胞质磷脂酶A2抑制剂

摘要

本发明涉及胞质磷脂酶A2抑制剂。具体而言，本发明提供各种磷脂酶(特别是胞质磷脂酶A2(cPLA2))活性的化学抑制剂，更特别包括胞质磷脂酶A2α酶(cPLA2α)抑制剂。在一些实施方案中，该抑制剂具有式I结构，在式I中，各基团如说明书中所定义。

说明书

本申请为2006年5月26日提交的、发明名称为“胞质磷脂酶A₂抑制剂”的PCT申请PCT/US2006/020847的分案申请，所述PCT申请进入中国国家阶段的日期为2007年11月27日，申请号为200680018646.6。

技术领域

本发明涉及各种磷脂酶(特别是胞质磷脂酶A₂(cPLA₂))活性的化学抑制剂，更特别包括胞质磷脂酶A₂α酶(cPLA₂α)抑制剂。

背景技术

白三烯和前列腺素是炎症的重要介质，分别促进不同途径的炎症响应的发展。白三烯将例如嗜中性粒细胞的炎症细胞募集于炎症处，促进这些细胞的外渗并刺激释放破坏组织的超氧化物和蛋白酶。白三烯还在遭受哮喘的过敏症中扮演病理生理的角色[见例如B.Samuelson等人，科学(Science)，237：1171-76(1987)]。前列腺素通过增加血流来并因此使白细胞渗透到炎症处，从而增强炎症。前列腺素还可以强化刺激所诱发的疼痛响应。

前列腺素和白三烯是不稳定的且不贮存于细胞中，但可在响应刺激时从花生四烯酸合成[W.L.Smith，生物化学杂志(Biochem.J.)，259：315-324(1989)]。在COX-1和COX-2酶的作用下，前列腺素可由花生四烯酸产生。花生四烯酸还是导致白三烯产生的不同酶途径的底物。

提供给这两种不同炎症途径的花生四烯酸，由磷脂酶A₂(以下称为PLA₂)从膜磷脂的sn-2位置释放。认为由PLA₂催化的反应为脂质介质生物合成过程(包括但不限于炎性前列腺素和白三烯的产生)的限速步骤。当PLA₂的磷脂底物为在sn-1位置具有醚连接的磷脂酰胆碱类时，产生的溶血磷脂为血小板活化因子(以下称为PAF)的直接前体，该物质为另一个炎症有效介质[S.I.Wasserman，医院实践(Hospital Practice)，15：49-58(1988)]。

大部分抗炎治疗集中在预防前列腺素或白三烯由这些不同途径产生，但并非全部如此。例如布洛芬、阿司匹林和吲哚美辛全都是NSAIDs，其通过抑制COX-1/COX-2，从而抑制前列腺素的产生，但对其他途径中由花生四烯酸炎性产生的白三烯并无直接影响。相反地，齐留通只抑制将花生四烯酸转换为白三烯的途径，而未直接影响前列腺素的产生。这些广泛使用的抗炎药无一影响PAF的产生。

因此已提议将直接抑制PLA₂活性作为治疗药物的有用机制，例如，干扰炎症响应[见，例如J.Chang等人，生化药理学(Biochem.Pharmacol.)，36：2429-2436(1987)]。

已经对具有分泌信号序列特征并最终从细胞分泌的PLA₂酶家族进行测序并确定结构。这些分泌型PLA₂具有约14kD分子量并含有7个活性必需的二硫键。在哺乳动物胰脏、蜜蜂毒液和各种蛇毒中发现大量的此类PLA₂[例如参阅上述Chang等人引用的参考文献13-15；以及E.A.Dennis，Drug Devel.Res.，10：205-220(1987)]。然而，胰酶被认为有消化功能，因此，其对炎性介质的产生(其产生必须被严格调节)应当不重要。

已鉴定了第一个人类非胰脏PLA₂的一级结构。该非胰脏PLA₂发现于血小板、关节液以及脾脏，而且也是分泌型酶。该酶为前述家族的成员之一[参阅J.J.Seilhamer等人，生物化学杂志(J.Biol.Chem.)，264：5335-5338(1989)；R.M.Kramer等人，生物化学杂志，264：5768-5775(1989)；和A.Kando等人，生物化学和生物物理学研究通讯(Biochem.Biophys.Res.Comm.)，163：42-48(1989)]。然而，该酶对于前列腺素、白三烯和PAF的合成是否很重要是让人怀疑的，因为非胰脏PLA₂为难以调节的细胞外蛋白质，且用于这些化合物生物合成途径的下一个酶是细胞内蛋白质。此外，有证据表明，PLA₂由蛋白激酶C和G蛋白调节[R.Burch和J.Axelrod，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，84：6374-6378(1989)]，这些蛋白质为必须作用于细胞内蛋白质的胞质蛋白质。非胰脏PLA₂作用于细胞溶胶应是不可能的，因为潜在的高还原性将减少二硫键并使酶失活。

已于鼠巨噬细胞系中鉴定鼠PLA₂，命名为RAW 264.7。已报道，抗还原条件的2μmols/min/mg比活性与约60kD分子有关。但该蛋白质未纯化为同质[参阅C.C.Leslie等人，生物化学与生物物理学学报(Biochem.Biophys.Acta.)，963：476-492(1988)]。将上面引用的文献在此引入作为参考，以提供与磷脂酶(特别是PLA₂)的功能有关的信息。

已经对胞质磷脂酶A₂α(以下称为″cPLA₂α″)进行了鉴定和克隆。参阅美国专利5322776和5354677，将其全部内容在此引入作为参考。这些专利中的酶为由天然来源纯化的或以纯化形式产生的细胞内PLA₂酶，其功能为响应炎症刺激在细胞内产生花生四烯酸。

花生四烯酸的生物活性代谢物：类花生酸，已被认为是血小板发出信号的重要调节剂。类花生酸途径的抑制剂(例如阿司匹林)可减少血栓素A₂(TXA₂，为不稳定且有效的血小板激动剂)的形成，导致血小板功能(血栓形成)降低，且经证实在临床上降低发病率及死亡率。

血小板在数种生物过程中扮演重要角色，包括血栓形成[参阅S.P.Jackson和S.M.Schoenwaelder，自然综述，药物发现(Nature Reviews，Drug Discovery)Vol.2，1-15，2003年10月；D.L.Bhatt和E.J.Topol，自然综述，药物发现Vol.2，15-28，2003年1月]。因此，近来已努力研究血小板受体和信号途径的特征。此外，已研发许多能用于血栓形成有效治疗法的研究的啮齿动物模型[参阅B.Nieswandt等人，血栓形成和止血(J.Thrombosis and Haemostasis)，3：1725-1736(2005)]。

胞质磷脂酶A₂的抑制剂公开在美国专利6797708中，将其全部内容在此引入作为参考。

现今已鉴定出数种磷脂酶，鉴定有特定磷脂酶作用的化学抑制剂是为所需的，此抑制剂应能用于治疗炎症疾病，特别是其中抑制前列腺素、白三烯和PAF的产生都是所需的。在本领域中，仍然需要鉴定此类抗炎物质，以用于治疗各种疾病状态。

发明内容

在某些实施方案中，本发明提供具有式I的化合物：

其中：

n₁为1或2；

n₂为1或2；

n₃为1或2；

n₅为0、1或2；

X²为键、O、-CH₂-或SO₂；

每一R₅独立为H或C_1-3烷基；

R₆为H或C_1-6烷基；

R₇选自OH、苄氧基、CH₃、CF₃、OCF₃、C_1-3烷氧基、卤素、COH、CO(C_1-3烷基)、CO(OC_1-3烷基)、喹啉-5-基、喹啉-8-基、3，5-二甲基异唑-4-基、噻吩-3-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、-CH₂-Q和由1至3个独立选自R₃₀的基团任选取代的苯基；

R₈选自H、OH、NO₂、CF₃、OCF₃、C_1-3烷氧基、卤素、CO(C_1-3烷基)、CO(OC_1-3烷基)、喹啉-5-基、喹啉-8-基、3，5-二甲基异唑-4-基、噻吩-3-基、-CH₂-Q和由1至3个独立选自R₃₀的基团取代的苯基；

Q为OH、二烷基氨基、

R₂₀选自H、C_1-3烷基及CO(C_1-3烷基)；且

R₃₀选自二烷基氨基、CN和OCF₃；

前提是：

a)当每一R₅为H、R₆为H、n₅为0且R₈为H时，R₇不可为氯；

b)当每一R₅为H、R₆为H、n₅为0、X²为O或-CH₂-且R₈为H时，R₇不可为CH₃；

c)当每一R₅为H且R₆为H时，R₇及R₈不可为氟；

d)当每一R₅为H、R₆为H且X²为O时，R₇及R₈不可为氯；

e)当每一R₅为H、R₆为H、X²为O且R₈为NO₂时，R₇不可为氟；以及

f)当每一R₅为H、R₆为H、X²为SO₂且R₈为H时，R₇不可为氟或氯。

在一些实施方案中，本发明提供具有式II的化合物：

其中：

X为键或O；

n₁为1或2；

n₂为1或2；

n₆为1或2；

R₅为H或CH₃；

R₆为H或C_1-6烷基；且

R₈选自H、OH、NO₂、CF₃、OCF₃、OCH₃、卤素、COCH₃、COOCH₃、二甲基氨基、二乙基氨基和CN。

本发明还提供在哺乳动物中治疗由前列腺素、白三烯或血小板活化因子所引起或强化的炎症的方法，该方法包括将药学上可接受量的本发明化合物或其药学上可接受的盐给药至对其需要的哺乳动物。

本发明另外提供在哺乳动物中治疗由前列腺素、白三烯或血小板活化因子所引起或强化的疼痛的方法，该方法包括将药学上可接受量的本发明化合物或其药学上可接受的盐给药至对其需要的哺乳动物。

本发明另外提供在哺乳动物中治疗或预防疾病或病症的方法，或在哺乳动物中预防这些疾病或病症的症状的发展的方法，其中所述疾病或病症选自哺乳动物中的哮喘、中风、动脉粥样硬化、多发性硬化症、帕金森病、关节炎病、风湿性疾病、中风导致的中枢神经系统损害、缺血导致的中枢神经系统损害、创伤导致的中枢神经系统损害、由前列腺素引起或强化的炎症、由白三烯引起或强化的炎症、疼痛和由血小板活化因子引起或强化的炎症，该方法包括将药学上可接受量的本发明化合物或其药学上可接受的盐给药至对其需要的哺乳动物。

本发明还提供在哺乳动物中治疗或预防静脉或动脉的血栓形成，或预防血栓形成的症状的发展，该方法包括将药学上可接受量的本发明化合物或其药学上可接受的盐给药至对其需要的哺乳动物。在一些实施方案中，血栓形成是粥样血栓形成。

本发明还提供药物组合物，该药物组合物包含本发明化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。

本发明还提供本文公开的化合物的药学上可接受的盐和前药。

附图说明

图1显示实施例14和25化合物在体外对人血中血小板聚集的抑制作用，由血小板功能分析仪(PFA-100)测定。

图2显示在急性血栓形成的大鼠模型中，实施例14和15化合物引起的血流改善和血栓形成减少。

图3显示在三氯化铁诱导的血栓形成的大鼠中，实施例14和25化合物引起血清血栓素B₂水平降低。

发明详述

在一些实施方案中，本发明提供具有式I的化合物：

其中：

n₁为1或2；

n₂为1或2；

n₃为1或2；

n₅为0、1或2；

X²为键、O、-CH₂-或SO₂；

每一R₅独立为H或C_1-3烷基；

R₆为H或C_1-6烷基；

R₇选自OH、苄氧基、CH₃、CF₃、OCF₃、C_1-3烷氧基、卤素、COH、CO(C_1-3烷基)、CO(OC_1-3烷基)、喹啉-5-基、喹啉-8-基、3，5-二甲基异唑-4-基、噻吩-3-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、-CH₂-Q和由1至3个独立选自R₃₀的基团任选取代的苯基；

R₈选自H、OH、NO₂、CF₃、OCF₃、C_1-3烷氧基、卤素、CO(C_1-3烷基)、CO(OC_1-3烷基)、喹啉-5-基、喹啉-8-基、3，5-二甲基异唑-4-基、噻吩-3-基、-CH₂-Q和由1至3个独立选自R₃₀的基团取代的苯基；

Q为OH、烷基氨基、

R₂₀选自H、C_1-3烷基和CO(C_1-3烷基)；且

R₃₀选自二烷基氨基、CN和OCF₃；

前提是：

a)当每一R₅为H、R₆为H、n₅为0且R₈为H时，R₇不可为氯；

b)当每一R₅为H、R₆为H、n₅为0、X²为O或-CH₂-且R₈为H时，R₇不可为CH₃；

c)当每一R₅为H并且R₆为H时，R₇及R₈不可为氟；

d)当每一R₅为H、R₆为H且X²为O时，R₇及R₈不可为氯；

e)当每一R₅为H、R₆为H、X²为O且R₈为NO₂时，R₇不可为氟；以及

f)当每一R₅为H、R₆为H、X²为SO₂且R₈为H时，R₇不可为氟或氯。

在一些实施方案中，X²为CH₂。在另外一些实施方案中，n₃为1。在另外一些实施方案中，n₁为1。在另外的实施方案中，n₂为1。

在一些实施方案中，n₃为1，n₁为1，且n₂为1。在一些此类实施方案中，R₆为H。在一些此类实施方案中，n₃为1，n₁为1，n₂为1，R₆为H，R₇选自CH₃、CF₃、OCF₃、卤素、COOCH₃、COH、CH₂OH、二乙基氨基甲基、喹啉-5-基、喹啉-8-基、3，5-二甲基异唑-4-基、噻吩-3-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、苯基、4-二甲基氨基-苯-1-基、2-三氟甲氧基-苯-1-基、2-氰基-苯-1-基、吗啉-1-基-甲基、哌嗪-1-基甲基、4-乙酰基-哌嗪-1-基甲基和4-甲基-哌嗪-1-基甲基；且R₈选自H、卤素、CF₃和NO₂。在一些此类实施方案中，R₅为H。在另外一些实施方案中，R₅为CH₃。

在式I化合物的一些实施方案中，X²为O。在一些此类实施方案中，n₃为1。在一些此类实施方案中，n₁为1。在一些此类实施方案中，n₂为1。在一些实施方案中，R₆为H。在一些此类实施方案中，n₃为1，n1为1，且n₂为1。在一些此类实施方案中，n₃为1，n1为1，n₂为1，R₆为H；R₇选自苄氧基、OH、卤素、CH₃和CF₃；且R₈选自H、卤素和NO₂。在一些此类实施方案中，R₅为H。在另外一些实施方案中，R₅为CH₃。在一些优选实施方案中，R₇为CF₃，且R₈为H。

在一些实施方案中，X²为SO₂。在一些此类实施方案中，n₅为2。在另外一些此类实施方案中，n₃为1。在另外一些此类实施方案中，n₁为1。在另外一些此类实施方案中，n₂为1。在一些实施方案中，R₆为H。在另外一些此类实施方案中，n₃为1，n₁为1，且n₂为1。在一些实施方案中，X²为SO₂，n₃为1，n₁为1，n₂为1，R₆为H，R₇为CF₃，且R₈为H。

在一些实施方案中，n₁为1，n₂为1或2，n₃为1，n₅为0；X²为CH₂，每一R₅和每一R₆为H；且R₇和R₈独立地选自H、F、CF₃、OCF₃、OH、喹啉-5-基和喹啉-8-基，前提是R₇和R₈不同时为H。

在一些实施方案中，本发明提供式II的化合物：

其中：

X为键或O；

n₁为1或2；

n₂为1或2；

n₆为1或2；

R₅为H或CH₃；

R₆为H或C_1-6烷基；且

R₈选自H、OH、NO₂、CF₃、OCF₃、OCH₃、卤素、COCH₃、COOCH₃、二甲基氨基、二乙基氨基和CN。

在一些实施方案中，n₁为1。在另外一些实施方案中，n₂为1。在另外一些实施方案中，n₆为2。在另外一些实施方案中，R₅为H。在另外一些实施方案中，R₆为H。在另外一些实施方案中，n₁为1，n₂为1，且n₆为2。

在一些优选实施方案中，R₅为H，R₆为H，n₁为1，n₂为1，且n₆为2。在一些此类实施方案中，R₈选自H、CF₃、OCF₃和卤素，优选H。

本发明还提供在哺乳动物在治疗由前列腺素、白三烯或血小板活化因子引起或强化的炎症的方法，该方法包括将药学上可接受量的本发明化合物或其药学上可接受的盐给药至对其需要的哺乳动物。

本发明另外提供在哺乳动物中治疗由前列腺素、白三烯或血小板活化因子引起或强化的疼痛的方法，该方法包括将药学上可接受量的本发明化合物或其药学上可接受的盐给药至对其需要的哺乳动物。

本发明还提供在哺乳动物中治疗或预防静脉或动脉血栓形成的方法，或预防血栓形成的症状的发展，该方法包括将药学上可接受量的本发明化合物或其药学上可接受的盐给药至对其需要的哺乳动物。在一些实施方案中，血栓形成是粥样血栓形成。

本发明还提供药物组合物，该药物组合物包含本发明化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受载体。

本发明还提供本文公开的化合物的药学上可接受的盐和前药。

当与药学上可接受载体混合时，本发明化合物可用于药物组合物。该组合物还可含有(除本发明的一种或多种化合物以及载体之外)稀释剂、填充剂、盐类、缓冲剂、稳定剂、助溶剂和本领域中公知的其它物质。术语“药学上可接受的”意指不会干扰活性成分的生物活性有效性的无毒物质。载体的特性将视给药途径而异。药物组合物可另外含有其它抗炎物质。这些其他成份和/或物质可包含于药物组合物中，以与本发明化合物产生协同作用，或使本发明化合物引起的副作用减至最低。

本发明的药物组合物可以脂质体或胶束(micelles)形式存在，其中，除其它药学上可接受的载体之外，本发明的化合物还可与两性物质组合，例如以在水溶液中的如胶束、不溶性单层、液晶或薄片状层的聚集形式存在的脂质。可用于脂质体制剂的适当脂质包括但不限于甘油一酯、甘油二酯、硫苷脂、溶血卵磷脂、磷脂、皂苷、胆汁酸等。本领域技术人员能够制备此类脂质体制剂，例如在美国专利4235871，4501728，4837028和4737323中所公开的，上述所有文献在此引入作为参考。

本文使用的术语“药学有效量”或“治疗有效量”意指药物组合物或方法中的每一活性成分的总量，其足以显示对于患者有意义的益处，例如生理响应或病症(例如炎性病症或疼痛)的治疗、痊愈，预防、抑制或改善，或增加此类病症的治疗、痊愈、预防、抑制或改善速率。当应用于个别活性成分时，单独给药，该术语意指仅有该成分。当应用于组合时，该术语是指造成治疗效果的组合量的活性成分，不论是组合、连续或同时给药。

文中所述的本发明的各种治疗方法或用途，包括将药学或治疗有效量的本发明之化合物，或其药学上可接受的盐形式给药至需要这些治疗或用途的哺乳动物。本发明的化合物可根据本发明的方法给药，单独或与其它疗法组合，例如采用其它抗炎物质、细胞因子、淋巴因子或其它造血因子的治疗。当与一种或多种其它抗炎物质、细胞因子、淋巴因子或其它造血因子共同给药时，本发明的化合物可与其它抗炎物质、细胞因子、淋巴因子、其它造血因子、血栓溶解或抗血栓因子同时或相继给药。若相继给药，主治医师将决定本发明化合物与其它抗炎物质、细胞因子、淋巴因子、其它造血因子、血栓溶解或抗血栓因子的适当给药顺序。

用于药物组合物或实施本发明方法的本发明化合物的给药，可以按各种常规方法进行，例如口服摄取，吸入，或皮肤、皮下或静脉内注射。

当将治疗有效量的本发明化合物口服给药时，本发明的化合物将为片剂、胶囊、粉剂、溶液剂或酏剂形式。当以片剂形式给药时，本发明的药物组合物可另外含有固体载体，例如明胶或佐剂。片剂、胶囊和粉剂含有约5％至95％的本发明化合物，优选约10％至90％的本发明化合物。当以液体形式给药时，可添加液体载体，例如水、石油、例如花生油的动物或植物来源的油、矿物油、磷脂、吐温(tweens)、甘油三酯类(包括中链甘油三酯)，大豆油或芝麻油或合成油类。液体形式的药物组合物可另外包含生理盐水、右旋糖或其它糖类溶液或乙二醇类(例如乙二醇、丙二醇或聚乙二醇)。当以液体形式给药时，按重量计算，药物组合物含有约0.5％至90％的本发明化合物，并优选约1％至50％的本发明化合物。

当将治疗有效量的本发明化合物以静脉内、皮肤或皮下注射给药时，本发明化合物可以是无热原、胃肠外可接受的水溶液的形式。此类具有适当pH、等渗性、稳定性等胃肠外可接受的蛋白质溶液的制备在本领域技术人员的掌握之中。静脉内、皮肤或皮下注射用的优选药物组合物，除本发明化合物之外，应含有等渗性溶媒，例如氯化钠注射液、林格氏注射液(Ringer′s Injection)、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化钠注射液、乳酸化林格氏注射液或其它本领域公知的溶媒。本发明的药物组合物还可含有稳定剂、防腐剂、缓冲剂、抗氧化剂或本领域技术人员公知的其它添加剂。

本发明药物组合物中的本发明化合物的量，取决于治疗的病症的性质和严重度以及患者之前已进行的治疗的性质。最后，主治医师将决定治疗每一患者个体所用本发明化合物的量。开始时，主治医师采用低剂量的本发明化合物给药，并观察患者的反应。可给予更大剂量的本发明化合物，直到患者获得最佳治疗效果，且从此时起不再进一步增加剂量。预计用于实施本发明方法的各种药物组合物，应含有约0.1μg至约100mg(优选约0.1mg至约50mg，更优选约1mg至约2mg)的本发明化合物/公斤体重。

使用本发明药物组合物的静脉内治疗的持续时间，将视所治疗疾病的严重程度和病症以及每一单个患者的潜在特异性响应而异。预计本发明化合物的每一应用持续时间为12至24小时的持续静脉内给药。最终主治医师将决定使用本发明药物组合物的适当的静脉内治疗持续时间。

基于本发明的口服制剂的脂质，已经通过混合50％PHOSAL.RTM.53MCT(American Lecithin Company)、5％聚山梨醇酯80(Polysorbate 80)、15％LABRASOL.RTM.Caprylocaproyl macrogol-8 glycerides(Gattefosse Corp.)、15％碳酸丙烯酯(Propylene Carbonate)以及15％本发明的活性cPLA2抑制性化合物制得，所列各百分比为按重量计算。

具有酸性基团的式(I)化合物的药学上可接受的盐可由有机和无机碱形成。与碱形成的适当的盐，例如金属盐，例如碱金属或碱土金属盐(例如钠、钾或镁盐)；或与氨或有机胺形成的盐，所述有机胺例如，吗啉、硫代吗啉、哌啶、吡咯烷、单-、二-或三-低级烷基胺，例如乙基-叔丁基-、二乙基-、二异丙基-、三乙基-、三丁基-或二甲基丙基胺，或单-、二-或三羟基低级烷基胺，例如单-、二-或三乙醇胺。

本发明还包括文中所述化合物的前药。文中使用的“前药”是指当将其给药至哺乳动物受试者时可释放本发明化合物的物质。可通过修饰存在于化合物的官能团制备前药，上述修饰可通过常规操作或在体内脱除，从而得到母体化合物。前药的示例包括文中所述的本发明化合物，其含有附加于该化合物的羟基、氨基、巯基或羧基的一个或多个分子部分，且当给药至哺乳动物受试者时，其在体内脱除分别形成游离的羟基、氨基、巯基或羧基。前药的示例包括但不限于本发明化合物中醇和胺官能团的乙酸酯/盐、甲酸酯/盐和苯甲酸酯/盐衍生物。前药的制备和使用在T.Higuchi和V.Stella，″前药作为新的递送体系(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)″Vol.14 of the A.C.S.Symposium Series，和药物设计中的生物可逆载体(Bioreversible Carriers in Drug Design)，ed.Edward B.Roche，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987中进行了讨论，将两者全部内容在此引入作为参考。

文中使用的术语“烷基”意指直链或支链的饱和烃基。烷基示例包括甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(例如正丙基和异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基)、戊基(例如正戊基、异戊基、新戊基)等。烷基可含有1至约20、1至约10、1至约8、1至约6、1至约4或1至约3个碳原子。在一些实施方案中，如下所述，烷基可最多被4个取代基取代。文中使用的术语“低级烷基”意指具有至多6个碳原子的烷基。

