公开/公告号CN1984883A
专利类型发明专利
公开/公告日2007-06-20
原文格式PDF
申请/专利权人 普罗蒂奥科技有限公司;
申请/专利号CN200580023540.0
申请日2005-05-12
分类号C07C311/08(20060101);C07C235/56(20060101);C07C237/40(20060101);C07D235/26(20060101);A61K31/167(20060101);A61P25/28(20060101);
代理机构11262 北京安信方达知识产权代理有限公司;
代理人陶贻丰;郑霞
地址 美国华盛顿
入库时间 2023-12-17 18:46:19
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2018-05-29
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):C07C311/08 授权公告日:20120321 终止日期:20170512 申请日:20050512
专利权的终止
2016-09-07
专利权人的姓名或者名称、地址的变更 IPC(主分类):C07C311/08 变更前: 变更后: 申请日:20050512
专利权人的姓名或者名称、地址的变更
2012-03-21
授权
授权
2007-08-15
实质审查的生效
实质审查的生效
2007-06-20
公开
公开
相关申请
本申请根据35U.S.C.§119(e)要求Snow等人于2004年5月12日提交的，标题为“治疗淀粉样蛋白病和共核蛋白病的取代的N-芳基苯甲酰胺和相关化合物”的美国临时专利申请60/570,669，和Snow等人于2004年11月18日提交的，标题为“治疗淀粉样蛋白病和其核蛋白病的取代的N-芳基苯甲酰胺和相关化合物”的美国临时专利申请60/629,525的优先权，这些临时申请的内容全部纳入本文作为参考。
技术领域
本发明提供了治疗淀粉样蛋白病的取代的N-芳基苯甲酰胺和相关化合物，药物组合物和方法，该淀粉样蛋白病包括β-淀粉样蛋白(Aβ)，如在阿尔茨海默病中观察到的β-淀粉样蛋白；唐氏综合症；胰岛淀粉样多肽(IAPP)，如在II型糖尿病中观察到的胰岛淀粉样多肽；α-共核蛋白(synuclein)，如在帕金森病中观察到的α-共核蛋白。
背景技术
阿尔茨海默病的特征是被称为β-淀粉样蛋白或Aβ的39-43个氨基酸的多肽以小纤毛的形式聚集，表现为细胞外的淀粉斑和脑血管壁的淀粉体。阿尔茨海默病中纤毛Aβ淀粉样蛋白的沉积被认为对患者有害，最终会导致毒性和神经细胞的死亡，而这些是阿尔茨海默病的特征性的标志。大量的证据表明淀粉样蛋白，更具体地说，Aβ纤毛的形成、沉积、聚集和/或存在是阿尔茨海默病病理发生的主要致病因子。此外，除阿尔茨海默病以外，许多其它淀粉样蛋白病都涉及Aβ纤毛的形成、沉积、聚集和/或存在，这些疾病包括唐氏综合症；涉及嗜刚果红血管病的病症，例如但不限于dutch型的遗传性脑出血，包涵体肌炎、拳击性失智症、脑β淀粉样蛋白血管病、与进行性核上瘫痪有关的痴呆、与皮质基底膜退化有关的痴呆和轻微的认知功能损伤。
帕金森病是特征为形成、沉积、聚集和存留表现出许多淀粉样蛋白特征的异常纤维蛋白沉淀物的另一种人类病症。在帕金森病中，由α-共核蛋白/NAC(非-Aβ成分)的纤丝构成的细胞质路易氏小体的聚集被认为在病理发生中很重要，并被作为治疗靶标。能够抑制α-共核蛋白和/或NAC的形成、沉积、聚集和/或存在，或破坏预先形成的α-共核蛋白/NAC纤维(或其中的一部分)的新试剂或化合物被认为是治疗帕金森病和有关共核蛋白病的潜在试剂。NAC是α-共核蛋白的35个氨基酸的片段，它在体外和帕金森病的患者的脑中能够形成淀粉样的纤丝。α-共核蛋白的NAC片段被认为是相对重要的治疗靶标，因为这一部分的α-共核蛋白被认为对在所有帕金森病、共核蛋白病和相关病症的患者中观察到的路易氏小体的形成至关重要。
许多其它的人类疾病也表现出淀粉样蛋白的沉积，且通常涉及全身器官(例如，位于中枢神经系统外的器官或组织)，且淀粉样蛋白的聚集导致器官的功能紊乱或衰退。已知在许多不同的器官和组织中引起显著淀粉样蛋白聚集的这些淀粉样蛋白病(如下所讨论)是全身性的淀粉样变性病。在其它淀粉样蛋白病中，单个器官受到影响，例如90％的II型糖尿病患者的胰腺。在这种淀粉样蛋白病中，认为胰腺中的郎罕氏小岛(Langerhans)中的β细胞因为纤毛淀粉样蛋白沉积物的聚集而破坏，该纤毛淀粉样蛋白沉积物主要由称为小岛淀粉样多肽(IAPP)的蛋白组成。抑制或减少这样的IAPP淀粉样蛋白纤毛的形成、沉积、聚集和存留认为会对II型糖尿病产生新的有效治疗。对阿尔茨海默病、帕金森病和全身性的淀粉样蛋白病，当前没有疗法或没有有效的疗法，患者通常在疾病发作后的3到10年内死亡。
按照存在的淀粉样蛋白的类型和由此形成的这些疾病来划分淀粉样蛋白病(淀粉样蛋白病变)的类型。淀粉样蛋白病有很多共同的特征，包括各淀粉体由独特类型的淀粉样蛋白构成。淀粉样蛋白病包括但不限于：与阿尔茨海默病有关的淀粉样病变；唐氏综合症；有Dutch型淀粉样病变的遗传性脑出血；拳击性失智症；包涵体肌炎(Askanas等人，Ann.Neurol.43：521-560，1993年)和轻微的认知损伤(其中，具体的淀粉样蛋白是指β淀粉样蛋白或Aβ)；与慢性炎症有关的淀粉样蛋白；各种形式的恶性肿瘤和家族性地中海热(其中，具体的淀粉样蛋白是指AA淀粉样蛋白或炎症相关性淀粉样病变)；与多发性骨髓瘤和其它B细胞体液不调有关的淀粉样蛋白病(其中，具体的淀粉样蛋白是指AL淀粉样蛋白)；与II型糖尿病有关的淀粉样蛋白病(其中，具体的淀粉样蛋白是指糊精或小岛淀粉样蛋白多肽或IAPP)；与朊病毒疾病有关的淀粉样蛋白病，包括克-雅氏病、格-史氏综合症、新几内亚震颤病和动物瘁病(其中，具体的淀粉样蛋白是指PrP淀粉样蛋白)；与长期的血液透析和腕管综合症有关的淀粉样蛋白病(其中，具体的淀粉样蛋白是指α2-微球蛋白淀粉样蛋白)；与高龄心脏淀粉样变性病和家族性多发性神经淀粉样变性有关的淀粉样蛋白病(其中，具体的淀粉样蛋白是指转甲状腺蛋白或前白蛋白)；与内分泌肿瘤如甲状腺髓样癌有关的淀粉样蛋白病(其中，具体的淀粉样蛋白是指前降血钙素的变体)。此外，发现形成淀粉样蛋白纤毛、且是刚果红和硫磺素S(用于检测淀粉样蛋白纤毛沉积物的专门染料)阳性的α-共核蛋白是下列疾病的患者的脑中路易氏小体的一部分：帕金森病，路易氏小体病(Lewy in Handbuch der Neurologie，M.Lewandowski编，Springer，Berlin pp.920-933，1912；Pollanen等人，J.Neuropath.Exp.Neurol.，52：183-191，1993；Spillantini等人，Proc.Natl Acad.Sci.USA，95：6469-6473，1998；Arai等人，Neurosci.Lett.259：83-86，1999)，多系统萎缩症(Wakabayashi等人，Acta Neuropath.96：445-452，1998)，有路易氏小体的痴呆以及阿尔茨海默病的路易氏小体变异。为了公开的目的，由于纤毛生长在这种疾病(刚果红和硫磺素S阳性，并且主要包含β折叠片的二级结构)的患者的脑中，因此如今认为帕金森病是一种还具有淀粉样蛋白病特征的疾病。
例如，全身性淀粉样变性病，包括与慢性炎症有关的淀粉样蛋白病，各种形式的恶性和家族性地中海热(例如，AA淀粉样蛋白或者炎症有关的淀粉样变性病)(Benson和Cohen，Arth.Rheum.22：36-52，1979；Kamei等人，Acta Path.Jpn.32：123-133，1982；McAdam等人.，Lancet2：572-573，1975；Metaxas，kidney Int.20：，676-685，1981)，和与多发性骨髓瘤和其它B细胞液不调有关的淀粉样蛋白病(例如，AL淀粉样蛋白)(Harada等人.，J.Histochem.Cytochem..19：1-15，1971)，已知涉及到中枢神经系统外的很多不同器官和组织中的淀粉样蛋白沉积。在这些疾病中，淀粉样蛋白沉积可以发生在，例如肝、心脏、脾、胃肠道、肾、皮肤和/或肺中(Johnson等，N.Engl.J.Med.321：513-518，1989)。对于大多数这样的淀粉样蛋白病变，没有明显的治疗方法或有效的治疗方案，淀粉样蛋白沉积的后果对患者是有害的。例如，淀粉样蛋白在肾中的沉积会导致肾衰竭，而淀粉样蛋白在心脏中的沉积会导致心力衰竭。对于这些患者，淀粉样蛋白在全身性器官中的聚集通常在3-5年内导致最终死亡。其它的淀粉样蛋白病变可以影响单个器官或组织，例如，阿尔茨海默病和唐氏综合症患者的脑中发现的Aβ淀粉样蛋白沉积所观察到的病变：在克-雅氏病、格-史氏综合症和新几内亚震颤病患者的脑中发现的PrP蛋白淀粉样沉积；在90％的II型糖尿病患者的胰腺的郎罕氏小岛中发现的小岛淀粉样蛋白沉积(IAPP)(Johnson等人，N.Engl.J.Med.321：513-518，1989；Lab.Invest.66：522-535，1992)；在经历长期血液透析的患者中引起腕管综合症的中央神经α2-微球蛋白淀粉样蛋白沉积(Geyjo等人，Biochem.Biophys.Res.Comm.129：701-706，1985；Kidey Int.30：385-390，1986)；在高龄心脏淀粉样蛋白病患者的心脏中观察到的前清蛋白/转甲状腺蛋白淀粉样蛋白；在有家族性多发性神经淀粉样变性患者的末梢神经中观察到的前清蛋白/转甲状腺蛋白的淀粉样蛋白(Skinner和Cohen，Biochems.Biophys.Res.Comm.99：1326-1332，1981；Sarauva等人，J.Lab.Clin.Med.102：590-603，1983；J.Clin Invest.74：104-119，1984；Tawara等人，J.Lab.Clin Med.98：811-822，1989)。
