一种适合双向电泳的枣蛋白质提取方法

摘要

一种适合双向电泳的枣蛋白质提取方法，以0.2g枣树叶片、枝皮或花为试材，在液氮中充分研磨后，转移到10mL离心管；加－20℃冻存的丙酮清洗样品粉末2次，4℃10000g离心5min，取沉淀；再用－20℃冻存的10％三氯乙酸(丙酮配制)洗沉淀4次至无色；用常温10％三氯乙酸水溶液和－20℃冻存的丙酮分别洗沉淀2次，沉淀室温干燥30min，得到蛋白粗提干粉，称干粉0.05－0.1g，溶于苯酚和SDS溶液中，充分涡旋30s，10000g离心5min，将上层酚相吸出，置于新离心管中，加5倍体积的－20℃冻存的冷甲醇与0.1M醋酸铵混合液到苯酚相，置于－20℃30min，离心后，用－20℃冻存的冷甲醇与0.1M醋酸铵混合液洗沉淀2次，－20℃冻存的丙酮洗沉淀2次，沉淀室温干燥30min，即可获得高质量的蛋白粉末，完全能满足后续双向电泳分析的要求。