文中使用的“羟基”是指OH。

文中使用的“卤素”或“卤代”包括氟、氯、溴和碘。

文中使用的“氰基”是指CN。

文中使用的“烷氧基”是指-O-烷基基团。烷氧基示例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如正丙氧基和异丙氧基)、叔丁氧基等。烷氧基可含有1至约20、1至约10、1至约8、1至约6、1至约4或1至约3个碳原子。

文中使用的“苄氧基”是指-O-苄基基团。

在本说明书中，本发明化合物的取代基以组或范围给出。特别是本发明包括此类组和范围的成员的每个的亚组合。例如，术语“C_1-6烷基”特别指甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲基、异丁基等。

本发明的化合物可含有不对称原子(也称为手性中心)，且部分化合物可含有一个或多个不对称原子或中心，因而可能产生旋光异构体(对映异构体)和非对映异构体。本发明包括这些旋光异构体(对映异构体)和非对映异构体(几何异构体)；以及外消旋的和经拆分的对映纯的R和S立体异构体；以及R和S立体异构体的其它混合物和其药学上可接受的盐。可以通过本领域技术人员公知的标准方法，以纯形式获得旋光异构体，所述标准方法包括但不限于形成非对映立体异构的盐、动力学拆分和不对称合成。应当理解，本发明包括所有可能的区域异构体和其混合物，可以由本领域技术人员公知的标准分离方法，以纯形式获得它们，所述标准分离方法包括但不限于柱色谱法、薄层色谱法和高效液相色谱法。

本发明的新化合物可由各种有机合成领域的技术人员公知的方法制备。可以用下面所述方法以及合成有机化学领域公知的合成方法或本领域技术人员可理解的上述方法的变通方法，合成本发明化合物。

可根据以下流程图概述的方法，可以由市售的起始材料、文献公知的化合物或容易制备的中间体，采用标准合成方法和本领域的技术人员公知的方法便利地制备本发明化合物。有机分子制备和官能团转化和操作的标准合成方法以及步骤，可很容易从该领域的相关科学文献或标准教科书中获得。应当指出，给出典型或优选方法条件(即反应温度、时间、反应物的摩尔比例、溶剂、压力等)处，除非另有说明，否则其它方法条件也可使用。最佳反应条件可根据所用具体反应物或溶剂而异，但这些条件可由本领域技术人员经常规优化方法确定。有机合成领域的技术人员将了解，为了优化本发明化合物的生成，可改变所列出的合成步骤的性质和顺序。

文中所述的方法可根据本领域公知的任何适当方法进行监测。例如产物形成可由光谱方法监测，例如核磁共振光谱法(例如¹H或¹³C)、红外线光谱法、分光光度法(例如UV-可见光)或质谱法，或由色谱法监测，例如高效液色谱法(HPLC)或薄层色谱法。

化合物的制备可包括各种化学基团的保护和脱保护。本领域技术人员可很容易地确定保护和脱保护的需要以及适当保护基的选择。保护基化学，例如可见于Greene等人，有机合成中的保护基(Protective Groups in Organic Synthesis)，2d.Ed.，Wiley&Sons，1991，将其全部内容在此引入作为参考。

文中所述方法的反应可在适当的溶剂中进行，有机合成领域中的技术人员可容易地选择溶剂。在反应进行的温度(例如可以在溶剂的冷冻温度到溶剂的沸腾温度之间)下，适当的溶剂对起始原料(反应物)、中间体或产物基本无反应性。所给出的反应可在一种溶剂或一种以上溶剂的混合物中进行。根据特定反应步骤，可选择适当的针对特定的反应步骤的溶剂。

虽然不欲限制任何来源，但是例如WO 200044723；Li，J.P.；Newlander，K.A.；Yellin，T.O.合成(Synthesis)，1988，73-76；Gilchrist，T.L.；Roberts，T.G.J.Chem.Soc.Perkin.Trans 1 1983，1283-1292的出版物和文献是本领域技术人员公知的有用和公认有机合成参考文献。将上述文献全部内容在此引入作为参考。

使用有机合成领域的技术人员公知的常规技术制备本发明化合物。用于制备本发明化合物的起始原料是公知的，或者是由公知方法制备的或获自市售商品。

有机合成领域的技术人员将了解，为了使本发明化合物的形成达到最佳，可改变所列出的合成步骤的性质和顺序。

具体实施方式

实施例

本发明化合物的制备

下面对本发明代表性化合物的制备进行更加详细地说明。提供的下列实施例是为举例说明，而不以任何方式限制本发明。本领域技术人员将容易识别各种非关键参数，可改变和修改这些参数，以得到基本相同的结果。

质谱分析数据以质谱与电荷比例：m/z来描述；并且对于高分辨率质谱分析数据而言，对于中性式M，采用计算和实验实测质量[M+H]⁺进行报告。核磁共振数据以δ描述，δ表示从标准物四甲基硅烷向低场移动百万分之几(ppm)；同时给出溶剂、核和电场强度参数。自旋-自旋同核偶合常数以J值(单位为赫兹)描述；且多重性以下列形式描述：s，单重峰；d，双重峰；t，三重峰；q，四重峰；五重峰(quintet)；或br，宽峰。

化合物制备的一般合成流程图

本发明化合物可由方法A-E的方法制备，如下所示：

方法A

如上面方法A所示，在路易斯(Lewis)酸或布朗斯台德(Bronsted)酸(例如三氟化硼醚合物或三氟乙酸)存在下，用醛或相应的缩醛可将起始吲哚的C3位置(在吲哚部分3-位置的碳原子)烷基化。然后用在例如DMF、DMSO或THF的溶剂中的例如双(三甲基硅烷基)氨化钠、n-BuLi、氢化钠或氢化钾的强碱处理，随后曝露在适当烷基卤化物下，从而将吲哚的氮原子烷基化。所得产物可用溶在四氯化碳中的四溴化碳和催化量的过氧化苯甲酰处理，以使C2甲基发生二溴化作用。然后该二溴化物与丙酮、水中的碳酸银搅拌或倒进DMSO中并搅拌。这两种方法都产生醛，然后在回流下，其与硝基甲烷及醋酸铵进行硝基羟醛反应。在回流条件下，将所得乙烯硝基中间体用THF和浓HCl的混合物中的锌汞齐还原为胺。然后此胺可在双相条件(碳酸氢钠水溶液/二氯甲烷)，或在添加有有机阻胺碱的有机溶剂中，用需要的磺酰氯处理。最终的水解作用可在碱性条件(氢氧化钠溶于水和甲醇及THF)下在室温或升高的温度下完成。或者，可用溶于例如THF或DMF的溶剂的硫代甲醇钠(sodium thiomethoxide)在升高的温度(50℃-100℃)下处理，将其脱除。

方法B：Suzuki方法

如上面方法B所述，将卤化物与硼酸、碱(例如KF)、钯源(例如Pd(OAc)₂)配体(例如PPh₃)和适当的脱气溶剂(例如DMF、MeOH、水或其组合)置于容器内。然后以热源或微波反应器加热混合物。标准后处理得到经保护的(酯)产物，然后将其在碱中水解，得到游离酸产物。

方法C：还原胺化方法

如上面方法C所述，将含有甲酰基的化合物用胺、酸源(如果需要的话)以及例如NaBH(OAc)₃的适当还原剂处理。此反应物可以在室温下搅拌，或视需要加热。标准后处理，得到经保护的(酯)产物，然后将其在碱中水解，得到游离酸产物。

方法D

如上面方法D所述，将适当取代的卤代胺与三氟乙酸酐反应，得到中间体，可以在例如三乙基胺的碱、CuI和适当炔存在下，将该中间体用Pd(II)催化剂在加热条件下处理，产生所要的吲哚中间体。用例如叔丁基二苯基硅烷基氯和例如咪唑的碱将伯醇保护为硅醚。然后将经保护的吲哚用草酰氯，随后用甲醇处理，产生所需草酸酯，使用例如碳酸铯的适当碱，在乙腈和卤化物中回流，可以烷基化吲哚中的氮。然后可用例如硼烷的适当还原剂还原草酸酯。例如使用CBr₄和膦将所得伯醇转换为卤化物，然后可由如苯硫酚的亲核试剂置换。所得硫代醚可被包括过硫酸氢钾制剂(oxone)和TPAP/NMO的各种氧化剂氧化。所得砜可经氟化物源(例如TBAF、CsF或HF)作用脱保护。例如使用甲磺酰氯和有机碱可将所得醇转换为卤化物或甲磺酸酯，然后其可被迭氮化钠在DMF中置换。所得烷基迭氮化物可在三苯基膦和湿THF作用下还原。该胺可在双相Schotten-Baumann条件下(碳酸氢盐水溶液和二氯甲烷)或由二氯甲烷和有机碱(例如Hunigs碱)组成的无水条件下经磺酰氯作用，而被磺酰化。使用碱(例如NaOH、KOH或LiOH)以及包括醇性溶剂、水和四氢呋喃的溶剂混合物水解所得酯中间体。

方法E：

如上面方法E所述，将起始氨基酸用一锅法(one pot)酯化和N-烷基化(例如使用重氮试剂或三甲基硅烷基重氮试剂)。然后使用Schotten-Baumann条件或有机溶剂和有机碱，用磺酰氯磺酰化该N-烷基酯。最后，使用碱(例如NaOH)和适当溶剂系统(THF和醇)，将该N-烷基酯水解为所需产物。

根据以上方法A-E制备下列化合物。

实施例1

4-{2-[2-[2-({[2-(苄氧基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-5-氯-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]乙氧基}苯甲酸

步骤1：向4-羟基-苯甲酸甲酯(1.0当量)溶于DMF(0.83M)溶液中加入K₂CO₃(2.0当量)，随后加入2-溴-1，1-二乙氧基-乙烷，反应混合物在110℃下搅拌2天。TLC显示有一新点。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用1NNaOH，水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并移除溶剂，得到所需产物，产率84％。此物质不需进一步纯化就可用于下一步骤。

步骤2：向上面产物(1.0当量)和5-氯-2-甲基吲哚(1.0当量)的CH₂Cl₂(0.12M)溶液中加入三乙基硅烷(3.0当量)，随后加入三氟乙酸(3.0当量)。在室温搅拌过夜后，将水和三氟乙酸(1.0当量)加入到反应混合物，在室温下搅拌两天，用CH₂Cl₂稀释，用1N NaOH、水和盐水洗涤，并经硫酸钠干燥。用CH₂Cl₂和己烷研磨该物质得到C3烷基化的吲哚，产率为92％。

步骤3：在25℃下，向来自上面的吲哚(1.0当量)的DMF(0.36M)溶液中加入NaH(1.2当量，60％分散于油中)。在0℃至-5℃下将该棕色溶液搅拌1小时，然后加入溴代二苯基甲烷(1.1当量)。将反应混合物搅拌过夜，然后用水淬灭，用乙酸乙酯稀释，用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并经柱色谱纯化，产生72％的所需产物。

步骤4：向来自上面的N-烷基化吲哚(1.0当量)的CCl₄(0.2M)溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺(2.0当量)和催化量的过氧化苯甲酰。将该溶液加热回流3小时，冷却到25℃，过滤，并用CCl₄洗涤固体。将滤液浓缩为泡沫状物，在真空中干燥。将泡沫状物溶解于丙酮中，并添加Ag₂CO₃(1.1当量)，随后添加水，在室温下将反应混合物搅拌过夜，然后过滤并用丙酮洗涤。将滤液浓缩为残留物，向其中加水。用乙酸乙酯萃取该混合物，用盐水洗涤，并经硫酸钠干燥。色谱分析法纯化该残留物，得到所需产物，产率为85％。

步骤5：向上面的醛(1.0当量)的CH₃NO₂(0.2M)溶液中添加醋酸铵(4当量)并将所得混合物加热回流4小时。然后用EtOAc稀释反应混合物并用盐水洗涤。用EtOAc萃取水相。用盐水洗涤合并的有机萃取物，经硫酸钠干燥，并浓缩直到橙色结晶固体沉淀。将混合物冷藏过夜，并经过滤收集硝基烯烃(76％产率)。将溶液相蒸发并用柱色谱纯化残留物(梯度洗脱液100％甲苯→1％EtOAc-甲苯)，得到另外量的硝基烯烃(23％产率)。

步骤6：将锌粉(20当量)悬浮于5％HCl水溶液(8M Zn/5％HCl)。向此混合物中加入HgCl₂(0.28当量)。将混合物振摇10分钟，轻轻倒出水相并用新的5％HCl置换，并再将混合物振摇5分钟，移除水相。然后将所产生的锌汞齐添加到硝基烯烃(1.0当量)和浓HCl(80当量)在THF(0.04M硝基烯烃/THF)中的混合物。混合物在缓和回流下保持1小时。用TLC分析产物的形成。冷却混合物到室温，并通过硅藻土(Celite)过滤移除固体。将浓NH₄OH添加到溶液相，并在旋转蒸发器上浓缩混合物。将残留物溶解于CH₂Cl₂和浓NH₄OH。以CH₂Cl₂萃取水相，并用盐水洗涤有机相，经硫酸钠干燥，并浓缩。经柱色谱纯化，得到所需产物(65％产率)。

步骤7：将亚硫酸钠(4.2g)加入到1-苄氧基-2-溴甲基-苯(8.9g)、四丁基碘化铵(59mg)和水(150ml)的搅拌着的混合物中。将混合物回温至回流并过夜。当混合物冷却到0℃时，用6N HCl酸化。用乙酸乙酯萃取(100ml×6)(某些余留在水层)。合并有机相，经MgSO₄干燥。真空浓缩滤液。用乙酸乙酯研磨产物得到(2-苄氧基-苯基)-甲磺酸(678mg，8％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-D6)：δ3.82(s，2H)5.09(s，2H)6.86(t，J＝7.45Hz，1H)6.96(d，J＝8.08Hz，1H)7.14(t，J＝7.83Hz，1H)7.32(d，J＝7.33Hz，1H)7.38(t，J＝7.33Hz，2H)7.46(d，J＝9.09Hz，1H)7.52(d，J＝7.07Hz，2H)。

步骤8：将四氢呋喃(10ml)、(2-苄氧基-苯基)-甲磺酸(138mg)和N，N-二甲基甲酰胺(2滴)冷却到-78℃，缓慢加入草酰氯(315mg)。从-78℃至0℃将反应混合物搅拌3小时。经过滤净化反应混合物。以冰水和庚烷洗涤滤液，并经干燥，得到(2-苄氧基-苯基)-甲磺酰氯(114mg，77％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ5.06(s，2H)5.15(s，2H)7.04(m，2H)7.42(m，7H)。

步骤9：向4-{2-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]乙氧基}苯甲酸甲酯(1.0当量，步骤6)和饱和NaHCO₃(0.14M)的CH₂Cl₂(0.07M)中添加(2-苄氧基-苯基)-甲磺酰氯(1.0当量，步骤8)。16小时后将混合物倒入饱和碳酸氢钠并用CH₂Cl₂萃取。用盐水洗涤合并的有机相，经硫酸钠干燥，并经柱色谱纯化得到77％的所需产物。

步骤10：通过与在THF(0.07M)和足够MeOH中的1N NaOH(5当量)搅拌，将所得酯水解，以产生透明的溶液。用TLC(10％MeOH-CH₂Cl₂)监测起始原料的消失，从而监测反应。当反应完全时，浓缩混合物，用H₂O稀释，并用1M HCl酸化至pH 2-4。用EtOAc萃取水相，并用盐水洗涤有机相，经硫酸钠干燥，并浓缩得到标题酸，产率为97％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.86(d，J＝14.40Hz，2H)2.92-3.04(m，2H)3.13(t，J＝6.69Hz，2H)4.12-4.23(m，2H)4.28(s，2H)4.34-4.45(m，1H)4.90(s，2H)6.47(d，J＝8.84Hz，1H)6.73-6.93(m，6H)6.95-7.08(m，4H)7.16-7.36(m，13H)7.53(d，J＝1.77Hz，1H)7.92-8.04(m，2H)；HRMS计算值[C₄₆H₄₁ClN₂O₆.S+H^-]783.2301，实测值783.2292；纯度H2O/MeOH 97％，H2O/MeCN 95％。

实施例2

4-{2-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-羟基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]乙氧基}苯甲酸

步骤1：向4-{2-[2-[2-({[2-(苄氧基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-5-氯-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]乙氧基}苯甲酸(实施例1，步骤9，109mg，0.14mmol)中添加THF和MeOH。加入10％的Pd/C(11mg)。在室温和H₂(1atm)条件下，将混合物搅拌过夜，通过硅藻土过滤，浓缩，并用柱色谱层析(35％EtOAc/己烷)得到4-(2-{1-二苯甲基-5-氯-2-[2-(2-羟基-苯基甲磺酰基氨基)-乙基]-1H-吲哚-3-基}-乙氧基)-苯甲酸甲酯(74mg，76％)，为灰白色固体。

步骤2：根据实施例1步骤10，水解该酯中间体得到标题酸，产率为85％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.87-3.01(m，2H)3.00-3.11(m，2H)3.18(t，J＝6.57Hz，2H)4.17(s，2H)4.19-4.30(m，2H)4.52(t，J＝5.81Hz，1H)6.52(d，J＝8.84Hz，1H)6.75-6.90(m，6H)6.99(dd，J＝7.45，1.64Hz，1H)7.01-7.13(m，4H)7.13-7.22(m，1H)7.27-7.37(m，6H)7.53(d，J＝2.02Hz，1H)7.91-8.04(m，2H)；HRMS计算值[C₃₉H₃₅ClN₂O₆.S+H^-]695.1977，实测值695.1984。

实施例3

4-{2-[5-氯-2-(2-{[(2，6-二溴苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]乙氧基}苯甲酸

步骤1：向2，6-二溴甲苯(5.38g，21.53mmol)的苯(1.54M)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(4.21g，23.68mmol)和过氧化苯甲酰(0.52g，2.15mmol)。然后将混合物加热回流过夜。冷却混合物至室温，用H₂O稀释并用EtOAc萃取。用盐水洗涤合并的有机相，经MgSO₄干燥并浓缩得到7.65g苄基溴，为棕色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ4.83(s，2H)，7.01(t，J＝8.0Hz，1H)，7.55(d，J＝8.1Hz，2H)。

步骤2：向2，6-二溴苄基溴(1.0当量，步骤1)的DMF(1.30M)溶液中加入硫代乙酸钾(1.2当量)，并将该混合物在室温下搅拌3-4小时。用LC/MS监控起始原料消失，从而监测反应。用H₂O稀释混合物并用EtOAc萃取。用盐水洗涤合并的有机相，经MgSO₄干燥并浓缩，得到6.70g(89％)硫代乙酸苄酯，为棕色油状物。

步骤3：向硫代乙酸(1.0当量，6.70g，20.7mmol)的AcOH(0.19M)和H₂O(0.91M)溶液中加入醋酸钠(6.7当量)。然后将氯气剧烈地鼓泡通入反应混合物中，通至30-45分钟。然后浓缩混合物，用醚稀释，用H₂O和盐水洗涤，用MgSO₄干燥并浓缩，得到5.30g(74％)的所需2，6-二溴苯基-甲磺酰氯，为棕色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ5.55(s，2H)，7.17(t，J＝8.0Hz，1H)，7.67(d，J＝8.1Hz，2H)。

步骤4：根据实施例1步骤9的方法，将4-{2-[2-(2-氨基-乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]-乙氧基}-苯甲酸甲酯(实施例1，步骤6，126mg，0.23mmol)与2，6-二溴苯基-甲磺酰氯(步骤3)反应，以定量产率得到203mg白色固体状所需磺酰胺。

步骤5：根据实施例1步骤10的方法，水解磺酰胺酯(175mg，0.206mmol)得到146mg(85％)的标题产物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.87-3.03(m，2H)，3.06-3.14(m，2H)，3.22(t，J＝6.9Hz，2H)，4.23(t，J＝6.4Hz，2H)，4.53(t，J＝5.9Hz，1H)，4.72(s，2H)，6.51(d，J＝8.8Hz，1H)，6.82(dd，J＝9.0，2.1Hz，1H)，6.87(d，J＝8.8Hz，2H)，6.92(s，1H)，6.97(t，J＝8.0Hz，1H)，7.05-7.12(m，J＝6.2，2.9Hz，4H)，7.29-7.34(m，6H)，7.49(d，J＝8.1Hz，2H)，7.54(d，J＝2.0Hz，1H)，8.00(d，J＝8.8Hz，2H)。

实施例4

4-(2-{1-二苯甲基-5-氯-2-[2-甲基-6-硝基-苯基甲磺酰基氨基]-乙基-1-H-吲哚-3-基}-乙氧基)-苯甲酸

步骤1：向2-甲基-6-硝基苯基苯甲酸(3.02g，16.67mmol)的亚硫酰氯(0.56M)溶液中加入DMF(催化量)，并将混合物加热回流5.5小时。然后冷却混合物到室温并浓缩。将残留物溶于THF(30mL)，并用20分钟将其缓慢加到NaBH₄混在THF(30mL)中的预冷到0℃的浆状物中。在室温下将混合物搅拌2小时，然后添加H₂O随后4M HCl淬灭。用EtOAc萃取混合物。用饱和NaHCO₃和盐水洗涤合并的有机相，经MgSO₄干燥并浓缩，得到2.52g(90％)的苄基醇，为橙色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.55(s，3H)，4.70(s，2H)，7.35(t，J＝7.8Hz，1H)，7.48(d，J＝7.6Hz，1H)，7.70(d，J＝8.3Hz，1H)。

步骤2：在氩气气氛下，向冷却到-78℃的苄醇(2.52g，15.07mmol)的CH₂Cl₂(0.12M)溶液中缓慢加入BBr₃(1.0M的CH₂Cl₂溶液)(23mL，22.6mmol)。在室温下将混合物搅拌过夜，然后用H₂O(150mL)稀释。分离各层并用盐水洗涤有机相，经MgSO₄干燥并浓缩，得到2.97g(86％)2-甲基-6-硝基苄基溴，为棕色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.53(s，3H)，4.72(s，2H)，7.36(t，J＝7.8Hz，1H)，7.46(d，J＝7.6Hz，1H)，7.75(d，J＝8.1Hz，1H)。

步骤3：根据实施例3步骤2的方法，将2-甲基-6-硝基苄基溴(步骤2，1.5g，6.5mmol)与硫代乙酸钾反应得到1.44g硫代乙酸苄酯，为棕色油状物。

步骤4：根据实施例3步骤3的方法，氧化硫代乙酸苄酯(1.44g，6.39mmol)得到1.35g(84％)的(2-甲基-6-硝基苯基)甲磺酰氯，为橙色固体。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ2.62-2.65(m，3H)，5.68(s，2H)宽峰，7.54(t，J＝7.8Hz，1H)，7.58-7.60(m，1H)，7.91(d，J＝7.8Hz，1H)。

步骤5：根据实施例1步骤9的方法，将4-{2-[2-(2-氨基-乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]-乙氧基}-苯甲酸甲酯(实施例1，步骤6，255mg，0.47mmol)与得自步骤4的磺酰氯反应，以90％产率得到318mg磺酰胺，为黄色固体。

步骤6：根据实施例1步骤10，水解磺酰胺酯(101mg，0.13mmol)得到87mg(91％)标题产物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.48(s，3H)，2.87-2.99(m，2H)，3.03-3.10(m，2H)，3.22(t，J＝6.6Hz，2H)，4.23(t，J＝6.6Hz，2H)，4.33(t，J＝5.9Hz，1H)，4.77(s，2H)，6.51(d，J＝8.8Hz，1H)，6.82(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，6.88(d，J＝8.8Hz，2H)，6.91(s，1H)，7.04-7.12(m，4H)，7.29-7.35(m，7H)，7.42(d，J＝7.3Hz，1H)，7.54(d，J＝2.0Hz，1H)，7.66(d，J＝7.6Hz，1H)，7.99(d，J＝8.8Hz，2H)。

实施例5

4-(2-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(三氟甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}乙氧基)苯甲酸

步骤1：将2~-(三氟甲基)苄基溴(25g，0.14mol)、亚硫酸钠(19.1g，0.15mol)、四丁基碘化铵(0.224g，0.6mmol)和H₂O(930mL)的混合物加热回流2天。冷却混合物到室温，并从油状残留物倒出水相，在旋转蒸发器上浓缩至干，得到所需钠盐(22.2g，60％)，为白色固体，其不需进一步纯化即可使用。

步骤2：将(2-三氟甲基苯基)甲磺酸钠盐(22.2g，84mmol)悬浮于MeOH(950mL)中，并冷却到-20℃。在此温度下，将持续冷却的HCl气体鼓泡通过混合物，达5分钟。在室温下将所得白色悬浮液搅拌1.5小时，然后在冰浴中冷却。过滤所得悬浮液并使收集的固体风干过夜，得到(2-三氟甲基苯基)甲磺酸(20.3g，～100％)，为白色固体，其不需进一步纯化即可使用。