阿尔茨海默病同样给社会带来沉重的经济压力。一项最近的研究估计在家或在护士站照料一位有严重认知损害的阿尔茨海默病患者的成本每年超过47,000美元(A Guide to Understanding Alzheimer’s Disease and RelatedDisorders)。对于一种2至20年的病，阿尔茨海默病对家庭和社会的的总成本都越来越大。在美国，根据医疗费用和患者及其照料他们的人的误工工资，阿尔茨海默病的年经济代价估计是800到1000亿(2003 Progress Reporton Alzheimer’s Disease)。
淀粉样蛋白作为阿尔茨海默病的治疗靶标
阿尔茨海默病的特征是被称为β-淀粉样蛋白，即Aβ或β/A4的39-43个氨基酸的沉积或聚集(Glenner和Wong等人，Biochem.Biophys.Res.Comm.120：885-890，1984；Master等人.，Proc.Natl.Asca.Sci.USA 82：4245-4249，1985；Husby等人，Bull.WHO 71：105-108，1993)。Aβ来源于称为β-淀粉样前体蛋白(APP)的较大前体蛋白的蛋白酶切除产物，该APP有几种不同的剪切变异体。APP的含量最丰富的形式包括由695个、751和770个氨基酸构成的蛋白(Tanzi等人，Nature 31：528-530，1998)。
小Aβ多肽是构成阿尔茨海默病患者的脑中的淀粉样蛋白沉积斑的主要成分。此外，阿尔茨海默病的特征是存在许多神经原纤维的“缠结”，其由在神经元细胞质中不正常地聚集的损伤的螺旋纤丝构成(Grundke-Iqbal等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，83：4913-4917，1986年；Kosik等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，83：4044-4048，1986；Lee等人，Science，251：675-678，1991)。因而阿尔茨海默病的病理标志是存在“斑”和“缠结”，淀粉样蛋白在斑的核心区沉积。在阿尔茨海默病脑中发现的其它主要损伤类型是淀粉样蛋白在脑软骨组织内的血管壁和大脑外的脑膜血管壁上聚集。定位在血管壁上的淀粉样蛋白沉积物称为脑血管淀粉样蛋白或嗜刚果红血管病(Mandybur，J.Neuropath.Exp.Neurol.45：79-90，1986；Pardridge等人，JNeurochem.49：1394-1401，1987)。
多年以来，关于淀粉祥蛋白在阿尔茨海默病中的重要性和这种疾病的“斑”和“缠结”特征是这种疾病的起因还是疾病的后果一直都在进行科学辩论。在过去的几年内，研究表明淀粉样蛋白确实是阿尔茨海默病的一种致病因子，而不应该认为是无关的。细胞培养物中的阿尔茨海默病Aβ蛋白显示在短期内引起了神经细胞退化(Pike等人，Br.Res.563：311-314，1991；JNeurochem.64：253-265，1995)。研究表明，正是所有淀粉样蛋白的纤毛结构(主要由β折叠片的二级结构构成)特征产生神经毒性作用。还发现Aβ蛋白在海马回的切片培养物中有神经毒性(Harrigan等人，Neurobiol.Aging，16：779-789，1995)，并诱导转基因老鼠的神经细胞死亡(Games等人Nature，373：523-527，1995年；Hsiao等人，Science，274：99-102，1996)。将阿尔茨海默病的Aβ蛋白注射入大鼠的脑中也会引起记忆损伤和神经功能紊乱(Flood等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，88：3363-3366，1991；Br.Res.663：271-276，1994)。
很可能地，Aβ与阿尔茨海默病的病理发生有直接关系的最有信服力的证据来自于遗传学研究。发现Aβ的产生是编码它的前体，即β-淀粉样蛋白前体蛋白的基因突变的结果(VanBroeckhoven等人，Science，248：1120-1122，1990；Murrell等人，Science，254：97-99，1991；Haass等人，Nature Med，1：1291-1296，1995)。对引起早期家族性阿尔茨海默病的β淀粉样前体蛋白基因的突变的识别是淀粉样蛋白对该疾病的病理发生是至关重要的这一主张的最强有力的证据。四个已报道的致病突变已被发现，这就证明了Aβ在引起家族性阿尔茨海默病中的重要性(Hatdy，NatureGenent.1：233-234，1992中的综述)。所有的这些研究表明提供药物来降低、消除或阻止纤毛Aβ在人类患者的大脑中的形成、沉积、聚集和/或存在是有效的治疗方法。
帕金森病和共核蛋白病
帕金森病是一种神经退行性疾病，其病理特征是细胞质内存在路易氏小体(Lewy in Handbuch der Neurologie，M.Lewandowski编，Springer，Berlin，pp.920-933，1912；Pollanen等人，J Neuropath.Exp.Neurol.52：183-191，1993)，其主要成分是由α-共核蛋白组成的纤丝(Spillantini等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95：6469-6473，1998；Aria等人，Neurosci.Lett.259：83-86，1999)，α-共核蛋白是140个氨基酸的蛋白(Ueda等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，90：11282-11286，1993年)。引起家族性早期发生的帕金森病的α-共核蛋白的两个显性突变已有描述，其表明路易氏小体在帕金森病和相关疾病中机制地引起神经元退化(polymeropoulos等人，Science，276：2045-2047，1997；Kruger等人，Nature Genet.18：106-108，1998)。最近，体外研究证明重组的α-共核蛋白确实能形成路易氏小体样的纤毛(Conway等人，Nature Med.4：1318-1320，1998；Hashimoto等人，BrainRes.799：301-306，1998；Nahri等人，J.Biol.Chem.274：843-9846，1999)。更重要地，两种帕金森病相关的α-共核蛋白突变都会加速这种聚集过程，这证明了这样的体外研究可能与帕金森病的病理发生有相关性。α-共核蛋白的聚集和纤毛的形成符合晶核形成依赖性聚合过程的标准(Wood等人，J.Biol.Chem.274：19509-19512，1999)。在这一点上，α-共核蛋白的纤毛形成如同阿尔茨海默病的β淀粉样蛋白(Aβ)纤毛形成。α-共核蛋白重组蛋白和非-Aβ成分(也称为NAC，35个氨基酸的α-共核蛋白多肽片断)在37℃温育时都能够形成纤毛，淀粉样蛋白染色，如刚果红(当在偏振光下观看时，呈现红/绿双折射)和硫磺素(硫磺素S)(表现为阳性荧光)染色都为阳性(Hashimoto等人，BrainRes.，799：301-306，1998；Ueda等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，90：11282-11286，1993)。
共核蛋白是一种小的突触前神经蛋白家族，包括α-、β-、γ-共核蛋白，其中，仅仅只有α-共核蛋白的聚集与严重的神经性疾病有关(Ian等人，Clinical Neurosc.Res.，1：445-455，2001；Trojanowski和Lee，Neurotoxicology，23：457-460，2002)。共核蛋白(特别是α-共核蛋白)在很多神经退行性和/或淀粉样蛋白病的病因中的作用是从几项观察中得出的。从病理学上来讲，共核蛋白是作为路易氏小体的主要成分、帕金森病的标志性内涵物而鉴别，其片断从不同的神经性疾病，即阿尔茨海默病的淀粉样蛋白斑中分离出来。从生物化学上来说，重组的α-共核蛋白显示形成淀粉样纤丝，该纤丝具有从路易氏小体痴呆、帕金森病和多系统萎缩患者中分离出来的α-共核蛋白的超结构特征。另外，虽然只在家族性帕金森病得很少病例中的鉴别了共核蛋白基因的突变，但是这证明了共核蛋白病理和神经退行性疾病之间的明确关系。α-共核蛋白共同参与了很多疾病，例如帕金森病、路易氏小体痴呆，多系统萎缩症、阿尔茨海默病的路易氏小体变异，因此就将这些疾病划分为一类“共核蛋白病”。
帕金森病的α-共核蛋白纤丝如阿尔茨海默病的Aβ纤丝一样也是主要由β折叠片的结构构成。因而，可以预见到抑制阿尔茨海默病Aβ淀粉样蛋白的纤丝形成的化合物对抑制α-共核蛋白/NAC纤丝的形成也是有效的，如本说明书的实施例所示。因此这些化合物也可以作为帕金森病和其它共核蛋白病的药物，此外还是阿尔茨海默病、II型糖尿病和其它淀粉样蛋白病的有效药物。
人们正在设法发现和识别能够作为潜在的药物来阻止阿尔茨海默病、帕金森病、II型糖尿病和其它淀粉样病变中的淀粉样蛋白的形成、沉积、聚集或存留的新的化合物或试剂。
发明概述
本申请提供了具有下式的化合物：
或
或其药学上可接受的衍生物和含有其的药物组合物，其中，R选自：1)CONR’和2)C1-C10亚烃基基团，其中，(a)当碳原子的数目至少为2时，任选有1或2个双键；(b)1到3个非相邻的亚甲基基团任选地被NR’、O、或S替代；(c)1或2个亚甲基基团任选地被羰基或羟基亚甲基基团替代；和(d)1或2个亚甲基基团任选地被环烷基或杂环基团替代，该环烷基或杂环基团任选地被一个或多个选自低级烷基、NR’、O或S的取代基取代；
R’是H、烷基或酰基；
R1、R2、R3和R4各自独立地选自：
