法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2016-05-18
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):C09B61/00 授权公告日:20121107 终止日期:20150329 申请日:20100329
专利权的终止
2012-11-07
授权
授权
2010-09-15
实质审查的生效 IPC(主分类):C09B61/00 申请日:20100329
实质审查的生效
2010-07-21
公开
公开
技术领域
本发明涉及一种色素分离纯化方法,具体涉及一种以水为溶剂的紫甘蓝色素提取方法。
背景技术
近年来医学毒理学研究发现用于食品、饮料的化学合成色素均有不同程度毒性,有的甚至具有致畸、致癌作用。随着科技发展,人们生活水平的提高和健康意识日益增强,许多人工合成色素逐渐为天然植物色素所取代。植物源色素是重要天然功能性食品添加剂,广泛应用于饮料、糖果、糕点、酒类及休闲食品等行业,而且也可用于医疗保健品及儿童食品等特殊食品的生产。天然植物色素的研究与开发方兴未艾,其中天然色素功能成分分离、纯化及其生物学活性研究已成为功能食品研究重要领域。
紫甘蓝(Brassinca Oleracea Var.capitata F.Rubra)属十字花科(cruciferae)芸薹属,又名紫卷心菜、紫包菜、回子包菜等,原产欧洲地中海地区。紫甘蓝作为一种食用性蔬菜,在我国已有一百多年的种植历史,大部分省区均有栽培,产量仅次于白包菜。由于紫甘蓝具有耐寒,来源丰富,价格低廉,色素含量高等优点,因此,以紫甘蓝为原料分离、纯化色素具有重要经济价值和良好的产业化前景。
从化学结构上讲,紫甘蓝色素属于花色苷类物质,具有重要的生理活性功能。科学研究发现,花色苷类物质可以清除体内自由基,具有抗氧化、抗衰老、改善视力、抑制肿瘤等功能。紫甘蓝色素易溶于水,安全无毒,是一种新型天然色素,可以作为重要功能性食品添加剂开发。然而,目前国内外紫甘蓝色素仅限于采用有机溶剂提取,色素的纯度低。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的缺点,提供了一种能够获得高纯度紫甘蓝色素的紫甘蓝色素提取方法。
针对上述技术问题,本发明提出了如下的技术方案:
1)将成熟紫甘蓝经清洗泥沙、去除根部、去除病虫害及残次包叶后切碎,将切碎的紫甘蓝与水按1∶5的质量比混合并置于打浆机中打成浆液,浆液用震动筛粗滤并收集滤液,调节滤液的pH值为3.0-4.5;
2)按100g紫甘蓝∶0.002-0.003ml的比例向滤液中加入复合果胶酶进行酶解澄清,将酶解澄清后的滤液以4000转/分离心20分钟,离心后所得上清液即色素清液;
3)将色素清液上大孔吸附树脂柱进行色素吸附,吸附完成后用乙醇溶液解吸色素得洗脱液,将洗脱液真空浓缩并回收乙醇,浓缩后的洗脱液经冷冻干燥即制得高纯度紫甘蓝色素。
所说的步骤1)调节滤液的pH值采用的是6mol/L的HCl。
所说的步骤2)的酶解温度为45-50℃,酶解时间为60分钟。
所说的步骤3)的大孔吸附树脂的型号为LSA-21,色素清液上柱流速为1.0倍柱体积/小时,上柱温度为20-50℃。
所说的步骤3)的吸附完成后用体积浓度为85%的乙醇进行解吸,且乙醇溶液上柱流速为1.5倍柱体积/小时,解吸温度为20℃。
所说的步骤3)的真空浓缩的压力为0.090~0.095MPa,温度为40~45℃,冷冻温度为-40℃~-50℃,压力为20~40Pa,加热板温度:65~110℃,冻干时间为16~22小时。
本发明所提取的紫甘蓝色素不仅纯度高、色价高,色值稳定,同时提高了紫甘蓝色素的生物活性,采用本发明紫甘蓝纯度达90%以上,且与乙醇有机溶剂提取的色素相比,色价提高12.6倍。
样品紫甘蓝纯度测定:
样品色价测定:
称取0.1000g色素粉末,以pH3.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液溶解,稀释定容至100mL,测定吸光度A530值,按下式计算色价。
A--530nm处吸光度值;
C-色素溶液质量百分数(%);
L-比色皿厚度(lcm)
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1:1)将成熟紫甘蓝经清洗泥沙、去除根部、去除病虫害及残次包叶后切碎,将切碎的紫甘蓝与水按1∶5的质量比混合并置于打浆机中打成浆液,浆液用震动筛粗滤并收集滤液,采用6mol/L的HCl调节滤液的pH值为3.0;
