刺五加茶树的栽培方法及具有增强免疫力功能的五加参枣茶

摘要

本发明涉及“刺五加茶树的栽培方法及具有增强免疫力功能的五加参枣茶”，属于保健茶领域。刺五加茶树的栽培方法，其特征在于：(1)用大豆饼作为根部肥施用；(2)刺五加蕊叶采摘前一周每天喷洒叶面肥，所述叶面肥由大枣提取物与人参蒸馏水配制而成。由其茶树制备成的五加参枣茶，没有其余配料，使免疫力低下者在饮用本保健茶时能明显增加机体免疫力，同时该茶叶饮用非常方便、没有碎末，同时口味酸甜适中。临床验证，本发明保健茶除了具有增强免疫力之功效以外，还能平衡血压、缓解体力疲劳、延缓衰老、降低头痛之发生率、增加记忆力、有的人还具有增加工作强度的作用。饮用该茶无任何毒副作用和不良反应。

说明书

技术领域

本发明涉及保健茶领域，特别是涉及一种刺五加栽培方法及具有增强免疫力功能的保健茶。

背景技术

人体理想的免疫功能应该是充分发挥对机体健康有利的作用，尽可能地减少或消除对机体不利的影响。在长期的研究和实践当中，人们发现自然界存在着许许多多能够调节机体免疫功能的物质，这些物质在调动机体免疫机能、提高机体抗病能力、维持着自身生理平衡等方面发挥了积极的作用。

中国具有悠久的茶文化，很多人把喝茶当作一种生活的享受。而市场上出现的很多具有特殊功能的保健茶，是由茶叶及一些保健食品配制而成，为了使其有效成分更好的溶解在水中，这些保健食品一般都粉碎成小颗粒，因此这种保健茶多装在小纸袋或是无纺布袋中，喝茶时把袋装茶直接放入杯中加水浸泡饮用，但是这些相关产品的质地都存在着情况不同的缺陷。比如：现有技术已公开了一种具有增强免疫力功能的保健茶，如专利申请号02109604.X中公布的刺五加绿茶，是由刺五加原浆提取物和绿茶为原料制成，这种茶可能因为颗粒小而漏袋，在饮用时要静置一会儿，而且不会有常规茶浸泡在杯中的视觉效果，因此对于那些喜爱品茶的人来说，他们是不喜欢饮用袋装茶的。

发明内容

针对上述领域中的缺陷，本发明提供一种刺五加茶树的栽培工艺及由该茶树制得的具有增强免疫力功能的五加参枣茶，不用添加其余原料及辅料，而是通过优化刺五加茶树的栽培工艺，使免疫力低下者在饮用本保健茶时能明显增加机体免疫力，同时该茶叶饮用非常方便、口味适中。

刺五加茶树的栽培方法，其特征在于：(1)用大豆饼作为根部肥施用；(2)刺五加蕊叶采摘前一周施加叶面肥，所述叶面肥由大枣提取物与人参蒸馏水配制而成。

所述大豆饼的施加量为80-100公斤/亩。

所述根部施肥是将大豆饼粉碎至30-60目后埋入刺五加茶树根部。

所述根部施肥时期为秋季上冻封地之前。

所述大枣提取物为大枣的乙醇提取物，所用乙醇浓度为60％。

所述大枣提取物与人参蒸馏水的重量比为1∶8-10。

所述叶面肥的喷洒量为80-100Kg/亩刺五加茶树，每次喷洒以叶面不滴流为准。

所述叶面肥的喷洒时间为下午3点后进行。

具有增强免疫力功能的保健茶即五加参枣茶，由上述方法栽培的刺五加茶树的蕊叶炒制而成。

刺五加茶树通过特殊的栽培工艺即根部施肥和叶面施肥相结合的方式，在每年秋季上冻封地前根部施用大豆饼按每亩100公斤的重量份，按株在刺五加茶树根部刨一小坑将适量的大豆饼粉碎后施入，然后以土封盖，来年早春期间所施粉体即会融化于土中被植物根部吸收；在刺五加蕊叶采摘前一周进行叶面施肥，将大枣的乙醇提取物与人参蒸馏水配制成叶面肥喷洒在刺五加茶树叶上，通过叶面气孔进入蕊叶中并参与刺五加植株的体循环。

