胺化，进一步提供类似物P(当应用化学计算量的醛时)或Q(当使用过量的醛时)。

通过常规方法合成伯酰胺官能团的系列类似物。因此，利用Lawesson’s试剂处理伯酰胺得到硫代酰胺R，而用碳酸亚乙烯酯处理则得到唑酮S。可通过用氯乙醛处理将硫代酰胺R进一步转化为噻唑T。

偶联3，4，5-三氯吡啶和4-氰基哌啶得到腈类似物U，在酸性条件下对其进行水解，得到羧酸V。

将3，4，5-三氯吡啶和3，5-二溴-4-氯吡啶与3-氰基吡咯烷偶联，得到腈中间体，其可水解产生酰胺类似物W。可通过手性hplc分离W的两个对映体形式。

类似地，可通过偶联中间体吡咯烷和3，4，5-三卤-吡啶合成基于乙二胺的酰胺类似物Y。

通过卤化4-嘧啶酮，随后与所需的环胺偶联，从而合成5-卤素嘧啶类似物Z。

还建立了更稳健的路径，其中首先合成2-氯嘧啶中间体，然后进行氢解。中间体5-溴嘧啶还进行Suzuki反应，得到芳基类似物AA。

类似地，采用芳基和杂芳基硼酸以及5-溴吡啶类似物的Suzuki反应以良好产率得到芳基类似物BB。

以相同的方式，从二氯-和二溴-吡啶化合物制备3-卤代-5-芳基吡啶类似物CC，小心地进行以防止双偶联。通过应用过量的硼酸，还可成功地进行仅提供二-芳基类似物DD的双Suzuki反应。

中间体1：4-(甲基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯1

通用方法A

向N-Boc-4-哌啶甲酸(0.20g，0.86mmol)和HATU(0.43g，1.1mmol)的DMF(4mL)溶液中加入DIPEA(0.76mL，4.4mmol)。搅拌该溶液5分钟后，加入盐酸甲胺(76mg，1.1mmol)。继续搅拌溶液16h后，将其倒入1M氢氧化钠溶液(50mL)中，并用EtOAc(2×50mL)萃取。用水(50mL)、1M盐酸(50mL)、水(50mL)和盐水(50mL)洗涤合并的有机萃取物。干燥(MgSO₄)有机相，并在减压下蒸发溶剂，得到标题化合物，其为浅黄色油状物(69mg，33％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13009，2932，1677，1522，1429，1279，1166；m/z(ESI)C₁₂H₂₂N₂NaO₃应为265.1523，实测[M+Na]⁺265.1525。

中间体2：4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯2

应用N-Boc-4-哌啶甲酸(0.20g，0.86mmol)、HATU(0.43g，1.1mmol)、DIPEA(0.76mL，4.4mmol)、盐酸二甲胺(92mg，1.1mmol)和DMF(4mL)进行通用方法A，得到标题化合物，为浅棕色油状物(156mg，70％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13020，2861，1684，1631，1417，1367，1151，1030；m/z(ESI)C₁₃H₂₄N₂NaO₃应为279.1679，实测[M+Na]⁺279.1677。

中间体3：4-(2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯3

应用N-Boc-4-哌啶甲酸(0.20g，0.86mmol)、HATU(0.43g，1.1mmol)、DIPEA(0.76mL，4.4mmol)、N-Boc-乙二胺(0.18g，1.1mmol)和DMF(4mL)进行通用方法A，得到标题化合物，其为米黄色固体(311mg，96％)，m.p.172-174℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13022，2981，1684，1671，1507，1367，1241，1165；m/z(ESI)C₁₈H₃₃N₃NaO₅应为394.2312，实测[M+Na]⁺394.2310。

中间体4：4-(2-(苄氧羰基氨基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯4

应用N-Boc-4-哌啶甲酸(0.10g，0.44mmol)、HATU(0.22g，0.57mmol)、DIPEA(0.38mL，2.2mmol)、N-Cbz-乙二胺(0.11g，0.57mmol)和DMF(2mL)进行通用方法A，得到标题化合物，其为黄色蜡状物(170mg，96％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13361，3024，2943，1713，1683，1519，1428，1236，1166；m/z(ESI)C₂₁H₃₂N₃O₅应为406.2337，实测[M+H]⁺406.2330。

中间体5：N-甲基哌啶-4-甲酰胺5

通用方法B

向冷却至0℃的4-(甲基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯1(68mg，0.28mmol)的MeOH(2mL)溶液中加入在1，4-二烷中的4M氯化氢溶液(2mL)。搅拌15分钟后，使溶液升温至室温，再搅拌3h后，在减压下移除溶剂。通过色谱法在SCX-2柱上(MeOH，随后是在MeOH中的0.5MNH₃)纯化粗产物，得到标题化合物，其为无色油状物(41mg，99％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13008，2948，1663，1525，1227，1199；m/z(ESI)C₇H₁₅N₂O应为143.1179，实测[M+H]⁺143.1178。

中间体6：N，N-二甲基哌啶-4-甲酰胺6

应用4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯2(0.16g，0.60mmol)、MeOH(2.5mL)和在1，4-二烷中的4M氯化氢溶液(2.5mL)进行通用方法B，得到标题化合物，其为浅黄色油状物(67mg，71％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13003，2947，1625，1497，1401，1320，1240，1137，1105；m/z(ESI)C₈H₁₇N₂O应为157.1335，实测[M+H]⁺157.1338。

中间体7：N-(2-氨基乙基)哌啶-4-甲酰胺7

应用4-(2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯3(0.31g，0.83mmol)、MeOH(5mL)和在1，4-二烷中的4M氯化氢溶液(5mL)进行通用方法B，得到标题化合物，其为无色油状物(109mg，76％)，υ_max cm^-13284，3940，1647，1550，1139，1035；m/z(ESI)C₈H₁₈N₃O应为172.1444，实测[M+H]⁺172.1445。

中间体8：2-(哌啶-4-甲酰氨基)乙基氨基甲酸苄基酯8

应用4-(2(苄氧羰基氨基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯4(0.19g，0.46mmol)、MeOH(3mL)和在1，4-二烷中的4M氯化氢溶液(3mL)进行通用方法B，得到标题化合物，其为无色油状物(108mg，76％)，m.p.165-167℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13013，2946，1713，1661，1519，1260，1226，1140，1014；m/z(ESI)C₁₆H₂₄N₃O₃应为306.1812，实测[MH]⁺306.1808.

中间体9：4-苯甲酰基哌嗪-1-甲酸叔丁基酯9

应用1-Boc-哌嗪(50mg，0.27mmol)、苯甲酸(43mg，0.35mmol)、HATU(0.14g，0.35mmol)、DIPEA(0.23ml1.4mmol)和DMF(2mL)进行通用方法A，得到标题化合物，其为米黄色固体(75mg，98％)，m.p.105-107℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13011，2930，2866，1691，1626，1421，1249，1158；m/z(ESI)C₁₆H₂₂N₂NaO₃应为313.1523，实测[M+Na]⁺313.1528。

中间体10：4-苯甲酰基哌嗪-1-甲酸酯10

应用4-苯甲酰基哌嗪-1-甲酸叔丁基酯9(75mg，0.26mmol)、MeOH(2mL)和在1，4-二烷中的4M氯化氢溶液(2mL)进行通用方法B，得到标题化合物，其为无色油状物(47mg，96％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13015，2954，1622，1435，1290，1136，1018；m/z(ESI)C₁₁H₁₅N₂O应为191.1179，实测[M+H]⁺191.1179。

中间体11：2-(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰氨基)乙基氨基甲酸苄基酯11

应用2-(哌啶-4-甲酰氨基)乙基氨基甲酸苄基酯14(59mg，0.19mmol)、3，4，5-三氯吡啶(35mg，0.19mmol)、三乙胺(27μL，0.58mmol)和NMP(1.5mL)进行通用方法C(参见实施例1)。通过硅胶快速柱色谱法(己烷/EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(42mg，48％)，m.p.147-149℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-1 3453，3009，2853，1713，1668，1516，1260，1147，1013；m/z(ESI)C₂₁H₂₅Cl₂N₄O₃应为451.1298，实测[M+H]⁺451.1301。

中间体12：4-(哌啶-4-羰基)哌嗪-1-甲酸苄基酯12

应用N-Boc-4-哌啶甲酸(0.25g，1.1mmol)、HATU(0.46g，1.2mmol)、DIPEA(0.57mL，3.3mmol)、1-Cbz-哌嗪(0.21mL，1.1mmol)和DMF(5mL)进行通用方法A，得到中间体化合物4-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-甲酸苄基酯，其为白色固体(339mg，72％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13014，2863，1688，1644，1427，1367，1205，1168。

随后应用4-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-甲酸苄基酯(330mg)、MeOH(10mL)和在1，4-二烷中的4M氯化氢溶液(10mL)进行通用方法B，得到标题化合物12，其为白色固体(120mg，46％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13016，2949，1699，1639，1431，1250，1227，1125，1019；m/z(ESI)C₁₈H₂₆N₃O₃应为332.1969，实测[M+H]⁺332.1968。