i)R1、R2、R3和R4各自独立地选自OH、-NR5C(＝O)R6和-NR7S(O2)R8，其中R5和R7各自独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂芳烷基、取代或未取代的杂环基、或取代或未取代的杂环炕基；和R6和R8各自独立地是取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的芳烷氧基、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的芳基、或-NR9R10，其中R9和R10各自独立地是氢、炕基、芳烷基、芳基、杂芳基、杂芳烷基或杂环基，前提条件是R1、R2、R3和R4中至少1个不是OH；
ii)R1与R2和/或R3与R4一起是-NH-C(＝O)-NH-、-NH-S(O2)-NH-、-CH2-C(＝O)-NH-或-CH2-S(O2)-NH，且与被取代的碳原子一起形成五元杂环，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地如1)所选择；或
iii)R1、R2、R3和R4中的至少一个是-NH-CRa＝CRb-，或-NH-S(O2)CRcRd-，且与苯环中两个相邻的碳原子一起形成取代或未取代的杂环，或取代或未取代的杂芳香环，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地如i)或ii)所选择；和
其中，环A和B被一个或多个选自吸电子基的取代基取代，该吸电子基包括但不限于卤素、假卤素、硝基、+NH3、SO3H、羧基和卤代烷基。
在一个具体实施方案中，合适地选择R1到R10、Ra、Rb、Rc和Rd来优化物理化学和/或生物特性，如生物利用度、药物动力学、血脑屏障渗透、优化的新陈代谢、和增强的治疗淀粉样蛋白病和共核蛋白病的功效。
本申请还提供了所述化合物的任何药学上可接受的衍生物，包括盐、酯、烯醇醚或酯、缩醛、缩酮、邻位酯、半缩醛、半缩酮、溶剂化物、水合物、或前药。药学上可接受的盐包括但不限于：氨盐，例如但不限于N，N’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、氨、二乙醇胺和其它的羟烷基胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺、普鲁卡因、N-苄基苯乙基胺、1-对-氯苄基-2-吡咯烷-1’-基甲基苯并咪唑、二乙基胺和其它烷基胺、哌嗪、三(羟甲基)氨基甲烷；碱金属盐，例如但不限于锂、钾和钠盐；碱土金属盐，例如但不限于钡、钙和镁盐；过渡金属盐，例如但不限于锌盐；其它金属盐，例如但不限于磷酸氢二钠；还包括但不限于：无机酸盐，例如但不限于氢氯化物和硫酸盐；有机酸盐，例如但不限于乙酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、 抗坏血酸盐、琥珀酸盐、丁酸盐、戊酸盐、延胡索酸盐。
本发明还提供了通过合适的路径和方式给药的药物制剂，其含有有效浓度的一种和多种本发明所提供的化合物或其药学上可接受的衍生物，例如盐、酯、烯醚或酯、缩醛、缩酮、邻位酯、半缩醛、半缩酮、溶剂化物、水合物、或前药，其递送治疗有效量以治疗淀粉样蛋白病。
上述制剂是适于通过任何需要的路径给药的组合物，包括但不限于溶液、悬浮液、乳状液、药片、可分散的药片、药丸、胶囊、粉剂、供吸入的干粉、持续释放的制剂、通过鼻和呼吸系统递送的气溶胶、通过皮肤和任何合适的路径递送的药膏。该组合物适于口服给药；通过注射肠胃外给药，包括作为可注射的水溶液或油状溶液或乳状液经皮下、肌肉内或静脉内注射；透皮给药和其它选择的路径给药。
本发明提供了使用这样的化合物和组合物来破坏、分散和引起淀粉样蛋白或共核蛋白纤丝的去除、减少或清除的方法，从而提供了治疗淀粉样蛋白病和共核蛋白病的新方法。
本发明还提供了治疗、预防或缓解淀粉样蛋白病或淀粉样病变，包括但不限于与淀粉样蛋白纤丝的形成、沉积、聚集、或存留有关的疾病的一种或多种症状的方法，淀粉样蛋白的纤丝例如选自：Aβ淀粉样蛋白、AA淀粉样蛋白、AL淀粉样蛋白、IAPP淀粉样蛋白、PrP淀粉样蛋白、α2-微球蛋白淀粉样蛋白、甲状腺素运载蛋白、前清蛋白、和前将血钙素的纤丝。
提供了治疗淀粉样蛋白病的方法，所述淀粉样蛋白病包括但不限于：阿尔茨海默病、唐氏综合症、拳击性失智症、多系统萎缩症、包涵体肌炎，有Ducth型淀粉样变性病的遗传性脑出血、C型Nieman-Pick病、脑β-淀粉样蛋白血管病、与皮层基底膜退化有关的痴呆、II型糖尿病的淀粉样变性病、慢性炎症的淀粉样变性病、恶性和家族性地中海热的淀粉样变性病，多发性骨髓瘤和B-细胞体液不调的淀粉样变性病、朊病毒病的淀粉样变性病、克-雅病、格-史氏综合症、新几内亚震颤病、瘁病、与腕骨道综合征有关的蛋粉样变性病、高龄心脏淀粉样变性病、家族性多发性神经淀粉样变性、以及与内分泌瘤有关的淀粉样变性病。
本发明还提供了治疗、预防或缓解共核蛋白疾病或共核蛋白病的一种或多种症状的方法。在一个具体实施方案中，该方法抑制或阻止了α-共核蛋白/NAC纤毛的形成，抑制或阻止了α-共核蛋白/NAC纤毛的生长，和/或引起预形成的α-共核蛋白/NAC纤毛和α-共核蛋白/NAC相关蛋白质沉积物的分解、破坏和/或解聚。共核蛋白病包括但不限于：帕金森病、家族性帕金森病、路易氏小体病、阿尔茨海默病的路易氏小体变异、有路易氏小体的痴呆、多系统萎缩症和关岛帕金森病痴呆综合症。
发明的详细描述
A.定义
除非另有定义，本说明书所使用的所有技术和科学术语均具有本领域普通技术人员所通常理解的含义。所有的专利、申请、公开的申请和其它公开都全部纳入本文作为参考。在对术语有多个定义的情况下，除非另有说明，以这一部分的定义为准。
在本说明书中，使用的“淀粉样蛋白病”或“淀粉样蛋白变性病”是与淀粉样纤毛的形成、沉积、聚集或存留有关的疾病，其中淀粉样纤毛包括但不限于选自下列的淀粉样蛋白的纤毛：Aβ淀粉样蛋白、AA淀粉样蛋白、AL淀粉样蛋白、IAPP淀粉样蛋白、PrP淀粉样蛋白、α2-微球蛋白淀粉样蛋白，转甲状腺蛋白、前清蛋白和前降血钙素。这种疾病包括但不限于：阿尔茨海默病、唐氏综合症、拳击性失智症、多系统萎缩症、包涵体肌炎、有Dutch型淀粉样蛋白的遗传性脑出血、C型Nieman-Pick病、脑β淀粉样蛋白血管病、和皮层基底膜退化有关的痴呆，II型糖尿病的淀粉样变性病、慢性炎症的淀粉祥变性病、恶性和家族性地中海热的淀粉样变性病、多发性骨髓瘤和B-细胞体液不调的淀粉样变性病、朊病毒疾病的淀粉样变性病、克-雅氏病、格-史氏综合症、新几内亚震颤病、瘁病、和腕管综合症相关淀粉样变性病、高龄心脏淀粉样变性病、家族性多发性神经淀粉样变性、以及与内分泌瘤有关的淀粉样变性病。
在本说明书中，使用的“共核蛋白疾病”或“共核蛋白病”是与共核蛋白纤毛的形成、沉积、聚集或存留有关的疾病，该共核蛋白纤毛包括但不限于：α-共核蛋白纤毛。这些疾病包括但不限于，帕金森病、家族性帕金森病、路易氏小体病、阿尔茨海默病的路易氏小体变异、有路易氏小体的痴呆、多系统萎缩症、以及关岛帕金森病痴呆综合症。
“原纤维生成(fibrillogenesis)”是指形成、沉积、聚集或存留淀粉样蛋白纤毛、细丝、包含物、沉积物以及共核蛋白(通常包括α-共核蛋白)和或NAC纤毛、细丝、包含物、沉积物等。
“原纤维生成的抑制”是指这些淀粉样纤毛或共核蛋白纤毛样沉积物的形成、沉积、聚集或存留受到抑制。
“纤丝或原纤维生成的破坏”是指预形成的淀粉样蛋白或共核蛋白纤毛的破坏，该淀粉样蛋白或共核蛋白纤毛通常主要以β折叠片的二级结构的形式存在。用本发明所提供化合物进行的这种破坏与淀粉样蛋白或共核蛋白纤丝的显著减少有关，这可以通过各种方法，例如硫磺素(硫磺素S)荧光计、刚果红结合、SDS-PAGE/蛋白印迹转移来进行评价，这一点可在本说明书的实施例部分得到证实。
“哺乳动物”包括人和非人哺乳动物，例如伴侣动物(猫、狗等)、实验室动物(例如老鼠、家鼠、几内亚猪等)，以及农场动物(牛、马、绵羊、山羊、猪等)。
“药学上可接受的赋形剂”意是指常规地用来制备药物组合物的赋形剂，它们通常是安全的、非-毒性的和理想的，包括兽医使用或人类药剂使用可接受的赋形剂。这样的赋形剂可以是固体、液体、半固体或气体(在气雾组合物的情况下)。
“治疗有效量”是指在给予个体或动物以药物治疗疾病时足以产生理想程度的疾病治疗、预防或症状缓解效果的量。在某些具体实施方案中，“治疗有效量”或“治疗有效剂量”抑制、减少、破坏和解聚淀粉样蛋白或共核蛋白纤毛的形成、沉积、聚集和/或存留，或治疗、预防或缓解与这些病症，例如淀粉样蛋白病或共核蛋白病有关的疾病的一种或多种症状，其相对于未接受治疗的个体，在一个具体实施方案中治疗、预防或缓解了至少20％，在另一个具体实施方案中至少40％，在另一个具体实施方案中至少60％，在另一个具体实施方案中至少80％的可检测量。本发明所提供的用于治疗哺乳动物的化合物或其组合物的有效量是大约0.1到大约1000毫克/千克个体体重/天，例如，大约1到大约100毫克/千克/天，在一个具体实施方案中，大约为10到大约100毫克/千克/天。各种范围的公开组合物剂量是都认为是安全和有效的。
术语“持续释放组分”在此定义为有利于活性成分持续释放的一种化合物或多种化合物，包括但不限于：聚合物、聚合基质、凝胶、渗透膜、脂质体、微球等或它们的组合。
如果所述复合物是水溶性的，那么可以将其配制在任何合适的溶液中，例如磷酸缓冲液、或其它生理学上相容的溶液。可选择地，如果产生的复合物在水性溶剂中的溶解性很差，那么它可以用非离子的表面活性剂，如Tween，或聚乙二醇来配制。这样，所述化合物与它们生理学上相容的溶剂可以配制来通过吸入和吹入法(通过口或鼻)给药或通过口服、口腔、肠胃外、或直肠给药。
