一种从枣中分级提取生物活性成分的方法

摘要

一种从枣中分级提取生物活性成分的方法，是将枣清选、去核、水洗、干燥、粉碎成颗粒，加入65～75％的乙醇提取2～3次，分离为枣渣和滤液；滤液浓缩得总黄酮醇溶性浸膏，枣渣中加入其重量10～15倍的去离子水提取2～3次，分离为水提液和残渣；水提液浓缩至原体积的1/8～1/6，加入浓缩液体积4～6倍的95％乙醇，醇沉分离10～18h，得沉淀物和滤液；沉淀物用98％以上的乙醇清洗2～3次，干燥得枣粗多糖，滤液经浓缩得到核苷酸水溶性浸膏；残渣干燥粉碎成膳食纤维粉。本发明方法实现了枣中多种活性成分的一次性分级提取，操作简单，除乙醇外未用其它有机溶剂，安全无毒、无残留，枣中所含生物活性成分尽被提取，物尽其用。

说明书

技术领域

本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及一种从枣中提取多种生物活性成分的方法。本发明采用同时分级提取工艺技术，从枣中提取总黄酮醇溶浸膏、枣粗多糖、核苷酸浸膏和膳食纤维。

背景技术

枣为鼠李科多年生落叶植物枣树的成熟果实，自古就被列为“五果”(桃、李、梅、杏、枣)之一，历史悠久。枣果实中含有各种生物活性成分(包括单双糖类、低聚糖、多糖、蛋白质、脂肪、有机酸、矿物质、核苷酸、三萜类化合物、类黄酮等)，具有多重的营养价值和保健功能，堪称是一座营养物质的天然宝库。枣是传统的药食同源植物，也是我国特有的生物资源。中医认为枣有补中益气、养血生津、安神镇疼和调节药效等功能。枣不仅营养丰富，而且味道可口，有“百果之王”的美称。

目前国内市场上的枣深加工产品很多，如干枣、蜜枣、枣片、枣酱、枣酒等，这些产品在加工时改变了枣果的色、香、味、形和质地，而且枣果中的特色营养和生物活性成分没有被充分利用。

随着枣研究开发的日益深入，关于提取枣果中多糖、核苷酸、类黄酮，以及从枣渣中提取多糖、三萜酸工艺技术的相关报道文献也越来越多。CN1175758C公开了一种从枣中分离提取环核苷酸糖桨、膳食纤维和枣蜡的方法，该方法采用乙醇提取，醇提残渣蒸干后制成枣膳食纤维粉，醇提液经有机溶剂萃取，分离出枣蜡，萃余液浓缩制成环核苷酸糖浆，实现了按枣的活性成分和理化性能开发多种产品的目的。CN101139402A公开了一种从大枣中提取多糖的方法，该技术将大枣用水提取，在水提液中加入澄清剂，经醇沉、分离、干燥后得到枣多糖。

以上两项技术存在着的共性缺陷是：一、在枣活性成分的提取过程中均使用了大量的有机溶液和化合物，不仅对环境造成了污染，最终产品中的残留也会带来食品安全问题；二、枣中富含多种活性成分，而上述技术只是各自提取了其中的一部分，没有做到综合提取，物尽其用。

发明内容

本发明提供了一种从枣中提取总黄酮醇溶浸膏、枣粗多糖、核苷酸浸膏和膳食纤维的方法，其目的是解决现有技术存在的有机溶液污染和枣资源得不到物尽其用的问题，通过分级综合提取，实现了枣中所含生物活性成分尽被提取的效果。