步骤3：于-20℃，向(2-三氟甲基苯基)甲磺酸(20.3g，84mmol)的THF(1.9L)和DMF(5.0mL)悬浮液中缓慢逐滴加入草酰氯(44.7mL，0.5mol)，历时1小时。浴温保持在0℃以下至4小时，在此时蒸发反应物至体积～250mL并用500mL乙酸乙酯稀释。在分液漏斗中用盐水洗涤该溶液，并经硫酸镁干燥。然后蒸发该溶液至棕色油状物。用500mL石油醚(30-50℃)溶解该油状物，并以加热枪加热直到油状物进入溶液中。然后将此溶液置入干冰丙酮浴中，以冷却形成白色结晶物质。经过滤收集该物质并干燥，得到19g(85％)(2-三氟甲基苯基)甲磺酰氯，为白色固体。

步骤4：如实施例1步骤9所描述，将4-{2-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]乙氧基}苯甲酸甲酯(实施例1，步骤9，0.15g，0.28mmol)与2-(三氟甲基苯基)甲磺酰氯(0.145g，0.50mmol)反应，以75％产率得到0.220g磺酰胺，为白色泡沫。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)2.73-2.88(m，2H)，2.96-3.09(m，2H)，3.16(t，J＝6.6Hz，2H)，3.88(s，3H)，4.19(t，J＝6.6Hz，2H)，4.23(t，J＝6.4Hz，1H)，4.34(s，2H)，6.51(d，J＝8.8Hz，1H)，6.77-6.84(m，3H)，6.86(s，1H)，6.98-7.12(m，4H)，7.27-7.35(m，6H)，7.36-7.47(m，2H)，7.53(d，J＝1.5Hz，1H)，7.59-7.69(m，2H)，7.95(d，J＝8.8Hz，2H)。

步骤5：根据实施例1步骤10的方法，水解磺酰胺酯(137mg，0.18mmol)得到86mg(64％)的标题产物，为白色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)3.04(s，4H)，3.18(t，J＝6.6Hz，2H)，4.23(t，J＝5.9Hz，2H)，4.42(s，2H)，6.48(d，J＝8.8Hz，1H)，6.81(dd，J＝9.0，2.1Hz，1H)，6.98(d，J＝9.1Hz，2H)，7.03-7.18(m，5H)，7.29-7.42(m，6H)，7.48-7.62(m，3H)，7.66(d，J＝2.0Hz，2H)，7.72(d，J＝7.8Hz，1H)，7.85(d，J＝8.8Hz，2H)，12.49(s，1H)；HRMS：计算值为C₄₀H₃₄ClF₃N₂O₅S+H+，747.19018；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，747.1886；HPLC纯度H₂O/CH₃CN：96.2％，H₂O/MeOH：95.4％。

实施例6

4-(2-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-氟-6-(三氟甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}乙氧基)苯甲酸

步骤1：使用实施例5步骤1所述的方法，用2-氟-6-(三氟甲基苯基)苄基溴(15g，61mmol)得到2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酸钠盐(15g，89％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)4.02(s，2H)，7.26-7.66(m，3H)。

步骤2：使用实施例5步骤2所述的方法，用2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酸钠盐(15g，53mmol)得到2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酸(15g)，为淡橙色油状物，其不需进一步纯化即可使用。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)4.12(s，2H)，7.39-7.73(m，3H)。

步骤3：使用实施例5步骤3所述的方法，用2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酸(15g，53mmol)得到11g粗制产物，从己烷经低温结晶纯化得到2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酰氯(9.0g，62％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)5.31(s，2H)，7.38-7.51(m，1H)，7.58-7.68(m，2H)。

步骤4：如实施例1步骤9所概述，将4-{2-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]乙氧基}苯甲酸甲酯(实施例1，步骤6，0.12g，0.22mmol)与2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酰氯(0.074g，0.27mmol)反应，得到0.164g磺酰胺，为白色泡沫状物，产率95％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃).2.83-3.03(m，2H)，3.07-3.17(m，2H)，3.21(t，J＝6.6Hz，2H)，3.88(s，3H)，4.22(t，J＝6.6Hz，2H)，4.31(t，J＝6.3Hz，1H)，4.43(s，2H)，6.52(d，J＝9.1Hz，1H)，6.76-6.89(m，3H)，6.92(s，1H)，7.07(dd，J＝6.1，4.3Hz，4H)，7.23(t，J＝8.6Hz，2H)，7.28-7.34(m，5H)，7.38-7.52(m，2H)，7.54(d，J＝1.8Hz，1H)，7.95(d，J＝9.1Hz，2H)。

步骤5：根据实施例1步骤10的方法，水解磺酰胺酯(136mg，0.17mmol)得到130mg(97％)的标题产物，为白色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)3.00-3.15(m，4H)，3.17(t，J＝6.4Hz，2H)，4.22(t，J＝6.6Hz，2H)，4.45(s，2H)，6.46(d，J＝8.8Hz，1H)，6.79(dd，J＝8.8，2.3Hz，1H)，6.97(d，J＝9.1Hz，2H)，7.03-7.13(m，5H)，7.16-7.41(m，6H)，7.48-7.70(m，4H)，7.74-7.90(m，3H)，12.56(s，1H)；HRMS：计算值为C₄₀H₃₃ClF₄N₂O₅S+H+，765.18076；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，765.1814；HPLC纯度H₂O/CH₃CN：96.6％，H₂O/MeOH：97.9％。

实施例7

4-{3-[5-氯-2-(2-{[(2，6-二溴苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：将4-碘苯甲酸甲酯(5.3g，20.2mmol)、烯丙醇(1.78g，30.3mmol)，NaHCO₃(4.24g，50.5mmol)、Pd(OAc)₂(0.14g，0.60mmol)、(n-Bu)₄NBr(6.55g，20.2mmol)和分子筛(4.1g)在无水DMF(69mL)中的混合物在室温下搅拌4天。将反应混合物通过硅藻土过滤，并将滤液倒在水上并用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，并在真空下浓缩。快速层析(硅胶，10-20％EtOAc-己烷)得到2.11g(85％基于回收的起始原料)的所需4-(3-氧代-丙基)-苯甲酸甲酯，为透明油状物。

步骤2：向5-氯-2-甲基吲哚(0.86g，5.2mmol)和4-(3-氧代-丙基)-苯甲酸甲酯(1.0g，5.2mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入TFA(1.78g，15.6mmol)，随后加入三乙基硅烷(1.81g，15.6mmol)。将反应混合物搅拌过夜，用饱和NaHCO₃溶液(50mL)淬灭，并用饱和NaHCO₃溶液、水、盐水洗涤有机层，然后干燥(Na₂SO₄)。减压下移除溶剂，并经由快速柱色谱以10-20％EtOAc/己烷洗脱纯化残留物，以94％产率产生所需产物(1.67g)。

步骤3：在N₂气氛下，向来自步骤2的产物(1.66g，4.86mmol)的DMF(20mL)溶液中，加入NaH(60％于矿物油，0.24g，5.83mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时，随后逐滴加入二苯甲基溴(1.8g，7.29mmol)的DMF(5mL)溶液。在室温下将此反应混合物搅拌过夜。加入水(500mL)，并用EtOAc萃取混合物，用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，并在减压下浓缩为棕色糖浆物，使用10％EtOAc/己烷为洗脱剂，经硅胶层析纯化，以59％产率分离出N-二苯甲基吲哚，为白色固体(1.47g)。

步骤4：来自上面的产物(1.46g，2.87mmol)溶解在CCl₄(14.5mL)中，随后加入NBS(1.02g，5.73mmol)和过氧化苯甲酰(2mg)。将反应混合物加热回流1小时(直到通过TLC分析，全部起始原料消失)。将该混合物冷却到室温，过滤并用CCl₄洗涤固体。蒸发滤液为棕色残留物，将其溶解在丙酮(40mL)和水(4mL)中。然后将Ag₂CO₃(1.75g，3.16mmol)加入到此溶液中，并在室温下搅拌过夜后，通过硅藻土过滤，减压发溶剂，并向残留物添加水。用EtOAc萃取，用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，并蒸发为糖浆状物，其经10％EtOAc/己烷洗脱纯化，以75％产率分离得到2-甲酰基吲哚(1.13g)。

步骤5：向来自上面的2-甲酰基吲哚(0.52g，1mmol)的CH₃NO₂(6.2mL)溶液中加入NH₄OAc(0.077g，1mmol)，将混合物加热回流1小时，然后添加NH₄OAc(0.077g，1mmol)，在回流下再持续加热1小时，再次添加NH₄OAc(0.077g，1mmol)并再持续加热1小时。使反应混合物冷却至室温并添加EtOAc(50mL)，随后添加水(100mL)。用EtOAc萃取水层，并用盐水洗涤合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)并蒸发为黄色泡沫状物，使用10％EtOAc/己烷为洗脱剂，将其进行层析纯化，以68％产率得到硝基烯烃，为黄色泡沫状物(0.38g)。

步骤6：在100mL烧杯中，通过加入HgCl₂(3.4g，7.2mmol)至Zn粉(34.7g，530.4mmol)和5％HCl(38mL)的混合物，来制备Zn(Hg)。将此混合物剧烈搅拌10分钟。轻轻倒出水相，添加38mL的5％HCl到Zn(Hg)，并将此混合物搅拌10分钟。轻轻倒出水相。将此Zn(Hg)固体加入到来自步骤5的乙烯基硝基化合物(15g，26.57mmol)的THF(660mL)和浓HCl(64.5mL)混合物中。在室温下将此混合物搅拌1小时，然后加热回流15分钟。冷却反应混合物到室温并通过硅藻土过滤。将NH₄OH水溶液(200mL)加入到滤液中，将所得混合物搅拌15分钟，并浓缩混合物以移除THF。用CH₂Cl₂萃取水层并用盐水洗涤合并的有机层，干燥(Na_2SO₄)并浓缩为棕色泡沫状物，用柱色谱纯化，开始以CHCl₃洗脱柱以除去非极性杂质，然后以2％MeOH/CHCl₃洗脱，以46％产率分离得到所需胺(6.1g)。

步骤7：如实施例1步骤9所概述，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(步骤6，128mg，0.24mmol)与2，6-二溴-苯基-甲磺酰氯(步骤3，实施例3)反应，以100％产率得到203mg磺酰胺，为褐色固体。

步骤8：根据实施例1步骤10的方法，水解磺酰胺酯(175mg，0.206mmol)得到133mg(77％)标题产物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.91-2.02(m，2H)，2.75(t，J＝8.1Hz，4H)，2.86-2.94(m，2H)，2.94-3.03(m，2H)，4.46-4.54(m，1H)，4.70(s，2H)，6.49(d，J＝9.1Hz，1H)，6.79(dd，J＝9.0，1.9Hz，1H)，6.87(s，1H)，6.96(t，J＝8.1Hz，1H)，7.04-7.11(m，J＝6.2，2.4Hz，4H)，7.25-7.34(m，8H)，7.40(d，J＝1.8Hz，1H)，7.48(d，J＝7.8Hz，2H)，8.00(d，J＝7.8Hz，2H)。

实施例8

4-{3-[5-氯-2-(2-{[(2，6-二氯苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：使用实施例3步骤1中的条件，将2，6-二氯苄基溴(3.32g，13.84mmol)与硫代乙酸钾反应得到2.92g(90％)硫代乙酸苄酯。

步骤2：使用实施例3步骤2中的方法，氧化硫代乙酸苄酯(2.90g，12.33mmol)得到1.7g(53％)磺酰氯，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ5.43(s，2H)，7.32-7.39(m，1H)，7.43-7.50(m，2H)。

步骤3：如实施例1步骤9所概述，使4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，149mg，0.28mmol)与2，6-二氯-苯基-甲磺酰氯反应，得到170mg磺酰胺，为黄色固体，产率80％。

步骤4：根据实施例1步骤10中的方法，水解磺酰胺酯(145mg，0.19mmol)，得到140mg(99％)标题产物，为褐色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.89-2.01(m，2H)，2.71-2.80(m，4H)，2.84-2.92(m，2H)，2.95-3.03(m，2H)，4.31(t，J＝6.2Hz，1H)，4.60(s，2H)，6.49(d，J＝9.1Hz，1H)，6.80(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，6.87(s，1H)，7.01-7.10(m，4H)，7.12-7.19(m，1H)，7.25-7.34(m，10H)，7.41(d，J＝2.0Hz，1H)，8.00(d，J＝8.1Hz，2H)。

实施例9

4-(3-{1-二苯甲基-5-氯-2-[2-(2-甲基-6-硝基-苯基甲磺酰基氨基)-乙基-1H-吲哚-3-基]-丙基}-苯甲酸

步骤1：如实施例1步骤9中所概述，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，255mg，0.47mmol)与2-甲基-6-硝基-苯基-甲磺酰氯(实施例4，步骤4)反应，得到180mg磺酰胺，为黄色固体，产率51％。

步骤2：根据实施例1步骤10中的方法，水解磺酰胺酯(60mg，0.080mmol)得到48mg(81％)标题产物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.89-2.01(m，2H)，2.49(s，3H)，2.75(q，J＝7.2Hz，4H)，2.82-2.89(m，2H)，2.90-2.98(m，2H)，4.10-4.18(m，2H)，4.76(s，2H)宽，6.48(d，J＝8.8Hz，1H)，6.79(dd，J＝8.8，2.3Hz，1H)，6.86(s，1H)，7.02-7.11(m，J＝6.6，2.5Hz，4H)，7.27-7.35(m，8H)，7.38-7.47(m，2H)，7.67(d，J＝7.8Hz，1H)，8.00(d，J＝8.3Hz，2H)。

实施例10

4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(三氟甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸

步骤1：向4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸(如美国专利6797708B2中所述制备，将其全部内容在此引入作为参考)(10.0g，19mmol)的CH₃CN(100mL)和MeOH(25mL)混悬液中加入(三甲基硅烷基)重氮甲烷(2.0M的己烷溶液，9.6mL，19mmol)。16小时后，过滤混合物并浓缩得到甲基酯(8.8g，大约86％)，为橙色泡沫状物，其不需纯化即可使用。

步骤2：如实施例1步骤9中所概述，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例1，步骤1，9.1g，17mmol)与(2-三氟甲基苯基)甲磺酰氯(实施例5，步骤3，4.8g，17mmol)反应，得到6.1g磺酰胺，为白色泡沫状物，产率47％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.88-2.00(m，2H)，2.64-2.77(m，6H)，2.83-2.95(m，2H)，3.90(s，3H)，4.05(t，J＝5.9Hz，1H)，4.33(s，2H)，6.49(d，J＝8.8Hz，1H)，6.70-6.88(m，2H)，7.04(dd，J＝6.4，2.7Hz，4H)，7.24(s，1H)，7.28-7.35(m，7H)，7.36-7.49(m，3H)，7.55-7.71(m，2H)，7.95(d，J＝8.1Hz，2H)。此外，得到N-甲基磺酰胺副产物(0.70g，5％)，为淡黄色泡沫状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.82-2.02(m，2H)，2.56(s，3H)，2.63-2.78(m，4H)，2.79-2.89(m，2H)，2.89-3.01(m，2H)，3.90(s，3H)，4.29(s，2H)，6.42(d，J＝8.8Hz，1H)，6.77(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，6.84(s，1H)，6.98-7.11(m，4H)，7.21-7.28(m，2H)，7.28-7.35(m，6H)，7.37-7.51(m，3H)，7.63(d，J＝7.1Hz，1H)，7.70(d，J＝8.6Hz，1H)，7.95(d，J＝8.3Hz，2H)。

步骤3：根据实施例1步骤10中的方法，水解甲基酯(2.6g，3.4mmol)得到2.25g(88％)标题产物，为黄色固体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ1.81-1.97(m，2H)，2.66-2.79(m，4H)，2.95(s，4H)，4.41(s，2H)，6.45(d，J＝8.8Hz，1H)，6.78(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，7.01-7.14(m，5H)，7.24-7.42(m，8H)，7.46(d，J＝2.0Hz，1H)，7.50-7.66(m，4H)，7.73(d，J＝7.8Hz，1H)，7.85(d，J＝8.3Hz，2H)，12.77(s，1H)；HRMS：计算值为C₄₁H₃₆ClF₃N₂O₄S+H+，745.21092；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，745.2132；分析计算值为C₄₁H₃₆ClF₃N₂O₄S：C，66.08；H，4.87；N3.76。实测值：C，66.07；H，4.57；N，3.67。

实施例11

4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-(甲基{[2-(三氟甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸

步骤1：根据实施例1步骤10中的方法，将分离自实施例10步骤2的作为副产物的N-甲基磺酰胺酯(0.66g，0.85mmol)水解，得到0.30g(46％)标题产物，为淡黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ1.76-1.93(m，2H)，2.63-2.81(m，9H)，3.31(s，2H)，4.46(s，2H)，6.46(d，J＝8.8Hz，1H)，6.78(dd，J＝8.8，2.3Hz，1H)，6.98-7.13(m，5H)，7.23-7.43(m，8H)，7.46(d，J＝2.0Hz，1H)，7.51-7.66(m，3H)，7.72(d，J＝7.8Hz，1H)，7.86(d，J＝8.3Hz，2H)，12.75(br s，1H)；HRMS：计算值为C₄₂H₃₈ClF₃N₂O₄S+H+，759.22657；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，759.2269；HPLC纯度H₂O/CH₃CN：96.2％，H₂O/MeOH：95.7％。

实施例12

4-{3-[2-[2-({[2，6-二(三氟甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-5-氯-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：2，6-双(三氟甲基)苯甲酰氟。使用W.Dmowski和K.Piasecka-Maciejewska，四面体快报(Tetrahedron Lett.)1998，54，6781-6792中所述的方法(将其全部内容在此引入作为参考)，将7.0g 2，6-双(三氟甲基)苯甲酸转换为酰氟(7.0g，100％)，为橙色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ8.17(t，J＝8.0Hz，1H)，8.40(d，J＝8.0Hz，2H)。

步骤2：2，6-双(三氟甲基苯基)苄醇。使用在W.Dmowski and K.Piasecka-Maciejewska，四面体快报1998，54，6781-6792中所述的方法(将其全部内容在此引入作为参考)，将7.0g的2，6-双(三氟甲基)苯甲酰氟转换为醇(6.6g，100％)为淡黄色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)4.95(s，2H)，7.59(t，J＝8.0Hz，1H)，7.94(d，J＝7.8Hz，2H)。

步骤3：2，6-双(三氟甲基苯基)苄基溴。在0℃下，向2，6-双(三氟甲基苯基)苄基醇(6.6g，28mmol)和1，3-双(二苯基膦基)丙烷(6.9g，17mmol)的CH₂Cl₂(50mL)溶液中缓慢加入四溴化碳(11g，33mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，然后经移液管加入到200mL Et₂O中。将混合物通过硅藻土过滤并浓缩。黄色油状物悬浮在2％EtOAc-己烷中，并透过SiO₂垫过滤，得到溴化物(7.2g，84％)，为无色油状物。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ4.78(s，2H)，7.59(t，J＝7.9Hz，1H)，7.92(d，J＝7.9Hz，2H)。

步骤4：2，6-双(三氟甲基苯基)甲磺酸钠盐。将双(三氟甲基苯基)苄基溴(7.2g，23mmol)、亚硫酸钠(3.1g，25mmol)、四丁基碘化铵(0.043g，0.1mmol)和H₂O(20mL)的混合物加热回流2天。冷却混合物到室温，并从油状残留物中轻轻倒出水相，并在旋转蒸发器上浓缩至干，得到2，6-双(三氟甲基苯基)甲磺酸钠盐氢溴化物(3.2g，32％)，为白色固体，其不需纯化即可使用。

步骤5：2，6-双(三氟甲基苯基)甲磺酸。将2，6-双(三氟甲基苯基)甲磺酸钠盐(0.19g，0.44mmol)悬浮于MeOH(5mL)中，在-20℃下冷却，同时向混合物鼓泡通入HCl气体达5分钟。在室温下将所得白色悬浮液搅拌1.5小时，通过硅藻土过滤，并浓缩得到2，6-双(三氟甲基苯基)甲磺酸(0.14g，100％)，为橙色固体，其可使用而不需进一步纯化。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)4.25(s，2H)，7.64(t，J＝8.5Hz，1H)，7.96(d，J＝7.8Hz，2H)。

步骤6：2，6-双(三氟甲基苯基)甲磺酰氯。在-20℃下，向2，6-双(三氟甲基苯基)甲磺酸(0.14g，0.44mmol)的THF(10mL)和DMF(0.05mL)悬浮液中，缓慢逐滴加入草酰氯(0.24mL，2.7mmol)。浴温在0℃以下维持4小时，然后通过硅藻土过滤反应混合物并用THF(10mL)洗涤，并浓缩至～5mL总体积。冷却混合物到-40℃，并缓慢加入H₂O(0.3mL)。用EtOAc(2×10mL)萃取混合物，用饱和NaHCO₃(20mL)、H₂O(20mL)和盐水(20mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)并浓缩得到99mg粗制产物，从己烷中经低温结晶纯化，得到2，6-双(三氟甲基苯基)甲磺酰氯(33mg，23％)，为白色粉末。浓缩母液得到另外产物(57mg，40％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)5.56(s，2H)，7.70(t，J＝8.0Hz，1H)，7.97(d，J＝8.0Hz，2H)。

步骤7：如实施例1步骤9中所概述，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例5，步骤6，148mg，0.27mmol)与2，6-双(三氟甲基苯基)甲磺酰氯(90mg，0.27mmol)反应，得到137mg磺酰胺，为淡黄色泡沫状物，产率60％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.83-2.03(m，2H)，2.68-2.78(m，4H)，2.79-2.91(m，2H)，2.92-3.03(m，2H)，3.89(s，3H)，4.21(t，J＝6.4Hz，1H)，4.66(s，2H)，6.51(d，J＝9.1Hz，1H)，6.81(dd，J＝8.7，2.1Hz，1H)，6.87(s，1H)，7.00-7.11(m，4H)，7.21-7.28(m，4H)，7.28-7.35(m，4H)，7.41(d，J＝1.5Hz，1H)，7.59(t，J＝7.7Hz，1H)，7.89(d，J＝7.8Hz，2H)，7.95(d，J＝8.1Hz，2H)。

步骤8：根据实施例1步骤10中的方法，水解磺酰胺酯(119mg，0.14mmol)得到97mg(83％)标题产物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)1.75-1.95(m，2H)，2.73(q，J＝7.5Hz，4H)，2.97(s，4H)，4.67(s，2H)，6.45(d，J＝8.8Hz，1H)，6.79(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，7.04(s，1H)，7.06-7.16(m，4H)，7.27-7.43(m，8H)，7.47(d，J＝2.0Hz，1H)，7.75(t，J＝5.2Hz，1H)，7.77-7.91(m，3H)，8.10(d，J＝8.1Hz，2H)，12.78(s，1H)；HRMS：计算值为C₄₂H₃₅ClF₆N₂O₄S+H+，813.19830；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，813.1965。HPLC纯度H₂O/CH₃CN：95.5％，H₂O/MeOH：96.8％。

实施例13

4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(甲氧基羰基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸

步骤1：向2-甲基苯甲酸甲酯(5.0g，0.033mmol)和N-溴琥珀酰亚胺(5.9g，0.033mmol)的CCl₄(50mL)混合物中加入过氧化苯甲酰(0.04g，0.00016mmol)。将混合物加热回流1.5小时，冷却到室温，通过硅藻土过滤，并浓缩得到2-(溴甲基)苯甲酸甲酯(7.2g，大约94％质量回收)，其被大约14％未反应的起始原料污染，并不需纯化即可使用。

步骤2：将来自步骤1的粗制溴化物(7.2g，0.031mmol)和硫脲(2.6g，35mmol)的MeOH(40mL)混合物加热回流4小时，冷却到室温，并浓缩得到2-({[氨基(亚胺基)甲基]硫代}甲基)苯甲酸甲酯氢溴化物(10g，大约100％)，其不需纯化即可使用。

步骤3：将来自步骤2的异硫脲盐(10g，0.031mmol)悬浮于H₂O(100mL)中，并冷却到0℃。将氯气鼓泡通入混合物中至30分钟。移除冰浴，将反应混合物倒入分液漏斗并用EtOAc(250mL)稀释。分离有机相并用饱和NaHCO₃(100mL)、H₂O(100mL)和盐水(100mL)洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩得到橙色固体(6.48g)。在-78℃下，将粗制产物从20％EtOAc-己烷中重结晶得到3.63g(47％)2-[(氯磺酰基)甲基]苯甲酸甲酯，为淡黄色结晶。