中间体13：4-(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-甲酸苄基酯13

应用4-(哌啶-4-羰基)哌嗪-1-甲酸苄基酯12(0.11g，0.33mmol)、3，4，5-三氯吡啶(61mg，0.33mmol)、NMP(2.5mL)和三乙胺(93μL，0.66mmol)进行通用方法C(参见实施例1)。通过硅胶快速柱色谱法(己烷，EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物13，其为白色固体(58mg，36％)，υ_max(CHCl3)/cm^-13023，1699，1635，1559，1432，1285，1232，1015；m/z(ESI)C₂₃H₂₇Cl₂N₄O₃应为477.1455，实测[M+H]⁺477.1457。

中间体14：(R，S)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲腈14

i)向(R，S)-N-Boc-3-氰基吡咯烷(0.25g，1.3mmol)的MeOH(5mL)溶液中加入氯化氢(5ml在二烷中的4M溶液)，并搅拌该混合物3小时，此后在减压下移除溶剂。在SCX-2柱上(MeOH，随后是在MeOH中的0.5M NH₃)纯化粗产物，得到(R，S)-3-氰基吡咯烷，其为无色油状物(136mg，100％)。

ii)向(R，S)-3-氰基吡咯烷(0.12g，1.3mmol)和3，4，5-三氯吡啶(0.23g，1.3mmol)的NMP(8mL)溶液中加入三乙胺(0.36mL，2.6mmol)。在微波反应器中在220℃加热该混合物60分钟，将其倒入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)中，并用EtOAc(2×100mL)萃取。用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)并在减压下浓缩。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，99∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为无色油状物(155mg，50％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13053，2245，1558，1468，1402；m/z(ESI)C₁₀H₁₀Cl₂N₃应为242.0246，实测[M+H]⁺242.0249。

中间体15：(R，S)-3-(2-苄氧羰基氨基-乙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯15

向(R，S)-1-Boc-吡咯烷-3-甲酸(0.22g，2.2mmol)、N-Z-乙二胺盐酸盐(0.50g，2.2mmol)和HATU(0.82g，2.2mmol)的DMF(15mL)溶液中加入DIPEA(1.9mL，11mmol)，并在室温下搅拌该溶液16h。将该混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)中，并用EtOAc(2×40mL)萃取。用水(50mL)、饱和柠檬酸溶液(50mL)、水(50mL)和盐水(50mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)并在减压下浓缩，得到标题化合物15，其为无色油状物(0.43g，100％)。直接使用该化合物，无需进一步纯化。

中间体16：{2-[(吡咯烷-3-羰基)-氨基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯16

向(R，S)-3-(2-苄氧羰基氨基-乙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯15(430mg，1.10mmol)的MeOH(5mL)溶液中加入在在1，4-二烷中的4M氯化氢溶液(5mL)。搅拌2小时后，在减压下浓缩混合物，并在SCX-2柱上(MeOH，随后是在MeOH中的0.5M NH₃)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(260mg，81％)，m.p.129-131℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13451，3014，1714，1663，1517，1227；m/z(ESI)C₁₅H₂₂N₃O₃应为292.1656，实测[M+H]⁺292.1654。

中间体17：(R，S)-(2-{[1-(3，5-二氯-吡啶-4-基)-吡咯烷-3-羰基]-氨基}-乙基)-氨基甲酸苄基酯17

应用3，4，5-三氯吡啶(50mg，0.27mmol)、(R，S)-{2-[(吡咯烷-3-羰基)-氨基]-乙基}-氨基甲酸苄基酯16(80mg，0.27mmol)、NMP(3mL)和三乙胺(0.11mL，0.82mmol)进行通用方法C。应用硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，99∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(61mg，51％)，m.p.148-150℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13028，1716，1668，1515，1464，1221；m/z(ESI)C₂₀H₂₃Cl₂N₄O₃应为437.1141，实测[M+H]⁺437.1142。

中间体18：3，5-二溴-4-氯吡啶18

向冷却至0℃的4-(1H)-吡啶酮(0.95g，10mmol)和氢氧化钾(1.1g，20mmol)的水(20mL)溶液加入溴(3.2g，20mmol)。在这一温度下搅拌75min后，过滤该混合物，并且用冷水(3×50mL)和己烷(3×20mL)洗涤滤饼，得到3，5-二溴-4-(1H)-吡啶酮，其为白色固体(2.09g，83％)。

向3，5-二溴-4-(1H)-吡啶酮(0.25g，1.0mmol)中加入POCl₃(2mL)，并在100℃加热混合物2h。将该混合物倒入冰/水(25g)中，并通过加入饱和碳酸氢钠溶液碱化。用CH₂Cl₂(2×20mL)萃取混合物，并用盐水(25mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下浓缩，得到标题化合物，其为白色固体(275mg，100％)，m.p.101-103℃；m/z 272(100％，[M+H]⁺)。

中间体19：(R，S)-(2-{[1-(3，5-二溴-吡啶-4-基)-吡咯烷-3-羰基]-氨基}-乙基)-氨基甲酸苄基酯19

应用3，5-二溴-4-氯吡啶18(74mg，0.27mmol)、(R，S)-3-(2-苄氧羰基氨基-乙基氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯16(80mg，0.27mmol)、NMP(3mL)和三乙胺(0.11mL，0.82mmol)进行通用方法C(参见实施例1)。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，99∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(86mg，60％)，m.p.132-134℃；υ_max(CHCl₃)/cm-13029，3024，1729，1665，1518，1446，1249，1229，1046，1016；m/z(ESI)C₂₀H₂₂Br₂N₄NaO₃应为546.9951，实测[M+Na]⁺546.9946。

中间体20：4，5-二氯嘧啶盐酸盐20

使氯气鼓泡通入4-嘧啶酮(1.9g，20mmol)的冰醋酸(20mL)溶液中，并再搅拌该反应混合物2h。使氯气鼓泡通入该溶液，再持续15分钟，并再搅拌该混合物90分钟。过滤该混合物，并用己烷(3×25mL)洗涤滤饼，得到标题化合物，其为白色固体(2.28g)。

将5-氯嘧啶酮盐酸盐(1.0g，6.0mmol)在氧氯化磷(4mL)中的悬浮液在90℃加热90分钟，然后冷却至室温并过滤。通过在减压下升华纯化粗产物，得到标题化合物20，其为结晶白色固体(273mg)。该化合物在空气中不稳定，并且立即用于下一步骤。

中间体21：5-溴-4-氯嘧啶盐酸盐21

将溴(1.0mL，20mmol)的冰醋酸(10mL)溶液在15分钟期间通过套管加入到4-嘧啶酮(1.9g，20mmol)的冰醋酸(20mL)溶液中。搅拌5h后，过滤混合物，并用己烷(2×20mL)洗涤滤饼，得到标题化合物，其为白色固体(1.52g)。

将5-溴嘧啶酮盐酸盐(1.0g，3.9mmol)在氧氯化磷(4mL)中的悬浮液在90℃加热1小时，然后冷却至0℃。过滤混合物，用POCl₃(2×2mL)洗涤，得到标题化合物，其为膏状固体(388mg)。该化合物在空气中不稳定，并且立即用于下一步骤。

中间体22：4-氯-5-甲基嘧啶盐酸盐22

向4-羟基-2-巯基-5-甲基嘧啶(1.0g，7.0mmol)在水(50mL)和氨水(3mL)中的悬浮液中加入兰尼镍在水(20mL)中的悬浮液。在回流下加热该混合物16h，然后通过硅藻土(10g)热过滤，并用水(3×25mL)洗涤。蒸干滤液，并使所得固体与甲苯(2×50mL)共沸，得到白色固体(0.75g，97％)。

在90℃加热5-甲基-3H-嘧啶-4-酮(0.60g，3.6mmol)和氧氯化磷(2.0mL)的混合物2.5小时。在减压下蒸发该混合物至干燥，通过在减压下升华纯化所得固体，得到标题化合物，其为白色固体。这一化合物在空气中不稳定，并且立即用于下一步骤。

中间体23：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23

应用4-哌啶甲酰胺(380mg，3.0mmol)、3，4，5-三氯吡啶(600mg，3.3mmol)、三乙胺(0.84mL，6.0mmol)和NMP(18mL)进行通用方法C(参见实施例1)。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂/EtOH，95∶5-91∶9)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(0.676g，83％)；LC-MS(ESI，4min)R_t1.46min，m/z 274(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₁H₁₃N₃OCl₂应为273.0436，实测[M+H]⁺273.0446。

中间体24：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-硫代甲酰胺24

向1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(40mg，0.15mmol)的THF(2mL)溶液中加入Lawesson’s试剂(71mg，0.18mmol)，并在回流下加热该混合物2.5h。冷却至室温后，将该混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液(20mL)中，并用EtOAc(2×20mL)萃取。用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下浓缩。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，99∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(21mg，40％)，m/z(ESI)C₁₁H₁₄Cl₂N₂S应为290.0280，实测[M+H]⁺290.0280。

实施例1：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)-N-甲基哌啶-4-甲酰胺E1

通用方法C

向N-甲基哌啶-4-甲酰胺5(26mg，0.18mmol)和3，4，5-三氯吡啶(33mg，0.18mmol)的NMP(1.5mL)溶液中加入三乙胺(76μL，0.54mmol)。在微波反应器中在220℃加热该混合物60分钟，冷却至室温，然后倒入到饱和碳酸氢钠溶液(50mL)中。用EtOAc(2×25mL)萃取该溶液，用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下移除溶剂。通过硅胶快速柱色谱法(己烷/EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(46mg，88％)，m.p.175-177℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13462，3006，2853，1665，1558，1385，1146，1096；m/z(ESI)C₁₂H₁₆Cl₂N₃O应为288.0665，实测[M+H]⁺288.0664。