在本说明书中，化合物的药学上可接受的衍生物包括盐、酯、烯醚、烯酯、缩醛、缩酮、邻酯、半缩醛、半缩酮、溶剂化物、水合物或其前药。本领域的普通技术人员使用制备这些衍生物的已知方法很容易制备出这些衍生物。制备的化合物可以给予动物或人而没有明显的毒性作用，其可以是活性药物或前药。药学上可接受的盐包括但不限于胺盐，例如但不限于N，N’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、氨、乙醇胺和其它羟烷基胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺、普鲁卡因、N-苄基苯乙基胺、1-对-氯苄基-2-吡咯烷-1’-基甲基-苯并咪唑、二乙基胺和其它烷基胺、哌嗪和三(羟甲基)氨基甲烷；碱金属盐，例如但不限于锂、钾和钠盐；碱土金属盐，例如但不限于钡、钙和镁盐；过度金属盐，例如但不限于锌盐；和其它金属盐，例如但不限于磷酸氢二钠和磷酸二钠；还包括但不限于：无机酸盐，例如但不限于盐酸盐和硫酸盐；有机酸盐，例如但不限于乙酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、丁酸盐、戊酸盐和延胡索酸盐。药学上可接受的酯包括，但不限于酸性基团的烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳炕基、环烷基和杂环基酯，该酸性基团包括但不限于羧酸、磷酸、次膦酸、磺酸、亚磺酸、和硼酸。药学上可接受的烯酯包括但不限于：具有式C＝C(OR)的衍生物，其中R是氢、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、环烷基或杂环基。药学上可接受的烯酯包括但不限于：具有式C＝C(OC(O)R)的衍生物，其中R是氢、炕基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、环烷基或杂环基。药学上可接受的溶剂化物和水合物是化合物分子与一个或多个溶剂或水分子，或1到大约100，或1到大约10个，或1到大约2、3或4个溶剂或水分子的复合物。
在本说明书中，治疗是指使疾病或病症的一种或多种症状得到缓解或有益改变的任何方式。疾病的治疗还包括预防疾病在易患该病但未患或未表现出该病症状的个体中发生(预防性冶疗)，抑制该疾病(减慢或阻止该疾病的发展)，减轻该疾病的症状或副作用(包括减缓治疗)，和缓解疾病(使疾病减轻)，例如通过破坏预形成的淀粉样蛋白或共核蛋白纤丝来实现。一种该预防性治疗可以是使用所公开的化合物来治疗轻微的认知损伤(MCI)。
在本说明书中，通过给予特定化合物或药物组合物来缓解具体病症的症状是指任何因为给予所述组合物或与其有关的减轻，无论是永久的还是暂时的，持久的还是短暂的。
在本说明书中，“NAC”(非-Aβ组分)是35个氨基酸的α-共核蛋白片段，它像α-共核蛋白一样，在37℃温育时能够形成淀粉样纤毛，且用淀粉样蛋白染色，如刚果红(当在偏振光下观看时，呈现红/绿双折射)和硫磺素S(表现为阳性荧光)为阳性(Hashimoto等人，Brain Res.799：301-306，1998；Ueda等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，90：11282-11286，1993)。相信抑制NAC纤毛的形成、沉积、聚集、聚合和/或存在对治疗许多疾病，包括α-共核蛋白病如帕金森病、路易氏小体病和多系统萎缩症有效。
在本说明书中，前药是一旦体内给予即通过一个或多个步骤代谢或以其它方式转化成其生物学、药理学或治疗学活性形式的化合物。为了制备前药，对药理学活性的化合物进行修饰从而使该活性化合物可以通过代谢过程再生。该前药可以设计来改变药物的代谢稳定性或转运特性，掩盖副作用或毒性，改进药物的味道或改变药物的其它特性或属性。利用药效知识和药物的体内代谢知识，如果已知药物学活性化合物，本领域的普通技术人员就能够设计出该化合物的前药(参见，Nogrady(1985)MedicinalChemistry A Biochemical Approach，牛津大学出版社，纽约，pp388-392)。
应该理解，本发明所提供化合物可以含有手性中心。这种手性中心可以具有(R)或(S)构型，或它们的混合物。因此，本发明所提供的化合物可以是对映异构体纯的化合物，或是立体异构体或非对映异构体的混合物。对于氨基酸残基，这些残基可以是L或D-型。天然存在的氨基酸残基的构型通常是L。当未特别值明时，该残基是L型。术语“氨基酸”是指外消旋的、或具有L-或D-构型的α-氨基酸。氨基酸名称前的字母“d”(例如dAla、dSer、dVal等)是指氨基酸的D-异构体。氨基酸名称前的字母“dl”(例如dlPip等)是指氨基酸的L-和D-异构体的混合物。应该理解，本发明所提供的化合物的手性中心在体内可以进行立体异构作用。因此，本领域的普通技术人员会认识到，对于在体内进行立体异构作用的化合物来说，给予R构型的化合物与给予S构型的化合物是等价的。
在本说明书中，基本上纯的是指足够均一，以致通过本领域的普通技术人员使用的标准分析方法，例如薄板层析色谱(TLC)、凝胶电泳、高效液相色谱(HPLC)和质谱(MS)不能容易地检测出杂质，或足够纯以致于进一步的纯化不会可检测地改变该物质的物理和化学属性，例如酶学和生物学活性。纯化化合物以产生化学基本上纯的化合物的方法是本领域的普通技术人员公知的。然而，基本上化学纯的化合物可以是立体异构体的混合物。在这种情况下，进一步的纯化可能会增加化合物的特异性。
在本说明书中，如果没有特别说明，烷基、烯基和炔基碳链含有1到20个碳原子，或1或2到16个碳原子，是直链或支链。在某些具体实施方案中，2到20个碳原子的烯烃碳链含有1到8个双键；在某些具体实施方案中，2到16个碳原子的烯烃碳链含有1到5个双键。在某些具体实施方案中，2到20个碳原子的炔基碳链含有1到8个三键；在某些具体实施方案中，2到16个碳原子的炔基碳链含有1到5个三键。典型的烷基、烯基和炔基基团包括但不限于：甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、正丁基、仲-丁基、叔-丁基、异戊基、新戊基、叔-戊基、异己基、烯丙基(丙烯基)和炔丙基丙炔基)。在本说明书中，低级烷基、低级烯基和低级炔基是指具有大约1个或大约2个，最多大约6个碳原子的碳链。“烯(炔)基”是指含有至少一个双键和一个三键的烷基基团。
在本说明书中，“环烷基”是指饱和的单-或多-环系统，在某些具体实施方案中含有3到10个碳原子，在其它具体实施方案中含有3到6个碳原子；环烯基和环炔基是指单-或多环系统，它们分别含有至少一个双键和至少一个三键。在某些具体实施方案中，环烯基和环炔基基团含有3到10碳原子，在又一些具体实施方案中，环烯基基团含有4到7个碳原子，在又一些具体实施方案中，环炔基基团含有8到10个碳原子。环烷基、环烯基和环炔基基团的环系统可以由一个或两个或多个环构成，这些环可以以融合的、桥式的或螺合的方式结合在一起。“环烯(炔)基”是指含有至少一个双键和至少一个三键的环烷基团。
在本说明书中，“芳基”是指含有6到19个碳原子的芳香族单环或多环基团。芳基团包括但不限于：未取代或取代的芴基、未取代或取代的苯基和未取代或取代的萘基等基团。
在本说明书中，“杂芳基”是指单环或多环的芳香族环系统，在某些具体实施方案中，其是大约5到大约15元环，其中在该环系统中的一个或多个，在一个具体实施方案中1到3个原子是杂原子，该杂原子是非碳的元素，包括但不限于氮、氧或硫。该杂芳基基团可以任选地与苯环融合。杂芳基基团包括但不限于：呋喃基、咪唑基、嘧啶基、四唑基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、噻唑基、异噻唑基、唑基、异唑基、三唑基、喹啉基和异喹啉基。
在本说明书中，“杂环基”是指单环或多环的非芳香族环系统，在一个具体实施方案中，其为3到10元环，在另一个具体实施方案中，为4到7元环，在又一具体实施方案中，为5到6元环，其中该环系统上的一个或多个，在一个具体实施方案中1到3个原子是杂原子，该杂原子是非碳的元素，包括但不限于氮、氧或硫。在杂原子是氮的具体实施方案中，该氮原子任选地被烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环烷基、酰基、胍基取代，或改氮原子可以被季铵化形成铵基团，其中取代基如上选择。
在本说明书中，“芳烷基”是指所述烷基上的一个氢原子被芳基基团取代的烷基基团。
在本说明书中，“杂芳烷基”是指所述烷基上的一个氢原子被杂芳基基团取代的烷基基团。
在本说明书中，“卤”、“卤素”或“卤化物”是指F、Cl、Br或I。
在本说明书中，假卤化物或假卤基团是作用与卤素基本相似的基团。可以以与卤素同样的方式来使用和处理这种化合物。假卤化合物包括但不限于：氰化物、氰酸盐、硫氰酸盐、硒氰酸盐(selenocyanate)、三氟甲氧基和叠氮化物。
在本说明书中，“卤代烷基”是指其一个或多个氢原子被卤素取代的烷基基团。这样的基团包括但不限于：氯甲基、三氟甲基和1-氯-2-氟乙基。
在本说明书中，“卤代烷氧基”是指RO-，其中R是卤代烷基基团。
在本说明书中，“亚磺酰”或“亚硫酰”是指-S(O)-。在本说明书中，“磺酰”或“硫酰”是指-S(O)2。在本说明书中，“硫代”是指-S(O)2O-。
在本说明书中，“羧基”是指二价自由基，即-C(O)-。
在本说明书中，“氨基羰基”是指-C(O)NH2。
在本说明书中，“烷基氨基羰基”是指-C(O)NHR，其中R是烷基，包括低级烷基。“二烷基氨基羰基”是指-C(O)NR’R，其中，R’和R独立地是烷基，包括低级烷基；“羧酰胺”是指具有式-NR’COR的基团，其中，R’和R独立地是烷基，包括低级烷基。
在本说明书中，“芳烷基氨基羰基”是指-C(O)NRR’，其中R和R’中的一个是芳基，包括低级芳基，例如苯基，R和R’中的另一个是烷基，包括低级烷基。
在本说明书中，“芳基氨基羰基”是指-C(O)NHR，其中，R是芳基，包括低级芳基，如苯基。
在本说明书中，“羟基羰基”是指-COOH。
在本说明书中，“烷氧基羰基”是指-C(O)OR，其中R是烷基，包括低级烷基。
在本说明书中，“芳氧基羰基”是指-C(O)OR，其中R是芳基，包括低级芳基，如苯基。
在本说明书中，“烷氧基”和“烷硫基”是指RO-和RS-，其中，R是烷基，包括低级烷基。