步骤4：向4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸(0.40g，0.76mmol)的CH₂Cl₂(5mL)混悬液中加入双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(0.30mL，0.29g，1.1mmol)。将混合物加热回流30分钟，然后冷却到35℃。加入吡啶(0.16mL，0.15g，2.0mmol)，随后加入来自步骤3的2-[(氯磺酰基)甲基]苯甲酸甲酯(0.29g，1.1mmol)的CH₂Cl₂(2mL)溶液。5小时后，冷却混合物到室温。加入浓HCl(0.17mL)的H₂O(5mL)溶液，并将混合物搅拌45分钟。分离水相并用CH₂Cl₂(50mL)萃取。用H₂O(25mL)和盐水(25mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO₄)并浓缩得到金黄色泡沫状物(0.40g)。经制备型HPLC纯化，得到标题化合物(70mg，12％)，为淡黄色泡沫。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)1.87-2.10(m，2H)，2.85(t，J＝6.6Hz，4H)，3.03(s，2H)，3.48(s，2H)，3.86(s，3H)，4.94(s，2H)，6.57(d，J＝8.8Hz，1H)，6.92(dd，J＝8.8，2.3Hz，1H)，7.14(s，1H)，7.17-7.29(m，4H)，7.43-7.57(m，10H)，7.57-7.69(m，3H)，7.90-7.97(m，1H)，8.00(d，J＝8.3Hz，2H)，12.93(s，1H)，HRMS：计算值为[C₄₂H₃₉ClN₂O₆S₁-H]^1-，733.2144；实测值(ESI-FTMS，[M-H]^1-)，733.2141；HPLC纯度H₂O/CH₃CN：95.3％，H₂O/MeOH：100％。

实施例14

4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-氟-6-(三氟甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸

步骤1：使用实施例5步骤1中所述的方法，用2-氟-6-(三氟甲基苯基)苄基溴(15g，61mmol)得到2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酸钠盐(15g，89％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)4.02(s，2H)，7.26-7.66(m，3H)。

步骤2：使用实施例5步骤2中所述的方法，用2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酸钠盐(15g，53mmol)得到2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酸(15g)，为淡橙色油状物，其不需进一步纯化即可使用。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)4.12(s，2H)，7.39-7.73(m，3H)。

步骤3：使用实施例5步骤3中所述的方法，用2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酸(15g，53mmol)得到11g粗制产物，从己烷中低温结晶纯化，得到2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酰氯(9.0g，62％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)5.31(s，2H)，7.38-7.51(m，1H)，7.58-7.68(m，2H)。

步骤4：如实施例1步骤9中所概述，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，0.12g，0.22mmol)与2-氟-6-(三氟甲基苯基)甲磺酰氯(0.074g，0.27mmol)反应，得到0.127g磺酰胺，为淡黄色泡沫状物，产率73％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)1.79-2.02(m，2H)，2.74(t，J＝8.0Hz，4H)，2.82-2.92(m，2H)，2.92-3.02(m，2H)，3.89(s，3H)，4.15(t，J＝5.8Hz，1H)，4.42(d，2H)，6.50(d，J＝8.6Hz，1H)，6.80(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，6.87(s，1H)，7.07(dd，J＝6.4，2.7Hz，4H)，7.19-7.28(m，5H)，7.29-7.35(m，5H)，7.39-7.56(m，2H)，7.95(d，J＝8.3Hz，2H)。

步骤4：根据实施例1步骤10中的方法，水解磺酰胺酯(115mg，0.15mmol)得到101mg(89％)标题产物，为淡黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)1.80-1.95(m，2H)，2.63-2.78(m，4H)，2.88-3.14(m，4H)，4.45(s，2H)，6.43(d，J＝8.8Hz，1H)，6.76(dd，J＝8.8，2.3Hz，1H)，6.96-7.15(m，5H)，7.20-7.41(m，8H)，7.45(d，J＝2.3Hz，1H)，7.50-7.59(m，1H)，7.59-7.66(m，2H)，7.71(t，J＝5.6Hz，1H)，7.83(d，J＝8.3Hz，2H)，12.73(s，1H)；HRMS：计算值为C₄₁H₃₅ClF₄N₂O₄S+H+，763.20149；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，763.1998；HPLC纯度H₂O/CH₃CN：95.4％，H₂O/MeOH：96.4％。

实施例15

4-[3-(5-氯-1-(二苯基甲基)-2-{2-[({2-[2-(三氟甲基)苯基]乙基}磺酰基)氨基]乙基}-1H-吲哚-3-基)丙基]苯甲酸

步骤1：如实施例12步骤3，将2-(三氟甲基)苯乙醇(5.0g，26mmol)用CBr₄处理，得到溴化物(6.6g，100％)，其不需纯化即可使用。

步骤2：将来自步骤1的溴化物(1.5g，5.9mmol)如实施例13步骤2用硫脲处理，得到异硫脲盐(2.2g)，为湿白色固体，其不需纯化即可使用。

步骤3：将来自步骤2的异硫脲盐(2.2g，～5.9mmol)混悬在H₂O中，并用氯气如实施例13步骤3进行处理，得到橙色油状物(1.15g)。向粗制产物添加己烷(75mL)，将混合物在60℃下加热4小时。轻轻倒出己烷可溶部分并冷却到-78℃，得到白色固体(0.13g，大约7％产率，2步骤)，其不需纯化即可使用。

步骤4：如实施例1步骤9中所概述，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，98mg，0.18mmol)与来自步骤3的(2-三氟甲基苯基)乙磺酰氯(75mg，0.28mmol)反应，得到70mg磺酰胺，为白色泡沫状物，产率50％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)1.88-2.03(m，2H)，2.70-2.83(m，4H)，2.88-3.07(m，6H)，3.07-3.23(m，2H)，3.90(s，3H)，4.07(t，J＝6.2Hz，1H)，6.51(d，J＝8.8Hz，1H)，6.72-6.86(m，1H)，6.90(s，1H)，7.07(d，J＝6.8Hz，4H)，7.17-7.32(m，9H)，7.35(t，J＝7.6Hz，1H)，7.41(d，J＝2.0Hz，1H)，7.48(t，J＝6.9Hz，1H)，7.63(d，J＝7.8Hz，1H)，7.95(d，J＝8.3Hz，2H)。

步骤5：根据实施例1步骤10中的方法，水解磺酰胺酯(70mg，0.09mmol)得到54mg(78％)标题产物，为白色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)1.82-2.22(m，2H)，2.68-2.90(m，4H)，2.99-3.24(m，8H)，6.50(d，J＝8.8Hz，1H)，6.83(dd，J＝8.8，2.3Hz，1H)，7.15(appar d，J＝6.8Hz，5H)，7.32-7.44(m，8H)，7.45-7.55(m，3H)，7.59(t，J＝5.7Hz，1H)，7.65(t，J＝7.3Hz，1H)，7.75(d，J＝7.8Hz，1H)，7.83-7.98(m，J＝8.3Hz，2H)，12.83(s，1H)；HRMS：计算值为C₄₂H₃₈ClF₃N₂O₄S+H+，759.22657；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，759.2277；HPLC纯度H₂O/CH₃CN：96.0％，H₂O/MeOH：98.0％。

实施例16

4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-甲酰基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：在0℃下，向α-溴-o-苄基氰(10g，51mmol)的CH₂Cl₂溶液中加入DIBAL-H(1M的己烷溶液，55mL，55mmol)，并在相同温度下将反应混合物搅拌3.5小时，然后在0℃下倒入冷的5％HBr溶液。将混合物搅拌15分钟，然后分离各层，并用CH₂Cl₂萃取水层，用NaHCO₃和水洗涤合并的有机层，经MgSO₄干燥并蒸发，得到深色液体(9.4g)。直接使将此物质用于下一步骤而不需进一步纯化。

步骤2：(2-甲酰基-苯基)-甲磺酸钠盐：使用实施例5步骤1中所述的方法，用2-溴甲基-苯甲醛(1.58g，7.94mol)得到(2-甲酰基-苯基)-甲磺酸钠盐(1.40g，80％)，灰白色固体。

步骤3：(2-甲酰基-苯基)-甲磺酸：使用实施例5步骤3中所述的方法，用(2-甲酰基-苯基)-甲磺酸钠盐(1.40g，6.30mmol)得到(2-甲酰基-苯基)-甲磺酸(418mg，33％)，淡黄色固体。

步骤4：(2-甲酰基-苯基)-甲磺酰氯：使用实施例5步骤4中所述的方法，用(2-甲酰基-苯基)甲磺酸(418mg，2.09mmol)得到(2-甲酰基-苯基)-甲磺酰氯(367mg，80％)。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ10.15(s，1H)，7.92(dd，1H)，7.74-7.61(m，3H)，5.67(s，2H)。

步骤5：如实施例1步骤9中所概述，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，63mg，0.12mmol)与(2-甲酰基-苯基)-甲磺酰氯(36mg，0.16mmol)反应，得到34mg(40％)磺酰胺，为黄色固体。

步骤6：根据实施例1步骤10中的方法，水解磺酰胺酯(28mg，0.039mmol)得到17mg(62％)标题产物，为白色固体。

实施例17

4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(吗啉-4-基甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸

步骤1：在0℃下，向4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-甲酰基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例16，步骤5，58mg，0.081mmol)的DCE(2mL)溶液中加入吗啉(0.0092mL，0.105mmol)及NaBH(OAc)₃(27mg，0.13mmol)，并使反应混合物回温至室温过夜。用饱和NaHCO₃淬灭反应，用EtOAc萃取，并经MgSO₄干燥。经硅胶色谱法纯化(35％至50％EtOAc/己烷)得到所需产物(41mg，64％)，为白色固体。

步骤2：根据实施例1步骤10中的方法，水解磺酰胺酯(18mg，0.039mmol)得到15mg(83％)标题产物，为白色固体。

实施例18

4-{3-[5-氯-2-{2-[({2-[(二乙基氨基)甲基]苄基}磺酰基)氨基]乙基}-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：如实施例17步骤1中所概述，将4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-甲酰基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例16，步骤5，58mg，0.081mmol)与HNEt₂(0.022mL，0.21mmol)和NaBH(OAc)₃(56mg，0.26mmol)的DCE(2mL)溶液反应，得到4-{3-[5-氯-2-{2-[({2-[(二乙基氨基)甲基]苄基}磺酰基)氨基]乙基}-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(26mg，41％)和副产物4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(羟基甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸甲酯(8.6mg，15％)，都为白色固体。

步骤2：根据实施例1步骤10中的方法，水解4-{3-[5-氯-2-{2-[({2-[(二乙基氨基)甲基]苄基}磺酰基)氨基]乙基}-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(20mg，0.026mmol)得到13mg(66％)标题产物，为白色固体。

实施例19

4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(羟基甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸

步骤1：根据实施例1步骤10中的方法，将来自实施例18步骤1的副产物4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(羟基甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸甲酯(8.4mg，0.0012mmol)水解，得到5.0mg(61％)标题产物，为白色固体。

实施例20

4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(哌嗪-1-基甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸和实施例21 4-{3-[2-{2-[({2-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基]苄基}磺酰基)氨基]乙基}-5-氯-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：如实施例17步骤1中所概述，将4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-甲酰基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例16，步骤5，45mg，0.063mmol)与1-乙酰基哌嗪(28mg，0.22mmol)和NaBH(OAc)₃(26mg，0.12mmol)的DCE(3mL)溶液反应，得到磺酰胺(39mg，75％)，为白色泡沫状物。

步骤2：根据实施例1步骤10中的方法，水解磺酰胺(37mg，0.045mmol)，用制备型HPLC分离之后，得到4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(哌嗪-1-基甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸甲酯(7.4mg，21％)和4-{3-[2-{2-[({2-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基]苄基}磺酰基)氨基]乙基}-5-氯-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(7.7mg，21％)，都为固体。

实施例22

4-[3-(5-氯-1-(二苯基甲基)-2-{2-[({2-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苄基}磺酰基)氨基]乙基}-1H-吲哚-3-基)丙基]苯甲酸

步骤1：如实施例17步骤1中所概述，将4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-甲酰基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例16，步骤5，44mg，0.061mmol)与1-甲基哌嗪(0.026mL，0.23mmol)和NaBH(OAc)₃(34mg，0.16mmol)的DCE(3mL)溶液反应，得到磺酰胺(41mg，84％)，为白色固体。

步骤2：根据实施例1步骤10中的方法，水解磺酰胺(39mg，0.026mmol)得到27mg(69％)标题产物，为白色固体。

实施例23

4-[3-(5-氯-1-(二苯基甲基)-2-{2-[({1-[2-(三氟甲基)苯基]乙基}磺酰基)氨基]乙基}-1H-吲哚-3-基)丙基]苯甲酸

步骤1：根据实施例3步骤2中概述的方法，向α-甲基-2-三氟甲基苄基溴(10.0g，39.5mmol)的DMF(50mL)溶液中加入硫代乙酸钾(8.1g，71.1mmol)。这样制得橙色油状物的硫代乙酸酯(10.49g，91％)。

步骤2：根据实施例3步骤3中的方法，将得自步骤1的硫代乙酸酯(10.49g，36.1mmol)和醋酸钠(21.5g，155.4mmol)溶解在乙酸(137mL)和水(31mL)的混合物中，并将氯气鼓泡通入。通过浓缩和从己烷低温重结晶，得到灰白色固体，稍后熔解为淡橙色油状物(4.9g，47％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.01(d，J＝6.8Hz，3H)5.32(q，J＝7.1Hz，1H)7.56(t，J＝6.7Hz，1H)7.67(t，J＝7.8Hz，1H)7.77(d，J＝7.8Hz，1H)7.91(d，J＝8.1Hz，1H)。

步骤3：根据实施例1步骤9中的方法，将4-{3-[2-(2-氨基-乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]-丙基}-苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，0.123g，0.23mmol)与1-(2-三氟甲基-苯基)-乙磺酰氯(0.79g，0.29mmol)反应，得到0.042g磺酰胺的外消旋混合物，产率24％。

步骤4：根据实施例1步骤10，水解磺酰胺酯(0.042g，0.054mmol)得到0.035g(85％)标题产物，为淡橙色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.68(d，J＝7.1Hz，3H)1.93(t，J＝5.4Hz，2H)2.02-2.08(m，1H)2.63-2.77(m，6H)2.86(t，J＝7.6Hz，2H)6.47(d，J＝8.8Hz，1H)7.01-7.07(m，4H)7.24-7.40(m，12H)7.44(t，J＝7.5Hz，1H)7.60(d，J＝7.6Hz，1H)7.85(d，J＝8.1Hz，1H)8.00(d，J＝8.1Hz，2H)。

实施例24

4-{3-[2-(2-{[(2-溴苄基)磺酰基]氨基}乙基)-5-氯-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：根据实施例1步骤9中的方法，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，1.51g，2.81mmol)与2-溴-苯基-甲磺酰氯反应，得到1.06g磺酰胺，为白色固体，产率49％。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解磺酰胺酯(90mg，0.117mmol)得到81mg(91％)标题产物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.89-2.02(m，2H)，2.68-2.78(m，4H)，2.78-2.87(m，2H)，2.89-2.97(m，2H)，4.21(t，J＝5.1Hz，1H)，4.37(s，2H)，6.48(d，J＝8.8Hz，1H)，6.79(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，6.84(s，1H)，7.00-7.08(m，4H)，7.09-7.17(m，1H)，7.17-7.24(m，1H)，7.25-7.34(m，8H)，7.36-7.45(m，2H)，7.49(dd，J＝8.1，1.3Hz，1H)，8.01(d，J＝8.3Hz，2H)。HRMS：计算值为C₄₀H₃₆BrClN₂O₄S+H+，755.13404；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，755.1341。

实施例25

4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(三氟甲氧基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸

步骤1：根据实施例1步骤9中的方法，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，164mg，0.305mmol)与2-三氟甲氧基-苯基-甲磺酰氯反应，得到109mg磺酰胺，为白色固体，产率46％。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解磺酰胺酯(83mg，0.107mmol)得到80mg(98％)标题产物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.86-2.03(m，2H)，2.74(q，J＝7.6Hz，4H)，2.76-2.86(m，2H)，2.90-3.00(m，2H)，4.12(t，J＝6.2Hz，1H)，4.19(s，1H)，6.49(d，J＝8.8Hz，1H)，6.80(dd，J＝8.8，2.3Hz，1H)，6.85(s，1H)，7.00-7.11(m，4H)，7.16-7.23(m，2H)，7.24-7.28(m，2H)，7.28-7.37(m，8H)，7.39-7.44(m，2H)，8.00(d，2H)。HRMS：计算值为C₄₁H₃₆ClF₃N₂O₅S+H+，761.20583；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，761.2057。

实施例26

4-{3-[5-氯-2-(2-{[(3-氯-6-氟-2-甲基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：2，6-二氟-N-(2-羟基-1，1-二甲基-乙基)-苯甲酰胺。在氮气气氛下，向0℃的2-氨基-2-甲基丙醇(10.1g，113.3mmol)的CH₂Cl₂(75mL)溶液中逐滴加入2，6-二氟苯甲酰氯(10.0g，56.6mmol)的CH₂Cl₂(50mL)溶液。然后将反应混合物回温至室温并搅拌过夜。用H₂O稀释反应混合物，并用CH₂Cl₂萃取水相，干燥(MgSO₄)并浓缩。经己烷研磨纯化，得到12.05g(93％)酰胺，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.41(s，6H)，3.66-3.75(m，2H)，3.77-3.87(m，1H)，5.94(s，1H)，6.90-6.99(m，2H)，7.31-7.41(m，1H)。

步骤2：2-(2，6-二氟苯基)-4，4-二甲基-4，5-二氢-唑。向0℃的得自步骤1的酰胺(11.9g，51.9mmol)的CH₂Cl₂(50mL)溶液中，加入亚硫酰氯(6.4mL，88.3mmol)。使反应混合物回温至室温。4小时后，浓缩反应混合物并用Et₂O研磨。将残留物溶解在H₂O中，用6N NaOH碱化并用EtOAc萃取。用盐水洗涤合并的有机相，干燥(MgSO₄)并浓缩，得到9.42g(86％)的二氢唑，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.42(s，6H)，4.13(s，2H)，6.90-7.02(m，2H)，7.32-7.44(m，1H)。

步骤3：2-(2-氟-6-甲基-苯基)-4，4-二甲基-4，5-二氢-唑。在氩气气氛下，向0℃的来自步骤2的二氢唑(9.18g，43.5mmol)的THF(140mL)溶液中，逐滴加入甲基氯化镁(3.0M的THF溶液，43.5mL，130mmol)。2小时后，移除冰浴，并在室温下将混合物搅拌过夜。用NH₄Cl饱和水溶液淬灭反应混合物并用EtOAc萃取。用盐水洗涤合并的有机相，干燥(MgSO₄)并浓缩，得到8.64g(96％)二氢唑，为透明油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.42(s，6H)，2.40(s，3H)，4.11(s，2H)，6.92(t，J＝9.0Hz，1H)，6.99(d，J＝7.6Hz，1H)，7.21-7.30(m，1H)。

步骤4：2-氟-6-甲基-苯甲酸。向得自步骤3的二氢唑(8.43g，40.7mmol)的CH₃CN(70mL)溶液中，加入碘甲烷(9.2mL，146mmol)，并将混合物加热回流6小时。然后冷却反应混合物至室温并搅拌过夜。浓缩反应混合物并用Et₂O研磨残留物。用等量的20％NaOH和甲醇溶解残留物，并加热回流6小时。冷却反应混合物到室温并浓缩除去有机溶剂。用EtOAc将水相洗涤数次并酸化至pH 1。用EtOAc萃取水相。用盐水洗涤合并的有机相，干燥(MgSO₄)并浓缩，得到3.67g(58％)苯甲酸，为白色固体。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ2.52(s，3H)6.99(t，J＝9.09Hz，1H)7.05(d，J＝7.83Hz，1H)7.31-7.41(m，1H)。

步骤5：向得自步骤4的酸(3.60g，23.4mmol)的亚硫酰氯(40mL)溶液中加入DMF(0.42mL)，并将混合物加热回流5.5小时。冷却混合物到室温并浓缩。将残留物溶于THF(40mL)中，并用20分钟将其加入到0℃的NaBH₄(3.53g，93.4mmol)的THF(40mL)浆状物中。在室温下将混合物搅拌2小时，然后添加H₂O和4M HCl淬灭，并用EtOAc萃取。用饱和NaHCO₃和盐水洗涤合并的有机相，干燥(MgSO₄)并浓缩，得到2.67g(～75％)苄基醇，淡黄色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.42(s，3H)，4.72(s，2H)，6.88(t，J＝9.0Hz，1H)，6.96(d，J＝7.6Hz，1H)，7.07-7.20(m，1H)。

步骤6：向得自步骤5的苄基醇(2.65g，18.9mmol)的CH₂Cl₂(15mL)溶液中加入1，3-双(二苯基膦基)丙烷(4.7g，11mmol)。冷却混合物到0℃，并缓慢加入CBr₄(7.4g，22mmol)。在室温下将混合物搅拌过夜。用CH₂Cl₂(50mL)稀释混合物并倒入Et₂O(75mL)中。过滤混合物并浓缩溶液相。所得产物再次溶解于CH₂Cl₂(75mL)并倒入Et₂O(100mL)中。过滤并浓缩得到3.27g(85％)溴化物，为橙色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.42(s，3H)，4.56(d，J＝1.5Hz，2H)，6.91(t，J＝9.1Hz，1H)，6.97(d，J＝7.6Hz，1H)，7.08-7.24(m，1H)。

步骤7：使用实施例3步骤2中的方法，将得自步骤6的苄基溴(3.27g，16.1mmol)与硫代乙酸钾反应，得到3.17g(98％)硫代乙酸苄酯，为棕色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.35(s，6H)，4.22(d，J＝1.5Hz，2H)，6.88(t，J＝9.0Hz，1H)，6.95(d，J＝7.6Hz，1H)，7.06-7.21(m，1H)。

步骤8：使用实施例3步骤3中的方法，氧化硫代乙酸苄酯(3.17g，16.0mmol)得到3.30g(80％)的(3-氯-6-氟-2-甲基-苯基)-甲磺酰氯，为棕褐色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.52(s，3H)，5.10(d，J＝1.3Hz，2H)，7.02(t，J＝9.0Hz，1H)，7.48(dd，J＝9.1，5.3Hz，1H)。

步骤9：根据实施例1步骤9中的方法，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，163mg，0.303mmol)与得自步骤8中的(3-氯-6-氟-2-甲基-苯基)-甲磺酰氯反应，得到102mg磺酰胺，为白色固体，产率44％。

步骤10：如实施例1步骤10中所述，水解磺酰胺酯(74mg，0.097mmol)得到65mg(90％)标题产物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.89-2.05(m，2H)，2.41(s，3H)，2.75(q，J＝7.6Hz，4H)，2.83-2.93(m，2H)，2.92-3.02(m，2H)，4.21-4.31(m，3H)，6.49(d，J＝8.8Hz，1H)，6.72-6.83(m，2H)，6.87(s，1H)，7.01-7.13(m，4H)，7.24-7.35(m，9H)，7.41(d，J＝2.0Hz，1H)，8.00(d，J＝8.1Hz，2H)。HRMS：计算值为C₄₁H₃₇Cl₂FN₂O₄S+H+，743.19079；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，743.1907。

实施例27

4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-硝基-6-(三氟甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸

步骤1：2-溴甲基-1-硝基-3-三氟甲基-苯。向2-甲基-1-硝基-3-三氟甲基-苯(5.0g，24.4mmol)的CCl₄(300mL)溶液中，加入N-溴代琥珀酰亚胺(4.35g，24.4mmol)和过氧化苯甲酰(0.11g，0.45mmol)。将混合物加热至回流并光照(300W)20小时。冷却混合物到室温，过滤并浓缩。经柱色谱纯化(EtOAc-己烷)，得到3.03g(44％)苄基溴，为黄色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ4.93(s，2H)，7.63(t，J＝8.1Hz，1H)，7.94(d，J＝7.8Hz，1H)，8.06(d，J＝8.1Hz，1H)。

步骤2：使用实施例3步骤2的方法，将得自步骤1的苄基溴(3.02g，10.6mmol)与硫代乙酸钾反应，得到2.71g(91％)的硫代乙酸苄酯，为棕色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ2.34(s，3H)，4.55(s，2H)，7.58(t，J＝7.7Hz，1H)，7.93(d，J＝7.8Hz，1H)，7.98(d，J＝8.1Hz，1H)。

步骤3：(2-硝基-6-三氟甲基苯基)甲磺酰氯。使用实施例3步骤3的方法，氧化硫代乙酸苄酯(2.71g，9.70mmol)得到2.42g(82％)标题产物，为棕色油状物。¹H NMR(400MHz，CDCl³)δ5.82(s，2H)宽，7.84(t，J＝8.1Hz，1H)，8.11(d，J＝7.8Hz，1H)，8.27(d，J＝8.1Hz，1H)。

步骤4：根据实施例1步骤9中的方法，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，164mg，0.305mmol)与得自步骤3的(2-硝基-6-三氟甲基苯基)甲磺酰氯反应，得到119mg磺酰胺，为黄色固体，产率49％。