实施例2：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)-N N-二甲基哌啶-4-甲酰胺E2

应用N，N-二甲基哌啶-4-甲酰胺6(43mg，0.27mmol)、3，4，5-三氯吡啶(50mg，0.27mmol)、三乙胺(76μL，0.54mmol)和NMP(1.5mL)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(己烷/EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(66mg，80％)，m.p.120-122℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13026，2850，1631，1559，1140，1092，934；m/z(ESI)C₁₃H₁₈Cl₂N₃O应为302.0821，实测[M+H]⁺302.0823。

实施例3：(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-基)(吗啉代)甲酮E3

应用吗啉代(哌啶-4-基)甲酮(21mg，0.12mmol)、3，4，5-三氯吡啶(23mg，0.12mmol)、三乙胺(32μL，0.23mmol)和NMP(1mL)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(己烷/EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(15mg，35％)，m.p.172-174℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13006，2858，1632，1559，1448，1116，1020；m/z(ESI)C₁₅H₂₀Cl₂N₃O₂应为344.0927，实测[M+H]⁺344.0929。

实施例4：1-(3-氯-5-(3，4-二甲氧基苯基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E4

通用方法D

向1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(24mg，0.088mmol)、3，4-二甲氧基苯基硼酸(19mg，0.11mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)在乙腈(1mL)中的混合物中加入0.5M碳酸钠水溶液(0.25mL，0.12mmol)。在微波反应器中在150℃加热该混合物45min，然后冷却至室温并在SCX-2柱上(MeOH，随后为在MeOH中的0.5M NH₃)纯化。通过制备tlc在硅胶上纯化(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)粗产物，得到不纯的标题化合物(7mg)。通过制备hplc(H₂O，MeCN，90∶10-10∶90，30min)进一步纯化，得到标题化合物，其为白色固体，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.60min，m/z 376(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₉H₂₃ClN₃O₃应为376.1428，实测[M+H]⁺376.1421。

实施例5：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)-N-(2-(3，5-二氯吡啶-4-基氨基)乙基)哌啶-4-甲酰胺E5

应用苄基-N-(氨基-乙基)哌啶-4-甲酰胺7(47mg，0.27mmol)、3，4，5-三氯吡啶(50mg，0.27mmol)、三乙胺(76μL，0.54mmol)和NMP(1.5mL)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(己烷/EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(81mg，64％)，m.p.157-159℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13013，1670，1574，1510，1231，1092；m/z(ESI)C₁₈H₂₀Cl₄N₅O应为462.0417，实测[M+H]⁺462.0421。

实施例6：4-(3-甲基吡啶-4-基)环己烷甲酰胺E6

在微波反应器中在100℃将4-氯-3-甲基吡啶盐酸盐(50mg，30mmol)和4-哌啶甲酰胺(0.12g，0.91mmol)的水(1mL)溶液加热45分钟。将反应混合物冷却至0℃，过滤混合物，并用Et₂O(2×10mL)洗涤，得到标题化合物，其为无色结晶固体(33mg，49％)，m.p.175-177℃；m/z(ESI)C₁₂H₁₈CN₃O应为220.1444，实测[M+H]⁺220.1445。

实施例7：4-(4-氨基甲酰基哌啶-1-基)-3，5-二氯吡啶1-氧化物E7

向冷却至0℃的1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(100mg，0.36mmol)和过氧化氢.尿素复合物(72mg，0.77mmol)的CH₂Cl₂(2mL)溶液中加入三氟乙酸酐(0.10mL，0.73mmol)。30分钟后，使溶液升温至室温，16小时后，加入饱和Na₂S₂O₅溶液(10mL)。用CH₂Cl₂(2×20mL)萃取混合物，用饱和NaHCO₃溶液(20mL)、盐水(20mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下移除溶剂。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂/MeOH，98∶2)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(20mg，19％)，m.p.130-133℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13026.2855，1724，1452，1273，1107。

实施例8：(4-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌嗪-1-基)(苯基)甲酮E8

应用4-苯甲酰基哌嗪10(47mg，0.25mmol)、3，4，5-三氯吡啶(72mg，0.39mmol)、三乙胺(0.11mL，0.78mmol)和NMP(1.5mL)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(己烷/EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(19mg，23％)，m.p.132-134℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13005，1627，1435，1286，1153，1010；m/z(ESI)C₁₆H₁₆Cl₂N₃O应为336.0665，实测[M+H]⁺336.0661。

实施例9：1-(4-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌嗪-1-基)乙酮E9

应用乙酰基哌嗪(35mg，0.27mmol)、3，4，5-三氯吡啶(50mg，0.27mmol)、三乙胺(0.76μL，0.54mmol)和NMP(1.5mL)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(己烷/EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(18mg，24％)，m.p.144-146℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13008，2909，2856，1638，1558，1470，1441，1282，1240，1152，1098；m/z(ESI)C₁₁H₁₄Cl₂N₃O应为274.0508，实测[M+H]⁺274.0513.

实施例10：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-甲基哌嗪E10

应用N-甲基哌嗪(27mg，0.27mmol)、3，4，5-三氯吡啶(50mg，0.27mmol)、三乙胺(0.76μL，0.54mmol)和NMP(1.5mL)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(己烷/EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为无色油状物(44mg，65％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-12942，2849，2803，1558，1449，1289，1151；m/z(ESI)C₁₀H₁₄Cl₂N₃应为246.0559，实测[M+H]⁺246.0560。

实施例11：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-乙基哌嗪E11

应用N-乙基哌嗪(31mg，0.27mmol)、3，4，5-三氯吡啶(50mg，0.27mmol)、三乙胺(0.76μL，0.54mmol)和NMP(1.5mL)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(己烷/EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为无色油状物(47mg，66％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-12975，2820，1559，1448，1245，1151，957；m/z(ESI)C₁₁H₁₆Cl₂N₃应为260.0716，实测[M+H]⁺260.0719。

实施例12：1-(3-氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E12

应用4-哌啶甲酰胺(43mg，0.34mmol)、3，4，二氯吡啶(50mg，0.34mmol)、三乙胺(0.14mL，1.0mmol)和NMP(1.5mL)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(己烷/EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为无色油状物(18mg，22％)，m.p.210-212℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-12360，2342，1653，1581’1382，1223，1135，1041；m/z(ESI)C₁₁H₁₅ClN₃O应为240.0898，实测[M+H]⁺240.0899。

实施例13：N-(2-氨基乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E13

向冷却至0℃的2-(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰氨基)乙基氨基甲酸苄基酯11(0.45g，1.0mmol)的乙腈和二氯甲烷(1∶1混合物，40mL)溶液中加入三甲基碘硅烷(0.57mL，4.0mmol)。搅拌60分钟后，在减压下移除溶剂，通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂/MeOH，98∶2)纯化粗产物，得到标题化合物，其为无色油状物(193mg，61％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13002，2853，1663，1559，1512，1457，1264，1146；m/z(ESI)C₁₃H₁₉Cl₂N₄O应为317.0930，实测[M+H]⁺317.0928。

实施例14：N-(2-(苄基氨基)乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E14

向N-(2-氨基乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E13(50mg，0.16mmol)的MeOH(5mL)溶液中加入苯甲醛(16μL，0.16mmol)。搅拌2h后，加入氰基硼氢化钠(20mg，0.32mmol)，并且再搅拌该混合物20h。减压下移除溶剂，将残余物溶解于EtOAc(20mL)中，用饱和碳酸氢钠溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，并在减压下移除溶剂。通过制备tlc在硅胶上纯化(CH₂Cl₂，MeOH，9∶1)粗产物，得到标题化合物，其为无色油状物(19mg，30％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13015，2850，1659，1558，1512，1236，1146，1036，934；m/z(ESI)C₂₀H₂₅Cl₂N₄O应为407.1400，实测[M+H]⁺407.1401。

实施例15：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)-N-(2-(4-甲氧基苄基氨基)乙基)哌啶-4-甲酰胺E15

向N-(2-氨基乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E13(50mg，0.16mmol)的MeOH(5mL)溶液中加入对甲氧基苯甲醛(19μL，0.16mmol)。搅拌2h后，加入氰基硼氢化钠(20mg，0.32mmol)，并再搅拌混合物20h。减压下移除溶剂，将残余物溶解于EtOAc(20mL)中，用饱和碳酸氢钠溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，并在减压下移除溶剂。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，9∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为无色油状物(13mg，19％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13008，2839，1660，1513，1249，1174，1036；m/z(ESI)C₂₁H₂₇Cl₂N₄O₂应为437.1506，实测[M+H]⁺437.1508。

实施例16：N-(2-(环己基甲基氨基)乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E16

向N-(2-氨基乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E13(50mg，0.16mmol)的MeOH(5mL)溶液中加入环己基甲醛(19μL，0.16mmol)。搅拌2h后，加入氰基硼氢化钠(20mg，0.32mmol)，并再搅拌混合物16h。减压下移除溶剂，将残余物溶解于EtOAc(20mL)中，用饱和碳酸氢钠溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，并在减压下移除溶剂。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，9∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(15mg，23％)，m.p.174-177℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-12932，2856，1665，1558，1457，1236，1146，1037；m/z(ESI)C₂₀H₃₁Cl2₂N₄O应为413.1869，实测[M+H]⁺413.1875。