在本说明书中，“芳氧基”和“芳硫基”是指RO-和RS-，其中，R是芳基，包括低级芳基，如苯基。
在本说明书中，“亚烃基”是指直链的、支链的或环状的(在某些具体实施方案中为直链的或支链的)二价的脂肪族碳氢基团，在一个具体实施方案中，有1到大约20个碳原子，在另一个具体实施方案中，有1到12个碳原子。在又一个具体实施方案中，亚烃基包括低级亚烃基。在亚烃基基团中，任选地含有一个或多个插入的氧；硫，包括S(＝O)和S(＝O)2基团；或取代或未取代的氮原子，包括-NR-和-N+RR-基团，其中氮取代基是烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基或COR’，其中R’是烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、-OY或-NYY，其中Y是氢、烷基、芳基、杂芳基、环烷基或杂环基。亚烃基包括但不限于：亚甲基(-CH2-)、亚乙基(-CH2CH2-)、亚丙基((-CH2)3-)、亚甲基二氧(-O-CH2-O-)和亚乙基二氧(-O-(CH2)2-O-)。术语“低级亚烃基”是指有1到6个碳原子的亚烃基。在某些具体实施方案中，亚烃基基团是低级亚烃基，包括1到3个碳原子的亚烃基。
在本说明书中，“氮杂亚烃基(Azaalkylene)”是指-(CRR)n-NR-(CRR)m-，其中n和m各自独立地是0到4的整数。在本说明书中，“氧杂亚烃基(oxaalkylene)”是指-(CRR)n-O-(CRR)m-，其中n和m各自独立地是0到4的整数。“硫杂亚烃基(thiaalkylene)”是指-(CRR)n-S-(CRR)m-，-(CRR)n-S(＝O)-(CRR)m-和-(CRR)n-S(＝O)2-(CRR)m-，其中n和m各自独立地是0到4的整数。
在本说明书中，“亚烯基”是指直链的、支链的或环状的(在一个具体实施方案中为直链的或支链的)二价脂肪族碳氢基团，在某些具体实施方案中，有2到大约20个碳原子和至少一个双键，在其它具体实施方案中，有1到12个碳原子。在又一些具体实施方案中，亚烯基包括低级亚烯基。在亚烯基基团中，可以任选地含有插入的一个或多个氧、硫或取代或未取代的氮原子，其中所述氮取代基是烷基。亚烯基基团包括但不限于：-CH＝CH-CH＝CH-和-CH＝CH-CH2-。术语“低级亚烯基”是指具有2到6个碳原子的亚烯基基团。在某些具体实施方案中，亚烯基是低级亚烯基，包括具有3到4个碳原子的亚烯基。
在本说明书中，“亚炔基”是指直链的、支链的或环状的(在一个具体实施方案中为直链的或支链的)二价脂肪族碳氢基团，在一个具体实施方案中，具有2到大约20个碳原子和至少一个三键，在另一个具体实施方案中，具有1到12个碳原子。在又一些具体实施方案中，亚炔基包括低级亚炔基。在亚炔基基团中，可以任选地含有插入的一个或多个氧、硫或取代或未取代的氮原子，其中所述氮取代基是烷基。亚炔基基团包括但不限于：-C≡C-C≡C-、-C≡C-和-C≡C-CH2-。术语“低级亚炔基”是指具有2到6个碳原子的亚炔基基团。在某些具体实施方案中，亚炔基是低级亚炔基，包括具有3到4个碳原子的亚炔基。
在本说明书中，“亚烯(炔)基”是指直链、分支或环状的(在某些具体实施方案中是直链或支链的)二价脂肪族碳氢基团，在一个具体实施方案中，具有2到大约20个碳原子和至少一个三键，和至少一个双键；在另一个具体实施方案中具有1到12个原子。在又一些具体实施方案中，亚烯(炔)基包括低级亚烯(炔)基。在亚烯(炔)基基团中，可以任选地含有插入的一个或多个氧、硫或取代或未取代的氮原子，其中所述氮取代基是烷基。亚烯(炔)基基团包括但不限于：-C＝C-(CH2)n-C≡C-，其中n是1或2。术语“低级亚烯(炔)基”是指具有最多6个碳原子的亚烯(炔)基基团。在某些具体实施方案中，亚烯(炔)基具有大约4个碳原子。
在本说明书中，“环亚烃基”是指二价的饱和单或多环系统，在某些具体实施方案中，该系统具有3到10个碳原子，在其它具体实施方案中，具有3到6个碳原子；环亚烯基和环亚炔基是指二价的单或多环系统，分别包含至少一个双键和至少一个三键。在某些具体实施方案中，环亚烯基和环亚炔基基团可以含有3到10个碳原子，在某些具体实施方案中，环亚烯基基团含有4到7个碳原子和在某些具体实施方案中，环亚炔基含有8到10个碳原子。环亚烃基、环亚烯基和环亚炔基基团的环系统可以由一个、两个或多个环构成，这些环以融合、桥式或螺连接的方式连接在一起。“环亚烯(炔)基”是指含有至少一个双键和至少一个三键的环亚烃基基团。
在本说明书中，“亚芳基”是指单环或多环的(在某些具体实施方案中为单环的)二价芳基，在一个具体实施方案中，具有5到大约20个碳原子和至少一个芳环，在另一个具体实施方案中，具有5到12个碳原子。在又一个具体实施方案中，亚芳基包括低级亚芳基。亚芳基基包括但不限于：1，2-，1，3-和1，4-亚苯基。术语“低级亚芳基”是指具有6个碳原子的亚芳基基团。
在本说明书中，“杂亚芳基”是指二价的单环或多环芳香环系统，在一个具体实施方案中，在所述环上有大约5到大约15个原子，其中在该环系统上有一个或多个，在某些具体实施方案中有1到3个原子是杂环原子，即非碳的元素，包括但不限于氮、氧或硫。术语“低级杂亚芳基”是指在所述环中具有5或6个原子的杂亚芳基基团。
在本说明书中，“杂亚环基”是指二价的单环或多环非芳香族环系统，在某些具体实施方案中，为3到10元环，在一个具体实施方案中，为4到7元环，在另一个具体实施方案中，为5到6元环，其中在该环系统上有一个或多个，包括1到3个原子是杂原子，即非碳的元素，包括但不限于氮、氧或硫。
在本说明书中，“取代的烷基”、“取代的烯基”、“取代的炔基”、“取代的环炕基”、“取代的环烯基”、“取代的环炔基”、“取代的芳基”、“取代的杂芳基”、“取代的杂环基”、“取代的亚烃基”、“取代的亚烯基”、“取代的亚炔基”、“取代的环亚烃基’、“取代的环亚烯基”、“取代的环亚炔基”、“取代的亚芳基”、“取代的杂亚芳基”和“取代的杂亚环基”分别是指被一个或多个取代基，在某些具体实施方案中被一个、两个、三个、或四个取代基取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基、杂环基、亚烃基、亚烯基、亚炔基、环亚烃基、环亚烯基、环亚炔基、亚芳基、杂亚芳基和杂亚环基基团，所述取代基如本文所定义，在一个具体实施方案中，选自Q1。
在本说明书中，“亚烷基”是指二价基团，如＝CR’R”，其与另一基团的一个原子上连接而形成双键。亚烷基团包括但不限于：“亚甲基”(＝CH2)和亚乙基(＝CHCH3)。在本说明书中，“芳基亚烷基”是指亚烷基集团，其中R或R’是芳基团。“环亚烷基”是R’和R”相连形成碳环的基团。“杂亚环基”是指其中R’和R”中的至少一个在链中含有杂原子，且R’和R”相连形成杂环链的集团。
在本说明书中，“氨基”是指二价基团-C(O)NH-。“硫代酰胺”是指二价基团-C(S)NH-。“氧氨基”是指二价基团-OC(O)NH-。“硫氨基”是指二价基团-SC(O)NH-。“二硫代氨基”是指二价基团-SC(S)NH-。“脲基”是指二价基团-HNC(O)NH-。“硫脲基”是指二价基团-HNC(S)NH-。
在本说明书中，“氨基脲”是指-NHC(O)NHNH-。“咔唑盐”是指二价基团-OC(O)NHNH-。“异硫咔唑盐”是指二价基团-SC(O)NHNH-。“硫咔唑盐”是指二价基团-OC(S)NHNH-。“磺酰肼”是指二价基团-C(O)NHNH-。“氮杂”是指二价基团-N＝N-。“肼基”是指二价基团-NH-NH-。
如果没有指明任何给定的取代基的数目(例如，卤代烷基)，则可以有一个或多个取代基。例如，“卤代烷基”可以包括一个或多个相同或不同的卤素。作为另一个实例，“C1-3烷氧苯基”可以包括一个或多个相同或不同的含有一个、两个或三个碳原子的烷氧基团。
在本说明书中，除非另有说明，任何保护基团、氨基酸和其它化合物的缩写与它们的通常用法、公用的缩写或生物化学命名的IUPAC-IUB协议(参见1972，Biochem.11：942-944)一致。
B.化合物
本发明提供了具有下式的化合物：
或
或其药学上可接受的衍生物和含有其的药物组合物，其中R选自：1)R是CONR’，或2)R是C1-C10亚烃基，其中a)当碳原子的数目至少为2时，其任选含有1或2个双键；(b)1到3个非相邻的亚甲基基团任选地被NR’、O或S替代；c)1或2个亚甲基基团任选地被羰基或羟亚甲基替代；和d)1或2个亚甲基基团任选地被环烷基或杂环基基团替代，该环烷基或杂环基任选地被一个或多个选自低级烷基、NR’、O、或S的取代基取代；
R’是H、烷基或酰基；
A1和B1各自独立地选自卤素、假卤素、硝基、+NH3、SO3H、羧基和卤代烷基；
t和v各自独立地是0到3；
R1、R2、R3和R4各自独立地选自：
i)R1、R2、R3和R4各自独立地选自OH、-NR5C(＝O)R6和-NR7S(O2)R8，其中R5和R7各自独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂芳烷基、取代或未取代的杂环基、或取代或未取代的杂环烷基；R6和R8各自独立地是取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的芳烷氧基、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基(heterocyclyl)、取代或未取代的芳基、或-NR9R10，其中R9和R10各自独立地是氢、烷基、芳烷基、芳基、杂芳基、杂芳烷基或杂环基，前提条件是R1、R2、R3和R4中的至少一个不是OH；
ii)R1与R2和/或R3与R4一起为-NH-C(＝O)-NH-，-NH-S(O2)-NH-，-CH2-C(＝O)-NH-或-CH2-S(O2)-NH，且与其取代的碳原子一起形成5元杂环，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地如i)所选择；或