步骤5：如实施例1步骤10中所述，水解磺酰胺酯(94mg，0.117mmol)得到90mg(92％)标题产物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.90-2.04(m，2H)，2.76(q，J＝7.5Hz，4H)，2.80-2.90(m，2H)，2.93-3.01(m，2H)，4.24(t，J＝6.2Hz，1H)，4.87(s，2H)宽，6.51(d，J＝8.8Hz，1H)，6.81(dd，J＝9.0，2.1Hz，1H)，6.86(s，1H)，7.08(dd，J＝6.8，2.5Hz，4H)，7.23-7.36(m，9H)，7.42(d，J＝2.0Hz，1H)，7.61(t，J＝8.1Hz，1H)，7.89-8.09(m，3H)。HRMS：计算值为C₄₁H₃₅ClF₃N₃O₆S+H+，790.19599；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，790.1944。

实施例28

4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-氟苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：根据实施例1步骤9中的方法，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，163mg，0.303mmol)与(2-硝基-6-三氟甲基-苯基)-甲磺酰氯反应，得到15mg磺酰胺，为白色固体，产率7％。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解磺酰胺酯(14mg，0.020mmol)得到12mg(88％)标题产物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.88-2.03(m，2H)，2.66-2.78(m，4H)，2.81-2.90(m，2H)，2.90-3.00(m，2H)，4.12-4.20(m，3H)，6.49(d，J＝8.8Hz，1H)，6.80(dd，J＝8.8，2.3Hz，1H)，6.86(s，1H)，6.94-7.01(m，1H)，7.02-7.12(m，5H)，7.23-7.36(m，10H)，7.40(d，J＝2.0Hz，1H)，8.00(d，J＝8.3Hz，2H)。HRMS：计算值为C₄₀H₃₆ClFN₂O₄S+H+，695.21411；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，695.2128。

实施例29

4-{3-[2-(2-{[(联苯-2-基甲基)磺酰基]氨基}乙基)-5-氯-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：将得自实施例24步骤1的溴化物(83mg，0.108mmol)与苯基硼酸(19.8mg，0.162mmol)、KF(9.4mg，0.162mmol)、Pd(OAc)₂(3.4mg，0.015mmol)和PPh₃(11.8mg，0.045mmol)置入微波反应器。将DME(0.12M)、MeOH(0.42M)、H₂O(0.42M)加到容器中，将混合物用氩气流去除气体，盖上盖子，并在Smith Creator微波炉中120℃加热1小时。冷却反应混合物到室温，通过硅藻土过滤(用EtOAc洗涤)，并用H₂O稀释。用EtOAc萃取水层。用H₂O和盐水洗涤合并的有机相，经MgSO₄干燥并浓缩。经柱色谱纯化粗制产物(EtOAc-己烷)，得到75mg(91％)的Suzuki产物，为黄色固体。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解酯(70mg，0.091mmol)得到46mg(67％)标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.85-1.98(m，2H)，2.45-2.55(m，2H)，2.64-2.78(m，4H)，2.82-2.90(m，2H)，3.99(t，J＝6.3Hz，1H)，4.18(s，2H)，6.47(d，J＝8.8Hz，1H)，6.71-6.84(m，2H)，6.97-7.08(m，4H)，7.15-7.24(m，3H)，7.25-7.28(m，4H)，7.28-7.36(m，9H)，7.40(d，J＝2.0Hz，1H)，7.47(dd，J＝7.7，1.1Hz，1H)，8.01(d，J＝8.3Hz，2H)。HRMS：计算值为C₄₆H₄₁ClN₂O₄S+H+，753.25483；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，753.253。

实施例30

4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-吡啶-4-基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：根据实施例29步骤1的方法，将得自实施例24步骤1的溴化物(77mg，0.10mmol)与吡啶-4-硼酸反应得到33mg(43％)的Suzuki产物，为白色固体。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解酯(33mg，0.043mmol)得到30mg(91％)标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.90-2.01(m，2H)，2.62-2.78(m，6H)，2.90(t，J＝7.5Hz，2H)，4.02(s，2H)，4.56(s，1H)宽，6.48(d，J＝8.8Hz，1H)，6.79(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，6.83(s，1H)，6.99-7.10(m，4H)，7.19(dd，J＝7.6，1.3Hz，1H)，7.22(dd，J＝4.5，1.5Hz，2H)，7.24-7.28(m，2H)，7.28-7.34(m，7H)，7.36-7.46(m，3H)，7.98(d，J＝8.3Hz，2H)，8.55(d，J＝5.8Hz，2H)。HRMS：计算值为C₄₅H₄₀ClN₃O₄S+H+，754.25008；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，754.2505。

实施例31

4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-吡啶-3-基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：根据实施例29步骤1中的方法，将得自实施例24步骤1的溴化物(77mg，0.10mmol)与吡啶-3-硼酸反应，得到59mg(77％)的Suzuki产物，为黄色固体。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解酯(54mg，0.070mmol)得到44mg(83％)标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.80-1.93(m，2H)，2.53-2.62(m，2H)，2.67(t，J＝7.5Hz，2H)，2.82(s，2H)宽，2.95-3.03(m，2H)，4.09(s，2H)，5.61(dd，J＝4.9，3.4Hz，1H)，6.41(d，J＝8.8Hz，1H)，6.76(dd，J＝9.0，2.1Hz，1H)，6.89(s，1H)，7.01-7.12(m，5H)，7.22-7.36(m，9H)，7.36-7.47(m，3H)，7.55-7.62(m，1H)，7.68-7.74(m，1H)，7.89(d，J＝8.3Hz，2H)，8.60(dd，J＝5.1，1.5Hz，1H)，8.90(d，J＝2.3Hz，1H)。HRMS：计算值为C₄₅H₄₀ClN₃O₄S+H+，754.25008；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，754.2505。

实施例32

4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(3-噻吩基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸

步骤1：根据实施例29步骤1中的方法，将得自实施例24步骤1的溴化物(77mg，0.10mmol)与噻吩-3-硼酸反应，得到67mg(87％)的Suzuki产物，为黄色固体。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解酯(62mg，0.080mmol)得到51mg(83％)标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.88-2.00(m，2H)，2.54-2.64(m，2H)，2.68-2.81(m，4H)，2.88-2.99(m，2H)，4.11(t，J＝6.3Hz，1H)，4.20(s，2H)，6.49(d，J＝8.6Hz，1H)，6.80(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，6.82(s，1H)，7.00(dd，J＝4.9，1.4Hz，1H)，7.05(dd，J＝6.7，2.4Hz，4H)，7.13(dd，J＝3.0，1.3Hz，1H)，7.20-7.28(m，4H)，7.28-7.34(m，8H)，7.38-7.44(m，2H)，7.97-8.04(m，2H)。HRMS：计算值为C₄₄H₃₉ClN₂O₄S₂+H+，759.21125；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，759.2099。

实施例33

4-{3-[5-氯-2-[2-({[2-(3，5-二甲基异唑-4-基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：根据实施例29步骤1中的方法，将得自实施例24步骤1的溴化物(77mg，0.10mmol)与3，5-二甲基异唑-4-硼酸反应，得到36mg(46％)的Suzuki产物，为黄色固体。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解酯(36mg，0.046mmol)得到32mg(90％)标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.88-2.04(m，5H)，2.14(s，3H)，2.68-2.78(m，4H)，2.78-2.85(m，2H)，2.96(t，J＝7.5Hz，2H)，3.82-3.97(m，2H)，4.18-4.27(m，1H)，6.49(d，J＝8.8Hz，1H)，6.80(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，6.83(d，J＝11.4Hz，1H)，7.06(dd，J＝3.7，1.6Hz，4H)，7.12(dd，J＝7.5，1.1Hz，1H)，7.26-7.34(m，10H)，7.34-7.40(m，1H)，7.41(d，J＝2.0Hz，1H)，7.99(d，J＝8.3Hz，2H)。HRMS：计算值为C₄₅H₄₂ClN₃O₅S+H+，772.26065；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，772.2595。

实施例34

4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-喹啉-8-基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：根据实施例29步骤1中的方法，将得自实施例24步骤1的溴化物(77mg，0.10mmol)与8-喹啉硼酸反应，得到67mg(82％)的Suzuki产物，为白色固体。

步骤2：如实施例1步骤10中所述中，水解酯(60mg，0.073mmol)得到42mg(72％)标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.68-1.85(m，1H)，1.99-2.13(m，1H)，2.23-2.37(m，1H)，2.43-2.53(m，3H)，2.56-2.85(m，4H)，3.91(d，J＝14.1Hz，1H)，4.28(d，J＝14.1Hz，1H)，4.83(t，J＝4.7Hz，1H)，6.39(d，J＝8.8Hz，1H)，6.72-6.80(m，2H)，6.94-7.01(m，2H)，7.01-7.09(m，2H)，7.19-7.27(m，4H)，7.27-7.31(m，4H)，7.32-7.37(m，1H)，7.37-7.44(m，4H)，7.47-7.56(m，3H)，7.75-7.91(m，3H)，8.22(dd，J＝8.3，1.8Hz，1H)，8.94(dd，J＝4.3，1.8Hz，1H)。HRMS：计算值为C₄₉H₄₂ClN₃O₄S+H+，804.26573；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，804.2641。

实施例35

4-{3-[5-氯-2-{2-[({[4′-(二甲基氨基)联苯-2-基]甲基}磺酰基)氨基]乙基}-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：根据实施例29步骤1中的方法，将得自实施例24步骤1的溴化物(77mg，0.10mmol)与4-(二甲基氨基)-苯基硼酸反应，得到51mg(大约52％)的Suzuki产物，为白色固体。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解酯(51mg，0.063mmol)得到17mg(大约41％)标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.87-1.98(m，2H)，2.44-2.53(m，2H)，2.64-2.70(m，2H)，2.70-2.77(m，2H)，2.79-2.89(m，8H)，4.01-4.07(m，1H)，4.28(s，2H)，6.46(d，J＝8.8Hz，1H)，6.59(d，J＝8.8Hz，2H)，6.76-6.81(m，2H)，6.99-7.07(m，6H)，7.16-7.23(m，2H)，7.25-7.33(m，9H)，7.39(d，J＝2.3Hz，1H)，7.44-7.49(m，1H)，8.00(d，J＝8.3Hz，2H)。HRMS：计算值为(C₄₈H₄₆ClN₃O₄S+2H+)/2，398.65215；实测值(ESI-FTMS，[M+2H]²⁺)，398.6504。

实施例36

4-[3-(5-氯-1-(二苯基甲基)-2-{2-[({[2′-(三氟甲氧基)联苯-2-基]甲基}磺酰基)氨基]乙基}-1H-吲哚-3-基)丙基]苯甲酸

步骤1：根据实施例29步骤1的方法，使实施例24步骤1的溴化物(77mg，0.10mmol)与2-(三氟甲氧基)苯基硼酸反应得到36mg(大约36％)的Suzuki产物，为白色固体。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解酯(36mg，0.042mmol)得到23mg(大约75％)标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.80-1.91(m，2H)，2.54(q，J＝7.2Hz，2H)，2.59-2.70(m，4H)，2.78-2.87(m，2H)，3.90(q，J＝14.1Hz，2H)，4.05-4.11(m，1H)，6.40(d，J＝8.8Hz，1H)，6.67-6.76(m，2H)，6.92-7.02(m，4H)，7.07-7.16(m，3H)，7.16-7.30(m，12H)，7.31-7.36(m，2H)，7.93(d，J＝8.3Hz，2H)。HRMS：计算值为C₄₇H₄₀ClF₃N₂O₅S+H+，837.23713；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，837.2375。

实施例37

4-{3-[5-氯-2-[2-({[(2′-氰基联苯-2-基)甲基]磺酰基}氨基)乙基]-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：将得自实施例24步骤1的溴化物(73mg，0.095mmol)与2-氰基苯基硼酸反应，得到23mg(30％)的Suzuki产物，为黄色固体。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解酯(19mg，0.024mmol)得到10mg(53％)标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.87-2.01(m，2H)，2.62-2.79(m，6H)，2.92(t，J＝7.6Hz，2H)，3.91-4.14(m，3H)，6.47(d，J＝8.8Hz，1H)，6.75-6.85(m，2H)，7.01-7.08(m，4H)，7.22-7.28(m，3H)，7.28-7.36(m，8H)，7.36-7.44(m，4H)，7.49-7.59(m，1H)，7.63-7.69(m，1H)，8.00(d，J＝8.3Hz，2H)。HRMS：计算值为C₄₇H₄₀ClN₃O₄S+H+，778.25008；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，778.2489。

实施例38

3-{4-[(2-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(三氟甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}乙基)磺酰基]苯基}丙酸

步骤1：将2-溴-4-氯苯胺(1.0当量)溶解于CH₂Cl₂(0.25M)中，然后加入三乙基胺和三氟乙酸酐(各1.1当量)。在室温下将所得混合物搅拌1小时。蒸发溶剂，并以CH₂Cl₂为洗脱剂，经快速色谱纯化残留物，以97％产率得到酰胺。m/z(M-H)^-300.0。

步骤2：在密封容器中N₂气氛下，将N-(2-溴-4-氯苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(步骤1，1.0当量)与3-丁炔-1-醇(2.0当量)、二氯双(三苯基膦)钯(II)(2.5％当量)、三乙基胺(3.0当量)、CuI(5％当量)在DMF(0.2M)中混合，并加热到120℃反应4小时。然后将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤并用Na₂SO₄干燥。经使用2％MeOH/CH₂Cl₂的快速柱色谱纯化，以67％产率得到炔。m/z(M-H)^-194.09。

步骤3：在加入叔丁基氯二苯基硅烷(1.2当量)前，在室温且搅拌下，将2-(5-氯-1H-吲哚-2-基)乙醇(步骤2，1.0当量)和咪唑(2.0当量)溶解在DMF(0.3M)中。用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭之前，将所得混合物在室温下搅拌过夜，然后用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机相，并经Na₂SO₄干燥。以CH₂Cl₂为洗脱剂，经快速色谱纯化，以超过90％的产率得到硅烷基醚，为棕色胶状物。m/z(M-H)^-433.0。

步骤4：将2-({[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基}乙基)-5-氯-1H-吲哚(步骤3，1.0当量)溶解在乙醚(0.4M)中，并将该溶液冷却到0℃。在强力搅拌下，将草酰氯(1.2当量)加入到上述冷溶液中。在0℃将反应混合物搅拌1小时，然后加入EtOH，随后加入NEt₃。在将所得混合物倒入水之前，用更多EtOH将其稀释，然后用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机相，经Na₂SO₄干燥，并浓缩，得到酮酯，为黄色固体，产率70％。m/z(M-H)^-533.0。

步骤5：将[2-({[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基}乙基)-5-氯-1H-吲哚-3-基](氧代)乙酸乙酯(步骤4，1当量)、Ph₂CHBr(1.5当量)Cs₂CO₃(1.5当量)与无水乙腈(0.1M)混合。将混合物加热回流2小时。冷却反应混合物到室温，用水稀释并用EtOAc萃取。浓缩有机相并用CH₂Cl₂为洗脱剂色谱分离残留物，以45％产率得到N-二苯甲基吲哚，为橙色胶状物。m/z(M+H)⁺701.3。

步骤6：向[1-二苯甲基-2-({[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基}乙基)-5-氯-1H-吲哚-3-基](氧代)乙酸乙酯(步骤5，1当量)THF(0.1M)溶液中加入BH₃·Me₂S(2M的THF溶液)(2当量)。在N₂气氛下，将所得混合物加热回流过夜。冷却反应混合物到室温，然后缓慢用1N NaOH淬灭，用EtOAc萃取，并用盐水洗涤。浓缩得到醇，产率65％。m/z(M+H)⁺645.0。

步骤7：向2-[1-二苯甲基-2-({[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基}乙基)-5-氯-1H-吲哚-3-基]乙醇(步骤6，1当量)的CH₂Cl₂(0.08M)溶液中加入1，3-双(二苯基膦基)-丙烷(DPPP，0.75当量)。在N₂气氛下冷却溶液到0℃，然后加入CBr₄(1.25当量)。使反应温度回到室温，历时2小时。蒸发溶剂，并以CH₂Cl₂为洗脱剂，用短硅胶柱纯化残留物，以定量产率得到溴化物。m/z(M+H)⁺708.0。

步骤8：将1-二苯甲基-3-(2-溴乙基)-2-({[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基}乙基)-5-氯-1H-吲哚(步骤7，1当量)与3-(4-巯基苯基)丙酸甲酯(1.5当量)和K₂CO₃(1.5当量)在DMF(0.1M)中混合。在室温N₂气氛下，将所得混合物搅拌2小时，然后用水稀释并用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机萃取物，浓缩，并经快速色谱纯化(CH₂Cl₂为洗脱剂)得到硫醚，为棕色胶，80％产率。m/z(M+H)823.0。

步骤9：将3-[4-({2-[1-二苯甲基-2-({[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基}乙基)-5-氯-1H-吲哚-3-基]乙基}硫烷基)苯基]丙酸甲酯(步骤8，1当量)溶解于乙腈(0.1M)中，然后在N₂气氛下加入分子筛(粉末，)及4-甲基吗啉N-氧化物(NMO)(4当量)。5分钟后，加入n-Pr₄NRuO₄(TPAP)(5％当量)。将所得混合物在40℃下加热1.5小时。浓缩混合物，并经快速色谱，以CH₂Cl₂然后1％EtOAc/CH₂Cl₂为洗脱剂，纯化残留物得到砜，为白色泡沫状物，产率44％。m/z(M+H)⁺855.1。

步骤10：将3-(4-{2-[1-二苯甲基-2-({[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基}乙基)-5-氯-1H-吲哚-3-基]乙氧基}苯基)丙酸甲酯(步骤9，1当量)溶解于THF(0.1M)中，并冷却到0℃，然后用nBu₄NF(1M的THF溶液)(1.2当量)处理。在0℃下，将所得混合物搅拌5分钟，然后回温到室温并搅拌30分钟。蒸发溶剂，并用以EtOAc/CH₂Cl₂(1∶9至1∶4)为洗脱剂的快速色谱纯化残留物，得到醇，为白色泡沫状物，产率90％。m/z(M+H)⁺616.20。

步骤11：在0℃下，将在CH₂Cl₂(0.02M)中的3-[4-{2-[1-二苯甲基-5-氯-2-(羟基乙基)-1H-吲哚-3-基]乙基}-磺酰基]苯基]丙酸甲酯(步骤10，1当量)用MeSO₂Cl(2.0当量)和Et₃N(2.5当量)处理，并搅拌1小时。移除冰浴并在室温将反应混合物搅拌1小时，然后用CH₂Cl₂稀释，用NaH₂PO₄、盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥，蒸发溶剂以定量产率得到甲磺酸酯。m/z(M+H)⁺695.0。

步骤12：将3-(4-{[2-(1-二苯甲基-5-氯-2-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}-1H-吲哚-3-基)乙基]磺酰基}苯基)丙酸甲酯(步骤11，1.0当量)溶解于DMF(0.03M)中，并用NaN₃(3.0当量)处理。将所得混合物加热至60℃并搅拌2小时，然后冷却到室温，用水稀释，用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤并用Na₂SO₄干燥。蒸发溶剂以定量产率得到叠氮化物。m/z(M+H)⁺641.1。

步骤13：将3-[4-({2-[2-(2-叠氮基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]乙基}磺酰基)苯基]丙酸甲酯(步骤12，1当量)溶解于THF(0.1M)中，并用三苯基膦(1.1当量)处理。2天后，添加水并将混合物搅拌过夜，浓缩，并经以4％MeOH∶CH₂Cl₂为洗脱剂的快速色谱纯化，以71％产率得到胺。m/z(M+H)⁺615.2。

步骤14：如实施例1步骤9中所概述，将3-[4-({2-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]乙基}磺酰基)苯基]丙酸乙酯(步骤13，200mg，0.32mmol)与(2-三氟甲基苯基)甲磺酰氯(实施例5，步骤3，110mg，0.42mmol)反应，得到250mg磺酰胺，为淡黄色泡沫状物，产率93％。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)1.23(t，J＝7.2Hz，3H)，2.62-2.71(m，2H)，2.76-2.93(m，4H)，2.98-3.17(m，4H)，3.27-3.38(m，2H)，4.11(q，J＝7.2Hz，2H)，4.35(s，2H)，4.57(t，J＝5.3Hz，1H)，6.43(d，J＝9.1Hz，1H)，6.77(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，6.81(s，1H)，7.18(d，J＝2.0Hz，1H)，7.24-7.35(m，10H)，7.41(d，J＝8.6Hz，3H)，7.49(t，J＝8.3Hz，1H)，7.60-7.77(m，2H)，7.88(d，J＝8.6Hz，2H)。

步骤15：根据实施例1步骤10中的方法，水解磺酰胺酯(220mg，0.26mmol)得到200mg(92％)标题产物，为白色泡沫状物。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)2.65(t，J＝7.6Hz，2H)，2.91-3.13(m，8H)，3.60(dd，J＝9.7，5.4Hz，2H)，4.46(s，2H)，6.48(d，J＝8.8Hz，1H)，6.83(dd，J＝8.7，2.1Hz，1H)，7.05-7.16(m，5H)，7.19(d，J＝2.3Hz，1H)，7.33-7.47(m，6H)，7.53-7.72(m，6H)，7.80(d，J＝7.6Hz，1H)，7.94(d，J＝8.3Hz，2H)，12.26(s，1H)；HRMS：计算值为C₄₂H₃₈ClF₃N₂O₆S₂+H+，823.18847；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，823.1887；HPLC纯度H₂O/CH₃CN：100％，H₂O/MeOH：100％。

实施例39

3-(4-{[2-(5-氯-1-(二苯基甲基)-2-{2-[({1-[2-(三氟甲基)苯基]乙基}磺酰基)氨基]乙基}-1H-吲哚-3-基)乙基]磺酰基}苯基)丙酸

步骤1：根据实施例1步骤9中的方法，将3-[4-({2-[2-(2-氨基乙基)-5-氯-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]乙基}磺酰基)苯基]丙酸乙酯(实施例38，步骤14)与1-(2-三氟甲基-苯基)-乙烷磺酰氯(0.13g，0.46mmol)反应，得到3-{4-[2-(1-二苯甲基-5-氯-2-{2-[1-(2-三氟甲基-苯基)-乙磺酰基氨基]-乙基}-1H-吲哚-3-基)-乙磺酰基]-苯基}-丙酸乙酯(0.110g，40％)。

步骤2：根据实施例1步骤10，水解磺酰胺酯(0.11g，0.13mmol)得到0.068g(64％)标题产物，为白色固体。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.67(d，J＝6.8Hz，3H)2.57-2.72(m，4H)2.80(t，J＝6.8Hz，2H)2.84-2.94(m，2H)3.03(t，J＝6.4Hz，2H)3.20-3.31(m，2H)5.82-5.88(m，1H)6.37(s，1H)6.73-6.81(m，2H)6.98(d，J＝4.4Hz，2H)7.05(d，J＝5.4Hz，2H)7.24-7.49(m，11H)7.63(d，J＝7.8Hz，1H)7.80(d，J＝7.8Hz，1H)7.88(d，J＝8.6Hz，2H)。

实施例40

4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-羟基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：使用实施例5步骤1中所述的方法，用2-苄氧基苄基溴化物(参考药物化学杂志(J.Med.Chem.)2006，49，31-34，R.V.Somu等人)(32.2g，116mmol)得到(2-苄氧基-苯基)-甲磺酸钠盐(30g，86％)，为白色固体。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ3.82(s，2H)5.09(s，2H)6.81-6.91(m，1H)6.96(d，J＝7.58Hz，1H)7.08-7.18(m，1H)7.26-7.34(m，1H)7.34-7.41(m，2H)7.45(dd，J＝1.77Hz，1H)7.52(d，J＝7.07Hz，2H)。

步骤2：使用实施例5步骤2中所述的方法，用(2-苄氧基-苯基)-甲磺酸钠盐(30g，99mmol)得到(2-苄氧基-苯基)-甲磺酸(15g)，为白色固体，其可使用而不需进一步纯化。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ3.81(s，2H)5.08(s，2H)6.80-6.92(m，1H)6.95(d，J＝7.83Hz，1H)7.07-7.17(m，1H)7.31(d，J＝6.82Hz，1H)7.34-7.42(m，2H)7.45(dd，1H)7.52(d，J＝7.33Hz，2H)。

步骤3：使用实施例5步骤3中所述的方法，用(2-苄氧基-苯基)-甲磺酸(7g，25.15mmol)得到(2-苄氧基-苯基)-甲磺酰氯(2.6g，35％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ5.06(s，2H)5.15(s，2H)7.00-7.10(m，2H)7.30-7.50(m，7H)。