实施例17：N-(2-(二苄基氨基)乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E17

向N-(2-氨基乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E13(20mg，0.060mmol)的MeOH(2mL)溶液中加入苯甲醛(19μL，0.19mmol)。搅拌45分钟后，加入氰基硼氢化钠(12mg，0.19mmol)，并再搅拌混合物16h。减压下移除溶剂，将残余物溶解于EtOAc(20mL)中，用饱和碳酸氢钠溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，并在减压下移除溶剂。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，9∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(14mg，54％)，m.p.147-149℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13007，2837，1658，1558，1509，1457，1146；m/z(ESI)C₂₇H₃₁Cl₂N₄O应为497.1869，实测[M+H]⁺497.1872。

实施例18：N-(2-(双(环己基甲基)氨基)乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E18

向N-(2-氨基乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E13(20mg，0.060mmol)的MeOH(2mL)溶液中加入环己基甲醛(23μL，0.19mmol)。搅拌30分钟后，加入氰基硼氢化钠(12mg，0.19mmol)，并再搅拌混合物16h。减压下移除溶剂，将残余物溶解于EtOAc(20mL)中，用饱和碳酸氢钠溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，并在减压下移除溶剂。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，9∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(28mg，87％)，m.p.236-238℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-12926，2852，1656，1510，1384，1099；m/z(ESI)C₂₇H₄₂Cl₂N₄O应为509.2808，实测[M+H]⁺509.2808。

实施例19：N-(2-苯甲酰氨基乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E19

向N-(2-氨基乙基)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E13(50mg，0.16mmol)、苯甲酸(23mg，0.19mmol)和HATU(72mg，0.19mmol)的DMF(1mL)溶液中加入DIPEA(82μL，0.47mmol)。16h后，将该混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)中，并用EtOAc(2×25mL)萃取。用水(50mL)、饱和柠檬酸溶液(50mL)、水(50mL)和盐水(50mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)并在减压下浓缩。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，9∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(24mg，36％)，m.p.209-211℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13029，3006，1656，1523，1385，1228，1017；m/z(ESI)C₂₀H₂₂Cl₂N₄NaO₂应为443.1012，实测[M+Na]⁺443.1013。

实施例20：(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-基)(哌嗪-1-基)甲酮E20

向冷却至0℃的4-(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-甲酸苄基酯13(40mg，0.080mmol)的DCM(1mL)溶液中加入三甲基碘硅烷(24μL，0.16mmol)，在这一温度下搅拌该溶液90分钟，此后加入三甲基碘硅烷(48μL，0.32mmol)，并使混合物升温至室温。再搅拌45min后，在减压下浓缩溶液，并在SCX-2柱上(MeOH，随后是在MeOH中的0.5M NH₃)纯化粗产物，得到标题化合物，其为黄色固体(27mg，94％)，m.p.256-258℃；m/z(ESI)C₁₅H₂₀Cl₂N₄NaO应为365.0906，实测[M+Na]⁺365.0909。

实施例21：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲酰胺E21

将1-(3，5-二氯吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲腈14(83mg，0.34mmol)在硫酸(3mL)中的溶液搅拌90分钟，然后倒入冰/水(100g)中。通过添加2M氢氧化钠溶液碱化混合物，并用EtOAc(2×50mL)萃取。用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下浓缩，得到标题化合物，其为白色固体(65mg，73％)，m.p.161-163℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13053，2985，1689，1558，1465；m/z(ESI)C₁₀H₁₂Cl₂N₃O应为260.0352，实测[M+H]⁺260.0355。

实施例22：1-(3，5-二溴吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲酰胺E22和

实施例23：1-(3，5-二溴吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲腈E23

应用3，5-二溴-4-氯吡啶(71mg，0.26mmol)、3-氰基吡咯烷(25mg，0.26mmol)、NMP(3mL)和三乙胺(72μL，0.52mmol)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，99∶1)纯化粗产物，得到标题化合物E22，其为白色固体(9mg，10％)，m.p.159-161℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13022，3008，1678，1591，1446，1235；m/z(ESI)C₁₀H₁₂Br₂N₃O应为347.9342，实测[M+H]⁺347.9339。

从该纯化步骤中分离的还有1-(3，5-二溴吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲腈E23，其为无色油状物(13mg，15％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13014，2988，2246，1731m 1451m 1374，1248，1045，1016；m/z(ESI)C₁₀H₁₀Br₂N₃应为329.9236，实测[M+H]⁺329.9238。

实施例24：(R，S)-1-(3，5-二氯-吡啶-4-基)-吡咯烷-3-甲酸(2-氨基-乙基)-酰胺E24

向冷却至0℃的(R，S)-(2-{[1-(3，5-二氯-吡啶-4-基)-吡咯烷-3-羰基]-氨基}-乙基)-氨基甲酸苄基酯17(50mg，0.11mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入碘代三甲基硅烷(66μL，0.46mmol)。在这一温度搅拌2h后，减压下移除溶剂，并在SCX-2柱上(MeOH，随后是在MeOH中的0.5M NH₃)纯化粗产物，得到标题化合物，其为无色油状物(16mg，46％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13014，1731，1664，1559，1519，1465，1248，1046；m/z(ESI)C₁₂H₁₆Cl₂N₄NaO应为325.0593，实测[M+Na]⁺325.0595。

实施例25：1-(3，5-二溴-吡啶-4-基)-吡咯烷-3-甲酸(2-氨基-乙基)-酰胺E25

向冷却至0℃的2-(1-(3，5-二溴吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲酰氨基)乙基氨基甲酸苄基酯19(65mg，0.12mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入碘代三甲基硅烷(70μL，0.49mmol)。在这一温度搅拌2h后，减压下移除溶剂，并在SCX-2柱上(MeOH，随后是在MeOH中的0.5M NH₃)纯化粗产物，得到标题化合物，其为无色油状物(40mg，83％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-13022，2871，1664，1556，1450，1399；m/z(ESI)C₁₂H₁₆Br₂N₄NaO应为412.9583，实测[M+H]⁺412.9582。

实施例26：4-(3，5-二甲基吡啶-4-基)环己烷甲酰胺E26

将4-氯-3，5-二甲基吡啶盐酸盐(0.10g，0.56mmol)和4-哌啶甲酰胺(0.22mg，1.7mmol)的水(1.5mL)溶液在微波反应器中在175℃加热60分钟。将该混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液(20mL)中，用EtOAc(2×20mL)萃取。干燥(MgSO₄)合并的有机萃取物，在减压下浓缩。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，95∶5)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(5mg，4％)，m/z 234(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₃H₂₀N₃O应为234.1601实测[M+H]⁺234.1600。

实施例27：1-(3，5-二溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E27

应用3，5-二溴-4-氯吡啶18(50mg，0.18mmol)、4-哌啶甲酰胺(24mg，0.18mmol)、NMP(2mL)和三乙胺(51μL，0.37mmol)进行通用方法C。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，9∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为浅黄色固体(29mg，43％)，m.p.158-160℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13053，2985，1687，1591；m/z(ESI)C₁₁H₁₄Br₂N₃O应为361.9498，实测[M+H]⁺361.9500。

实施例28：1-(5-氯嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E28

向4，5-二氯嘧啶盐酸盐20(0.20g，1.1mmol)的DMF(4mL)溶液中加入三乙胺(1.5mL，10mmol)。搅拌30分钟后，加入4-哌啶甲酰胺(0.42mg，3.3mmol)的DMF(4mL)溶液，并在室温下再搅拌该混合物16h。将该混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)中，并用EtOAc(2×25mL)萃取。用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下浓缩。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，梯度98∶2-96∶4)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(51mg，20％)，m.p.201-202℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13023，3014，1724，1682，1448，1360，1219，1037；m/z(ESI)C₁₀H₁₄CN₄O应为241.0851，实测[M+H]⁺241.0851。

实施例29：1-(5-溴嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E29

向5-溴-4-氯嘧啶盐酸盐21(0.10g，0.36mmol)的DMF(2mL)溶液中加入三乙胺(0.51mL，3.6mmol)。搅拌30分钟后，加入4-哌啶甲酰胺(0.14g，1.1mmol)的DMF(2mL)溶液，并在室温下再搅拌混合物16h。将混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)中，并用EtOAc(2×25mL)萃取。用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下浓缩。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，98∶2)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(60mg，58％)，m.p.188-190℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13012，2853，1682，1566，1447，1359，1144，1017，950；m/z(ESI)C₁₀H₁₄BrN₄O应为285.0346，实测[M+H]⁺285.0344。

实施例30：1-(5-甲基嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E30

向5-甲基-4-氯嘧啶盐酸盐22(75mg，0.45mmol)的DMF(2mL)溶液中加入三乙胺(0.63mL，4.5mmol)。搅拌15分钟后，加入4-哌啶甲酰胺(64mg，0.50mmol)的DMF(2mL)溶液，并在室温下再搅拌混合物20h。将混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)中，并用EtOAc(2×25mL)萃取。用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下浓缩。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，梯度98∶2至9∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(25mg，25％)，m.p.182-184℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13024，1678，1581，1439，1359，1147，948；m/z(ESI)C₁₁H₁₇N₄O应为221.1397，实测[M+H]⁺221.1394。