本发明的分级提取方法包括如下步骤：

(1)将枣清选、去核、水洗、干燥后，粉碎成10～40目的颗粒；

(2)在枣颗粒中加入65～75％的乙醇提取2～3次，分离为枣渣和滤液，滤液浓缩得含总黄酮的醇溶性浸膏；

(3)枣渣中加入占枣渣重量10～15倍的去离子水，在pH＝4～12的条件下进行提取，重复提取2～3次，分离为水提液和残渣；

(4)合并水提液，调节pH值至中性后，浓缩至原体积的1/8～1/6，加入浓缩液体积4～6倍的95％乙醇，缓慢搅拌，醇沉分离10～18h，得沉淀物和滤液，沉淀物用98％以上的乙醇清洗2～3次，干燥得枣粗多糖，滤液经浓缩得到含核苷酸的水溶性浸膏；

(5)残渣干燥后，粉碎成60～300目的膳食纤维粉。

其中，工艺中物料的干燥可以是鼓风干燥或者真空度0.06～0.095MPa下的真空干燥，在50～80℃干燥5～20h，至物料的含水量为5～20％。

工艺中的物料提取方法可以采用常规水浴法、超声波法、微波法中的一种或者几种的复合方式进行。其中的常规水浴法是在40～80℃条件下提取0.5～5h；超声波法是在40～80℃条件下以频率25～80KHz、功率50～1000W的超声波提取10～60min；微波法是在40～80℃条件下以频率30～100MHz、功率50～1200W的微波提取10～60min。

工艺中物料的浓缩采用减压浓缩，在温度40～90℃、压力0.04～0.095MPa的条件下进行。

本发明得到的醇溶性浸膏的主要成分是枣黄酮类物质。

本发明得到的大枣粗多糖的主要成分有水溶性多糖、粗蛋白和矿物质等多种，可以粉碎成60～100目的细粉，装入胶囊中，制备成枣果粗多糖提取物产品。

本发明得到的水溶性浸膏主要含核苷酸、单糖、双糖、低聚糖等水溶性成分，可以作为食品基料或与其他食品复配加工保健饮品。

最后的残渣机械粉碎至60～100目的细粉，或者先机械粗粉碎，进一步超微细粉碎，使细度达到100～300目，此粉状物的主要成分为膳食纤维。

本发明的主要优点是：(1)通过简单的提取工艺流程，实现了枣中多种活性成分的分离提取，与现有技术相比，具有操作简单、成本低的优势；(2)提取工艺中除使用食品加工常用的乙醇外，未使用其他任何有机溶剂，具有安全无毒、无残留的优点；(3)分离提取的几种活性成分各有不同的生理功能，可细分作为保健食品的原料或药品的中间体，做到物尽其用。

附图说明

图1为本发明从枣中分级提取生物活性成分的工艺流程示意图。

具体实施方式

实施例1

将成熟枣果剔除病虫害腐蚀等不可食部分，用流动自来水清洗干净，手工去核。称取1Kg枣果置于鼓风干燥箱中，于60～65℃干燥10h，至含水量10％左右。将干燥的枣果取出，冷却后，机械粉碎成10目的颗粒。

枣果颗粒中加入65％乙醇10L，50℃下以频率25KHz、功率200W的超声波超声提取40min，重复提取2次，静置分离。合并滤液，于60℃、0.08MPa下减压浓缩并回收乙醇，得到醇溶性浸膏460g，其主要成分是枣黄酮类物质。

醇提后得到的枣渣中加入10L去离子水，调节溶液pH＝7，采用常规水浴法提取，提取温度50℃，时间1.5h，离心分离为水提液和枣渣。枣渣重复提取2次，共得到水提液18.8L，枣渣1970g。

水提液于70℃、0.09MPa下减压浓缩至3.2L，再加入16L的95％乙醇，缓慢搅拌，醇沉分离10h以上，抽滤得到沉淀物32.5g，滤液18.3L。

将沉淀物用98％以上的乙醇清洗2次，每次300mL，40℃鼓风干燥，粉碎后得到枣果粗多糖提取物29.5g。其中多糖含量30.6％、水分12.1％。

滤液于50℃、0.09MPa下减压浓缩并回收乙醇，浓缩至可溶性固形物含量占65％，得到浸膏750g。浸膏中含有核苷酸、单糖、双糖、低聚糖等多种水溶性成分，其中核苷酸含量176mg。

