抗β－catenin单克隆抗体制备及在结肠癌病理检测中的应用

摘要

抗β－catenin单克隆抗体制备及在结肠癌病理检测中的应用，属于生物医药技术领域。本发明应用重组小鼠β－catenin蛋白，免疫Balb/c小鼠，应用杂交瘤技术，通过ELISA双筛得到1株抗β－catenin单抗1D3，其亚型为IgG2a。用免疫印迹法(Western blot)检测β－catenin抗体的纯度和特异性以及结肠癌细胞系SW48和HCT116中β－catenin蛋白的表达。用免疫组化SP法检测β－catenin在正常结肠组织和结肠癌组织中的不同表达。本发明制备了高效价、特异性的抗β－catenin单克隆抗体。用该抗体检测证实，正常结肠组织β－catenin表达在细胞膜中，而结肠癌组织β－catenin则在细胞浆中表达。提示结肠癌发生后β－catenin由细胞膜易位入细胞浆中表达，这可作为结肠癌的诊断的参考指标。