2)在50℃下按100g紫甘蓝∶0.002ml的比例向滤液中加入复合果胶酶在45℃酶解60分钟并澄清,将酶解澄清后的滤液以4000转/分离心20分钟,离心后所得上清液即色素清液;
3)将色素清液上LSA-21大孔吸附树脂柱进行色素吸附,色素清液上柱流速为1.0倍柱体积/小时,上柱温度为40℃,吸附完成后用体积浓度为85%的乙醇解吸色素得洗脱液,乙醇溶液上柱流速为1.5倍柱体积/小时,解吸温度为20℃,将洗脱液真空浓缩并回收乙醇,真空浓缩的真空度为0.095MPa,温度为40℃,浓缩后的洗脱液经冷冻干燥即制得高纯度紫甘蓝色素,冷冻温度为-40℃,压力为20Pa,加热板的温度:110℃(7h)→100℃(1h)→95℃(1.5h)→85℃(3h)→75℃(至结束),冻干时间为16小时。
实施例2:1)将成熟紫甘蓝经清洗泥沙、去除根部、去除病虫害及残次包叶后切碎,将切碎的紫甘蓝与水按1∶5的质量比混合并置于打浆机中打成浆液,浆液用震动筛粗滤并收集滤液,采用6mol/L的HCl调节滤液的pH值为3.5;
2)在45℃下按100g紫甘蓝∶0.002ml的比例向滤液中加入复合果胶酶在50℃酶解60分钟并澄清,将酶解澄清后的滤液以4000转/分离心20分钟,离心后所得上清液即色素清液;
3)将色素清液上LSA-21大孔吸附树脂柱进行色素吸附,色素清液上柱流速为1.0倍柱体积/小时,上柱温度为20℃,吸附完成后用体积浓度为85%的乙醇解吸色素得洗脱液,乙醇溶液上柱流速为1.5倍柱体积/小时,解吸温度为20℃,将洗脱液真空浓缩并回收乙醇,真空浓缩的真空度为0.092MPa,温度为43℃,浓缩后的洗脱液经冷冻干燥即制得高纯度紫甘蓝色素,冷冻温度为-40℃,压力30Pa,加入板温度:105℃(7h)→95℃(1h)→85℃(1h)→75℃(3h)→65℃(至结束),冻干时间为18小时。
实施例3:1)将成熟紫甘蓝经清洗泥沙、去除根部、去除病虫害及残次包叶后切碎,将切碎的紫甘蓝与水按1∶5的质量比混合并置于打浆机中打成浆液,浆液用震动筛粗滤并收集滤液,采用6mol/L的HCl调节滤液的pH值为4.0;
2)在45℃下按100g紫甘蓝∶0.003ml的比例向滤液中加入复合果胶酶在48℃酶解60分钟并澄清,将酶解澄清后的滤液以4000转/分离心20分钟,离心后所得上清液即色素清液;
3)将色素清液上LSA-21大孔吸附树脂柱进行色素吸附,色素清液上柱流速为1.0倍柱体积/小时,上柱温度为50℃,吸附完成后用体积浓度为85%的乙醇解吸色素得洗脱液,乙醇溶液上柱流速为1.5倍柱体积/小时,解吸温度为20℃,将洗脱液真空浓缩并回收乙醇,真空浓缩的真空度为0.090MPa,温度为45℃,浓缩后的洗脱液经冷冻干燥即制得高纯度紫甘蓝色素,冷冻温度为-50℃,压力为40Pa,加热板的温度100℃(7h)→90℃(1h)→80℃(2h)→70℃(3h)→65℃(至结束),冻干时间为20小时。
实施例4:1)将成熟紫甘蓝经清洗泥沙、去除根部、去除病虫害及残次包叶后切碎,将切碎的紫甘蓝与水按1∶5的质量比混合并置于打浆机中打成浆液,浆液用震动筛粗滤并收集滤液,采用6mol/L的HCl调节滤液的pH值为4.5;
2)在50℃下按100g紫甘蓝∶0.003ml的比例向滤液中加入复合果胶酶在46℃酶解60分钟并澄清,将酶解澄清后的滤液以4000转/分离心20分钟,离心后所得上清液即色素清液;
3)将色素清液上LSA-21大孔吸附树脂柱进行色素吸附,色素清液上柱流速为1.0倍柱体积/小时,上柱温度为30℃,吸附完成后用体积浓度为85%的乙醇解吸色素得洗脱液,乙醇溶液上柱流速为1.5倍柱体积/小时,解吸温度为20℃,将洗脱液真空浓缩并回收乙醇,真空浓缩的真空度为0.095MPa,温度为40℃,浓缩后的洗脱液经冷冻干燥即制得高纯度紫甘蓝色素,冷冻温度为-45℃,压力为30Pa,加热板的温度90℃(7h)→80℃(1h)→70℃(1h)→65℃(至结束),冻干时间22小时。
机译: 一种基本溶液中高浓度黄原黄素色素油的提取方法及游离黄原黄素的制备方法
机译: 仙人掌仙人掌中食用色素的提取方法及含有该色素的着色剂
机译: 无色素的鱼皮,尤其是扁平鱼的无色素鱼皮,作为胶原蛋白的新型工业来源,提取方法,胶原蛋白和生物材料