iii)R1、R2、R3和R4中的至少一个是-NH-CRa＝CRb-、或-NH-S(O2)CRcRd，且与苯环的两个相邻的碳原子一起形成取代或未取代的杂环或取代或未取代的杂芳香环，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地如i)或ii)所选择；其中，Ra、Rb、Rc、Rd各自独立地是氢或取代或未取代的烷基。
其中，所述取代基(当存在时)选自一个或多个取代基，在一个具体实施方案中，为一到三个或四个取代基，其各自独立地选自Q1，其中Q1是卤素、假卤素、羟基、氧、硫代、腈、硝基、甲酸基、巯基、羟基羰基、羟基羰基烷基、烷基、卤代烷基、多聚卤代烷基、氨基烷基、二氨基烷基、含1到2个双键的烯基、和含1到2个三键的炔基、环烷基、环烷基烷基、杂环基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、杂芳烷基、三烷基甲硅烷基、二烷基芳基甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基、三芳基甲硅烷基、亚烷基、芳基亚烷基、烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、芳氧基羰基、芳氧基羰基烷基、芳烷氧基羰基、芳烷氧基羰基烷基、芳基羰基烷基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、二芳基氨基羰基、芳烷基氨基羰基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂芳烷氧基、杂环氧基、环烷氧基、全氟烷氧基、烯氧基、炔氧基、芳烷氧基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基羰氧基、氨基羰氧基、烷基氨基羰氧基、二烷基氨基羰氧基、烷基芳基氨基羰氧基、二芳基氨基羰氧基、胍基、异硫脲基、酰脲基、N-烷基酰脲基、N-芳基酰脲基、N’-烷基酰脲基、N’，N’-二烷基酰脲基、N’-烷基-N’-芳基酰脲基、N’，N’-二芳基酰脲基、N’-芳基酰脲基、N，N’-二烷基酰脲基，N-烷基-N’-芳基酰脲基、N-芳基-N’-烷基酰脲基、N，N’-二芳基酰脲基、N，N’，N’-三烷基酰脲基、N，N’-二烷基-N’-芳基酰脲基、N-烷基-N’，N’-二芳基酰脲基、N-芳基-N’，N’-二烷基酰脲基、N，N’-二芳基-N’-烷基酰脲基、N，N’，N’-三芳基酰脲基、脒基、烷基脒基、芳基脒基、亚氨基、羟基亚氨基、烷氧基亚氨基、芳氧基亚氨基、芳烷氧基亚胺基、烷基偶氮基、芳基偶氮基、芳烷基偶氮基、氨基硫代羰基、烷基氨基硫代羰基、芳基氨基硫代羰基、氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、芳基氨基烷基、二芳基氨基烷基、烷基芳基氨基烷基、烷基氨基、二烷基氨基、卤代烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基芳基氨基、烷基羰基氨基、烷氧基羰基氨基、芳烷氧基羰基氨基、芳基羰基氨基、芳基羰基氨基烷基、芳氧基羰基氨基烷基、芳氧基芳基羰基氨基、芳氧基羰基氨基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、杂芳基磺酰基氨基、杂环基磺酰基氨基、杂芳硫基、叠氮基、-N+R51R52R53、P(R50)2、P(＝O)(R50)2、OP(＝O)(R50)2、-NR60C(＝O)R63、二烷基磷酸基、烷基芳基磷酸基、二芳基磷酸基、羟基磷酸基、烷硫基、芳硫基、全氟烷硫基、羟基羰基烷硫基、氰硫基、异氰硫基、烷基亚磺酰氧基、烷基磺酰氧基、芳基亚磺酰氧基、芳基磺酰氧基、羟基磺酰氧基、烷氧基磺酰氧基、氨基磺酰氧基、烷基氨基磺酰氧基、二烷基氨基磺酰氧基、芳基氨基磺酰氧基、二芳基氨基磺酰氧基、烷基芳基氨基磺酰氧基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳基亚磺酰基、芳基磺酰基、羟基磺酰基、烷氧基磺酰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、二芳基氨基磺酰基或烷基芳基氨基磺酰基；或两个Q1基团(取代以1，2或1，3排列的原子)一同形成亚烃基二氧基(即-O-(CH2)y-O-)、硫代亚烷氧基(即-S-(CH2)y-O-)或亚烃基二硫氧基(即-S-(CH2)y-S-)，其中y是1或2；或两个Q1基团(取代同一个原子)一同形成亚烃基；其中，
R50是羟基、烷氧基、芳烷氧基、烷基、杂芳基、杂环基、芳基或-NR70R71，其中R70和R71各自独立地是氢、烷基、芳烷基、芳基、杂芳基、杂芳烷基或杂环基，或R70和R71一起形成亚烃基、氮杂亚烃基、氧代亚烃基或硫代亚烃基；
R51、R52、R53各自独立地是氢、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基或杂环基烷基；
R60是氢、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基或杂环基烷基；和
R63是烷氧基、芳烷氧基、烷基、杂芳基、杂环基、芳基或-NR70R71。
在某些具体实施方案中，本发明提供了具有下式的化合物：
或
或其药学上可接受的衍生物，其中R选自C1-C10亚烃基，其中(a)当碳原子的数目至少为2时，其任选地有1或2个双键；(b)1到3个非相邻的亚甲基团任选地被NR’(其中，R’是H、烷基、或酰基)、或O、或S替代；(c)1或2个亚甲基团任选地被羰基或羟亚甲基团替代；和(d)1或2个亚甲基基团任选地被环烷基或杂环基基团替代，该环烷基或杂环基基团任选地被一个或多个选自低级烷基、NR’(其中R’是H、烷基或酰基)、O或S的取代基取代，
R1、R2、R3和R4各自独立地选自：
i)R1、R2、R3和R4各自独立地选自OH、-NR5C(＝O)R6和-NR7S(O2)R8，其中R5和R8各自独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂芳烷基、取代或未取代的杂环基或取代或未取代的杂环基烷基；R6和R8各自独立地是取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的芳烷氧基、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的芳基或-NR9R10，其中的R9和R10各自独立地是氢、烷基、芳烷基、芳基、杂芳基、杂芳烷基或杂环基，条件是R1、R2、R3和R4中的至少一个不是OH。
ii)R1与R2和/或R3与R4一起为-NH-C(＝O)-NH-、-NH-S(O2)-NH-、-CH2-C(＝O)-NH-或-CH2-S(O2)-NH-，且与它们取代的碳原子一起形成5元杂环，而其余的R1、R2、R3和R4各自独立地如i)所选择；或
iii)R1、R2、R3和R4中的至少一个是-NH-CRa＝CRb-、或-NH-S(O2)CRcRd-，且与苯环上的两个相邻碳原子一起形成取代或未取代的杂环或取代或未取代的杂芳香环，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地如i)或ii)所选择；其中Ra、Rb、Rc和Rd各自独立地是氢或取代或未取代的烷基；
其中，所述取代基(当存在时)选自一个或多个取代基，在一个具体实施方案中，选自1到3个或4个取代基，其各自独立地选自Q1，其中Q1是卤素、假卤素、羟基、氧、硫代、腈、硝基、甲酸基、巯基、羟基羰基、羟基羰基烷基、烷基、卤代烷基、多聚卤代烷基、氨基烷基、二氨基烷基、含1到2个双键的烯基、和含1到2个三键的炔基、环烷基、环烷基烷基、杂环基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、杂芳烷基、三炕基甲硅烷基、二烷基芳基甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基、三芳基甲硅烷基、亚烷基、芳基亚烷基、烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、芳氧基羰基、芳氧基羰基烷基、芳烷氧基羰基、芳烷氧基羰基烷基、芳基羰基烷基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、二芳基氨基羰基、芳烷基氨基羰基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂芳烷氧基、杂环氧基、环烷氧基、全氟烷氧基、烯氧基、炔氧基、芳烷氧基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基羰氧基、氨基羰氧基、烷基氨基羰氧基、二烷基氨基羰氧基、烷基芳基氨基羰氧基、二芳基氨基羰氧基、胍基、异硫脲基、酰脲基、N-烷基酰脲基、N-芳基酰脲基、N’-烷基酰脲基、N’，N’-二烷基酰脲基、N’-烷基-N’-芳基酰脲基、N’，N’-二芳基酰脲基、N’-芳基酰脲基、N，N’-二烷基酰脲基，N-烷基-N’-芳基酰脲基、N-芳基-N’-烷基酰脲基、N，N’-二芳基酰脲基、N，N’，N’-三烷基酰脲基、N，N’-二烷基-N’-芳基酰脲基、N-烷基-N’，N’-二芳基酰脲基、N-芳基-N’，N’-二烷基酰脲基、N，N’-二芳基-N’-烷基酰脲基、N，N’，N’-三芳基酰脲基、脒基、烷基脒基、芳基脒基、亚氨基、羟基亚氨基、烷氧基亚氨基、芳氧基亚氨基、芳烷氧基亚胺基、烷基偶氮基、芳基偶氮基、芳烷基偶氮基、氨基硫代羰基、烷基氨基硫代羰基、芳基氨基硫代羰基、氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、芳基氨基烷基、二芳基氨基烷