草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白原核表达载体构建及多克隆抗体制备方法

摘要

本发明提供了一种草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白原核表达载体构建及多克隆抗体制备方法，该原核表达载体构建制备方法至少包括：病毒RNA提取、PCR扩增、酶切、连接、草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白(VP7)基因测序及原核表达载体构建、感受态细胞的制备与重组质粒的转换、重组克隆的筛选及酶切鉴定、蛋白的表达纯化，注射小鼠，血清的采集。本发明将草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白(VP7)基因克隆至原核表达质粒中，并在大肠杆菌中大量表达和纯化，经免疫小鼠，以得到特异性好，浓度高的抗体，从而能大量制备出廉价的、高质量的抗草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白(VP7)的抗体，为免疫试剂的制备和免疫保护实验奠定了基础。