一种连续监测胎膜早破诊断工具及诊断方法

摘要

本发明涉及一种适于家用的非侵入性的连续监测胎膜早破诊断工具及诊断方法。一种所述连续监测胎膜早破诊断工具，分为上层的隔离过滤层、中层的测试系统和下层的吸收层，所述测试系统由含脲酶和pH指示剂的A型固相载体以及含pH指示剂的B型固相载体两部分组成。其诊断方法如下：当下体流出液同时浸润两片固相载体时，所述A型固相载体和B型固相载体上的显色有差异时，则为尿液，当所述A型固相载体和B型固相载体上的显色颜色和深浅程度完全相同时，则为羊水。其操作简便；敏感性及特异性较高；可连续监测间断性的羊水渗漏；即时性。

说明书

技术领域：

本发明涉及一种适于家用的非侵入性的连续监测胎膜早破诊断工具及诊断方法。

背景技术：

胎膜早破(premature rupture of membranes，PROM)的定义是临产前胎膜破裂，其发生率为2.7％-17％。胎膜早破可诱发早产及增加宫内感染和产褥感染机会。破膜48小时后分娩者，产妇感染率为5％-20％，败血症率为1∶145，产妇死亡率为1∶5500。胎儿吸入感染的羊水可发生肺炎、胎儿宫内窘迫。脐带脱垂发生机会增加。越临近妊娠足月，破膜后产兆发动率越高。

尽管及早发现胎膜早破具有很重要的临床意义，但是一般孕妇本人很难判断。少量的阴道流液或是先流液而后又停止(高位破水)，不能引起孕妇的注意，大量的阴道流液虽能引起孕妇的注意，但由于临产前一般会有轻微尿失禁，很多孕妇不能自行分辨是尿液还是羊水，因此不能确定是胎膜早破还是尿失禁。而外出就诊使诊断时间相对延后，破膜时间长，假阴性率增高，容易引起误诊。因此迫切需要可供家用的连续监测胎膜早破的产品，以便孕妇即时作出准确判断。

临床上90％的胎膜早破可通过阴道流液的病史和阴道窥器检查时有宫颈口流液或阴道后穹隆出现羊水池而作出诊断。10％的可疑PROM单纯依靠病史不能确诊，需借助于阴道液pH测定、阴道分泌物涂片镜下找羊齿状结晶或羊膜腔内注入染料、阴道冲洗液生化物质(如：AFP、hCG、PRL、纤连蛋白)检测等其他检查来辅助诊断。

阴道窥器检查，羊齿镜检，染色实验等准确度较高，但需专业仪器，需要操作人员具有一定的专业知识。费用较高，诊断等待时间长，侵入性高，操作不当会导致怀孕出血，感染，胎膜破裂，且怀孕失败的可能性为1比270。

阴道分泌物PH为4.7-6.5，健康人尿液为5.0-8.0，羊水PH为6.0-8.0。阴道液pH测定用石蕊试纸或硝嗪试纸，需直接在阴道中取样以避免尿液干扰，试验的准确率为93％。

综上所述，当前通常使用的诊断方法或不准确或入侵性高，或是两种弊端都有，并且其中任何一种方法都不能进行连续实时监测。

发明内容：

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种适于家用的非侵入性的连续监测胎膜早破诊断工具及诊断方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种连续监测胎膜早破诊断工具，分为上层的隔离过滤层、中层的测试系统和下层的吸收层，所述测试系统由含脲酶和PH指示剂的A型固相载体以及含PH指示剂的B型固相载体两部分组成。

其诊断方法如下：利用酶反应，使原本PH值范围相同或相近的两种体液的PH值产生差距，凭借适当的PH指示剂可显示肉眼可辨的颜色差异。可采用的其中一种方式，其中：A型固相载体和B型固相载体上的PH指示剂为在PH值为5.5-8.5之间显色逐级加深的单一PH指示剂或混合PH指示剂，A型固相载体和B型固相载体上固定的PH指示剂相同。

结果判定如下：当下体流出液同时浸润A型固相载体和B型固相载体时，若A型固相载体上显色深于B型固相载体，则为尿液，若A型固相载体和B型固相载体显色深浅程度相同，则为羊水。

所述诊断方法还可使用另一种方式，其前提为：A型固相载体和B型固相载体上的PH指示剂分别为在PH值为8上下时显色有明显变化的单一PH指示剂或混合PH指示剂，所述A型固相载体上的PH指示剂在PH为8以上变色，所述B型固相载体上的PH指示剂在PH为8以下变色。

结果判定如下：当下体流出液同时浸润两片固相载体时，A型固相载体和B型固相载体同时显色，则可判定为尿液，当只有B型固相载体显色时，则为羊水。

为了隔离过滤大分子尿蛋白，减少对测试系统的干扰，进一步的：所述隔离过滤层为高分子微孔过滤膜。

为了防止两个固相载体试剂的相互影响，导致检测结果不准确，进一步的：所述A型固相载体和B型固相载体之间采用不接触式的放置方法。当上下交叠放置时，其底面及边缘2mm处包覆有防渗隔离层。当左右平行放置时，两个固相载体之间有2mm以上的间隔。