刺五加蕊叶是初春刺五加茶树新发出的嫩茎尖上的叶，将刺五加蕊叶采摘下来，按常规方法炒制茶叶，制得本发明保健茶。

实验证明，按本方法栽培制得的保健茶较常规栽培方法制得的刺五加茶其刺五加多糖含量要高，而刺五加多糖是真正起增强免疫功能的主要成分。

刺五加中含刺五加多糖和刺五加苷A(eleutheroside A-β-谷甾醇葡萄糖苷)、刺五加苷B(紫丁香苷syringin)、刺五加苷B1(6，8-二甲氧基香豆素-7-葡萄糖苷)、刺五加苷L(乙基半乳糖苷)、刺五加苷D和E(为二种不同构型的紫丁香树脂酚的葡萄糖苷)等，起增强免疫力功效的为刺五加多糖。我们在试验研究刺五加多糖对正常小鼠及免疫抑制小鼠免疫器官细胞数目和体视学参数的影响。结果表明，刺五加多糖能增强小鼠脾脏和肠系膜淋巴结的细胞数目、脾脏白髓总体积和淋巴结皮质总体积，能明显对抗环磷酰胺所致的免疫抑制作用。结论：刺五加多糖有增强小鼠免疫功能的作用。这也是刺五加多糖具有对人体增强免疫力功能的主要作用。

大枣含有机酸、三萜苷类、生物碱类、黄酮类、糖类、维生素类以及谷甾醇、豆甾醇、链甾醇，亦含有cAMP和cGMP。有机酸类有：桦木酸、齐墩果酸、山楂酸、苹果酸、酒石酸、儿茶酸、油酸等。三萜苷类有：山楂酸-3-O-顺式-对-香豆酰酯。黄酮类有、6，8-二葡萄糖基-2(R)-柑橘素、芦丁等。大枣中所含糖类主要是葡萄糖，亦含果糖、蔗糖、由葡萄糖和果糖组成的低聚糖、阿拉伯聚糖及半乳醛聚糖等。另外，还发现大枣中存在一种酸性多糖，命名为大枣果胶A。大枣中尚含有维生素C、核黄素、硫胺素、胡萝卜素、尼克酸等多种维生素。此外，大枣中尚含树脂、黏液质、香豆素类衍生物、儿茶酚、鞣质、挥发油、13种氨基酸及钙、磷、铁、硒等36种微量元素。

大枣为鼠李科植物酸枣Zizipgus jujube Mill.的成熟果实，亦名红枣(《医学入门》)、干枣(《名医别录》)。味甘，性温。归脾、胃经。功能：补脾和胃、益气生津、调营卫、解药毒。

用环磷酰胺引致小鼠免疫低下，结果表明大枣多糖可显著促进免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞IL-Ia的产生及活性，促进体外脾细胞增殖。结论：大枣多糖有明显免疫兴奋作用。