步骤4：如实施例1步骤9中所概述，将4-{3-[2-(2-氨基乙基)-1-二苯甲基-5-氯-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(实施例7，步骤6，3.92g，7.3mmol)与(2-苄氧基-苯基)-甲磺酰氯(2.6g，8.76mmol)反应，得到4.1g4-{3-[2-[2-({[2-(苄氧基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-5-氯-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯，为白色泡沫状物，产率59％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.80-1.99(m，2H)2.49-2.78(m，6H)2.85(t，J＝8.84Hz，2H)3.89(s，3H)3.96-4.05(m，1H)4.26(s，2H)4.90(s，2H)6.45(d，J＝8.84Hz，1H)6.73-6.82(m，2H)6.83-6.93(m，2H)6.94-7.08(m，4H)7.16-7.34(m，15H)7.39(d，J＝2.02Hz，1H)7.85-7.98(m，2H)。

步骤5：在钯炭(0.5g)存在下，将4-{3-[2-[2-({[2-(苄氧基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-5-氯-1-(二苯基甲基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(5.1g，6.4mmol)与氢气反应，得到4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-羟基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯和4-{3-[1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-羟基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸甲酯(3∶1)的混合物，为白色泡沫状物，总产率74％。

步骤6：根据实施例1步骤10中的方法，水解磺酰胺酯混合物(3.35g)并用制备型HPLC纯化，得到1.18g(36％)标题产物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.89-2.01(m，2H)2.64-2.96(m，8H)4.16(s，2H)4.17-4.25(m，1H)6.50(d，J＝8.84Hz，1H)6.74-6.89(m，4H)6.95(dd，J＝1.64Hz，1H)7.01-7.13(m，4H)7.11-7.23(m，1H)7.23-7.38(m，8H)7.41(d，J＝2.02Hz，1H)7.90-8.04(m，2H)；HRMS：计算值为C₄₀H₃₇ClN₂O₅S+H+，693.21845；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，693.21709；HPLC纯度(CH₃CN-H₂O)：7.24分钟，100.0％。HPLC纯度(MeOH-H₂O)：8.12分钟，100.0％。

实施例41

4-{3-[5-氯-1-(二苯基甲基)-2-(2-{[(2-喹啉-5-基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸

步骤1：根据实施例29步骤1中的方法，将得自实施例24步骤1的溴化物与5-喹啉硼酸反应，得到Suzuki产物。

步骤2：如实施例1步骤10中所述，水解上述酯并用制备型HPLC纯化产物，得到标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ1.77-1.91(m，2H)，2.35-2.70(m，6H)，2.76(t，J＝7.2Hz，2H)，3.65(d，J＝13.9Hz，1H)，3.89(d，J＝13.9Hz，1H)，4.00(t，J＝5.3Hz，1H)，6.39(d，J＝9.1Hz，1H)，6.63-6.79(m，2H)，6.86-7.04(m，4H)，7.08-7.24(m，10H)，7.24-7.40(m，4H)，7.43-7.51(m，1H)，7.55(dd，J＝8.6，7.1Hz，1H)，7.62(d，J＝8.3Hz，1H)，7.84-7.94(m，2H)，8.05(d，J＝8.6Hz，1H)，8.83(dd，J＝4.3，1.8Hz，1H)。HRMS：计算值为C₄₉H₄₂ClN₃O₄S+H+，804.26573；实测值(ESI-FTMS，[M+H]¹⁺)，804.2663。

制备下面通式的中间体化合物的另一方法，

其中X为卤素，优选氯，在2005年2月23日提交的序号为11/064241美国专利申请中公开，将该专利申请的全部内容在此引入作为参考。简言之，根据下列一般流程图，该方法包括在转换为磺酰氯之前先形成磺酸：

其中L为离去基团；Ar为2，6-二取代苯基；R为(CHR₅)_n2；且M为I主族或II主族金属离子。根据该流程图，式IV的磺酸类可与卤素置换剂(即可将例如H或OH的非卤素取代基转化为卤素取代基的试剂；将磺酸部分转换为磺酰卤部分)反应，从而被转换为磺酰卤，所述卤素置换剂例如SOCl₂、POCl₃、CCl₄/三苯基膦、草酰氯或草酰溴，优选草酰氯。卤素置换剂优选过量使用，特别是在起始原料、溶剂或二者中有残留溶剂时。当用草酰氯作为卤素置换剂时，相对于磺酸试剂(式IV的化合物)的量，它可以以约1至约6当量、约2至约4当量或约3至约3.5当量使用。本领域技术人员将明白，所用的卤素置换剂的量特别将根据起始原料或溶剂中的水量以及起始原料和溶剂的性质和反应性而异。

卤素置换反应(上面流程图中的步骤3)的适当溶剂包括至少能部分溶解式IV化合物的任何有机溶剂。优选溶剂包括非极性或弱极性溶剂，包括乙腈、芳香族烃类例如苯及甲苯和卤素化溶剂(例如1，2-二氯乙烷以及二氯甲烷)。优选溶剂为醚类。适当醚类包括四氢呋喃、二烷、二乙基醚、二丁基醚、二异丙基醚或其混合物等。更优选的醚为四氢呋喃。

卤素置换反应可在任何适当温度下进行，例如在约-40℃至约室温，优选约低于-10℃。

磺酰卤形成步骤(上面流程图中的步骤3)也可在例如三级酰胺(例如二甲基甲酰胺)的酰基转移催化剂存在下进行。以足以加速反应速率的量提供酰基转移催化剂。相对于磺酸试剂的量，酰基转移催化剂以少于约1当量的量存在，优选量为约0.01至约0.5当量；相对于磺酸试剂的量，更优选为约0.1至约0.2当量。

可经沉淀和过滤将式I化合物从反应混合物中分离。可使用诱发沉淀的任何熟知方法。在一些优选实施方案中，可将例如水或含有水溶剂的反溶剂(anti-solvent)添加于反应混合物中，以诱发沉淀。相对于使用有机溶剂如庚烷时所观察到的分解速率，使用水为反溶剂时可降低磺酰卤产物的分解速率，从而提高产率。降低反应混合物的温度到例如约低于-20℃可促进沉淀。

如以上流程图所示，式IV磺酸类可经式III磺酸盐类与质子酸反应来制备。根据本发明的方法，适当质子酸有足够强度以至能将磺酸盐转化为其对应酸。例如，质子酸可为强无机酸，例如HCl、HBr、H₃PO₄、HNO₃、HClO₄、H₂SO₄等。或者，质子酸可为有机酸，例如甲酸、甲磺酸、对-甲苯磺酸、苯磺酸、三氟乙酸和其它强有机酸。质子酸可以以气体形式提供。优选地，无机酸为HCl，更优选为气体HCl，其加入到含有磺酸盐的反应溶剂中。相对于式III的磺酸盐，质子酸以过量的摩尔当量提供较好。

式IV磺酸化合物的形成可在任何适当溶剂中进行。例如，适合的有机溶剂为式III化合物至少可部分溶于其中的有机溶剂。可选择对例如NaCl或KCl的金属卤化物盐类溶解较差的溶剂，因此通过金属卤化物盐类沉淀以热力学驱动反应。溶剂可含有醇，例如甲醇、乙醇、异丙醇等，或其混合物，优选为甲醇。溶剂也可含有水。反应温度可由技术人员很容易地确定。例如，反应可在低于室温的温度进行，例如约-20℃至约10℃，优选为约0℃或约低于10℃。

式IV的磺酸化合物可根据常规方法分离，例如从反应混合物中沉淀产物。

式III的磺酸盐化合物可由式II化合物：Ar-R-L(其中Ar、R及L如上文中定义)与I或II主族金属亚硫酸盐任选存在相转移催化剂条件下反应，如上面流程图步骤1所示。任何I或II主族金属亚硫酸盐都适宜，例如Li₂SO₃、Na₂SO₃、K₂SO₃、MgSO₃、CaSO₃等。I或II主族金属亚硫酸盐类可以过摩尔量提供，例如相对于式II化合物的量为约2当量至约1当量。适当金属盐类包括Na₂SO₃、K₂SO₃和Na₂SO₃。

式III磺酸盐化合物的形成可在相转移催化剂(例如四级铵卤化物，例如四丁基碘化铵)存在下进行。可提供适于加速反应速率的量的相转移催化剂，例如按重量计算，约0.1％至2％，更优选为0.5％至1％。

任何适宜的溶剂可被应用，例如至少能部分溶解I或II主族金属亚硫酸盐类的溶剂，例如水，以约从50％起的量，更优选约75％，还更优选约超过90％，又更优选约超过95％，还更优选约超过99％的水。该反应还可在任何适当温度进行，优选为升高的温度，例如约100℃。

从反应混合物分离式III化合物可以用任何常规方法进行，例如从反应混合物沉淀，例如用水溶性无机盐(如NaCl或KCl，更优选为NaCl)处理反应混合物。可以通过向反应混合物中添加基本上不与水混溶的有机溶剂，促进式III化合物的分离，所述有机溶剂例如乙酸乙酯、醚类(例如乙醚等)、烷类(例如己烷、石油醚等)、芳香族类(例如苯、甲苯、二甲苯等)等，乙酸乙酯为最优选的。还可冷却反应混合物(例如约低于10℃)以协助诱发沉淀。

生物测试程序

GLU胶束分析

该分析是使用带有355nM激发光滤镜和460nM发射光滤镜(Lab Systems Fluoroscan II，Helsinki，Finland)的荧光读板仪在96孔板中进行。分析缓冲液含有940μM Triton X-100、50mM Hepes pH 7.4、0.3mMEDTA、1mM CaCl₂和300mM KCl。在实验日添加终浓度为120μM的DTPC(1，2-O-十四烷基-sn-甘油-3-磷酸胆碱，Avanti)，并在每一分析之前立即添加终浓度为90μM的GLU(7-羟基香豆素基-γ-亚麻酸酯，Biomol Research Lab，Inc.)。

将溶解于DMSO的化合物(10μL)一式两份置入黑色96孔板的孔中。对应于阳性和阴性对照组的孔含有DMSO而无抑制剂。在实验之前即刻，将200μL含有90μM GLU和120μM DTPC的分析缓冲液加到分析板的全部孔中。将分析缓冲液(50μL)添加到阴性对照组，并将50μL cPLA₂α溶液(5mg/mL在分析缓冲液中)加入到所有其它孔中，以开始反应。酶的终浓度为1μg/ml。在添加酶期间，和缓地混合每一孔中的内含物，然后将平板快速移到荧光读板仪。每4分钟读取荧光的增加，直到84分钟。确定所得线的斜率并使用下列方程式计算抑制作用：

抑制百分比＝[1-(含有抑制剂的斜率-阴性对照组的斜率)/(阳性对照组的斜率-阴性对照组的斜率)]×100

大鼠全血分析

通过心脏穿刺雄性Sprague-Dawley大鼠，将新鲜全血收集于肝素化管中。将血液的等分试样(0.6mL)与6μL溶剂(DMSO)或6μL各种浓度的测试化合物在37℃培育15分钟。随后将该血液与稀释于DMSO的6μL钙离子载体A23187(Sigma C-7522)在37℃培育10分钟。A23187的终浓度为5μM。将DMSO(6μL)加入到未经刺激的对照组。通过与60μL冷EDTA混合停止反应，得到20mM的终浓度。在微离心机中以6500rpm将血液离心10分钟，以得到血浆。将70μL的血浆等分试样与400μL冷甲醇混合，以沉淀蛋白质。在-80℃培育30分钟后，经6500rpm离心10分钟得到上清液，并根据厂商说明分析TXB₂(Assay Designs，Inc.’s ELISA kit#900-002)。

本发明化合物的GLU胶束分析和大鼠全血分析结果如下表1所示：

  10  0.009  0.02  11  0.28  0.38  12  0.021  0.04  13  0.026  0.03  14  0.03  0.02

  15  0.068  0.12  16  0.023  0.05  17  0.01  0.02  18  0.025  0.04  19  0.022  0.03  20  0.014  0.17  21  0.0059  0.03  22  0.021  0.08  23  0.105  0.04  24  0.008  0.03  25  0.013  0.03  26  0.022  0.03  27  0.038  0.03  28  0.03  0.03  29  0.018  0.05  30  0.021  0.06  31  0.016  0.04  32  0.013  0.05  33  0.022  0.02  34  0.016  0.03  35  0.027  0.05  36  0.031  0.07  37  0.025  0.03

  38  0.007  0.01  39  0.068  0.02  40  0.072  0.06  41  0.022  ---

cPLA₂抑制剂在血栓形成模型中的作用

通过下面方法，对在血栓形成模型中给药cPLA₂抑制剂的作用进行测定。

血小板功能分析仪(PFA-100)研究

使用血小板功能分析仪(PFA-100)研究人类血小板聚集。从两周前已不再服用任何血小板抑制性药物的自愿者收集人类血液。血液收集于3.2％柠檬酸钠Vacutainer试管(Becton Dickinson)中。将试管反转5次并将血液转移到15ml聚丙烯圆锥形试管。将5μl溶解于100％DMSO的各抑制剂(4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-氟-6-(三氟甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸(实施例14)；4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(三氟甲氧基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸(实施例25)；4-{3-[1-二苯甲基-5-氯-2-(2-{[(3，4-二氯苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸(化合物C)分别加至1ml人类全血等分试样中，以得到各个抑制剂浓度和0.5％的DMSO最终浓度。将试管反转10次混合，并在进行PFA-100之前，在室温静放10分钟。依照厂商说明书使用胶原/肾上腺素药筒(在全血中的单独0.5％DMSO给出125+/-13.9秒的封闭时间(closure time))进行PFA-100。如厂商设定，最大封闭时间为300秒。

结果示在图1中。在PFA-100中激发测试(challenge testing)之前，使化合物C或实施例14或实施例25的化合物与人类全血一起培育。全部化合物在血小板功能分析中是有效的。在浓度为1.25μg/mL时，化合物C和实施例14的化合物使封闭时间增加，而实施例25的化合物在0.3μg/ml的低浓度下即有效。这些数据显示这3个化合物在体外可抑制人类血液的血小板聚集。

FeCl₃-诱发的动脉血栓形成模型

诱发血管损伤之前2小时，Sprague Dawley杂交繁殖大鼠(体重80-100g)经口服管饲接受剂量为25mg/kg的4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-氟-6-(三氟甲基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸(实施例14)或4-(3-{5-氯-1-(二苯基甲基)-2-[2-({[2-(三氟甲氧基)苄基]磺酰基}氨基)乙基]-1H-吲哚-3-基}丙基)苯甲酸(实施例25)。管饲的总体积为0.5ml。对照组动物仅用溶媒处理。在血管损伤之前15分钟，肌肉内注射氯胺酮/xylazyne混合物将大鼠麻醉，麻醉后左颈动脉被解剖并暴露，以做进一步测量。为诱发血栓形成前损伤，将浸泡于10％FeCl₃溶液的一张圆滤纸(2mm直径)铺在暴露的血管壁上。5分钟后移除滤纸，并将1PRB周围血管都卜勒血流探头(1PRB perivasular Doppler flow probe，Transonic Systems Inc.)牢靠围绕颈动脉以测量血流。使用超声速流动仪(模式TS420，Transonic Systems Inc.)和Windaq数据采集软件记录血流共30分钟。

结果示在图2中，显示当口服剂量为25mg/kg时，两化合物在大鼠氯化铁血栓形成模型中都有效。

在FeCl₃诱血栓形成的大鼠中的血栓素B₂(Thromboxane B₂)水平

从给予溶媒、实施例14的化合物或实施例25的化合物的大鼠收集血液，并根据如上所述进行氯化铁损伤步骤。从腔静脉收集血液并在37℃使血液凝固1小时。然后分离血清并用ELISA确定血清血栓素B₂(thromboxane B₂)水平。

结果示在图3中。这些数据显示两化合物都可降低血清血栓素B₂水平。

多发性硬化症的动物模型中的cPLA₂抑制剂的作用

用下面的方法，对给药cPLA₂抑制剂在多发性硬化症的动物模型中的作用进行了测定。

6组B6小鼠经MOG/CFA免疫并注射百日咳毒素，诱发实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)，这为一多发性硬化症动物模型。自免疫之日起，将3组小鼠用溶媒、4-{3-[1-二苯甲基-5-氯-2-(2-{[(2，6-二甲基苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸(化合物A)或4-{2-[1-二苯甲基-5-氯-2-(2-{[(3，4-二氯苄基)磺酰基]氨基}-乙基)-1H-吲哚-3-基]乙氧基}苯甲酸(化合物B)处理(口服，100mg/kg，两次/天)。另3组小鼠在EAE开始之日(第15天)开始给予溶媒，化合物A或化合物B(口服，100mg/kg，两次/天)。在此日，超过20％的动物呈现EAE的首次临床症状并在这些组的全部动物中开始治疗。结果显示在下表中，其中平均临床计分为每一动物在该特定日的平均临床评估。动物如下计分：

0-没有EAE的临床症状(无麻痹)

1-尾巴麻痹

2-尾巴麻痹及部分后腿麻痹

3-尾巴麻痹和整个后腿麻痹

4-尾巴麻痹、整个后腿麻痹及部分前腿麻痹

5-垂死的动物(全部四肢瘫痪，缺乏反应力，立即将这些老鼠安乐死)。

此外，发现实施例14和25的化合物，在多发性硬化症小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型中也是有效的。如下表数据所示，当口服给药低如2.5mg/kg的剂量时，这些化合物导致疾病的发作延迟并降低疾病的严重性。

  12  0.08  0  0  13  0.50  0  0

  14  1.13  0  0.14  15  1.48  0.14  0.20  16  2.00  0.32  0.55  17  2.00  0.50  0.55  18  2.19  0.55  0.55  19  3.31  1.32  0.84  20  3.48  1.41  1.27  21  3.60  1.77  1.68  22  3.60  1.89  1.89  23  3.58  2.00  1.93  24  3.60  2.05  2.00  25  3.71  1.90  1.98  26  3.71  1.89  1.95  27  3.71  1.89  1.93

这些结果显示，当从免疫之时给药，用实施例14、25的cPLA₂抑制剂、化合物A和化合物B治疗的小鼠可预防EAE，并在已进展为EAE或接近进展为该疾病临床症状的小鼠中降低EAE的临床严重性。

cPLA₂抑制剂在动脉粥样硬化中的作用

通过下面方法，对cPLA₂抑制剂在载脂蛋白E(ApoE)敲除的动脉粥样硬化小鼠模型中的作用进行测定。

ApoE KO小鼠模型

通过胚胎干细胞中的基因靶向(gene targeting)破坏ApoE基因，从而产生载脂蛋白E(ApoE)敲除小鼠。ApoE是一种糖蛋白，负责由肝脏摄取乳糜微粒和VLDL颗粒，藉此预防富含胆固醇的残留物聚积于血流中。由于ApoE基因的纯合性失活，ApoE KO小鼠具有高水平的胆固醇，这又导致诱发沿动脉树特异区域形成动脉粥状硬化斑，特别在主动脉窦(此处高血液动力学障碍盛行)和沿主动脉的分支位置。

在动脉粥样硬化中的cPLA₂

胞质磷脂酶A2(cPLA₂)优先介导随细胞活化的花生四烯酸的释放。花生四烯酸的代谢物(类花生酸类)被认为是炎症过程的重要调节剂。减少前炎症性类花生酸类的生物合成已显示，可在人类和小鼠中抑制动脉粥状硬化的损伤进展，因此提出cPLA₂在动脉粥样硬化中可能起作用(参阅Ranke等人，循环(Circulation)1993；87(6)1873-1879；Paul等人，生命科学(Life Sciences)2000；68(4)：457-465；Cyrus等人，循环2002；106(10)1282-1287；Praticò等人，PNAS 2001；98(6)：3358-3363；Burleigh等人，循环2002；105(15)：1816-1823；Cayatte等人，ATVB 2000；20(7)：1724-1728；Aiello等人，ATVB 2002；22(3)：443-449；Subbanagounder等人，循环研究(Circ.Res.)1999；85(4)：311-318)。此外，已在人类粥样硬化动脉中检测到cPLA₂表达，但正常健康人类动脉却未发现(参阅Elinder等人，ATVB 1997；17(10)：2257-2263)。

cPLA₂抑制剂对小鼠动脉粥样硬化的作用

将六周龄雄性ApoE KO小鼠用4-{3-[1-二苯甲基-5-氯-2-(2-{[(3，4-二氯苄基)磺酰基]氨基}乙基)-1H-吲哚-3-基]丙基}苯甲酸(化合物C)处理。将小鼠用补充以1.3mg/g和3.3mg/g(分别导致～250ng/mL和～500ng/mL最大药物暴露)化合物C或溶媒的正常饲料喂食20周。相对于对照组动物，治疗9和20周后，血清血栓素B₂水平显著降低，如下表所示：

血清血栓素B₂水平

此外，相对于对照组动物，在给药1.3mg/g和3.3mg/g化合物的动物中，造成主动脉窦负担的动脉粥状硬化斑分别减少32.7％(349582±132685对519220±100694μm²，p＜0.05)以及45.6％(282697±146462对519220±100694μm²，p＜0.001)。此外，如下表所示，沿主动脉的损伤面积百分比减少不显著(ns)，证明该cPLA₂抑制剂在影响疾病上的作用，特别是在最高血液动力学障碍区域。

沿主动脉的动脉粥状硬化损伤

如下表所示，与对照组动物相比时，用化合物C处理的动物的动脉粥状硬化损伤复杂性降低，可由主动脉窦早期阶段损伤的频率增加和后期阶段损伤的频率减少来证实。该表显示给予溶媒、1.3mg/g化合物C和3.3mg/g化合物C的动物具有阶段1(纤维脂质化损伤)、阶段2(早期纤维斑)、阶段3(后期纤维斑)、阶段4(稳定的复杂损伤)以及阶段5(不稳定的复杂损伤)的全部动物的百分比。

动脉粥状硬化损伤复杂性

动脉粥样硬化的ApoE KO小鼠模型中的血栓素B₂水平

将ApoE KO小鼠用补充以3.3mg/g饲料的化合物C或实施例10化合物或溶媒的正常饲料喂食2天。透过眼窝窦收集血液并在37℃放置凝固1小时。然后分离血清并用ELISA分析血栓素B₂。得到的血栓素浓度(ng/mL)为：溶媒：76.1±17.3；化合物C(3.3mg/g)：33.5±11.6；实施例10的化合物：(3.3mg/g)：1.4±0.7。

在一分开实验中，通过口服管饲，给予ApoE KO小鼠溶媒或10mg/kg实施例25化合物。透过眼窝窦收集血液并在37℃放置凝固1小时。然后分离血清并用ELISA分析血栓素B₂。得到的血栓素浓度(ng/mL)：溶媒：267.9±34.3；实施例25的化合物：9.4±5.0。

cPLA₂抑制剂在中风模型中的作用

通过下面方法，对给药cPLA₂抑制剂在中风模型中的作用进行测定。

小脑颗粒状神经元培养

从P5-8的幼小大鼠分离原始小脑颗粒状神经元。简而言之，收集小脑并汇集于不含Ca²⁺及Mg²⁺的冰冷磷酸缓冲盐水(PBS)中。将组织切细并转移到含有20IU/ml木瓜蛋白酶的Earle氏平衡盐溶液(Worthington Biochemical，Freehold，NJ)的酶解离培养基中并在37℃培育30分钟。酶解离后，吸出木瓜蛋白酶溶液，并在含有2000IU/ml DNase和10mg/ml卵类粘蛋白的蛋白酶抑制剂的完全培养基[含B-27补充物的神经细胞基础培养基(Gibco，Grand Island，NY)，青霉素/链霉素，艾非地可林(aphidicolin)，谷氨酸，氯化钾]中，用火焰磨光Pasteur吸管机械性研磨组织。在完全培养基中的单一细胞悬浮液，以5.0×10⁵细胞/孔的密度置于预涂覆聚-L-鸟氨酸/层粘连蛋白的24孔板(Becton-Dickinson，Bedford，MA)中。在实验前，将细胞保持两周。

培养的神经元的氧-葡萄糖剥夺(OGD)

OGD之前60分钟，将培养物用各种浓度的化合物A处理。移除培养基并在无氧容器中(80％氮，10％氢，10％二氧化碳气体混合物)用脱氧缓冲液置换。将新的化合物A、实施例34或实施例41加入到培养物中并在无氧容器中保持2小时。培育终了，更换新的培养基并添加新的化合物A。培养物在正常培养器再保持24小时。24小时后通过测量释放到培养基的乳酸脱氢酶来测定细胞死亡(Roche Biochemicals)。下表所示为对照组、OGD、各种浓度的化合物A和MK801的值，MK801为NMDA受体拮抗剂，其为阳性对照组。

由cPLA2抑制剂对抗OGD的神经保护

  对照组  OGD  0.1μM  0.3μM  1μM  3μM  对照组  平均  14  51  标准偏差  3  5  化合物A  平均  38  31  27  20  标准偏差  2  5  4  2  实施例34  平均  35  28  21  18  标准偏差  4  3  3  2  实施例41  平均  40  33  30  24  标准偏差  6  4  5  4

