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一种β-1,4-内切葡聚糖酶基因的克隆及重组酶的制备

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本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的β-1，4-内切葡聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。生物信息学分析表明该β-内切葡聚糖酶属于糖苷水解酶第12家族，命名为Aus Cel12A，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3，相应的基因命名为Aus cel12A。本发明还公开了Aus Cel12A工程菌的构建以及重组Aus Cel12A的高效表达和纯化的方法。制备的重组Aus Cel12A的最适作用温度和pH分别为60℃和5.0，在pH 4.0-7.0、60℃以下稳定，具有较大的工业化生产潜力和经济价值，也为其它β-内切葡聚糖酶的研究奠定了理论基础。

著录项

公开/公告号CN102127555A

专利类型发明专利
公开/公告日2011-07-20

原文格式PDF
申请/专利权人江南大学;
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申请/专利号CN201010581299.6
发明设计人邬敏辰;史红玲;郭静;韦敬土;刘高磊;
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申请日2010-12-10
分类号C12N15/56;C12N9/42;C12N15/10;C12N15/09;
代理机构
代理人
地址 214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号
入库时间 2023-12-18 02:51:52

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2014-07-30

发明专利申请公布后的视为撤回 IPC(主分类):C12N15/56 申请公布日:20110720 申请日:20101210

发明专利申请公布后的视为撤回
2011-07-20

公开

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1. 一种β-1,4-内切葡聚糖酶基因的克隆及重组酶的制备 [P] . 中国专利： CN102127555A . 2011-07-20
2. β-1,4-内切甘露聚糖酶(Tvi Man5A)基因的克隆及重组酶的制备 [P] . 中国专利： CN102392036A . 2012-03-28
3. Preparation of isolated protein, substantially pure or recombinant, isolated trt protein, substantially pure or recombinant isolated trt protein, substantially pure or recombinant, isolated trt protein or a variant thereof, or a fragment, polynucleotide, synthetic, substantially pure or recombinant, isolated nucleic acid, encoding a trt protein, expression vector, transfected cell, non-human animal, or its progeny, transgenic non-human animal, antibody or its binding fragment, antibody, specifically immunoreactive under immunologically reactive conditions, for a trt protein or its immunogenic fragment, processes of determining whether a compound or treatment is a modulator of a trt activity or expression, of determining whether a test compound is a modulator of a trt activity, of preparing recombinant telomerase, to detect a trt gene product in a sample, to detect the presence of d and at least one telomerase positive human cell in a biological sample comprising human cells, to diagnos [P] . BR9711844A . 2000-01-18

机译：分离的蛋白质，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白或其变体或片段，多核苷酸，合成的，基本上纯的或重组的分离的核酸的制备编码trt蛋白的酸，表达载体，转染的细胞，非人类动物或其后代，转基因非人类动物，抗体或其结合片段，抗体，在免疫反应条件下对trt蛋白或其免疫原具有特异性片段，确定化合物或处理是否是trt活性或表达的调节剂，确定测试化合物是否是trt活性的调节剂，制备重组端粒酶以检测样品中trt基因产物的过程，检测包含人细胞的生物样品中d和至少一种端粒酶阳性人细胞的存在，以进行诊断
4. Isolated nucleic acid molecule and antibody genetically engineered processes to increase the level of non-crystalline beta-1,4-glucan cellulose and starch and to reduce the level of beta-1,4- starch and cellulose non-crystalline glucan in an organ tissue or organism cell to produce an enzymatically active recombinant polypeptide and to alter the mechanical properties of a recombinant polypeptide cell wall transgenic plant and use of a isolated nucleic acid molecule [P] . BR9710696A . 1999-08-17

机译：分离的核酸分子和抗体经过基因工程处理，以增加器官组织中非结晶β-1,4-葡聚糖纤维素和淀粉的水平并降低β-1,4-淀粉和纤维素非结晶葡聚糖的水平或生物体细胞以产生酶促活性的重组多肽，并改变重组多肽细胞壁转基因植物的机械特性，并使用分离的核酸分子
5. The purified enzyme termoestavel, encoder interface gene of enzyme, plasmidio selected, bactereofogo, structure of the enzyme is stable.Process for amplifying at least a sequence specific nucleic acid, a process to detect the presence or absence of at least one sequence specific nucleic acid.Process for detecting the presence or absence of at least one change of the nucleotideos in sequence in one or more nucleic acids.Process for cloning vector for cloning one or more specific sequences of nucleic acid and nucleic acid sequence amplified [P] . BR8704332A . 1988-04-19

机译：纯化的酶termoestavel，酶的编码器接口基因，质粒选择的，细菌的fogofogo，酶的结构是稳定的。扩增至少一种序列特异性核酸的方法，检测至少一种序列特异性核酸的存在或不存在的方法检测一种或多种核酸中至少一个核苷酸序列变化的存在或不存在的方法克隆载体的方法，用于克隆一种或多种核酸的特定序列和扩增的核酸序列