醇提后的残渣置于鼓风干燥箱中，于60～65℃下干燥10h，至含水量10％以下，冷却，机械粉碎成80目的细粉120g，其中膳食纤维含量62.3％。

实施例2

将成熟枣果剔除病虫害腐蚀等不可食部分，用流动自来水清洗干净，手工去核。称取500g枣果置于鼓风干燥箱中，于60～65℃干燥10h，至含水量10％左右。将干燥的枣果取出，冷却后，机械粉碎成20目的颗粒。

枣果颗粒中加入70％乙醇6L，60℃下以频率40MHz、功率500W的微波提取30min，重复提取2次，静置分离。合并滤液，于63℃、0.09MPa下减压浓缩并回收乙醇，得到醇溶性浸膏238g，其主要成分是枣黄酮类物质。

醇提后得到的枣渣中加入4.5L去离子水，调节溶液pH＝5，采用常规水浴法提取，提取温度50℃，时间1h，调节溶液pH值为中性，离心分离为水提液和枣渣。枣渣重复提取3次，共得到水提液12.8L，枣渣970g。

水提液于75℃、0.09MPa下减压浓缩至1.6L，加入9.6L的95％乙醇，缓慢搅拌，醇沉分离10h以上，抽滤得到沉淀物15.5g，滤液10.7L。

将沉淀物用98％以上的乙醇清洗2次，每次120mL，45℃鼓风干燥，粉碎后得到枣果粗多糖提取物13.8g。其中多糖含量38.4％、水分11.7％。

滤液于60℃、0.08MPa下减压浓缩并回收乙醇，浓缩至可溶性固形物含量占63％，得到浸膏362g。浸膏中含有核苷酸、单糖、双糖、低聚糖等多种水溶性成分，其中核苷酸含量86mg。

醇提后的残渣置于鼓风干燥箱中，于60～65℃下干燥10h，至含水量10％以下，冷却，机械粗粉碎，进一步超微细粉碎成250目的细粉97g，其中膳食纤维含量64.4％。

实施例3

将成熟枣果剔除病虫害腐蚀等不可食部分，用流动自来水清洗干净，自动去核机去核。称取1kg枣果置于鼓风干燥箱中，于60～65℃干燥12h，至含水量8％左右。将干燥的枣果取出，冷却后，机械粉碎成40目的颗粒。

枣果颗粒中加入70％乙醇10L，于60℃水浴提取2h。重复提取3次，静置分离。合并滤液，于58℃、0.07MPa下减压浓缩并回收乙醇，得到醇溶性浸膏505g，其主要成分是枣黄酮类物质。

醇提后得到的枣渣中加入9.2L去离子水，调节溶液pH＝11，采用微波法提取，频率50MHz，功率800W，温度50℃，时间30min，调pH为中性，离心分离为水提液和枣渣。枣渣重复提取2次，共得到水提液17.3L，枣渣1710g。

水提液于75℃、0.09MPa下减压浓缩至2.5L，再加入10L的95％乙醇，缓慢搅拌，醇沉分离14h以上，抽滤得到沉淀物35.4g，滤液11.6L。

将沉淀物用98％以上的乙醇清洗2次，每次350mL，45℃鼓风干燥，粉碎后得到枣果粗多糖提取物32.9g。其中多糖含量35.4％、水分12.6％。

滤液于60℃、0.08MPa下减压浓缩并回收乙醇，浓缩至可溶性固形物含量占73％，得到浸膏722g。浸膏中含有核苷酸、单糖、双糖、低聚糖等多种水溶性成分，其中核苷酸含量168mg。

醇提后的残渣置于鼓风干燥箱中，于60～65℃下干燥10h，至含水量10％以下，冷却，机械粗粉碎，进一步超微细粉碎成180目的细粉106g，其中膳食纤维含量63.6％。