我们又试验大枣多糖对脾细胞产生和分泌白介(interleukin-2，IL-2)和血清可溶性白介素-2受体(soluble interleukin-2 receptor，SIL-2R)水平的影响以及作用机制。用放血与环磷酰胺并用致免疫低下小鼠为研究对象，分为大、中、小剂量(剂量分别为400、200、100mg/kg)的大枣多糖水溶液组，当归补血口服液缓组(6.6ml/kg，原药液稀释3倍)及同体积生理盐水组，另设完全空白对照组，每组6只。造模同时给药，连续7d，测定小鼠脾细胞lL-2的产生及活性和血清SIL-R水平。结果表明，大、中、小剂量大枣多糖组和当归补血口服液组均可显著提高1∶2和1∶4稀释度免疫抵制小鼠脾细胞lL-2的产生和活性，与模型组比较，差异有显著性意义(t＝5.2～8.4，P＜0.01)以中剂量大枣多糖组对免疫抵制小鼠脾细胞lL-2产生及活性影响作用为最强。大、中、小剂量大枣多糖组及当归补血口服液组均可显著降低血清SIL-2R水平。与模型组比较，差异有显著性意义(t＝14.1～16.3，P均＜0.01)，以中剂量大枣多糖对血清SIL-2R水平的影响最为显著。结论：大枣多糖可促进免疫抵制小鼠脾细胞产生和分泌IL-2，降低血清SIL-2R水平。

我们又试验大枣注射液对小鼠免疫功能的影响。用100％大枣注射液给小鼠皮下注射，观察小鼠胸腺及脾重量、血清溶菌酶含量、T淋巴细胞酸性a-醛酸奈脂酶(ANAE)百分率及T淋巴细胞转化率。结果表明，实验组小鼠胸腺及脾重量增加，血清溶菌酶含量增加，T淋巴细胞ANAE活性升高，T淋巴细胞转化率增高。结论：大枣注射液能使小鼠免疫器官重量增加，并能增强小鼠非特异性免疫功能及特异性细胞免疫功能。

人们在人参产区利用鲜人参为原料，在加工红参时，有一道工序是蒸参，在这道工序中，产生了大量的人参蒸馏水，每加工100kg人参，可产生150kg左右的人参蒸馏水，这些蒸馏水一般都被白白扔掉，都没有进行过综合利用，我们经过试验证明，这些人参蒸馏水含有大量的人参皂苷，完全可以充分利用其在人参加工过程中，在蒸参时就已自然同时完成的高温灭菌，并且利用红参加工生产期间的外界自然温度(一般平均温度为-5℃至5℃)，这个温度有利于这些人参蒸馏水可以在容器内存放、保管至来年的四、五月间的生产使用期。

本发明优化了刺五加茶树的栽培方法，通过以根部施肥那样的植物吸收养分的办法，将加工制成的大豆饼粉填埋于刺五加植物的根部；又采用如同对植物叶面进行施肥、施水那样的办法将我们配制成的混合溶液，在采摘刺五加蕊叶前适当的时间进行叶面喷洒、进行植物吸收和光合作用，使刺五加茶叶的免疫功能得到提高。

本发明保健茶，分别给予体力劳动者和脑力劳动者、学生、老人等适宜人群服用，从而将身体各部位调整至舒畅的状态，明显缓解各种原因引起的体力疲劳和精神紧张、疲劳，从而常见病减少，精力充沛，得以实现本发明所具有的增强免疫力之功能。

大豆饼为大豆炼油后的残渣，常用作动物饲料及作物的大分子有机肥。人参蒸馏水是蒸制人参时的水溶液，常是直接排放掉，但在蒸制人参的过程中或多或少有一些人参有效成分溶解在水中，因此上述两类原料均是废物利用，成为刺五加茶树的绝好肥料。刺五加作为茶叶早有应用，但其味苦，一般人难于下咽，本发明优选的大枣这味药食两用药材并辅以人参蒸馏水，它们除了对增强免疫力有功效外，同时利用其酸、甜、和人参特有的甘、香味来调节茶水的口味，使本发明的保健茶成为消费者乐于接受的大众产品。

本发明保健茶没有其余配料，而是通过优化刺五加茶树的栽培工艺而制成本发明保健茶，使免疫力低下者在饮用本保健茶时能明显增加机体免疫力，同时该茶叶饮用非常方便、没有复合茶叶形成的碎末，同时口味酸甜适中。

