一种二硫键稳定的抗氯霉素单链抗体及其构建方法和应用

摘要

本发明公开了一种二硫键稳定的抗氯霉素单链抗体及其构建方法和应用。本发明抗氯霉素单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明以抗氯霉素抗体可变区基因为模板，通过引物突变PCR在轻链和重链的可变区分别加入一个半胱氨酸定点突变，以重叠延伸PCR组装成二硫键稳定的抗氯霉素单链抗体基因，通过引物突变PCR在基因的5’端30bp序列内引入同义突变后，将基因转导入大肠杆菌表达系统中，表达的蛋白即为二硫键稳定的抗氯霉素单链抗体。本发明抗氯霉素单链抗体通过模拟天然抗体的结构，在单链抗体的基础上引入一对二硫键的构建形式，可以提高抗体的稳定性。本发明二硫键稳定的抗氯霉素单链抗体可以取代单克隆抗体用于氯霉素残留检测。