为了便于用户使用，进一步的：所述吸收层为高吸水树脂及防漏膜，所述吸收层背面设有粘胶带和离型纸。

为了尽量减少酶反应释放的氨逸出到空气中，以及空气中二氧化碳接触PH指示剂而影响结果的准确性，在测试系统上设置一层保护层，进一步的：所述A型固相载体和B型固相载体上含有成膜剂。

为了A型固相载体和B型固相载体的工作效率达到最佳，进一步的：所述A型固相载体和B型固相载体为亲水性材质。

本发明与现有技术相比具有以下优点：1、操作简便，可直接检测流出液的PH值，无需放置入阴道后穹隆羊水池；2、敏感性及特异性较高，检测结果排除尿液干扰，避免假阳性；3、可连续监测间断性的羊水渗漏；4即时性。随时随地检测，可立即作出判断，最大可能避免滞后检验造成的假阴性，为高危产妇赢得宝贵的救治时间。

附图说明：

下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。

图1为本发明的一种结构示意图。

图2为本发明的另一种结构示意图。

图3为图1的A型固相载体和B型固相载体的结构示意图。

图中：1、防渗隔离层；2、隔离过滤层；3、A型固相载体；4、B型固相载体；5、吸收层。

具体实施方式：

如图1或图2所示的一种连续监测胎膜早破诊断工具分为三层，上层的隔离过滤层2，为半透明的可过滤隔离大分子尿蛋白的高分子微孔过滤膜；下层的吸收层5，含可吸收多余的渗漏液的高吸水树脂及防漏膜，下层背面有粘胶带和离型纸；中层的测试系统，其由含酶液和PH指示剂的A型固相载体3以及含有PH指示剂的B型固相载体4组成，上下两层边缘热压粘合，中间层被固定在当中不能任意滑动。所述A型固相载体3和B型固相载体4之间采用不接触式的上下交叠放置(图1)或左右放置(图2)，为了防止两个固相载体试剂的相互影响，导致检测结果不准确，在采用左右放置时，其左右间隔至少为2mm，采用上下交叠放置时，A型固相载体3和B型固相载体4底面及边缘2mm处包覆有防渗隔离层1(如图3所示)，所述A型固相载体3和B型固相载体4为亲水性材质。

为了提高酶的稳定性，在配制酶液时加入牛血清白蛋白或EDTA，从而来提高酶的稳定性。为了尽量减少酶反应释放的氨逸出到空气中，以及空气中二氧化碳接触PH指示剂而影响结果的准确性，在测试系统上设置一层保护层，在浸渍上述的A型固相载体3和B型固相载体4的浸渍液中含有成膜剂，所述成膜剂为聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮或醋酸纤维素，从而可使A型固相载体3和B型固相载体4上形成一层保护膜。

健康人尿液与羊水的PH区间存在重叠。尿液为5.0-8.0，多数7.2；羊水PH为6.0-8.0，多数7.0到7.5之间。脲酶与尿素反应释放氨使含有尿液的样品PH升高到8以上，与仅含羊水的样品PH值形成差异。通过观察PH指示剂的颜色反应区分羊水与尿液。

用户在使用时，撕去吸收层背面离型纸，将粘胶面粘贴在内裤裆部，即可将本发明诊断工具长时间固定在内裤上，实现连续监测。当下体流出液同时浸润A型固相载体3和B型固相载体4时，若A型固相载体3上显色深于B型固相载体4，则为尿液，若A型固相载体3和B型固相载体4显色深浅程度相同时，则为羊水。(其中：A型固相载体和B型固相载体上的PH指示剂为在PH值为5.5-8.5之间显色逐级加深的单一PH指示剂或混合PH指示剂，A型固相载体和B型固相载体上固定的PH指示剂相同。)

以下给出本发明的另一种诊断方法和其诊断方法中的固相载体的制备方法。

所述A型固相载体3的制备方法为：

第一步：取3MM试纸，用0.5％戊二醛水溶液处理2h。用蒸馏水洗涤，真空干燥。

第二步：40U/ml脲酶，牛血清白蛋白5g，EDTA 1g溶于PH6的MES缓冲液中，浸渍上述试纸2h，取出，真空干燥。

第三步：10ml丙酮中加入醋酸纤维素150mg，5％聚乙烯醇，0.1ml邻苯二甲酸二乙酯，0.2ml乙二醇乙醚与间甲酚紫0.003mg混合溶解，调节PH到6，将上述试纸浸入，30秒后取出，真空干燥。

所述B型固相载体4的制备方法为：

10ml丙酮中加入醋酸纤维素150mg，5％聚乙烯醇，0.1ml邻苯二甲酸二乙酯，0.2ml乙二醇乙醚与硝氮黄0.003mg混合溶解，调节PH到6，将3MM试纸浸入，30秒后取出，冷风吹干。

检测：用户在使用时，撕去吸收层背面离型纸，将粘胶面粘贴在内裤裆部，即可将本发明诊断工具长时间固定在内裤上，实现连续监测。

结果判定：当下体有流出液时，A型固相载体(3)和B型固相载体(4)被同时浸润，固定有硝氮黄指示剂的B型固相载体立即显色，此时固定有酶和间甲酚紫指示剂的A型固相载体无变化，随后如果在流出液中含有大量尿素，则在脲酶作用下，流出液PH值将升高至8以上，使A型固相载体上的间甲酚紫变色，说明流出液为尿液。因此当两片试纸同时显色时，可判定为尿液，只有一片显色时则为羊水。

需要强调的是：以上仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。