本发明具有增强免疫力功能的保健茶的服用方法：

(1)需要增强免疫力者只要用80℃热开水冲泡后饮用即可。

(2)可将本发明的茶制成滤纸袋泡茶，以方便饮用。

(3)本品冲泡后冷热饮用均可，效果不变。

许多适宜人群在试饮用本发明的茶后普遍反应头脑清醒，感觉轻松，身体疲劳得到缓解，免疫机能得到改善，大部分都摆脱了多年相关的药品。

临床验证，本发明保健茶除了具有增强免疫力之功效以外，还能平衡血压、缓解体力疲劳、延缓衰老、降低头痛之发生率、增加记忆力、有的人还具有增加工作强度的作用。饮用该茶无任何毒副作用和不良反应。

具体实施方式

下面结合实施例和实验对本发明作进一步的详细说明。

实施例1

1.1根部施肥

在每年秋季上冻封地前还要用如同施肥一样的方法，按每亩80公斤的重量份，称取大豆饼粉碎至30-60目的粉备用，组织人员按株在刺五加植物根部刨一小坑将适量的大豆饼备用粉施入，然后以土封盖。来年早春期间所施粉体即会融化于土中被植物根部吸收。

1.2叶面施肥

喷洒量与刺五加蕊叶的比例：每亩种植刺五加植物为4200株，每株蕊叶产量为0.05kg，每亩刺五加蕊叶的鲜叶产量为210kg，大枣提取物和人参蒸馏水(1∶10)兑制水溶液喷洒量为80kg/亩，鲜茶折干后为21kg/亩。

1.2.1称取原料药材：大枣100Kg，上述原料的标准按《中华人民共和国药典》2005年版一部项下。

1.2.2将大枣用60％乙醇回流3小时，提取两次，回收乙醇并浓缩，浓缩采用真空浓缩。真空浓缩又称减压浓缩，在较低温度下蒸发，不仅可以节省大量能源；同时，由于物料不受高温影响，避免了热不稳定成分的破坏和损失，更好地保存了原料的营养成分和香气。浓缩后在50-60℃下干燥，制得干浸膏28kg；

1.2.3将其干浸膏粉碎成200目粉，然后按照1∶10的比例加入到人参蒸馏水中，制成人参蒸馏水水溶液308kg。

1.2.4选择在摘取刺五加蕊叶的季节，每摘取前的一周，用制成的水溶液I，装入备好的质量合格的规格适应的喷雾器内，组织经培训好的技术人员，对即将摘取的刺五加蕊叶的植物叶面，实施按每亩80kg的水溶液分三次计量喷雾。每天下午3时后进行，(喷后如遇雨天需要补喷)，连续实施一周。

1.2.5选择天气晴好的早晨，组织经培训好的技术人员，进行刺五加蕊叶的摘取工作。摘取下来的新鲜蕊叶，要放在不锈钢制成的晾晒网盘内，不能成堆堆放，防止发热、霉变。

1.2.6按常规方法炒制茶叶，压饼或装袋，即为本发明保健茶。

实施例2

2.1根部施肥

在每年秋季上冻封地前还要用如同施肥一样的方法，按每亩100公斤的重量份，称取大豆饼粉碎至30-60目的粉备用，组织人员按株在刺五加植物根部刨一小坑将适量的大豆饼备用粉施入，然后以土封盖。来年早春期间所施粉体即会融化于土中被植物根部吸收。

2.2叶面施肥

喷洒量与刺五加蕊叶的比例：每亩种植刺五加植物为4200株，每株蕊叶产量为0.05kg，每亩刺五加蕊叶的鲜叶产量为210kg，大枣提取物和人参蒸馏水(1∶8)兑制水溶液喷洒量为100kg/亩，鲜茶折干后为21kg/亩。

2.2.1称取原料药材：大枣100Kg，上述原料的标准按《中华人民共和国药典》2005年版一部项下。

2.2.2将大枣用60％乙醇回流3小时，提取两次，回收乙醇并浓缩，浓缩采用真空浓缩。真空浓缩又称减压浓缩，在较低温度下蒸发，不仅可以节省大量能源；同时，由于物料不受高温影响，避免了热不稳定成分的破坏和损失，更好地保存了原料的营养成分和香气。浓缩后在50-60℃下干燥，制得干浸膏28kg；