实施例31：1-(5-溴-2-氯嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E31

向5-溴-2，4-二氯嘧啶(0.11g，0.50mmol)和4-哌啶甲酰胺(77mg，0.60mmol)的DMF(2mL)溶液中加入三乙胺(77μL，0.55mmol)，并在室温下将混合物搅拌4.5h。将混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液(10mL)中，并用EtOAc(2×10mL)萃取。用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下浓缩。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，98∶2)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(174mg，95％)，m/z(ESI)C₁₀H₁₂BrClN₄NaO应为340.9775，实测[M+Na]⁺340.9776。

实施例32：1-(2-氯-5-苯基嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E32

向1-(5-溴-2-氯嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E31(0.10g，0.31mmol)、苯硼酸(46mg，0.38mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(20mg，5mol％)的DME(8mL)溶液中加入0.5M碳酸钠溶液。在回流下加热混合物22h，然后冷却至室温，并在SCX-2柱上(MeOH，随后是在MeOH中的0.5M NH₃)纯化。通过硅胶色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，98∶2)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(58mg，59％)，m/z 317(100％，MH⁺)；m/z(ESI)C₁₆H₁₈BrClN₄O应为317.1165，实测[M+H]⁺317.1161。

实施例33：1-(5-苯基嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E33

在氢气气氛(1atm)下搅拌在乙酸(2mL)中的1-(2-氯-5-苯基嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E32(35mg，0.11mmol)、乙酸钾(22mg，0.22mmol)和10％wt钯炭(3.5mg)的混合物，搅拌18小时。通过硅藻土过滤混合物，用AcOH(2×10mL)洗涤，并在减压下浓缩。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂/MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(9mg，29％)m/z 283(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₆H₁₉N₄O应为283.1553，实测[M+H]⁺283.1549。

实施例35：2-(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-基)噻唑E34

向1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-硫代甲酰胺24(23mg，0.079mmol)的乙醇(2mL)溶液中加入氯乙醛(50％wt，在H₂O中)(0.26mL，0.16mmol)，并在回流下加热该混合物17h。浓缩混合物，并将氯仿(10mL)加入到残余物中。用水(10mL)洗涤溶液，并用氯仿(10mL)萃取。用盐水(10mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，减压下浓缩，得到棕色油状物(40mg)。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1，然后是己烷，EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为浅棕色固体(5mg，20％)，LC-MS(ESI)R_t2.79min，m/z 314(100％，M⁺)。

实施例35：2-(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-基)唑E35

向80℃的1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(0.10g，0.36mmol)的多磷酸(5mL)溶液中加入碳酸亚乙烯酯(35mg，0.40mmol)。在170℃加热混合物4小时，冷却至室温，并倒入水(200mL)中。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取混合物，并用水(100mL)、饱和碳酸氢钠溶液(50mL)、水(50mL)、盐水(50mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，减压下浓缩，得到无色油状物(12mg)。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1，然后是己烷，EtOAc，1∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(13mg，12％)，LC-MS(ESI)R_t 2.66min，m/z 298(100％，M⁺)；m/z(ESI)C₁₃H₁₄Cl₂N₃O应为298.0508，实测[M+H]⁺298.0507。

实施例36：1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E36

应用3-溴-4-氯-吡啶(0.10g，0.52mmol)和4-哌啶甲酰胺(67mg，0.52mmol)、NMP(2mL)和三乙胺(0.14mL，1.0mmol)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，梯度99∶1至95∶5)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(49mg，33％)，LC-MS(ESI)R_t 0.80min，m/z 284(100％，[M+H]⁺⁾；m/z(ESI)C₁₁H₁₅BrN₃O应为284.0393，实测[M+H]⁺284.0392。

实施例37：1-(3-(4-甲氢基苯基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E37

应用1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E36(50mg，0.17mmol)、4-甲氧基苯基硼酸(32mg，0.21mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(10mg，5mol％)、乙腈(1.2mL)和0.5M碳酸钠(0.49mL，0.25mmol)进行通用方法D(参见实施例4)，反应50分钟。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，梯度97∶3至95∶5)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(49mg，89％)，LC-MS(ESI)R_t 1.28min，m/z 312(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₈H₂₂N₃O₂应为312.1706，实测[M+H]⁺312.1705。

实施例38：1-(3-(噻吩-2-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E38

应用1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E36(25mg，0.088mmol)、噻吩-2-硼酸(13mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D(参见实施例4)，反应30分钟。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(23mg，91％)，LC-MS(ESI)R_t 1.17min，m/z288(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₅H₁₈N₃OS应为288.1165，实测[M+H]⁺288.1163。

实施例39和40：1-(3-溴-5-苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E39及1-(3，5-二苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E40

向1-(3，5-二溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E27(50mg，0.14mmol)、苯硼酸(70mg，0.58mmol)和磷酸钾(0.20g，0.96mmol)的甲苯(1.5mL)溶液中加入四(三苯基膦)钯(0)(18mg，0.014mmol)。在微波反应器中在170℃加热该混合物45分钟，然后将其倒入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)中。用EtOAc(2×25mL)萃取该混合物，并用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下移除溶剂。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，98∶2)纯化粗产物，得到单-和双-偶联产物的2∶3混合物。通过制备HPLC(MeCN，H₂O 5∶95)进一步纯化分析样品：

1-(3-溴-5-苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E39：(4.2mg，8％)，m.p.220-222℃；υ_max(CHCl₃)/cm^-13029，1684，1441，1383；m/z(ESI)C₁₇H₁₉BrN₃O应为360.0706，实测[M+H]⁺360.0706。

1-(3，5-二苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E40：(14mg，28％)，υ_max(CHCl₃)/cm^-1 3039，1731，1375，1249，1045，1016；m/z(ESI)C₂₃H₂₄N_3O应为358.1914，实测[M+H]⁺358.1911。

实施例41：1-(3-溴-5-(4-(三氟甲基)苯基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E41

向1-(3，5-二溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E27(50mg，0.14mmol)、4-三氟甲基苯硼酸(0.11g，0.56mmol)和磷酸钾(0.20g，0.96mmol)的甲苯(4mL)溶液中加入四(三苯基膦)钯(0)(18mg，10mol％)。在微波反应器中在170℃加热该混合物60min，然后将其倒入饱和碳酸氢钠溶液(25ml)中。用EtOAc(2×20mL)萃取该混合物，并用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下移除溶剂。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，98∶2)纯化粗产物，并通过制备HPLC(H₂O，MeCN，在30分钟内，梯度90∶10至10∶90)进一步纯化(11mg，9％)，m/z(ESI)C₁₈H₁₈BrF₃N₃O应为428.0580，实测[M+H]⁺428.0574。

实施例42：1-(3-氯-5-苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E42

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(24mg，0.088mmol)、苯硼酸(13mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D(参见实施例4)，反应30min。通过制备HPLC(H₂O，MeCN，在30分钟内，梯度90∶10至10∶90)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(6mg，22％)，LC-MS(ESI)R_t 1.63min，m/z 316(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₇H₁₈ClN₃NaO应为338.1031，实测[M+Na]⁺338.1030。

实施例43：1-(3-氯-5-(4-甲氧基苯基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E43

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(24mg，0.088mmol)、4-甲氧基苯硼酸(16mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D(参见实施例4)，反应30min。通过制备HPLC(CH₃CN，H₂O，23∶77)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(9mg，30％)，LC-MS(ESI)R_t 1.67min，m/z 346(100％，[M+H]⁺⁾；m/z(ESI)C₁₈H₂₁ClN₃O₂应为346.1317，实测[M+H]⁺346.1317。

实施例44：1-(3-氯-5-(1H-吡唑-5-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E44

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(24mg，0.088mmol)、1H-吡唑-5-硼酸频哪醇酯(19mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D(参见实施例4)，反应30min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(18mg，67％)，LC-MS(ESI)R_t 1.06min，m/z 306(100％，[M+H]⁺⁾；m/z(ESI)C₁₄H₁₇ClN₅O应为306.1116，实测[M+H]⁺306.1114。

实施例45：1-(3-氯-5-(1，5-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E45

通用方法E

向1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(75mg，0.27mmol)、1，5-二甲基-4-吡唑硼酸频哪醇酯(76mg，0.34mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(16mg，5mol％)在乙腈(3mL)中的悬浮液中加入0.5M碳酸钠溶液(0.77mL，0.38mmol)。在微波反应器中在150℃加热该混合物45min。一旦冷却，即在真空中浓缩反应物，并干法上样至硅胶上。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，EtOH，97∶3-80∶20，biotage 25+S)纯化粗产物，得到标题化合物，其为透明无色油状物(24mg，26％)，LC-MS(ESI，4min)R_t 1.49min，m/z 334(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₆H₂₀N₅OCl应为333.1356，实测[M+H]⁺333.1354。

实施例46：1-(3-氯-5-(2-(甲硫基)嘧啶-5-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E46

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(75mg，0.27mmol)、2-(甲硫基)嘧啶-5-硼酸(58mg，0.34mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(16mg，5mol％)、乙腈(3mL)和0.5M碳酸钠(0.77mL，0.38mmol)进行通用方法E。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，EtOH，96∶4-82∶18，biotage 25+S)纯化粗产物，得到标题化合物，其为灰白色固体(11mg，11％)，并回收为白色固体的1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(41mg，55％RSM)，LC-MS(ESI，4min)R_t2.14min，m/z 364(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₆H₁₈N₅OSCl应为363.09206，实测[M+H]⁺363.0922。