基、烷基芳基氨基烷基、烷基氨基、二烷基氨基、卤代烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基芳基氨基、烷基羰基氨基、烷氧基羰基氨基、芳烷氧基羰基氨基、芳基羰基氨基、芳基羰基氨基烷基、芳氧基羰基氨基烷基、芳氧基芳基羰基氨基、芳氧基羰基氨基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、杂芳基磺酰基氨基、杂环基磺酰基氨基、杂芳硫基、叠氮基、-N+R51R52R53、P(R50)2、P(＝O)(R50)2、OP(＝O)(R50)2、-NR60C(＝O)R63、二烷基磷酸基、烷基芳基磷酸基、二芳基磷酸基、羟基磷酸基、烷硫基、芳硫基、全氟烷硫基、羟基羰基烷硫基、氰硫基、异氰硫基、烷基亚磺酰氧基、烷基磺酰氧基、芳基亚磺酰氧基、芳基磺酰氧基、羟基磺酰氧基、烷氧基磺酰氧基、氨基磺酰氧基、烷基氨基磺酰氧基、二烷基氨基磺酰氧基、芳基氨基磺酰氧基、二芳基氨基磺酰氧基、烷基芳基氨基磺酰氧基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳基亚磺酰基、芳基磺酰基、羟基磺酰基、烷氧基磺酰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、二芳基氨基磺酰基或烷基芳基氨基磺酰基；或两个Q1基团(取代以1，2或1，3排列的原子)一同形成亚烃基二氧基(即-O-(CH2)y-O-)、硫代亚烷氧基(即-S-(CH2)y-O-)或亚烃基二硫氧基(即-S-(CH2)y-S-)，其中y是1或2；或两个Q1基团(取代同一个原子)一同形成亚烃基；其中，
R50是羟基、烷氧基、芳烷氧基、烷基、杂芳基、杂环基、芳基或-NR70R71，其中R70和R71各自独立地是氢、烷基、芳烷基、芳基、杂芳基、杂芳烷基或杂环基，或R70和R71一起形成亚烃基、氮杂亚烃基、氧代亚烃基或硫代亚烃基；
R51、R52、R53各自独立地是氢、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基或杂环基烷基；
R60是氢、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基或杂环基烷基；和
R63是烷氧基、芳烷氧基、烷基、杂芳基、杂环基、芳基或-NR70R71。
在某些具体实施方案中，Q1是氧、烷基、卤代烷基、多聚卤代烷基、氨基烷基、二氨基烷基、含1到2个双键的烯基、含1到2个三键炔基、环烷基、环烷基烷基、杂环基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基或杂芳烷基。
在某些具体实施方案中，Q1是氧或烷基。在某些具体实施方案中，Q1是氧。在某些具体实施方案中，Q1是烷基。在某些具体实施方案中，Q1是低级烷基。在某些具体实施方案中，Q1是甲基。
在某些具体实施方案中，R’是H或烷基。在其它具体实施方案中，R’是H。
在某些具体实施方案中，t是0、1或2。在某些具体实施方案中，t是0或1。在某些具体实施方案中，t是1。在某些具体实施方案中，v是0、1或2。在某些具体实施方案中，v是0或1。在某些具体实施方案中，v是1。
在某些具体实施方案中，R是-(CH2)mC(O)(CH2)sNH(CH2)r-、-(CH2)p-或-(CH2)sY(CH2)r-，其中Y是任选地被一个或多个选自烷基、NR’、O、或S的取代基取代的环烷基或杂环基团；p是1到10，而m、s和r各自独立地是0到6的整数。
在一个具体实施方案中，R是-C(O)NH、CH2CH2-或-(CH2)Y(CH2)-。在一个具体实施方案中，R是-C(O)NH-、在一个具体实施方案中，R是-CH2CH2-。在一个具体实施方案中，R是-(CH2)Y(CH2)-。
在一个具体实施方案中，Y是杂环基，任选地被一个或多个选自烷基和氧的取代基取代。在一个具体实施方案中，Y是桥式的杂环基，任选地被一个或多个选自烷基和氧的取代基取代。在一个具体实施方案中，Y是二环杂环基，任选地被甲基和氧取代。在一个具体实施方案中，Y是
其中Q2是烷基。
在某些具体实施方案中，Y是
在某些具体实施方案中，R被烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、杂环基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳烷基或杂芳烷基取代。
在某些具体实施方案中，R被烷基取代。在某些具体实施方案中，R被低级烷基取代。在某些具体实施方案中，R被甲基取代。
在某些具体实施方案中，用于本本发明的组合物和方法中的化合物具有下式：
在某些具体实施方案中，用于本发明的组合物和方法中的化合物具有下式：
在某些具体实施方案中，R1、R2、R3和R4各自独立地选自：
i)OH、甲酰胺基、烷基酰胺基、烷基芳基酰胺基、芳烷基酰胺基、芳基酰胺基、N-烷基-N-烷基磺酰胺基、烷基磺酰胺基、烷基芳基磺酰胺基、
芳基磺酰胺基或芳烷基磺酰胺基，条件是R1、R2、R3和R4中的至少一个不是OH；
ii)R1与R2和/或R3与R4一起为-NH-C(＝O)-NH-、-NH-S(O2)-NH-、-CH2-C(＝O)-NH-或-CH2-S(O2)-NH，且与它们取代的碳原子一起形成5元杂环，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地如i)所选择；或
iii)R1、R2、R3和R4中的至少一个是-NH-CRa＝CRb-、或-NH-S(O2)CRcRd-，且与苯环上的两个相邻碳原子一起形成取代或未取代的杂环或取代或未取代的杂芳香环，而其余的R1、R2、R3和R4各自独立地如i)或ii)所选择；其中Ra、Rb、Rc和Rd各自独立地是氢或烷基；
在一个具体实施方案中，R1、R2、R3和R4各自独立地是OH、甲酰胺基、烷基酰胺基、烷基芳基酰胺基、芳烷基酰胺基、芳基酰胺基、烷基磺酰胺基、N-烷基-N-烷基磺酰胺基、烷基芳基磺酰胺基、芳基磺酰胺基或芳烷基磺酰胺基，条件是R1、R2、R3和R4中的至少一个不是OH；
在另一个具体实施方案中，R1、R2、R3和R4各自独立地是OH、甲酰胺基、烷基酰胺基，条件是R1、R2、R3和R4中的至少一个不是OH；
在另一个具体实施方案中，R1与R2和/或R3与R4一起为-NH-C(＝O)-NH-，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地是OH、甲酰胺基、烷基酰胺基。在另一个具体实施方案中，R1与R2一起为-NH-C(＝O)-NH-，R3和R4各自独立地是OH、甲酰胺基或甲基磺酰胺基。
在另一个具体实施方案中，R3与R4一起为-NH-C(＝O)-NH-，R1、R2各自独立地是OH、甲酰胺基或甲基磺酰胺基。
在另一个具体实施方案中，R1、R2、R3和R4中的至少一个是-NH-CRa＝CRb-、或-NH-S(O2)CRcRd-，且与苯环上的两个相邻碳原子一起形成取代或未取代的杂环或取代或未取代的杂芳香环，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地如i)或ii)所选择；其中Ra、Rb、Rc和Rd各自独立地是氢或烷基，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地选自：OH、甲酰胺基、烷基酰胺基、烷基芳基酰胺基、芳烷基酰胺基、芳基酰胺基、烷基磺酰胺基、烷基芳基磺酰胺基、芳基磺酰胺基和芳烷基磺酰胺基。
在另一个具体实施方案中，R1、R2、R3和R4中的至少一个是-NH-CH＝CH-，且与苯环上的两个相邻碳原子一起形成吲哚环，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地选自：OH、甲酰胺基、烷基酰胺基、烷基芳基酰胺基、芳烷基酰胺基、芳基酰胺基、烷基磺酰胺基、烷基芳基磺酰胺基、芳基磺酰胺基和芳烷基磺酰胺基。
在另一个具体实施方案中，R1、R2、R3和R4中的至少一个是-NH-CH＝CH-，且与苯环上的两个相邻碳原子一起形成吲哚环，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地选自：OH、甲酰胺基、甲基磺酰胺基。
在另一个具体实施方案中，R1、R2、R3和R4中的至少一个是-NH-S(O2)CH2-，且与苯环上的两个相邻碳原子一起形成苯并异噻唑-1，1-二氧，其余的R1、R2、R3和R4各自独立地选自：OH、甲酰胺基和甲基磺酰胺基。
在某些具体实施方案中，所述化合物具有从下列选择的结构式：
和
其中，
i)当M是C(O)时，Rx是氢或烷基，和
ii)当M是S(O)2时，Rx是烷基。在一个具体实施方案中，M是C(O)且Rx是烷基。在一个具体实施方案中，M是C(O)且R5是异丙基。在一个具体实施方案中，M是S(O)2且Rx是甲基。
在某些具体实施方案中，所述化合物具有从下列选择的结构式：
和
在某些具体实施方案中，所述化合物具有从下列选择的结构式：
和
在某些具体实施方案中，所述化合物具有从下列选择的结构式：
和
在某些具体实施方案中，所述化合物具有下式：
或
其中，A2、A3、B2和B3各自独立地选自卤素、氰化物、氰酸盐、硫氰酸盐、硒氰酸盐(selenocyanate)、三氟甲氧基、叠氮化物、硝基和三氟甲基；
R1、R2、R3和R4选自：
i)R1和R2是OH，且R3和R4各自独立地如本说明书其它部分所述，或
ii)R3和R4是OH，且R1和R2各自独立地如本说明书其它部分所述，其余的变量如本说明书所述。
在某些具体实施方案中，所述化合物具有下式：
其中，A2、A3、B2和B3各自独立地选自卤素、假卤素、硝基、+NH3、SO3H、羧基和卤代烷基；而其余的变量如本说明书其它部分所述。
在某些具体实施方案中，所述化合物具有下式：
或
其中，所述变量如本说明书其它部分所述。