2.2.3将其干浸膏粉碎成200目粉，然后按照1∶8的比例加入到人参蒸馏水中，制成人参蒸馏水水溶液252kg。

2.2.4选择在摘取刺五加蕊叶的季节，每摘取前的一周，用制成的水溶液I，装入备好的质量合格的规格适应的喷雾器内，组织经培训好的技术人员，对即将摘取的刺五加蕊叶的植物叶面，实施按每亩100kg的水溶液分三次计量喷雾。每天下午3时后进行，(喷后如遇雨天需要补喷)，连续实施一周。

2.2.5选择天气晴好的早晨，组织经培训好的技术人员，进行刺五加蕊叶的摘取工作。摘取下来的新鲜蕊叶，要放在不锈钢制成的晾晒网盘内，不能成堆堆放，防止发热、霉变。

2.2.6按常规方法炒制茶叶，压饼或装袋，即为本发明保健茶。

实验例1

本保健茶即五加参枣茶的增强免疫力功能学试验标准，依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003)年版进行，试验结果如下：

1.材料与方法

1.1试验材料：本发明实施例1制得的五加参枣茶；成人推荐量每日2g/d。按成人60kg体重计，即33mg/(kg·体重)。

1.2试验动物：清洁级BALB/c小鼠，雄性，200只，18～22g，购自湖北省实验动物研究中心，合格证号为医动字第2006-0812号。

1.3剂量选择：试验设三个剂量组：10倍人体摄入量[0.33g/(kg·体重)]组、20倍人体摄入量[0.67g/(kg·体重)]组、30倍人体摄入量[1.00g/(kg·体重)]组和对照组。小鼠灌胃体积为0.2ml/10g·体重。

1.4主要仪器与试剂：5mm直径打孔器、显微镜、微量血凝试验板、离心机、酶标仪、96孔培养板、5％CO₂培养箱、200目筛网、注射用墨汁、刀豆蛋白A(ConA)、MTT、DNFB、丙酮、麻油、脱毛剂、SPBS、生理盐水、鸡红细胞、甲醇、Giemsa染液、YAC-1细胞、Hanks液(pH7.2～7.4)、RPMI 1640完全培养液、乳酸锂、碘硝基氯化四氮唑(INT)、吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)、NAD、Tris-HCI缓冲液(pH8.2)1％NP40、台盼兰、1mol/L盐酸等。

1.5实验方法

1.5.1碳廓清实验和脏器/体重比值测定：实验末期，小鼠稳重后，按体重从小鼠尾静脉注入稀释的印度墨汁(100mL/kg)，注入墨汁后2、10min，分别从内眦静脉丛取血20uL，并立即将其加到2mL 0.1％NaCO₃溶液中。用721分光光度计在600nm处测光密度值(OD)，以NaCO₃溶液做空白对照。将小鼠处死，解剖动物，取出肝脏、脾脏及胸腺，用滤纸吸干血迹后稳重。

1.5.2迟发型变态反应(DTH)：将试验材料给小鼠连续灌胃30d后，每鼠腹部皮肤用脱毛剂进行脱毛处理，范围约3cm×3cm，后用DNFB溶液50uL均匀涂抹致敏；5d后，再用DNFB溶液10u L均匀涂抹于小鼠右耳两面，进行攻击；24h后，颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右两耳，用打孔器取下直径5mm的耳片称重。

1.5.3半数溶血值(HC₅₀)的测定和抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)：将试验材料给小鼠连续灌胃30d后，每只腹腔注射2％(体积分数)SRBC的细胞悬液0.2mL进行免疫。5d后，取小鼠血及脾脏分别做半数溶血值(HC₅₀)的测定和抗体生成细胞检测。