实施例47：1-(3-氯-5-(1，3-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E47

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(75mg，0.27mmol)、1，3-二甲基-4-频哪醇硼烷基-1H-吡唑(76mg，0.34mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(16mg，5mol％)、乙腈(3mL)和0.5M碳酸钠(0.77mL，0.38mmol)进行通用方法E。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，EtOH，94∶6-80∶20，biotage 25+S)纯化粗产物，得到为灰白色固体的标题化合物(16mg，18％)，并回收1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(30mg，40％RSM)，LC-MS(ESI，4min)R_t 1.40min，m/z 334(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₆H₂₀N₅OCl应为333.1356，实测[M+H]⁺333.1356。

实施例48：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈E48

应用3，4，5-三氯吡啶(0.50g，2.7mmol)、4-哌啶甲酰胺(0.30mg，2.7mmol)、NMP(15mL)和三乙胺(0.76mL，5.5mmol)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，99∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(228mg，33％)，m/z(ESI)C₁₁H₁₂Cl₂N₃应为256.0403，实测[M+H]⁺256.0409。

实施例49：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-甲基哌啶-4-甲腈E49

向-78℃的1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈E48(90mg，0.35mmol)的THF(1.5mL)溶液中加入1M LDA的THF溶液(0.38mL，0.38mmol)。在升温至室温之前，在-78℃搅拌混合物30分钟。60分钟后，添加甲基碘(31μL，0.5mmol)。室温下再搅拌混合物60分钟，然后添加水(5mL)。用CH₂Cl₂(3×5mL)萃取混合物，在MgSO₄上干燥合并的有机萃取物，并在减压下浓缩至干。通过硅胶快速柱色谱法(己烷，EtOAc，100∶0-80∶20，biotage 25+M)纯化粗产物，得到为白色固体的标题化合物(34mg，36％)，并得到回收的1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈(23mg，25％)，LC-MS(ESI，4min)R_t 3.09min，m/z 270(100％，M⁺)；m/z(ESI)C₁₂H₁₃Cl₂N₃应为269.0487，实测[M+H]⁺289.0488。

实施例50：1-(3-氯-5-(4-氟苯基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E50

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(24mg，0.088mmol)、4-氟苯硼酸(15mg，0.11mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D，进行30分钟。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到不纯的标题化合物(19mg)，通过制备hplc(CH₃CN，H₂O，梯度1∶9至9∶1)进一步纯化得到标题化合物，其为白色固体，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.71min，m/z 334(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₇H₁₈ClFN₃O应为334.1117，实测[M+H]⁺334.1116。

实施例51：1-(3-氯-5-(4-三氟甲基)苯基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E51

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(24mg，0.088mmol)、(4-三氟甲基)苯硼酸(20mg，0.11mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D，进行30分钟。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，随后通过制备hplc(CH₃CN，H₂O，梯度1∶9至9∶1)纯化，得到标题化合物，其为白色固体(10mg，30％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 2.26min，m/z 384(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₈H₁₈ClF₃N₃O应为384.1085，实测[M+H]⁺384.1084。

实施例52：1-(3-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E52

应用1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E36(25mg，0.088mmol)、4-氟-3-甲基苯基硼酸(16mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)和乙腈(1mL)进行通用方法D，进行50分钟。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(15mg，56％)，LC-MS(ESI 3.5min)R_t 1.46min，m/z314(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₈H₂₁FN₃O应为314.1663，实测[M+H]⁺314.1658。

实施例53：1-(3-(3，5-二甲基异唑-4-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E53

应用1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E36(100mg，0.35mmol)、3，5-二甲基-4-异唑硼酸(74mg，0.53mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(20mg，5mol％)、乙腈(4mL)和0.5M碳酸钠(1.1mL，0.53mmol)进行通用方法E。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，EtOH，97∶3-80∶20，biotage 25+S)纯化粗产物，得到为白色固体的标题化合物(18mg，17％)，并得到1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(10mg，10％RSM)，LC-MS(ESI，4min)R_t 0.76min，m/z301(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI，R_t 1.22min)C₁₆H₂₀N₄O₂应为300.1587，实测[M+H]⁺300.1591。

实施例54和55：8-(3，5-二氯吡啶-4-基)-1-苯基-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-4-酮E54和1-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(苯基氨基)哌啶-4-甲酰胺E55

应用3，4，5-三氯吡啶(120mg，0.66mmol)、1-苯基-1，3，8-三氮杂螺[4，5]癸-4-酮(150mg，0.66mmol)、NMP(3.6ml)和三乙胺(0.19ml，1.3mmol)进行通用方法D，得到粗制的橙色/白色油性固体(105mg)。通过硅胶快速柱色谱法(己烷，EtOAc，80∶20-10∶90，biotage 25+S)纯化粗产物，得到作为灰白色固体的不纯标题化合物E54(39mg)和作为灰白色固体的不纯标题化合物E55(97mg)。通过在EtOAc/Et₂O中重结晶进一步纯化这两种产物，得到作为灰白色固体的标题化合物E54(13mg，5％)和作为灰白色固体的标题化合物E55(46mg，19％)。

8-(3，5-二氯吡啶-4-基)-1-苯基-1，3，8-三氮杂螺[4.5]癸-4-酮E54：LC-MS(ESI，4min)R_t3.26min，m/z 377(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₈H₁₈N₄Cl₂O应为376.0858，实测[M+H]⁺364.0869。

1-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(苯基氨基)哌啶-4-甲酰胺E55：LC-MS(ESI，4min)R_t2.99min，m/z 365(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₇H₁₈N₄Cl₂O应为364.0858，实测[M+H]⁺364.0851。

实施例56：1-(3-氯-5-(嘧啶-5-基)吡啶-4-基)哌啶-4甲酰胺E56

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(24mg，0.088mmol)、嘧啶-5-基硼酸(12mg，0.11mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D，进行30分钟。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(26mg，95％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.19min，m/z318(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₅H₁₇ClN₅O应为318.1116，实测[M+H]⁺318.1114。

实施例57：1-(3-(噻吩-3-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E57

应用1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E36(17mg，0.060mmol)、噻吩-3-硼酸(9.2mg，0.072mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(3.5mg，5mol％)、0.5M碳酸钠(0.17mL，0.084mmol)和乙腈(1mL)进行通用方法D，进行50分钟。通过制备tlc(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(13mg，76％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.12min，m/z 288(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₅H₁₈N₃OS应为288.1165，实测[M+H]⁺288.1163。

实施例58：1-(3-氯-5-(1，3，5-三甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E58

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(75mg，0.27mmol)、1，3，5-三甲基-1H-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(65mg，0.27mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(16mg，5mol％)、乙腈(3mL)和0.5M碳酸钠(0.77mL，0.38mmol)进行通用方法E。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，EtOH，94∶6-80∶20，biotage 25+S)纯化粗产物，得到作为极浅黄色固体的标题化合物(34mg，35％)，并回收1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(52mg，57％RSM)，LC-MS(ESI，4min)R_t 1.55min，m/z 348(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₇H₂₂N₅OCl应为347.1513，实测[M+H]⁺347.1508。

实施例59：8-(3，5-二氯吡啶-4-基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮E59

应用3，4，5-三氯吡啶(100mg，0.55mmol)、2，8-二氮杂螺[4，5]癸-1-酮.HCl(85mg，0.55mmol，商购自ASW MedChem Inc.)、NMP(3.0ml)和三乙胺(0.23ml，1.6mmol)进行通用方法C，得到粗制的橙色/白色油性固体(458mg)。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，97∶3)纯化粗产物，得到作为油性白色固体的不纯标题化合物(110mg)。通过在Et₂O中研磨进一步纯化得到标题化合物，其为白色固体(57mg，35％)，LC-MS(ESI，4min)R_t 2.66min，m/z 300(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₃H₁₅N₃Cl₂O应为299.0593，实测[M+H]⁺300.0665。

实施例60：8-(3-氯-5-苯基吡啶-4-基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮E60

应用8-(3，5-二氯吡啶-4-基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮E59(38mg，0.13mmol)、苯基硼酸(19mg，0.16mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(7.3mg，5mol％)、乙腈(1.4ml)和0.5M碳酸钠(0.35ml，0.18mmol)进行通用方法E。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，97∶3)纯化粗产物，随后通过制备hplc(CH₃CN，H₂O，梯度1∶9至9∶1)纯化，得到作为白色固体的标题化合物(12mg，28％)以及回收的作为透明无色油状物的原料(10mg，23％RSM)，LC-MS(ESI，4min)R_t 2.22min，m/z 342(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₉H₂₀N₃ClO应为341.1295，实测[M+H]⁺341.1301。

实施例61：(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-基)甲醇E61

应用3，4，5-三氯吡啶(50mg，0.27mmol)、哌啶-4-基甲醇(35mg，0.30mmol)、三乙胺(76μL，0.54mmol)和NMP(1.5mL)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(己烷，EtOAc，85∶15)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(51mg，71％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 2.49min，m/z 261(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₁H₁₅Cl₂N₂O应为261.0556，实测[M+H]⁺261.0558；HPLC R_t 6.68min，100％.