从这些数据可见，给予化合物A、实施例34的化合物或实施例41的化合物可有效保护培养的神经元免于OGD-诱发的细胞死亡。在浓度低如0.1μM时，对于这些化合物而言，可观察到在统计学上显著地降低细胞死亡的百分比。

cPLA₂抑制剂在帕金森氏病模型中的作用

通过下面的方法，对给药cPLA₂抑制剂在帕金森氏病模型中的作用进行了测定。

多巴胺能神经元培养

如Pong K.等人在(1997)神经化学杂志(J.Neurochem.)69 986-994所述，从E15大鼠胚胎分离初级多巴胺能神经元。简言之，分离腹侧中脑(ventral mesencephalon)并将组织倒入冰冷无Ca²⁺及Mg²⁺的磷酸缓冲盐水(PBS)中。将组织转移到含有20IU/ml木瓜蛋白酶的Earle氏平衡盐溶液(Worthington Biochemical，Freehold，NJ)的酶解离培养基中，并在37℃培育30分钟。酶解离后，吸出木瓜蛋白酶溶液，并在含有2000IU/ml DNase和10mg/ml卵类粘蛋白的蛋白酶抑制剂的完全培养基[含B-27补充物的神经细胞基础培养基(Gibco，Grand Island，NY)，青霉素/链霉素，艾非地可林，谷氨酸，氯化钾]中，用火焰磨光Pasteur吸管机械性研磨组织。在完全培养基的单一细胞悬浮液中，以5.0×10⁵细胞/孔的密度置于预涂覆聚-L-鸟氨酸/层粘连蛋白的24-孔板中(Becton-Dickinson，Bedford，MA)。在实验前将细胞保持两周。

在多巴胺能神经元中的MPP⁺曝露

暴露于神经毒素MPP⁺(MPTP的毒性代谢物)数小时前，将培养物用各种浓度的化合物A、化合物B、化合物C和GDNF(胶质细胞株衍生的神经营养因子，为阳性对照)进行处理。培养物暴露于10μM MPP⁺达60分钟。暴露之后，更换新鲜培养基并添加新鲜化合物。24小时后，通过测量³H-多巴胺摄取确定多巴胺能神经元存活力，如上Pong等人1997所述。结果示于下表：

由cPLA2抑制剂对抗MPP⁺的神经保护

  平均  76.9  83.4  78.8  81.1  标准偏差  3.4  5.7  3.3  6.4  化合物B  平均  74  71.6  78.6  83.2  标准偏差  3  2  5.5  5.1  化合物C  平均  68.6  70.6  75.9  79.6  标准偏差  3.8  3.6  2.6  1.3

从这些数据可见，这些化合物的给药有效地保护多巴胺能神经元对抗MPP⁺的存活力。

cPLA₂抑制剂在骨关节炎、类风湿性关节炎以及疼痛模型中的作用

进行实施例10的化合物的体内药理研究来证明在炎性和外周疼痛模型中口服给药的效力，所述疼痛模型包括角叉菜胶爪水肿模型(参阅Winter，C.A.，等人，Proc Soc Exp Biol Med 1962；111：544-547)、胶原诱发的关节炎模型(参阅Trentham，D.E.，等人.，J Exp.Med 146；828-833)和完全弗氏佐剂(CFA)-诱发的痛觉过敏模型(参阅Stein C，等人，Pharmacology Biochemistry&Behavior，1988；31：445-451)。还在痛觉过敏模型中CFA激发的对前列腺素和白三烯的体内抑制进行测定。

角叉菜胶爪水肿分析

角叉菜胶爪水肿分析是一种炎症的急性模型，特别可用于体内评估影响前列腺素产生的化合物。特别是，在此模型中NSAIDs以特征性剂量响应方式抑制水肿，并且在此模型中的NSAIDs活性与人类中所观察到的活性有良好的关联性(参阅Mukherjee A，等人，Inflamm Res.1996；45：531-540)。因此，将实施例10的化合物在角叉菜胶爪水肿模型中进行测试。在此模型中，脚底下注射角叉菜胶之前2小时，口服给予该化合物，并在随后的3小时中测定爪肿胀的抑制。爪水肿在低如3mg/kg的剂量时有统计意义的显著减少，以及大约的ED50(根据最大抑制的50％)经测定为7.5mg/kg。

这些数据证明，实施例10的化合物在用于预测NSAIDs和COX-2抑制剂效果的体内炎症的典型模型中起作用。

实施例10的化合物在胶原诱发的关节炎模型中的作用

将实施例10的化合物在小鼠CIA模型(其与人类类风湿性关节炎具有很多免疫学上和病理学上的类似性)中进行测试(参阅上面Trentham，D.E.，等人)。经皮内注射牛II型胶原和CFA的乳液，随后在初次免疫后第21天，经皮内注射乳化在不完全弗氏佐剂的牛II型胶原增强效果，从而在DBA/1LacJ小鼠中诱导关节炎。化合物效力是在10％的动物显示疾病症状时而开始的半治疗剂量方案中进行评估的。此时动物被随机分配于治疗组并经口服每日二次给予实施例10的化合物(100mg/kg)达28天。对照组接受塞来考昔、单独的溶媒或未作处理。以盲方式根据疾病症状的视觉症状对全部动物进行每日计分。

使用Student’s t-检验，将实施例10化合物处理的组别的平均计分与溶媒对照组值进行比较。在第10天开始的处理期间，用实施例10化合物(100mg/kg，每日二次)处理的组别显示在全部实验中疾病严重性在统计学上显著减少；并且无疾病症状的动物数在用实施例10化合物处理的组别中是最高的。

实验完成后，对爪进行组织学研究。两位经政府认证的兽医病理学家以盲方式评估载玻片。对每一爪的关节炎严重性和受影响关节的大体数指定数值计分。用实施例10化合物(100mg/kg，每日二次)处理的小鼠具有最低的组平均严重度计分和最高的未受影响(评分0)爪的百分比；用溶媒处理和未处理的小鼠具有最高的组平均严重度计分和最高的评分3和评分4的受影响爪的组合百分比。用实施例10化合物(100mg/kg)处理的小鼠具有平均严重度评分0.9/2.1(病理学家1/病理学家2)，而用溶媒处理的动物具有平均严重度计分2.1/3.0。类似结果见于在100mg/kg时的另外实验。

实施例10化合物在大鼠痛觉过敏模型中的作用

外周感觉神经元的敏感度可被增强，以致对有害和无害的刺激都有反应，从而造成慢性疼痛(参阅Julius，D.等人，自然(Nature.)2001；413：203；Woolf，C.J.，等人，科学(Science.)200；288：1765)。在炎症和组织损伤位置的前列腺素和白三烯对此疼痛反应的强化负部分责任。前列腺素促进离子通道的磷酸化，增加可激发性并降低感觉神经元的疼痛阈值。类似地，白三烯B₄和12-LO的相关花生四烯酸代谢物结合到并活化对热和低pH响应的神经元上的辣椒素受体(或VR₁)离子通道(参阅Piomelli D.，药理科学趋势(TRENDS in Pharmacological Sciences)，January 2001；22(1)：17-29)。在CFA诱发的痛觉过敏模型中对实施例10化合物的作用进行测量，并且对外周和中枢位置的脂质介质产率进行测定。

将动物给予溶媒、实施例10化合物、萘普生或塞来考昔，然后立即将CFA注射到后腿脚趾。为评估痛觉过敏，使用数字量力计(digital force gauge)以缓慢且固定速率将压力施加到左后腿爪。在0和6小时进行测量。当动物喊叫或挣扎时停止施力。在给药和CFA注射之前进行读取，并在CFA注射后重复6小时。进行两独立的实验并分别分析数据。与溶媒对照组相比，在25mg/kg时实施例10的化合物显出有统计意义的疼痛显著减少。

在每一实验(6小时)终了收集爪，并测量流出液中的PGE₂、LTB₄及TXB₂水平。爪中PGE₂水平显著被实施例10化合物(在25mg/kg)以及被奈普生和塞来考昔对照显著抑制。TXB₂水平也显著被塞来考昔抑制，但用实施例10化合物和奈普生的抑制大于用塞来考昔(为合成的COX-1依赖性成分的抑制)的抑制。如预期，LTB₄水平显著被实施例10化合物抑制，但水平确实被奈普生和塞来考昔增加时，有证据表明底物转至5-脂肪氧合酶途径。

总之，实施例10的化合物在骨关节炎、类风湿性关节炎和疼痛模型中是有活性的。该化合物在角叉菜胶爪水肿模型中以3mg/kg的剂量显著抑制水肿，并在～7.5mg/kg处有最大效力的50％。用实施例10的化合物(100mg/kg，每日二次)每日治疗达28天，根据临床和组织学评估在半治疗胶原诱发的关节炎模型中造成疾病的显著降低。该化合物在痛觉过敏的CFA模型中在25mg/kg时也有效。

实施例10的化合物在使用体内模型时对抑制前列腺素和白三烯的产生也都有效。COX-2依赖PGE2，COX-1依赖血栓素及5-LO依赖白三烯B4的生产在以CFA激发的爪中被抑制。

实施例10的化合物在啮齿动物和绵羊的哮喘模型中的作用

哮喘已被界定为一种呼吸道的慢性炎性疾病，其中很多细胞和细胞成分起作用。在许多易感个体中，该炎症导致重发性或持久的喘鸣、呼吸急促、胸紧闷和咳嗽发作，特别是在晚上或早晨。这些发作通常与广泛但有变化的气流阻碍有关，常自动或治疗解决。炎症也造成现有支气管对各种刺激的过度反应相关地增加。已从哮喘的临床前模型理解疾病的病理学基础机制，且有助于哮喘治疗的进展。特别是，过敏原-诱发的肺部炎症啮齿动物模型，可用于化合物抑制过敏性哮喘相关的炎症的体内评估，并已广泛用于评估糖皮质激素类、白三烯受体拮抗剂、5-L0抑制剂和磷酸二酯酶4抑制剂的效力(参阅Kumar，R.K.等人，J Pharmacol Exp Ther.2003；307：349-355；Wu，A.Y.等人.Clin Exp Allergy.2003；33：359-366；Bell，R.L.等人，J Pharmacol Exp Ther 1997；280：1366-1373；和Henderson，W.R.，Jr.，等人，J Exp Med.1996；184：1483-1494)。

在过敏原诱发的肺部炎症大鼠和小鼠模型中都对实施例10的化合物进行测试。

除啮齿动物过敏原诱发的肺部炎症模型之外，也经常在过敏性绵羊中评估过敏原诱发的肺功能变化。经呼吸道以猪蛔虫(Ascaris suum)抗原激发的蛔虫敏化绵羊，表现可逆的呼吸道收缩和AHR特性。在此动物模型中进行的研究呈现强力证据，证明花生四烯酸代谢物的释放在对抗原激发的后期支气管反应的发展中起重要作用(参阅Abraham，W.M.，等人，呼吸(Respiration.)1989；56：48-56)。如此，在哮喘的绵羊模型中评估实施例10化合物对过敏原诱发的肺功能变化的效力。

大鼠抗原诱发的肺部炎症模型

在Brown Norway大鼠模型中评估实施例10化合物的效力，其中在第1和第2天以卵清蛋白(OVA)气溶胶通过呼吸道对卵清蛋白(OVA)-敏化的动物进行激发。将OVA敏化的大鼠在第1和第2天用气溶胶激发。在2天的激发期间，激发前1小时以及激发后10小时每日二次口服给予30mg/kg的实施例10化合物。在第1天和第2天激发的1小时前，腹腔注射地塞米松3mg/kg。第3天处死动物并灌洗支气管肺泡腔以分析细胞内向通量。2天激发期间每日二次口服给药30mg/kg，在8个独立研究中有8个在统计学上显著地抑制支气管肺泡灌洗液(BALF)嗜酸性粒细胞的内向通量。实施例10的化合物在测试剂量下也在统计学上显著地减弱BALF内的炎症细胞总数，但在此模型中，对淋巴细胞或嗜中性粒细胞的内向通量没有显著影响。

实施例10的化合物在抗原诱发的早和后期支气管收缩和AHR的绵羊模型中的作用

过敏原诱发可逆的呼吸道收缩和AHR为过敏性哮喘的两个标志特征，它们可在哮喘绵羊模型中被体内检测。在此动物模型进行的研究呈现强力证据，证明花生四烯酸代谢物的释放在对抗抗原激发的后期支气管反应的发展中起重要作用(参阅Abraham，W.M.，et al.，呼吸1989；56：48-56)。吸入猪蛔虫(Ascaris suum)抗原后的急性支气管收缩期间通过LO途径的白三烯释放，代表开始后续事件(亦即后期反应及支气管过敏症)的关键因子。在此模型中，5-LO抑制剂齐留通阻断抗原-诱发的后期呼吸道反应、炎症和AHR，然而持续IV输注选择性LTD₄受体拮抗剂孟鲁司特(montelukast)则减弱早期和后期哮喘反应(参阅Abraham，W.M.，等人，欧洲药理学杂志(Eur J Pharmacol)1992；217：119-126；Jones，T.R.等人，加拿大生理学和药理学杂志(Can J Physiol Pharmacol.)1995；73：191-201)。此外，口服给药LTD₄/TXB₂双抑制剂能够抑制早期和后期反应，以及对卡巴胆碱和组胺的呼吸道过度反应(参阅Abraham，W.M.，等人，JPharmacol Exp Ther.1988；247：1004-1011)。PAF也与此模型的后期反应有关，这进一步支持了这样一个概念：与目前的抗白三烯类物质相比，cPLA₂α拮抗剂对脂质介质的更完全阻断，可提供更好的临床效力(参阅Abraham，W.M.，等人，应用生理学杂志(J Appl Physiol.)1989；66：2351-2357)。

激发前24小时、激发前2小时以及激发后8小时，每日二次口服给予30mg/kg的实施例10化合物。接下去的8小时期间测定3只个体绵羊的呼吸道抗性增加的平均值％。观察到后期哮喘反应完全阻断。

次日，在这些经相同处理的绵羊中测定累积的卡巴胆碱浓度(可增加专一肺抗性达400％)来评估呼吸道过度反应(AHR)。使用实施例10化合物的处理造成呼吸道过度反应的完全阻断。在长期剂量方案中，激发前4天、第5天激发前2小时以及激发后8小时，口服每日二次给予3mg/kg实施例10的化合物。

接下去的8小时期间测定5只个体绵羊的呼吸道抗性增加的平均值％，在此更长期剂量方案中，除后期反应的完全阻断及对气溶胶化卡巴胆碱的呼吸道过度反应完全阻断外，适度的但统计学上显著地抑制早期哮喘反应。

上述数据显示在哮喘动物模型中实施例10的化合物为过敏原诱发的肺部炎症、支气管收缩及AHR的有效抑制剂。

本发明的化合物可抑制cPLA₂活性，该活性为供应花生四烯酸底物给环氧化酶-1或2以及5-脂肪氧合酶所必需的，这又使得分别开始生产前列腺素和白三烯。此外，cPLA₂活性为生产溶血磷脂(PAF前体)所必需。如此这些化合物可用于治疗及预防与白三烯、前列腺素或PAF有关的疾病。再者，在超过一个以上的物质起作用的疾病中，预期cPLA₂抑制剂将比白三烯、前列腺素或PAF受体拮抗剂更有效，且也比环氧化酶或5-脂肪氧合酶抑制剂更有效。

因此，本发明的化合物、药物组合物以及治疗方案可用于治疗和预防用环氧化酶-2、环氧化酶-1及5-脂肪氧合酶抑制剂，以及PAF、白三烯或前列腺素受体的拮抗剂治疗的疾病。可由本发明化合物治疗的疾病包括但不限于：肺部疾病，包括例如哮喘、慢性支气管炎以及相关的阻塞性呼吸道疾病的疾病；过敏和过敏性反应，例如过敏性鼻炎、接触性皮炎、过敏性结膜炎等；炎症，例如关节炎或炎性肠疾病，皮肤疾病，例如牛皮癣、异位性湿疹、痤疮、UV损伤、烧伤和皮炎(dermatittis)；心血管疾病，例如动脉粥样硬化、心绞痛、心肌缺血、高血压、血小板聚集等；以及免疫原和化学物质诱发的肾功能不全。药物也可为细胞保护性的，预防有害物质对肠胃道黏膜的伤害。这些化合物也可用于治疗成人呼吸窘迫综合征、内毒素性休克以及包括心肌或脑部损伤的局部缺血诱发的损伤。

本发明的治疗、抑制、减轻或缓解哮喘的方法包括外因性哮喘(也称为过敏性哮喘或特应性哮喘)、内因性哮喘(也称为非过敏性哮喘或非特应性哮喘)或二者的组合(也称为混合型哮喘)。这些方法用于那些经历或受到外因性或过敏性哮喘者，所述哮喘包括由许多过敏原引起的或与之相关的哮喘，过敏原例如花粉、孢子、青草或杂草、宠物皮屑、灰尘、壁虱等。由于过敏原和其它刺激物本身在一年中的不同时点出现，所以这些类型的哮喘也称为季节性哮喘。外因性哮喘还包括支气管哮喘和过敏性支气管肺曲菌症。

可被本发明方法治疗或减轻的内因性哮喘包括由感染物质引起的哮喘，所述感染物质为例如成人的感冒和流感病毒及儿童中常见的呼吸道融合瘤病毒(RSV)、鼻病毒和流行性感冒病毒。还包括因运动和/或冷空气引起某些哮喘的哮喘病症。这些方法可用于与工业和职业暴露(例如烟尘、臭氧、有害气体、二氧化硫、一氧化氮、烟雾，包括来自油漆、塑料、聚氨酯、涂料(varnishes)等的异氰酸酯类，木头，植物或其它有机灰尘等)有关的内因性哮喘。这些方法也可用于与食物添加剂、防腐剂或医药剂有关的哮喘性病症。这些类型的常见物质是例如柠檬黄的食品着色剂，例如亚硫酸氢盐类和偏亚硫酸氢盐类防腐剂，以及例如阿司匹林和非类固醇抗炎物质(NSAIDs)的药物，还包括治疗、抑制或减轻称为沉默哮喘(Silent Asthma)或咳嗽变异型哮喘的哮喘类型的方法。

本发明的治疗哮喘的另一方法包括对有此治疗需要的哺乳动物给予药学有效量的如上所述的本发明化合物和药学有效量的一种或多种另外的抗哮喘药。

可用于这些组合产品的抗哮喘药包括长期控制药，例如皮质类固醇类(糖皮质激素类)、色甘酸钠(色甘酸二钠-DSCG)、奈多罗米、甲基黄嘌呤类(例如茶碱)和白三烯改性剂。有用的白三烯改性剂包括白三烯受体拮抗剂，例如扎鲁司特(ACCOLATE)和孟内司特(monetlukast)(SINGULAIR)；和5-脂肪氧合酶抑制剂，例如齐留通(ZYFLO)。可用的皮质类固醇类包括吸入性产品，例如倍氯米松二丙酸盐、布地奈德、氟尼缩松、氟替卡松和曲安西龙(Triamcinolone)以及它们药学上可接受的盐形式。全身性皮质类固醇类，例如泼尼松、泼尼松龙和甲泼尼龙也是可用的。

快速缓解的抗哮喘药，例如长期作用型β₂-激动剂，短期作用型β₂-激动剂，抗胆碱能药类和全身性皮质类固醇类，也是可用的。可使用的β-肾上腺素能药包括肾上腺素、异丙肾上腺素、奥西那林、特布他林、新异丙肾上腺素(isoetharine)、沙丁胺醇、比托特罗和皮布特罗(perbuterol)。可用的抗胆碱能药包括阿托品(及其衍生物ipatropium bromide)和格隆溴铵。本发明的化合物还可结合过敏免疫治疗用于治疗哮喘，在本领域这也称为减过敏治疗。可根据本领域公知的剂量和方案将这些化合物给药。

可用于本发明的组合产品的另外的抗哮喘药包括普仑司特、阿那白滞素、塞曲司特、奥洛他定盐酸盐、赖色甘酯(cromoglicate lisetil)、雷马曲班、白介素-4受体(Immunex)、利尿素(urodilatin)、考福新达普酸盐(colforsin daropate)、沙丁胺醇、LCB-2183、安多司特、环索奈德、布地奈德、福莫特罗、奥马珠单克隆抗体(omalizumab)、曲尼司特、沙瑞度坦、CDP-835(抗-IL-5单克隆抗体)、非索非那定盐酸盐、N-(1-(氯苯基)-1-甲基乙基)-3-(咪唑-1-基)丙胺二盐酸盐(BTS-71-321)、西洛司特、bimosiamose、促肾上腺皮质激素释放因子、克立昔单抗(clenoliximab)、噻托溴铵、2H-1，2-苯并硒嗪、3，4-二氢-4，4-二甲基(BXT-51072)、阿曲留通、(R)-沙丁胺醇、8-甲氧基喹啉-5-(N-(2，5-二氯吡啶-3-基))甲酰胺(D-4418)，曲安奈德、KW-4490(KF-19514)、LAX-300(LX-109)、IDEC-152(ST-152；抗-CD23抗体)、细胞因子Traps、花生四烯酸乙醇胺(anandamide)、SRL-172，沙美特罗+氟替卡松、KCA-757、2-吡啶羧酸、6-(2-(3，4-二乙氧基苯基)-4-噻唑基)-(OPC-6535)、PM-56D9、沙丁胺醇、CT-2820(PDEIV抑制剂)、倍氯米松、奈帕坦特、富马酸酮替芬、DHEAS(PB-005)、PharmaprojectsNo.5163、No.5278和No.5297、沙丁胺醇硫酸盐、EPI-2010(EpiGenRx)、美泊利单抗、苯甲酰胺、N-(5-(3-((4-氯苯基)磺酰基)丙基)-2-(1H-四唑-5-基甲氧基)苯基)-3-((4-(1，1-二甲基乙基)-2-噻唑基)甲氧基)-、单钠盐(YM-158)、2-(4-乙氧基羰基氨基苄基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-2，3，4，5-四氢-哒嗪-3-酮Pharmaprojects(No.5450)、Sch-205528、L-826141(Pharmaprojects No.5477)、布地奈德、耐久霉素、4，4-双(4-(喹啉-2-基甲氧基)苯基)戊酸钠盐(VML-530)、IL-9抑制剂，倍氯米松二丙酸盐、福莫特罗、环(MePhe-Leu-Asp-Val-D-Arg-D-Arg)(ZD-7349)、沙丁胺醇、Ethanaminium、2-(((2-乙酰基-4-((1-氧代十六烷基)氨基)苯氧基)羟基氧膦基)氧基)-N，N，N-三甲基-，内盐(CPR-2015)、PD-168787(CI-1018)、组织蛋白酶S抑制剂、SB-240683(抗-IL-4单克隆抗体)、BIIL-284、APC-2059、布地奈德+福莫特罗、Bay-16-9996(IL-4拮抗剂)、倍氯米松、GW-328267、VLA-4拮抗剂、4-羟基-1-甲基-3-辛氧基-7-芥子碱基氨基-2(1H)-喹啉酮(TA-270；注：芥子碱基为sinapinoyl)、CPG-7909(ProMune)、DNK-333A(Pharmaprojects No.6070)、AWD-12-281、LM-1507(LM-1484)、福莫特罗、MOL-6131、组织蛋白酶S抑制剂、CS-615、异丁司特、2-{N-(4-(4-氯苯基磺酰基氨基)丁基)-N-{3-(2-(4-环丁基噻唑-2-基)乙基)苄基}氨磺酰基}苯甲酸(S-36527)和2-{N-(4-(4-氯苯基磺酰基氨基)丁基)-N-{3-((4-异丙基噻唑-2-基)甲基氧基)苄基}氨磺酰基}苯甲酸(S-36496)。

文中方法还可用于治疗及减轻与能刺激支气管收缩的胃食道反流(GERD)有关的内因性哮喘。GERD与保留的体分泌液、压抑的咳嗽和暴露于卧房的过敏原和刺激物能导致哮喘病症，并已统称为夜间哮喘。在治疗、抑制或减轻与GERD有关的哮喘的方法中，药学有效量的本发明化合物可如本文所述与药学有效量的GERD治疗药物组合使用。这些药物包括但不限于质子泵抑制剂，例如商标为PROTONIX.RTM.的缓释型泮托拉唑钠片剂，商标为PRILOSEC.RTM.的奥美拉唑缓释型胶囊，商标为ACIPHEX.RTM.的rebeprazole sodium缓释型片剂或商标为PREVACID.RTM.的缓释型兰索拉唑胶囊。

本发明的化合物可用作退热剂。本发明的化合物可在治疗疼痛(特别是与炎症有关的疼痛)的方法中使用。具体方法包括但不限于用于治疗：中枢介导的疼痛；外周介导的疼痛；肌肉骨骼疼痛；腰骶疼痛；结构或软组织损伤相关的疼痛；疾病(例如肿瘤及退化性疾病)进展相关的疼痛；神经病理性疼痛，可包括急性疼痛(例如急性损伤或创伤，手术前或手术后，偏头痛，牙痛等)，慢性疼痛(例如糖尿病末梢神经病变的神经病理性疼痛病症，带状疱疹后神经痛以及纤维肌痛)；以及炎症病症，例如骨关节炎或类风湿性关节炎；急性损伤或创伤的后遗症及癌症有关的疼痛。