1.5.3.1半数溶血值(HC₅₀)的测定：将小鼠摘除眼球取血于离心管中，放置约1h，使血清析出，2000r/min离心10min，收集血清。用生理盐水稀释血清(300倍)，将稀释后的血清1mL置试管内，依次加入10％(体积分数)SRBC 0.5mL，补体1mL(用生理盐水按1∶10稀释)，另设不加血清的对照管(以生理盐水代替)，置37℃恒温水浴中保温15～30min后，冰浴终止反应。2000r/min离心10min，取上清液1mL，加都氏试剂3mL于试管内，同时取10％(体积分数)SRBC 0.25ml加都氏试剂至4mL，于另一支试管内，充分混匀，放置10min后，于540nm处以对照管作空白，分别测定各管光密度值。

1.5.3.2抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)：取SRBC免疫5d后的小鼠脾脏，放在盛有Hanks液的小平皿内，轻轻磨碎脾脏，经200目筛网过滤，制成单细胞悬液。离心10min(1000r/min)，用Hanks液洗两次，将细胞悬浮于5mL RPMI 1640培养液中，计数细胞，并将细胞浓度调整为5×10⁶个/mL。将表层培养基加热溶解后，与等量PH7.2～7.4、2倍浓度的Hanks液混合，分装小试管，每管0.5mL，再向管内加50uL10％SRBC，20UL脾细胞县液，迅速混匀，倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，做平行片，等琼脂凝固后，将玻片扣放在片架上，放入CO₂培养箱中孵育1～1.5h后，计数溶血空斑数。

1.5.4小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)：将试验材料给小鼠连续灌胃30d后，每鼠腹腔注射2％鸡红细胞悬液1mL。30min后，颈椎脱臼处死动物，仰位固定于蜡板上，正中剪开腹壁皮肤，经腹腔注入生理盐水2mL，转动鼠板1min，然后吸出腹腔洗液1mL，平均分滴于2片载玻片上，放入垫有湿纱布的搪瓷盒内，于37℃孵箱温育30min.孵毕，在生理盐水中漂洗，除去未贴片细胞.晾干，以1∶1丙酮甲溶液固定20min，4％(体积分数)Giemsa-磷酸缓冲液染色3min，再用蒸馏水漂洗凉干，于显微镜下计数巨噬细胞。

1.5.5 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验和小鼠NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶LDH测定法)：将试验材料给小鼠连续灌胃30d后，颈椎脱臼处死，无菌取脾，置于盛有适量无菌Hanks液的小平皿中，用镊子轻轻将脾撕碎，经200目筛网过滤，制成单细胞悬液，将细胞悬液分为两部分，分别于ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验和小鼠NK细胞活性测定。

1.5.5.1 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验：用Hanks液洗涤细胞悬液2次，每次离心10min(1000r/min)，然后将细胞悬浮于1mL的完全培养液中，台盼兰染色计数活细胞数(在95％以上)，调整细胞浓度为3×10⁶个/mL。将每份细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1mL，一孔加75uLConA液，另一孔作为对照，置培养箱中培养72h。培养结束前4h，每孔吸去上清液0.7mL，加入0.7mL不含血清的RPMI 1640培养液，同时加入MTT 50uL/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1mL酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。然后分装到96孔培养板，每孔做3个平行孔，用酶标仪以570nm波长测定光密度值。