实施例62：(R，S)-1-(3-氯-5-苯基吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲腈E62

应用(R，S)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲腈14(25mg，0.10mmol)、苯硼酸(15mg，0.12mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(6mg，5mol％)、0.5M碳酸钠(0.29mL，0.14mmol)和乙腈(1mL)进行通用方法D，进行30分钟。通过制备hplc(CH₃CN，H₂O，梯度1∶9至9∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(8mg，27％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.64min，m/z 284(100％，[M+Na]⁺)。

实施例63：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-甲基哌啶-4-甲酸乙酯E63

向N-Boc-4-甲基哌啶-4-甲酸乙酯(130mg，0.47mmol)的CH₂Cl₂(8mL)溶液中加入三氟乙酸(0.86mL，11mmol)，并在室温下将反应物搅拌2h，然后蒸发，并与甲苯(2x25ml)共沸。将粗制物溶解于NMP(4.3ml)中，加入3，4，5-三氯吡啶(135mg，0.74mmol)，然后加入三乙胺(0.42mL，3.0mmol)，并在微波反应器中在220℃加热该混合物60min。将该混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)中，并用EtOAc(2×100mL)萃取。用水(2x50mL)、盐水(50mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下浓缩得到粗的浅棕色/橙色油状物(175mg)。通过硅胶快速柱色谱法(环己烷，EtOAc，99∶1-88∶12，biotage 25+S)纯化粗产物，得到标题化合物，其为透明无色油状物(85mg，56％)，LC-MS(ESI，4min)R_t 3.36min，m/z 317(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₄H₁₈N₂O₂Cl₂应为316.0745，实测[M+H]⁺316.0745。

实施例64：(R，S)-1-(3-氯-5-苯基吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲酰胺E64

应用(R，S)-1-(3，5-二氯吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲酰胺E21(23mg，0.088mmol)、苯硼酸(13mg，0.11mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D，反应30min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到白色固体(14mg)，随后通过制备hplc(H₂O，MeCN，历经30分钟的梯度90∶10至10∶90)纯化，得到标题化合物，其为白色固体，LC-MS(ESI，3.5min)R_t1.32min，m/z 302(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₆H₁₇ClN₃O应为302.1055，实测[M+H]⁺302.1047。

实施例65：1-(5-氨-3，4′-联吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E65

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(24mg，0.088mmol)、吡啶-4-基硼酸(12mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D，反应30min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(5mg，18％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.10min，m/z317(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₆H₁₈ClN₄O应为317.1164，实测[M+H]⁺317.1160。

实施例66：1-(3-环丙基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E66

应用1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E36(25mg，0.088mmol)、环丙基硼酸(9.4mg，0.44mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)和乙腈(1mL)进行通用方法D，进行50min。应用制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH 10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(4mg，19％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 0.97min，m/z 246(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₄H₁₉N₃O应为246.1601，实测[M+H]⁺246.1596。

实施例67：1-(3-(1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E67

应用1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E36(25mg，0.088mmol)、1H-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(21mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)和乙腈(1mL)进行通用方法D，进行50min。通过制备hplc(H₂O，MeCN，95∶5)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(11mg，46％)，m/z(ESI)C₁₄H₁₈N₅O应为272.1506，实测[M+H]⁺272.1509。

实施例68：1-(3-苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E68

向1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E36(20mg，0.070mmol)、苯基硼酸(17mg，0.14mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(8mg，10mol％)在甲苯(1.5mL)中的混合物中加入磷酸钾(45mg，0.21mmol)。在微波反应器中在170℃加热该混合物45min，然后将其倒入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)中。用EtOAc(2×20mL)萃取混合物，并用盐水(25mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下移除溶剂。应用硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，95∶5)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(5mg，25％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.28min，m/z 282(100％，[M+H]⁺)，m/z(ESI)C₁₇H₂₀N₃O应为282.1601，实测[M+H]⁺282.1597。

实施例69：(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-基)甲胺E69

向0℃的1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(30mg，0.11mmol)的THF(2mL)溶液中加入1M硼烷THF复合物的THF溶液(11.1mL，1.1mmol)。搅拌该反应物1小时，然后升温至室温，并再搅拌18h。向反应中加入2M HCl(2ml)，用水(20ml)稀释混合物，并用EtOAc(2×20mL)萃取，用盐水(25mL)洗涤合并的有机萃取物。用饱和碳酸氢钠溶液碱化合并的水萃取物，然后用EtOAc(2×20mL)萃取。用盐水(20mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下浓缩，得到粗无色油状物(8mg)。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，97∶3至CH₂Cl₂，1M NH₃甲醇溶液，9∶1)纯化粗产物，得到标题化合物LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.45min，m/z260(91％，[M+H]⁺)。

实施例70：1-(3-氯-5-(4-二甲基氨基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E70

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(24mg，0.088mmol)、(4-二甲基氨基)苯硼酸(17mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D，反应30min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，随后通过制备hplc(CH₃CN，H₂O，梯度1∶9至9∶1)纯化，得到标题化合物，其为白色固体(4mg，13％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.54min，m/z 359(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₉H₂₄Cl₃N₄O应为359.1633，实测[M+H]⁺359.1633。

实施例71：1-(3-氯-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E71

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(24mg，0.088mmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(20mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D，反应30min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(8mg，29％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.20min，m/z 320(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₅H₁₉ClN₅O应为320.1273，实测[M+H]⁺320.1272。

实施例72：1-(5-氯-6′-(二甲基氨基)-3，3′-联吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E72

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(50mg，0.18mmol)、2-(N，N-二甲基氨基)吡啶-5-硼酸2HCl盐(55mg，0.23mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(11mg，5mol％)、乙腈(2mL)和0.5M碳酸钠(1.3mL，0.66mmol)进行通用方法E。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，EtOH，96∶4-82∶18，biotage 25+S)纯化粗产物，随后通过制备tlc(CH₂Cl₂，MeOH，9∶1)纯化，得到标题化合物，其为灰白色固体(6mg，9％)，LC-MS(ESI，4min)R_t 1.28min，m/z 360(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₇H₂₂N₅OCl应为359.1513，实测[M+H]⁺359.1511。

实施例73：N-(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-基)乙酰胺E73

应用3，4，5-三氯吡啶(50mg，0.27mmol)、4-乙酰氨基哌啶(43mg，0.30mmol)、三乙胺(76μL，0.54mmol)和NMP(1.5mL)进行通用方法C。通过硅胶快速柱色谱法(己烷，EtOAc，MeOH，1∶1∶0.05)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(7mg，9％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 2.25min；m/z(ESI)C₁₂H₁₆Cl₂N₃O应为288.0665，实测[M+H]⁺288.0664；HPLC R_t 5.98min，100％。

实施例74：1-(3-氯-5-(4-甲氧基苯基)吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲酰胺E74

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)吡咯烷-3-甲酰胺E21(23mg，0.088mmol)、4-甲氧基苯硼酸(13mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D，反应30min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到不纯的标题化合物，其为白色固体(15mg)。通过制备hplc(H₂O，MeCN，梯度90∶10至10∶90，历经30min)进一步纯化，得到标题化合物，其为白色固体，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.40min，m/z 332(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI，3.5min)C₁₇H₁₈ClN₃NaO₂应为354.0980，实测[M+Na]⁺354.0980。

实施例75：1-(5-氯-3，3′-联吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E75

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(24mg，0.088mmol)、吡啶-3-基硼酸(12mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D，反应30min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(7mg，25％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.06min，m/z317(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₆H₁₈ClN₄O应为317.1164，实测[M+H]⁺317.1161。

实施例76：1-(3-氯-5-(2-甲氧基嘧啶-5-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E76

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(75mg，0.27mmol)、2-甲氧基嘧啶-5-硼酸(53mg，0.34mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(16mg，5mol％)、乙腈(3mL)和0.5M碳酸钠(0.77mL，0.38mmol)进行通用方法E。应用硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，EtOH，96∶4-82∶18，biotage 25+S)纯化粗产物，得到作为灰白色固体的标题化合物(20mg，21％)，并回收为白色固体的1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(32mg，43％RSM)，LC-MS(ESI，4min)R_t 1.76min，m/z 348(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₆H₁₈N₅O₂Cl应为347.1149，实测[M+H]⁺347.1147。

实施例77：1-(3-氯-5-(3，4-二氟苯基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E77

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(24mg，0.088mmol)、3，4-二氟苯硼酸(17mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D，反应30min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到作为白色固体的不纯标题化合物(16mg)，随后通过制备hplc(CH₃CN，H₂O，梯度1∶9至9∶1)纯化，得到标题化合物，其为白色固体，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.91min，m/z 352(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₇H₁₆ClF₂N₃O应为352.1023，实测[M+H]⁺352.1017。

实施例78：1-(3-氯-5-(1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E78

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(24mg，0.088mmol)、1H-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(12mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、乙腈(1mL)和0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)进行通用方法D，反应30min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(18mg，67％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t1.06min，m/z 306(100％，[M+H]⁺⁾；m/z(ESI)C₁₄H₁₇ClN₅O应为306.1116，实测[M+H]⁺306.1114。

