法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2015-01-07
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):G01N1/30 授权公告日:20130220 终止日期:20131126 申请日:20101126
专利权的终止
2013-02-20
授权
授权
2012-08-01
著录事项变更 IPC(主分类):G01N1/30 变更前: 变更后: 申请日:20101126
著录事项变更
2011-06-15
实质审查的生效 IPC(主分类):G01N1/30 申请日:20101126
实质审查的生效
2011-04-27
公开
公开
技术领域
本发明涉及生物化学实验技术领域,尤其涉及一种垂直板电泳中凝胶点样顺序及凝胶顺序的双重标示方法。
背景技术
在利用垂直板凝胶电泳进行群体多态分析的实验中,需要对凝胶从玻璃板上剥离后染色处理,而染色之前需要对凝胶顺序和每块凝胶的点样方向/顺序进行标示,以免混乱。传统的凝胶顺序及凝胶的点样方向/顺序标示是每块凝胶用一套染色盘(需要经过“染色→显色→固定”程序,而其中染色、显色用的瓷盘是单独使用的,所以整个染色过程一套染色盘至少需要三个瓷盘),对染色瓷盘进行顺序编号,按凝胶先后顺序放入相应的瓷盘进行染色,该种方法对凝胶点样顺序的标示一般是在点样结束后在玻璃板上用记号笔以箭头来标识点样顺序,在剥离胶时在凝胶上角(点样开始的一方)切一个小三角形来标识点样顺序。由于群体多态分析的实验一般都是成百上千的样本量,加上不同的引物对,其整个工作量之大可想而知。传统的这种凝胶顺序及凝胶点样顺序的标示方法工作效率不高、器材利用率不高,而且由于凝胶一旦剥离玻璃板后直至染色工作完成前凝胶间容易相互混淆,凝胶间一旦混淆后,整个工作就报废了,得重新来过,这不但耽误实验进程,还浪费实验试剂。最严重的是混淆后如不知情,张冠李戴,严重影响实验结果的真实性。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足提供一种垂直板电泳中凝胶点样顺序及凝胶顺序的双重标示方法。
本发明技术方案如下:
一种垂直板电泳中凝胶点样顺序及凝胶顺序的双重标示方法,在凝胶的四角切出不同形状的缺口,使用切口的位置和切口的形状的组合,实现凝胶顺序和凝胶点样方向的双重标示。
所述方法,所述缺口包括三角形和四边形。
所述方法,若仅有一边有切口,或一边上有两个切口,则该边即为凝胶点样起始方向。
①本发明技术方案由于可以每次每个染色盘染2~4块胶,比现有的凝胶标示方法能提高实验工作效率2~4倍。染色盘和振荡仪的使用效率也随之大大提高。
②本发明技术方案克服现有凝胶标示方法在染胶中凝胶易相互混淆而导致实验结果的真实性大打折扣的缺点,本发明技术方案能确保凝胶在整个染色过程中相互不相混淆而得到真实可靠的实验结果。
附图说明
图1:凝胶标示图——上角切小三角形标示第一块凝胶;
图2:凝胶标示图——下角切小三角形标示第二块凝胶;
图3:凝胶标示图——上下角均切小三角形标示第三块凝胶;
图4:凝胶标示图——三角均切小三角形标示第四块凝胶;
图5:凝胶标示图——上角切方形标示第五块凝胶;
图6:凝胶标示图——下角切方形标示第六块凝胶;
图7:凝胶标示图——上下角均切方形标示第七块凝胶;
图8:凝胶标示图——三角均切切方形标示第八块凝胶。
具体实施方式
以下结合具体实施例,对本发明进行详细说明。
本实用新型的技术方案如下:在点完样后在玻璃板上用阿拉伯数字和箭头标示凝胶顺序及凝胶上的点样方向/顺序,在剥离凝胶时按玻璃板上的标示在凝胶的四角切去不同形状(小三角形和小方形),并按切口的不同位置和形状的组合,以实现凝胶顺序和凝胶点样方向/顺序的双重标示。其中以切口或上下均切口的一边为凝胶点样起始方向标示,不同切口位置和切口形状组合标示凝胶顺序。由于凝胶具有韧性,不易破碎,而且目的条带一般都至凝胶中下部就结束电泳,所以在凝胶四角切去不同的形状并不影响实验结果的读取。而且对凝胶这样进行标示处理后,每个盘可以放两块凝胶进行染色,大点的盘还可以放3~4块凝胶,每个批次可以染八块凝胶,这不但可以提高工作效率,也能提高器材的利用效率,而且不担心凝胶间相互混淆,也能保证结果的真实性。具体切口形状和位置组合标示图例如下。
参考图1至图8,图1:凝胶上角切小三角形标示第一块凝胶;此时只有一边有切口,则该边为点样起始方向;
图2:凝胶下角切小三角形标示第二块凝胶;此时只有一边有切口,则该边为点样起始方向;
图3:凝胶上下角均切小三角形标示第三块凝胶;此时该边有两个切口,则该边为点样起始方向;
图4:凝胶三角均切小三角形标示第四块凝胶;此时该边有两个切口,则该边为点样起始方向;
图5:凝胶上角切方形标示第五块凝胶;此时只有一边有切口,则该边为点样起始方向;
图6:凝胶下角切方形标示第六块凝胶;此时只有一边有切口,则该边为点样起始方向;
图7:凝胶上下角均切方形标示第七块凝胶;此时该边有两个切口,则该边为点样起始方向;
图8:凝胶三角均切切方形标示第八块凝胶;此时该边有两个切口,则该边为点样起始方向。
应当理解的是,对本领域普通技术人员来说,可以根据上述说明加以改进或变换,而所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
机译: 制备琼脂糖凝胶以通过电泳使凝胶板分离大分子的方法包括,例如,制备浓缩琼脂糖和缓冲液的混合物,并加热混合物以将琼脂糖颗粒溶解在缓冲液中
机译: 凝胶垂直板中电泳的装置
机译: 垂直凝胶板上电泳的设备和方法