1.5.5.2小鼠NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶LDH测定法)：试验前24h将靶细胞传代培养，应用前以Hanks液洗3次，用RPMI 1640完全培养液调整细胞浓度为4×10⁵个/mL。用Hanks液洗脾细胞悬液2次，每次离心10min(1000r/min)。弃上清液后，加入0.5mL灭菌水20s，裂解红细胞后再加入0.5mL2倍Hanks液及8mLHanks液，离心10min(1000r/min)，用1mL完全培养基重悬，用1％冰醋酸稀释后计数，台盼兰染色计数活细胞数(应在95％以上)，调整细胞浓度为2×10⁷个/mL。取靶细胞和效应细胞各100uL(效靶比50∶1)，加入96孔培养板中；靶细胞自然释放孔加靶细胞和1％N P40各100uL，上述各项均设三个复孔，于37℃、5％CO₂培养箱中培养4h，然后将培养板离心(1500r/min)5min，每孔吸取上清液100uL置96孔养板中，同时加入LDH基质液100uL，反应3min，每孔加入1mol/L的HCI 30uL，在酶标仪490nm处测定光密度值。实验数据统计：实验所得数据采用SAS软件进行分析。

2.结果

2.1五加参枣茶对小鼠体重的影响，结果见表1至表5

表1碳廓清实验和脏器/体重实验前后动物体重记录

表2 DTH实验前后动物体重记录

表3半数溶血值(HC₅₀)实验和抗体生成细胞实验前后动物体重记录

表4吞噬实验前后动物体重记录

表5小鼠脾淋巴细胞转化实验和小鼠NK细胞活性实验前后动物体重记录

经方差分析，三个剂量组与对照组之间各试验前、后，体重以及增重均无显著性差异，P＞0.05

2.2五加参枣茶对小鼠脏器/体重比的影响，结果见表6。

表6五加参枣茶对小鼠脏器/体重比的影响

注：*表明与对照组比较，P＜0.05

脾脏/体重比值经方差分析，F＝0.40，P＞0.05。胸腺/体重比值经方差分析，F＝3.20，P＜0.05。Q检验，人体推荐量的30倍剂量组与对照组比较，有显著性差异，P＜0.05。

2.3五加参枣茶对小鼠细胞免疫功能[小鼠脾淋巴细胞转化实验以及小鼠迟发型变态反应(DTH)]的影响，见表7。

表7五加参枣茶对小鼠细胞免疫功能的影响

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注：*表明与对照组比较P＜0.05

淋巴细胞增殖试验的OD差值经方差分析，F＝2.86，P＜0.05。Q检验，人体推荐量的三个剂量组与对照组比较，P＜0.05，有显著性差异。耳肿程度经方差分析，F＝3.42，P＜0.05。Q检验，人体推荐量的30倍剂量组与对照组比较，P＜0.05，有显著性差异。

2.4五加参枣茶对小鼠体液免疫功能(抗体生成细胞测定以及小鼠半数溶血值测定)的影响，见表8。

表8五加参枣茶对小鼠体液免疫功能的影响

注：*表明与对照组比较P＜0.05，**表明与对照组相比较，P＜0.01

溶血空斑数经方差分析，F＝4.33，P＜0.05。Q检验，三个剂量组与对照组相比较，有显著性差异，P＜0.05；HC₅₀经方差分析，F＝4.88，P＜0.01。Q检验，30倍剂量组与对照组相比较，有极显著性差异，P＜0.01。

2.5五加参枣茶对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响，见表9。

表9五加参枣茶对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响

注：*表明与对照组比较，P＜0.05

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率经方差分析，F＝1.94，P＞0.05。吞噬指数经方差分析，F＝3.16，P＜0.05。Q检验，30倍剂量组与对照组相比较，P＜0.05，有显著性差异。

2.6五加参枣茶对小鼠NK细胞活性的影响，见表10。

表10五加参枣茶对小鼠NK细胞活性的影响

注：*表明与对照组比较，P＜0.05

经方差分析，F＝4.14.P＜0.05。Q检验，30倍剂量组与对照组相比较，P＜0.05，有显著差异。

3.结论

(1)五加参枣茶三个剂量组均未见对动物体重及体重增长有明显的影响。

(2)五加参枣茶人体推荐量的30倍剂量组的胸腺/体重比值与对照组比较，有显著性差异。

(3)小鼠细胞免疫功能试验表明，在脾淋巴细胞转化实现中，五加参枣茶人体推荐量的三个剂量组OD差值显著高于对照组，呈阳性结果；迟发型变态反应实验表明，耳肿程度与对照组比较，30倍剂量组差异显著，呈阳性结果。