实施例79：1-(3-氯-5-(噻吩-2-基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E79

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(75mg，0.27mmol)、2-噻吩硼酸(44mg，0.34mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(16mg，0.014mmol)、乙腈(3mL)和0.5M碳酸钠(0.77mL，0.38mmol)进行通用方法E。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，EtOH，96∶4-80∶20，biotage 25+S)纯化粗产物，得到原料和产物的混合物(50mg，2∶5)，以及脱卤的单氯代原料(7mg，11％)。通过制备hplc(CH₃CN，H₂O，梯度1∶9至9∶1，15min)进一步纯化产物/原料混合物，得到作为透明无色油状物的标题化合物(9mg，10％)，并回收为白色固体的1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(30mg，40％)，LC-MS(ESI，4min)R_t 2.31min，m/z 322(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₅H₁₆N₃OSCl应为321.0703，实测[M+H]⁺321.0700。

实施例80：1-(3-溴-5-氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E80

向1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E36(100mg，0.35mmol)的DMF(7.00mL)溶液中加入N-氯琥珀酰亚胺(94mg，0.70mmol)。将反应物加热至80℃，并搅拌8小时，然后在EtOAc和水(各100ml)之间分配，用水(2x75ml)、盐水(20mL)洗涤分离的有机层，干燥(MgSO₄)，并在减压下浓缩，得到粗的透明浅黄色油状物(82mg)。通过在硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，EtOH，98∶2-84∶16，biotage 25+S)纯化粗产物，随后通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，EtOH，96∶4-82∶18，biotage 14+M)纯化，得到标题化合物和1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺副产物的混合物，其为白色固体(20mg)。通过制备hplc(MeOH，H₂O，9∶20，25min)进一步纯化该混合物，得到标题化合物，其为白色固体，LC-MS(ESI，4min)R_t2.46min，m/z 320(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₁H₁₃N₃OClBr应为316.9931，实测[M+H]⁺318.0003。

实施例81：1-(3-(4-三氟甲基苯基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E81

应用1-(3-溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E36(25mg，0.088mmol)，4-三氟甲基苯基硼酸(20mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)和乙腈(1mL)进行通用方法D，进行50min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(28mg，91％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t1.51min，m/z 350(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₈H₁₉F₃N₃O应为350.1475，实测[M+H]⁺350.1478。

实施例82和83：1-(3-溴-5-邻甲苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E82和1-(3，5-二邻甲苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E83

向1-(3，5-二溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E27(50mg，0.14mmol)、邻甲苯基硼酸(77mg，0.56mmol)和磷酸钾(0.20g，0.96mmol)的甲苯(4mL)溶液中加入四(三苯基膦)钯(0)(18mg，10mol％)。在微波反应器中在170℃加热该混合物45min，然后将其倒入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)中。用EtOAc(2×25mL)萃取混合物，并用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)，并在减压下移除溶剂。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，98∶2)纯化粗产物，得到作为白色固体的不纯标题化合物(23mg)。通过制备hplc进一步纯化，得到作为白色固体的两种标题化合物。

1-(3-溴-5-邻甲苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E82：(13mg，24％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t1.85min，m/z 376(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₂₅H₂₈N₃O应为374.0863，实测[M+H]⁺374.0860.

1-(3，5-二邻甲苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E83：(3.3mg，6％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t1.66min，m/z 386(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₈H₂₁BrN₃O应为386.2227，实测[M+H]⁺386.2225.

实施例84：1-(3-氯-5-(3，4，5-三甲氧基苯基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E84

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺23(24mg，0.088mmol)、3，4，5-三甲氧基苯基硼酸(22mg，0.11mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(5mg，5mol％)、0.5M碳酸钠(0.25mL，0.12mmol)和乙腈(1mL)进行通用方法D，反应30min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到不纯的标题化合物，其为无色油状物(17mg)。通过制备hplc进一步纯化，得到标题化合物，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.71min，m/z 406(100％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₂₀H₂₅ClN₃O₄应为406.1528，实测[M+H]⁺406.1526。

实施例85：1-(5-(4-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E85

应用1-(5-溴嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E29(11mg，0.039mmol)、4-甲氧基苯基硼酸(7mg，0.046mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(2.5mg，5mol％)、0.5M碳酸钠(0.11mL，0.054mmol)和乙腈(1mL)进行通用方法D，反应30min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(5mg，41％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t1.33min，m/z 312(100％，[M+H]⁺)。

实施例86：1-(3-氯-5-苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈E86

应用1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈E48(100mg，0.39mmol)、苯基硼酸(57mg，0.47mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(22mg，5mol％)、0.5M碳酸钠(1.1mL，0.55mmol)和乙腈(3.5mL)进行通用方法D，进行45min。通过制备hplc(H₂O，MeCN，90∶10-10∶90，30min)纯化粗产物，得到标题化合物(25mg，22％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t2.24min，m/z 298(100％，[M+H]⁺)。

实施例87：1-(3-氯-5-苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酸E87

将1-(3-氯-5-苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈E86(16mg，0.054mmol)溶液在6M盐酸(1mL)中在100℃加热2小时。在减压下浓缩反应物，并在SCX-2柱上(MeOH，随后是在MeOH中的0.5M NH₃)纯化。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到标题化合物(5mg，30％)，LC-MS(ESI，4min)R_t2.13min，m/z 317(100％，M+H]⁺)。

实施例88：1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酸E88

将1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈E48(25mg，0.097mmol)溶液在6M盐酸(2mL)中在100℃加热3小时。在减压下浓缩反应物，并在SCX-2柱上(MeOH，随后是在MeOH中的0.5M NH₃)纯化。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物(16mg)，得到标题化合物，LC-MS(ESI，4min)R_t2.83min，m/z 275(100％，M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₁H₁₂Cl₂N₂O₂应为275.0349，实测[M+H]⁺275.0349。

实施例89：2-(1-(3-氯-5-苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰氨基)乙基氨基甲酸苄基酯E89

应用2-(1-(3，5-二氯吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰氨基)乙基氨基甲酸苄基酯11(105mg，0.23mmol)、苯基硼酸(34mg，0.28mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(13mg，5mol％)、0.5M碳酸钠(0.65mL，0.33mmol)和乙腈(2.5mL)进行通用方法D，进行45min。通过制备tlc在硅胶上(CH₂Cl₂，MeOH，10∶1)纯化粗产物，得到不纯的标题化合物(32mg)。通过制备hplc进一步纯化，得到标题化合物，LC-MS(ESI，3.5min)R_t2.43min，m/z 494(100％，[M+H]⁺)。

实施例90：N-(2-氨基乙基)-1-(3-氨-5-苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E90

向0℃的2-(1-(3-氯-5-苯基吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰氨基)乙基氨基甲酸苄基酯E89(39mg，0.079mmol)的CH₂Cl₂(2mL)溶液中加入TMSI(34μL，0.24mmol)。历时3小时使反应升温至室温，然后在减压下浓缩，并在SCX-2柱上(MeOH，随后为在MeOH中的0.5M NH₃)纯化，得到标题化合物(23mg，81％)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t1.33min，m/z 359(40％，[M+H]⁺)；m/z(ESI)C₁₉H₂₄ClN₄O应为359.1623，实测[M+H]⁺359.1633。

实施例91：1-(3，5-双(4-甲氧基苯基)吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E91

应用1-(3，5-二溴吡啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺E27(50mg，0.14mmol)、4-甲氧基苯基硼酸(25mg，0.15mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(8mg，5mol％)、乙腈(1.4mL)和0.5M碳酸钠(0.27mL，0.16mmol)进行通用方法D，反应30min。通过硅胶快速柱色谱法(CH₂Cl₂，MeOH，98∶2)纯化粗产物，得到标题化合物，其为白色固体(39mg)，LC-MS(ESI，3.5min)R_t 1.68min，m/z418(100％，[M+H]⁺)。

实施例92：活性测试

应用基于荧光素酶报告细胞的测试法评估Wnt通路的抑制活性。在HEK293细胞中建立荧光素酶报告细胞系，其含有雌激素受体-DSH(ER-DSH)构建物和TCF-荧光素酶-IRES-GFP构建物。

通过添加雌激素(2μM)在ER-DSH HEK293细胞系中诱导TCF-依赖性转录，其导致在24小时测量的报告活性至少升高14倍，进而进行高通量测试。

然后应用初级和次级去卷积(deconvolution)测试法来评价化合物。首先，在用TCF-荧光素酶报告质粒单独或与ER-可诱导DSH质粒联合瞬时转染的HEK293细胞中测试化合物的抑制活性。应用雌二醇或BIO引起通路的诱导。应用TK-Renilla荧光素酶质粒作为共转染对照，以鉴定与一般转录相比对Wnt信号具有特异性的化合物。

本发明的具体化合物在上述荧光素酶测试法中具有小于10μM的IC50。优选的化合物具有小于1μM的IC50，并且最优选的化合物具有小于0.5μM的IC50。

本发明的具体化合物在上述荧光素酶报告测试法中的示例性活性值显示于下面的表A中：

表A

然后在类似的测试法中进一步测试化合物，其中在所述测试法中通过DN-LRP(Wnt受体的组件)、Ax-2(虫漆脂(axin)的显性负性形式)、DN-β-连环蛋白(β-连环蛋白的稳定形式)和VP16-TCF(不存在β-连环蛋白的情况下具活性的TCF转录因子)的组成型表达诱导通路。

还针对一小组人结肠直肠细胞系(HCT116、HT29和SW480)确定了化合物的生长抑制活性。

发现某些化合物具有针对HT29细胞系的小于100μM的GI₅₀，以及针对荧光素酶报告载体的小于100μM的IC₅₀。