本发明的化合物能用于减轻、抑制、缓解及/或治疗哺乳动物中的关节炎病症，包括但不限于类风湿性关节炎、脊椎关节病变、痛风性关节炎、感染性关节炎、骨关节炎(包括糜烂性骨关节炎且也称为骨关节病变或退化性关节疾病或DJD)、系统性红斑狼疮以及幼年型关节炎。这些方法中的每个包括对有此作用需要的哺乳动物给予药学有效量的如文中所述的本发明的取代的吲哚，或其药学上可接受的盐或酯。

此外，本发明的化合物能用于减轻、抑制、缓解及/或治疗与脊椎炎有关的关节炎病症，包括强直性脊椎炎、反应性关节炎(Reiter氏综合征)、银屑病关节炎、与慢性炎性肠疾病有关的关节炎以及AIDS有关的血清阴性脊椎关节病。

本发明还提供治疗、减轻或抑制风湿性疾病和病症的方法。这些方法可用于治疗系统性红斑狼疮、全身性硬化症和各种形式的硬皮症、多发性肌炎、皮肤肌炎、坏死性血管炎及其它血管病变、过敏性血管炎(包括紫斑症)、Wegener氏肉芽肿、巨细胞动脉炎、黏膜皮肤淋巴节综合征(Kawasaki病)、Behcet氏综合征、冷球蛋白血症、幼年型皮肌炎、氏综合征、重叠综合征(包括混合型结缔组织疾病)、风湿性多肌痛、结节性红斑、复发性多软骨炎、肌腱炎(腱鞘炎)、二头肌肌腱炎(Bicipital tendenitis)、黏液囊炎、鹰嘴突滑囊炎、肩关节粘连性关节炎(冰冻肩)、板机指以及Whipple氏病。

本发明的方法还可用于治疗、减轻或抑制具风湿性状态的代谢和内分泌疾病，包括痛风、假性痛风、软骨钙化、淀粉样变性、坏血病、专一酶缺乏状态(包括Fabry氏病、尿黑酸尿症、欧诺西病(Ochonosisi)、Lesch-Nyhan综合征以及Gaucher氏症)、高脂蛋白血症(II、IIa、IV型)、Ehlers-Danlos综合征、马方氏综合征(Marfan’s syndrome)、弹性假黄瘤、威尔森氏症(Wilson’s disease)。本发明方法也可治疗与内分泌疾病有关的风湿性状态，例如糖尿病、肢端肥大症、甲状旁腺机能亢进、进行性骨化性肌炎(myositis ossificans progressiva)、运动过度综合征、先天性多关节挛缩症，以及甲状腺疾病，例如甲状腺炎、甲状腺机能低下和甲状腺机能亢进。这些方法还可用于与肿瘤有关的风湿性状态，例如原发性瘤(滑膜瘤)、转移性瘤、多发性骨髓瘤、白血病和淋巴瘤、色素绒毛结节性滑膜炎(pigmented villonodular synovitis)、骨软骨瘤症及其它。本发明方法还包括缓解与神经病变性病症有关的风湿性状态，包括Charcot氏关节、手臂振动综合征(也称为振动诱发的白指症或雷诺氏症(Raynaud’s phenomenon))、反复应激综合征、反射交感神经性营养障碍及压迫性神经病变，例如周围神经嵌制(entrapment)(包括腕管综合征、旋前肌综合征、胸廓出口综合征以及跗管综合征)，神经根病变以及脊椎狭窄。

本发明进一步提供在哺乳动物中减轻、抑制、缓解或治疗关节炎病的方法，该方法包括对有其需要的哺乳动物给予药学有效量的磷脂酶(特别是如文中定义的磷脂酶A₂酶)的化学抑制剂以及药学有效量的抗风湿药。

用于关节炎病治疗的组合产品可包括市售可获得的抗风湿药，例如但不限于奈普生，其市售可获形式为EC-NAPROSYN.RTM.缓释片剂，NAPROSYN.RTM.，ANAPROX.RTM.以及ANAPROX.RTM.DS片剂以及来自Roche Labs的NAPROSYN.RTM.悬浮剂，商标为CELEBREX.RTM.的塞来考昔片剂，商标为VIOXX.RTM.的罗非考昔，商标为CELESTONE.RTM.的倍他米松，商标为CUPRAMINE.RTM.的青霉胺胶囊，商标为DEPEN.RTM.的可滴定青霉胺片剂，商标为DEPO-MEDROL的甲泼尼龙乙酸盐可注射悬浮剂，ARAVA.TM.来氟米特片剂，商标为AZULFIDIINE EN-tabs.RTM.的柳氮磺吡啶缓释片剂，商标为FELDENE.RTM.的吡罗昔康胶囊，CATAFLAM.RTM.双氯芬酸钾片剂，VOLTAREN.RTM双氯芬酸钠缓释片剂，VOLTAREN.RTM.-XR双氯芬酸钠延长释放片剂，ENBREL.RTM.可溶性受体(etanerecept)产品，(应添加其它生物剂用于RA)及其它市售可获抗风湿药。

也可用商标为GENGRAF.TM.的环孢菌素胶囊，商标为NEORAL.RTM.的环孢菌素胶囊或口服溶液，商标为IMURAN.RTM.的硫唑嘌呤片剂或IV注射液，商标为INDOCIN.RTM.吲哚美辛胶囊、口服悬浮液和栓剂，PEDIAPED.RTM.泼尼松龙磷酸钠口服溶液，商标为PLAQUENIL.RTM.的羟氯喹硫酸盐，商标为PRELONE.RTM.的泼尼松龙糖浆剂，REMICADE.RTM.的IV注射液用的英夫利昔单抗(infliximab)重组体，以及SOLU-MEDROL.RTM.注射用甲泼尼龙琥珀酸钠。

在本发明组合产品中也可用金化合物和可用于关节炎及风湿性病症治疗的产品，例如金诺芬或MYOCHRISYINE.RTM.硫代苹果酸钠金注射液。

这些产品中的每种可根据本领域公知的药学有效量和方案给药，例如医师案头手册(Physicians′Desk Reference)，55 Edition，2001，published by Medical Economics Co.，Inc.，Montvale，N.J.中所述的产品。

本发明的方法中，本发明的化合物还可与例如NSAIDs及阿司匹林及其它水杨酸盐类的止痛药和抗炎物质一起给药。可用药物的示例包括布洛芬(MOTRIN.RTM.，ADVIL.RTM.)、萘普生(NAPROSYN.RTM.)、舒林酸(CLINORIL.RTM.)、双氯芬酸(VOLTAREN.RTM.)、吡罗昔康(FELDENE.RTM.)、酮洛芬(ORUDIS.RTM.)、双氟尼柳(DOLOBID.RTM.)、萘丁美酮(RELAFEN.RTM.)、依托度酸(LODINE.RTM.)、奥沙普秦(DAYPRO.RTM.)、吲哚美辛(INDOCIN.RTM.)、麦利克(melicoxam)(MOBICOX.RTM.)、伐地考昔及衣特昔布(eterocoxib)。当以高剂量给药时，阿司匹林为抗炎物质，否则只为类似乙酰氨基酚(Acetaminophen)(TYLENOL.RTM.)的镇痛药。

与本发明方法一起使用的适当环氧化酶2(COX-2)抑制剂，包括但不限于2-(4-乙氧基-苯基)-3-(4-甲磺酰基-苯基)-吡唑并[1，5-b]哒嗪、CDC-501、塞来考昔、COX-189、4-(2-氧代-3-苯基-2，3-二氢唑-4-基)苯磺酰胺、CS-179、CS-502、D-1367、达布非酮、DFP、DRF-4367、氟舒胺、JTE-522(4-(4-环己基-2-甲基-5-唑基)-2-氟苯磺酰胺)、L-745337、L-768277、L-776967、L-783003、L-791456、L-804600、美洛昔康、MK663(艾托考昔)、尼美舒利、NS-398、帕瑞考昔、1-甲基磺酰基-4-(1，1-二甲基-4-(4-氟苯基)环戊-2，4-二烯-3-基)苯、4-(1，5-二氢-6-氟-7-甲氧基-3-(三氟甲基)-(2)-苯并噻喃并(4，3-c)吡唑-1-基)苯磺酰胺、4，4-二甲基-2-苯基-3-(4-甲基磺酰基)苯基)环丁烯酮、4-氨基-N-(4-(2-氟-5-三氟甲基)-噻唑-2-基)-苯磺酰胺、1-(7-叔丁基-2，3-二氢-3，3-二甲基-5-苯并呋喃基)-4-环丙基丁-1-酮，PharmaprojectsNo.6089(Kotobuki Pharmaceutical)、RS-1 13472、RWJ-63556、S-2474、S-33516、SC-299、SC-5755、伐地考昔、UR-8877、UR-8813，、UR-8880。根据本发明使用的更适当COX-2抑制剂，包括帕瑞考昔、MK663、4-(4-环己基-2-甲基-5-唑基)-2-氟苯磺酰胺(JTE-522)、尼美舒利、氟舒胺、DFP以及2-(4-乙氧基-苯基)-3-(4-甲磺酰基-苯基)-吡唑并[1，5-b]哒嗪，及其生理上可接受的盐类、酯类或溶剂合物。

这些组合物还可用于治疗月经痉挛、早产阵痛、肌腱炎、黏液囊炎、过敏性神经炎、巨细胞病毒感染、细胞凋亡(包括HIV诱发的细胞凋亡)、腰痛、肝病包括肝炎。

该方法亦可用于治疗胃肠道病症，例如炎性肠病、Crohn氏症、胃炎、肠易激综合征和溃疡性结肠炎，以及用于预防或治疗癌症，例如结直肠癌。本发明的化合物和组合物还可用于预防或治疗良性及恶性肿瘤/瘤，包括癌症，例如结直肠癌，脑癌，骨癌，上皮细胞衍生的瘤(上皮细胞癌)例如基底细胞癌，腺癌，胃肠道癌包括唇癌，口腔癌，食道癌，小肠癌及胃癌，结肠癌，肝癌，膀胱癌，胰腺癌，卵巢癌，子宫颈癌，肺癌，乳腺癌，以及皮肤癌例如鳞状细胞癌和基底细胞癌，前列腺癌，肾细胞癌，及其它已知影响全身上皮细胞的癌症。本发明组合物可对其特别有效的瘤为胃肠道癌，巴瑞特氏食道(Barrett′s esophagus)，肝癌，膀胱癌，胰腺癌，卵巢癌，前列腺癌，子宫颈癌，肺癌，乳腺癌，以及皮肤癌例如鳞状细胞癌及基底细胞癌。本发明的化合物和方法还可用于治疗放疗所发生的纤维化。这些组合物可用于治疗患有腺瘤性息肉(包括家族性腺瘤性息肉症(FAP))的患者。此外，这些组合物可用于预防有FAP风险的患者中的息肉形成。本发明的化合物可用于治疗癌症，因为它们具有抗血管生成的作用。

另外的用途包括治疗如下疾病中的炎症，所述疾病为血管疾病、偏头痛、结节性动脉周围炎、甲状腺炎、再生障碍性贫血症、Hodgkin氏病、硬皮病(sclerodoma)、风湿热、I型糖尿病、神经肌肉接头疾病(包括重症肌无力)、脑白质病变(包括多发性硬化症)、结节病、肾病综合征、Behcet氏综合征、多发性肌炎、牙龈炎、肾炎、过敏症、损伤后的肿胀(包括大脑水肿)、心肌局部缺血等。还包括治疗眼部疾病，例如视网膜炎、结膜炎、视网膜病变、葡萄膜炎、眼畏光以及眼组织的急性损伤。本发明的化合物将可用于治疗手术后的炎症，包括眼部手术，例如白内障手术或屈光手术。还包括治疗肺和上呼吸道炎症，例如与病毒感染和囊肿性纤维化有关的炎症，以及例如伴随骨质疏松的骨质吸收的炎症。这些化合物和组合物可用于治疗某些中枢神经系统病症，例如皮质性痴呆(包括阿尔茨海默氏病)、神经退化以及中风产生的中枢神经系统损伤、缺血和创伤。本发明的化合物也可用于治疗帕金森病。

治疗疼痛的方法包括对遭受此种疼痛的哺乳动物患者单独给予药学有效量的本发明化合物，或者与一种或多种另外的治疗疼痛或炎症或下面有关的医学病症的药学有效量的药物组合给药。可与本发明化合物组合给药的药物示例为止痛药、抗血管生成药、抗肿瘤生成药物。这些化合物也可与具有减轻疼痛特性的例如加巴喷丁和普瑞巴林的抗癫痫化合物组合。

本发明的这类组合方法包括对有其需要的哺乳动物给予药学有效量的本发明化合物和药学有效量的无毒性的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂和/或能至少阻断一种NMDA受体活化的主要细胞内结果的药物。可用于这些方法的NMDA受体拮抗剂的示例包括右美沙芬、右啡烷、金刚烷胺和美金刚，或其药学上可接受的盐类。

文中治疗炎症和炎性病症的另一方法包括将诱发的一氧化氮合成酶的抑制剂与本发明的化合物共同给药至有其需要的哺乳动物。此组合产品的给药在遭受或遇到异常低水平的一氧化氮合成酶(NOS)活性的哺乳动物中是有用的预防性或治疗性给药，上述哺乳动物特别是患有高血压或升高的肺高血压危险性、缺血性中风、心肌梗塞、心力衰竭、进行性肾病、血栓形成、再灌注损伤或神经系统退化症，例如阿尔茨海默氏病，或长期暴露于低氧状况下的哺乳动物。

本发明的方法还包括在有此治疗或预防需要的包括人类的哺乳动物中治疗或预防肿瘤病的方法。该方法包括用治疗有效量的本发明化合物与MMP抑制剂来治疗哺乳动物。这两种成分可另外任选与一种或多种选自抗血管生成剂、抗瘤剂、佐剂、免疫治疗剂、止痛药及/或放疗剂的药物组合。一种这类多种成分治疗法包括对有其需要的哺乳动物给予本发明的化合物、基质金属蛋白酶抑制剂和抗肿瘤剂。

本发明的方法及组合产品可用于治疗或预防肿瘤病症，所述肿瘤病症包括肢端雀斑样黑色素瘤(acral lentiginous melanoma)、光化性角化病、腺癌、腺样囊性癌(adenoid cycstic carcinoma)、腺瘤、腺肉瘤、腺鳞癌、星形细胞肿瘤、巴氏腺癌(Bartholin gland carcinoma)、基底细胞癌、支气管腺癌、毛细管、类癌、癌、癌肉瘤、海绵状(cavernous)、胆管癌、chondosarcoma、脉络丛乳头状瘤(choriod plexus papilloma)/癌、透明细胞癌(clear cell carcinoma)、囊腺瘤、内胚层窦瘤、子宫内膜增生、子宫内膜间质肉瘤、子宫内膜样腺癌、室管膜(ependymal)、类上皮细胞(epitheloid)、尤文氏肉瘤(Ewing’s sarcoma)、纤维层(fibrolamellar)、局灶性结节性增生、胃泌素瘤、生殖细胞肿瘤、胶质母细胞瘤、胰高血糖素瘤、血管母细胞瘤(hemangiblastomas)、血管内皮瘤、血管瘤、肝脏腺瘤(hepatic adenoma)、肝腺瘤病(hepatic adenomatosis)、肝细胞癌、胰岛素瘤、上皮内瘤(intaepithelial neoplasia)、上皮内(interepithelial)、鳞状细胞瘤、侵袭性鳞状细胞癌、大细胞癌、平滑肌肉瘤、雀斑恶性黑色素瘤、恶性黑色素瘤、恶性间皮肿瘤、神经管母细胞瘤、髓上皮瘤、黑色素瘤、脑膜的、间皮的、转移性癌、粘液表皮样癌、神经母细胞瘤、神经上皮腺癌(neuroepithelial adenocarcinoma)、结节性黑色素瘤、燕麦细胞癌、少突胶质的(oligodendroglial)、骨肉瘤、胰腺多肽、乳突状浆液性腺癌、松果体细胞、脑下垂体肿瘤、浆细胞瘤、假性肉瘤、肺母细胞瘤、肾细胞癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、肉瘤、浆液性癌、小细胞癌、软组织癌，促生长素抑制素分泌肿瘤(somatostatin-secreting tumor)、鳞癌(squamous carcinoma)、鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma)、间皮下的(submesothelial)、浅表扩散型黑色素瘤、未分化癌、葡萄膜黑色素瘤、疣状癌、血管活性肠肽瘤(vipoma)、高分化癌(well differentiated carcinoma)以及威氏肿瘤(Wilm′s tumor)。

可用于本文组合产品治疗法中的抗肿瘤药包括阿那曲唑、碳酸钙、卡培他滨、卡铂、顺铂、细胞途径CP-461、多烯紫杉醇、多柔比星、依托泊苷、氟脲嘧啶、fluoxymestrine、吉西他滨、戈舍瑞林、伊立替康、酮康唑、来曲唑、亚叶酸钙、左旋咪唑、甲地孕酮、米托蒽醌、紫杉醇、雷洛昔芬、视黄酸、他莫昔芬、塞替派、托泊替康、托瑞米芬、长春瑞滨、长春碱、长春新碱、硒(硒蛋氨酸)、熊脱氧胆酸、舒林酸(sulindac)砜、依西美坦以及依氟鸟氨酸(DFMO)、1-[4-(2-氮杂环庚-1-基-乙氧基)-苄基]-2-(4-羟基-苯基)-3-甲基-1H-吲哚-5-醇(也称为TSE-424)及2-(4-羟基-苯基)-3-甲基-1-(4-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苄基)-1H-吲哚-5-醇(也称为ERA-923)。

本发明还包括将文中化合物与蛋白质类白介素-1抑制剂(例如IL-1受体拮抗剂(IL-Ira))组合，用于预防或治疗哺乳动物中的炎性疾病的方法。这些方法所关注的急性和慢性白介素-1(IL-1)-介导的炎性疾病，包括但不限于急性胰腺炎；ALS；阿尔茨海默氏病；恶病质/厌食症；哮喘；动脉粥样硬化；慢性疲劳综合征；发热；糖尿病(例如胰岛素型糖尿病)；肾小球肾炎；移植物抗宿主排斥反应；溶血性休克；痛觉过敏；炎性肠病；关节的炎性病症，包括骨关节炎、银屑病关节炎以及类风湿性关节炎；缺血性损伤，包括脑部缺血(例如因创伤、癫痫、出血或中风(每种情况都可导致神经退化)造成的大脑损伤)；肺病(例如ARDS)；多发性骨髓瘤；多发性硬化症；骨髓性(例如AML及CML)以及其它白血病；骨髓病变(例如肌蛋白质代谢，特别是在败血症中)；骨质疏松症；帕金森氏症；疼痛；早产阵痛；银屑病；再灌注损伤；败血性休克；放疗的副作用；颞下颌关节病，肿瘤转移；或劳损、扭伤、软骨受伤、创伤、整形手术、感染或其它疾病过程导致的炎性病症。

本发明还提供一种方法，该方法为将一种或多种发明化合物给药至有其需要的女性，以基本上预防或降低女性生殖系统与产程启动或产程延长有关的变化。还提供一种基本上预防或降低怀孕期间的或与经血过多相关的子宫收缩。这些方法任选包括将本发明的化合物与孕激素(progestogen)、黄体酮(progestin)或促孕剂(progestational agent)共同给药。

胞质磷脂酶A₂α(cPLA₂α)为广泛表达的酶，优先介导随细胞活化的花生四烯酸的释放。花生四烯酸的生物活性代谢物(类花生酸类)被认为是血小板发信号的重要调节剂。类花生酸途径的抑制剂(例如阿司匹林)可降低血栓素A₂(TXA₂，为不稳定且有效的血小板激动剂)的形成，导致血小板功能(血栓形成)降低，且经证实在临床上降低发病率和死亡率。

本发明的化合物可抑制cPLA₂活性，该活性是供应花生四烯酸底物给环氧化酶-1或2以及5-脂肪氧合酶所必需的，这又启动分别生产前列腺素和白三烯。此外，cPLA₂活性是制造溶血磷脂(PAF前体)所必需的。因此，这些化合物可用于治疗和预防与白三烯、前列腺素或PAF有关的疾病。此外，在这些疾病中超过一个以上的物质起作用，预期cPLA₂抑制剂将比白三烯、前列腺素或PAF受体拮抗剂更有效，并且也比环氧化酶或5-脂肪氧合酶抑制剂更有效。

因此，本发明的化合物、药物组合物和方案可用于治疗和预防被环氧化酶-2、环氧化酶-1及5-脂肪氧合酶抑制剂以及PAF、白三烯或前列腺素受体拮抗剂治疗的疾病。

本发明还提供在哺乳动物中治疗或预防静脉或动脉血栓形成，或预防血栓形成的症状的发展，该方法包括对有其需要的哺乳动物给予药学上可接受量的本发明化合物或其药学上可接受的盐。在某些实施方案中，血栓形成是粥样血栓形成。

本发明的每一方法包括对有此类治疗需要的哺乳动物给予药学或治疗有效量的本发明化合物。在采用文中所述组合产品进行治疗时，应当理解给药另外包括药学或治疗有效量的上述讨论的第二种药物。文中所述的第二种或另外的药物可以以本领域公知的剂量和方案给药。

本发明的化合物还可被兽医用于治疗方法中，特别是用于治疗、抑制或减轻炎症和疼痛。应当理解，这些方法特别是可用于哺乳类宠物动物，例如狗及猫，以及用于农场的哺乳动物，例如牛、马、骡、驴、山羊、猪，绵羊等。这些方法可被兽医用于治疗各种类型的炎症和疼痛，包括但不限于与关节炎有关的疼痛和炎症、关节发育缺陷、例如髋关节发育不良的发育性关节缺陷、肌腱炎、悬韧带炎症、蹄叶炎、蹄筋及黏液囊炎(curb and bursitis)、或与手术、意外事故、创伤有关的疼痛炎症或例如莱姆病(Lyme Disease)的疾病。这些化合物还可用于治疗气道的炎症，例如哮喘、喉炎、气管炎、支气管炎、鼻炎以及咽炎。

这些兽医使用的方法包括对有其需要的哺乳动物给予药学有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐。本发明的化合物可结合本领域公知的其它用于治疗、抑制或减轻炎症或疼痛的药物或饮食补充品，用于人类或兽用的方法中。这些药物或饮食补充品可包括阿司匹林(包括阿司匹林缓释片，含Maalox的阿司匹林和肠包衣型阿司匹林)，COX-2抑制剂，例如塞来考昔，非乙酰基化羧酸，例如水杨酸镁，水杨酰胺或水杨酸钠，乙酸类，例如双氯芬酸或依托度酸，丙酸类例如布洛芬，萘普生(可获自商标为NAPROSYNO.RTM.及EQUIPROXEN.RTM.的)，酮洛芬，RIMADYL.RTM.(卡洛芬)，氟尼辛葡甲胺，芬那酸类例如托芬那酸，甲芬那酸(mefanamic acid)，甲氯芬那酸(ARQUEL.RTM.)或氟尼酸，烯醇酸类例如羟保松，保泰松，吡罗昔康或安乃近(dipyrone)或非酸性化合物如萘丁美酮。还可在兽用中使用的为二甲亚砜(DMSO)，奥古蛋白(orgotein)(例如商标为PALOSEIN.RTM.的奥古蛋白)，多硫酸化糖胺聚糖或PS-GAGs(例如商标为ADEQUAN.RTM.的多硫酸化糖胺聚糖)，透明质酸及其天然和合成类似物，酮洛酸三甲胺(Ketorolac trimethamine)(例如商标为TORADOL.RTM.)，FELDENE.RTM.(吡罗昔康)或METACAM.RTM.(美洛昔康)。

用于人类或兽医应用的饮食补充品包括葡萄糖胺、硫酸软骨素、甲磺酰基甲烷(MSM)以及Ω-3脂肪酸和其它冷水鱼油。本发明的化合物和方法还结合人类或兽用的物理治疗、按摩、脊椎按摩疗法和针灸治疗以及方案使用。这些药物和饮食补充品的每种都可使用本领域公知的方案和有效剂量给药至上述的哺乳动物。

每一专利、专利申请和发行的刊物(包括本专利文件提及的书籍)均以其全部内容在此引入作为参考。

本申请要求于2005年5月27日提交的美国专利临时申请60/685564的优先权，其全部内容在此引入作为参考。

本领域技术人员将理解，可对本发明的优选实施方案进行诸多变化和修改而不背离本发明的精神。所有这些变化落在本发明范围内。