凝胶阻滞色谱柱上聚合制备窄分布低分子量聚合血红蛋白的方法

摘要

一种凝胶阻滞色谱柱上聚合制备窄分布低分子量聚合血红蛋白的方法，它将天然血红蛋白用泵加入凝胶阻滞色谱中平衡，然后分布加入双功能交联剂进行聚合反应，反应温度为0～30℃，pH值为5.0～9.0反应时间3～10小时；血红蛋白溶液浓度为1～100mg/ml，血红蛋白与双功能交联剂的摩尔比为1∶10～1∶50。用氨基的缓冲溶液将生成的聚合产物洗脱、收集。收集液用甘氨酸或赖氨酸中止反应，戊二醛与甘氨酸(赖氨酸)的摩尔比为2～3∶1。超滤浓缩。采用硼氢化钠对得到的聚合血红蛋白进行还原处理后，再用超滤、层析等方法对该产物进行分离纯化，得到窄分布、平均分子量在200kD以下的聚合血红蛋白。