(4)小鼠体液免疫功能实验表明，在抗体生成细胞实验中，与对照组相比，五加参枣茶三个剂量组脾细胞溶血空斑数显著升高，呈阳性结果；小鼠半数溶血值测定表明，30倍剂量组的HC₅₀值与对照组比较有极显著差异，呈阳性结果。

(5)小鼠单核—巨噬细胞功能实验结果表明，在小鼠碳廓清实验中，五加参枣茶30倍剂量组的吞噬指数显著高于对照组，呈阳性结果；小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验表明，30倍剂量组的吞噬指数显著高于对照组，呈阳性结果

(6)NK细胞活性测定实验表明，与对照组比较，五加参枣茶30倍剂量组NK细胞的活性显著升高，呈阳性结果。

依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003)年版判定标准，由以上结果判定五加参枣茶具有明显的增强免疫力的功能。

实验例2：增强免疫力情况的临床观察。

(1)适宜人群情况

参加实验的适宜人群志愿者共80例，其中男44例，女36例，男女比1.38∶1。年龄30-40岁16例，41-50岁25例，51-60岁25例，60岁以上16例。其中职业干部32人，教师20人，工人13人，学生5人，其他10人。

(2)诊断标准

服用本品一周后，适宜人群在正常状态下，89％的需要增强免疫力的人群感觉能明显进入良好精神状态，连续工作8小时。人的精神状态良好，无明显疲劳和不适现象及常见病现象。感觉身体状况明显好转的占21％，继续服用后，一般情况下都进入正常状态。

饮用本发明的保健茶对人体增强免疫力的全过程是一个循序渐进的过程，中草药效果，欲速则不达。饮用1个时期后，人体免疫力的增强呈波动状态，在波峰时继续饮用。一般情况下饮用1个时期以后人体免疫力逐渐趋于稳定，饮用一个月左右，人体免疫力基本恢复正常，再继续坚持饮用后就不存在人体免疫力不良之状况了。

有效：各型需增强免疫力人群经饮用本发明保健茶以后，人体免疫力稳定在正常范围内，一般不需要停饮，因为此茶同时具有多项保健功能，可以继续服用。我们通过临床验证，本发明保健茶除了具有增强免疫力之功效以外，还能平衡血压、降血脂、降血糖、抗氧化、缓解体力疲劳、延缓衰老、降低头痛之发生率、增加记忆力、还具有增加工作强度的作用。长期饮用该保健茶无任何毒副作用和不良反应。

实验例3：刺五加多糖含量对比试验

实验材料：受试物(实验例2制得的五加参枣茶)与对照品(北京森源五加饮品有限公司销售的、2006年8月1日生产的、森源牌刺五加茶叶)

刺五加多糖提取方法采用微波提取法：分别取受试物和对照品500g，破碎后，各称取100g置500ml瓶中，将此烧瓶放入MCL-3型连续微波反应器中，依次用250mL石油醚(60～90℃)、乙醚和80％乙醇回流提取，调整功率560W、500W、400W、350W，反应时间20分钟。残渣挥干溶剂后，再放入MCL-3型连续微波反应器中，继续以水回流提取20分钟，调整功率630W、600W、560W、450W，减压浓缩至一半体积，加入0.1％活性炭，脱色，滤过，滤液加入95％乙醇使溶液含醇80％，静置过夜，滤过，残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤，得刺五加多糖。60℃烘干后称量。本品按干燥品计算，受试物中含刺五加多糖0.075％，对照物中含刺五加多糖0.025％。由此对比可见本发明栽培方法种植的刺五加中所含刺五加多糖比常规方法种植的刺五加所含刺五加多糖多出2倍之多。因此本发明所制得的五加参枣茶与常规的五加参枣茶具有更好的增强免疫力的功能。