在某些具体实施方案中，所述化合物具有下式：
或
其中，所述变量如本说明书其它部分所述。
在一个具体实施方案中，所述化合物选自：2-氧-N-(2-氧-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺；N-(3，4-二羟基苯基)-2-氧-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基-碳酰胺和3，4-二羟基-N-(2-氧-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)苯甲酰胺。
在一个具体实施方案中，所述化合物选自：3，4，3’，4’-四羟基安息香胶；3，4，3’，4’-四羟基脱氧安息香胶；3，4，3’，4’-四羟基二苯基甲烷；1，2-二(3，4-二羟基苯基)乙烷；1，3-二(3，4．二羟基苯基)丙烷；3，4，3’，4’-四羟基苯丙烯酰苯；3，5-二(3，4-二羟基苯基)-1-甲基-2-吡唑啉；4，6-二(3，4-二羟基苯基)-3-氰-2-甲基嘧啶；1，4-二(3，4-二羟基苄基)哌嗪；N，N’-二(3，4-二羟基苄基)-N，N’-二甲基亚乙基二氨；2，5-二(3，4-二羟基苄基)-2，5-二氮[2.2.1]二环庚烷；N，N’-二(3，4-二羟基苄基)-反-1，2-二氨基环己烷；N，N’-二(3，4-二羟基苄基)-反-1，4-二氨基环己烷；N，N’-二(3，4-二羟基苄基)-顺-1，3-二(氨基甲基)环己烷；N-(3，4-二羟基苄基)脯氨酸3，4-二羟基苄胺；2-(3，4-二羟基苄基)异喹啉-3-羧酸-3，4-二羟基苯乙基酰胺；2，6-二(3，4-二羟基苄基)环己酮；3，5-二(3，4-二羟基苄基)-1-甲基-4-哌啶酮；2，4-二(3，4-二羟基苄基)-3-托品酮；三(3，4-二羟基苄基)甲烷；α-(3，4-二羟基苯甲酰胺)-3，4-二羟基苯丙烯酸3，4-二羟基苄胺；4-(3，4-二羟基苄基氨基亚甲基)-2-(3，4-二羟基苯基)噁唑啉-5-酮；1，4-二(3，4-二羟基苯甲酰基)哌嗪；N，N’-二(3，4-二羟基苯甲酰基)-N，N’-二甲基亚乙基二氨；2，5-二(3，4-二羟基苯甲酰基)-2，5-二氮[2.2.1]二环庚烷；N，N’-二(3，4-二羟基苯基酰基)-反-1，2-二氨环己烷；N，N’-二(3，4-二羟基苯甲酰基)-顺-1，3-二(氨基甲基)环己烷；3，6-二(3，4-二羟基苄基)-2，5-二酮哌嗪；3，6-二(3，4-二羟基苯亚甲基)-1，4-二甲基-2，5-二酮哌嗪；N-(3，4-二羟基苯基乙酰基)脯氨酸-3，4-二羟基苯胺；2，3-二(3，4-二羟基苯基)丁烷；1，3-二(3，4-二羟基苄基)苯；1，4-二(3，4-二羟基苄基)苯；2，6-二(3，4-二羟基苄基)嘧啶；2，5-二(3，4-二羟基苄基)噻吩；2，3-二(3，4-二羟基苄基)噻吩；1，2-二(3，4-二羟基苯基)环己烷；1，4-二(3，4-二羟基苯基)环己烷；3，7-二(3，4-二羟基苯基)二环[3.3.0]辛烷；2，3-二(3，4-二羟基苯基)-1，7，7-三甲基-二环[2.2.1]庚烷；1，2-二(3，4-二羟基苯氧基)乙烷；1，3-二(3，4-二羟基苯氧基)丙烷；反-1，2-二(3，4-二羟基-苯氧基)环戊烷；N-(3，4-二羟基苄基)-3-(3，4-二羟基苯氧基)-2-羟基丙基胺；3，4-二羟基苯氧基乙酸3，4-二羟基苯胺；3，4-二羟基苯氧基乙酸3，4-二羟基苄胺；3，4-二羟基苯氧基乙酸3，4-二羟基苯乙基酰胺；3，4-二羟基苯甲酸p-(3，4-二羟基苯氧基)苯胺；3，4-二羟基苯甲酸o-(3，4-二羟基苯氧基)苯胺；2，6-二(3，4-二羟基苯氧基)嘧啶；3，4-二羟基苯甲酸3，4-二羟基苯胺；3，4-二羟基苯甲酸3，4-二羟基苄胺；3，4-二羟基苯甲酸3，4-二羟基苯乙基酰胺；3，4-二羟基苯基乙酸3，4-二羟基苯胺；3，4-二羟基苯基乙酸3，4-二羟苄胺；3，4-二羟基苯基乙酸3，4-二羟基苯乙基酰胺；3-(3，4-二羟基苯基)丙酸3，4-二羟基苯胺；3-(3，4-二羟基苯基)丙酸3，4-二羟基苄胺；3-(3，4-二羟基苯基)丙酸3，4-二羟基苯乙基酰胺；3，4-二羟基苯丙烯酸3，4-二羟基苯胺；3，4-二羟基苯丙烯酸3，4-二羟基苄胺；3，4-二羟基苯丙烯酸3，4-二羟基苯乙基酰胺；草酸二(3，4-二羟基苯胺)；草酸二(3，4-二羟基苄胺)；草酸二(3，4-二羟基苯乙基酰胺)；琥珀酸二(3，4-二羟基苯胺)；琥珀酸二(3，4-二羟基苄胺)；琥珀酸二(3，4-二羟基苯乙基酰胺)；马来酸二(3，4-二羟基苯胺)；马来酸二(3，4-二羟基苄胺)；延胡索酸二(3，4-二羟基苯胺)；延胡索酸二(3，4-二羟基苄胺)；二(3，4-二羟基苄基)酰胺；N-(3，4-二羟基-苄基)-3，4-二羟基苯乙基氨；三(3，4-二羟基苄基)胺；1，3-二(3，4-二羟基苯基)脲；1-(3，4-二羟基苯基)-3-(3，4-二羟基苄基)脲；1-(3，4-二羟基苯基)3-(3，4-二羟基苯乙基)脲；3-脱氧-3-(3，4-二羟基苄基)氨基表儿茶酸；3-脱氧-3-(3，4-二羟基苯乙基)氨基表儿茶酸；2，3，6，7-四羟基-9，10-环氧-9，10-二氢吖啶；10-氨基蒽-1，2，7，8-四醇；吖啶-1，2，6，7-四醇；吩嗪-2，3，7，8，10-五醇；二苯并[c，f][2，7]萘啶-2，3，10，11-四醇；和6-甲基-5，6，6a，7-四氢-4H-二苯并[de，g]喹啉-2，10，11-三醇，其中所述化合物的酚式羟基基团的至少一个被下列取代基替代：
i)-NR5C(＝O)R6、-NR7S(O2)R8，其中R5和R7各自独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂芳烷基、取代或未取代的杂环基或取代或未取代的杂环基烷基；R6和R8各自独立地是取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的芳烷氧基、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的芳基或-NR9R10，其中R9和R10各自独立地是氢、烷基、芳烷基、芳基、杂芳基、杂芳烷基或杂环基；
ii)R1与R2和/或R3与R4一起形成苯并咪唑啉酮(benzimidazolinone)、苯并噻二唑啉-S，S-二氧或苯并噁唑啉酮；或
iii)R1、R2、R3和R4中的至少一个与相邻的碳原子形成取代或未取代的杂环或取代或未取代的杂芳香环；其中所述取代基(当存在时)选自一个或多个取代基，在一个具体实施方案中，选自1到3个或4个取代基，各个取代基独立地选自Q1，该Q1是卤素、假卤素、羟基、氧、硫代、腈、硝基、甲酸基、巯基、羟基羰基、羟基羰基烷基、烷基、卤代烷基、多聚卤代烷基、氨基烷基、二氨基烷基、含1到2个双键的烯基、含1到2个三键的炔基、环烷基、环烷基烷基、杂环基、杂环基烷基、芳基、杂环芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、杂芳基烷基、三烷基甲硅烷基、二烷基芳基甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基、三芳基甲硅烷基、亚烷基、芳基亚烷基、烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、芳氧基羰基、芳氧基羰基烷基、芳烷氧基羰基、芳烷氧基羰基烷基、芳基羰基烷基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基氨基羰机、二芳基氨基羰基、芳烷基氨基羰基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂芳烷氧基、杂环氧基、杂环烷氧基、全氟烷氧基、烯氧基、炔氧基、芳烷氧基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基羰氧基、氨基羰氧基、烷基氨基羰氧基、二烷基氨基羰氧基、烷基芳基氨基羰氧基、二芳基氨基羰氧基、胍基、异硫脲基、脲基、N-烷基脲基、N-芳基脲基、N’-烷基脲基、N’，N’-二烷基脲基、N’-烷基-N’芳基脲基、N’，N’-二芳基脲基、N’-芳基脲基、N，N’-二烷基脲基、N-烷基-N’-芳基脲基、N-芳基-N’-烷基脲基、N，N’-二芳基脲基、N，N’，N’-三烷基脲基、N，N’-二烷基-N’-芳基脲基、N-烷基-N’，N’-二芳基脲基、N-芳基-N’，N’-二烷基脲基、N，N’-二芳基-N’-烷基脲基、N，N’，N’-三芳基脲基、脒基、烷基脒基、芳基脒基、亚氨基、羟基亚氨基、烷氧基亚氨基、芳氧基亚氨基、芳烷氧基亚胺基、烷基偶氮基、芳基偶氮基、芳烷基偶氮基、氨基硫代羰基、烷基氨基硫代羰基、芳基氨基硫代羰基、氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、芳基氨基烷基、二芳基氨基烷基、烷基芳基氨基烷基、烷基氨基、二烷基氨基、卤代烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基芳基氨基、烷基羰基氨基、烷氧基羰基氨基、芳烷氧基羰基氨基、芳基羰基氨基、芳基羰基氨基烷基、芳氧基羰基氨基烷基、芳氧基芳基羰基氨基、芳氧基羰基氨基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、杂芳基磺酰基氨基、杂环基磺酰基氨基、杂芳硫基、叠氮基、-N+R51R52R53、P(R50)2、P(＝O)(R50)2、OP(＝O)(R50)2、-NR60C(＝O)R63、二烷基磷酸基、烷基芳基磷酸基、二芳基磷酸基、羟基磷酸基、烷硫基、芳硫基、全氟烷硫基、羟基羰基烷硫基、氰硫基、异氰硫基、烷基亚磺酰氧基、烷基磺酰氧基、芳基亚磺酰氧基、芳基磺酰氧基、羟基磺酰氧基、烷氧基磺酰氧基、氨基磺酰氧基、烷基氨基磺酰氧基、二烷基氨基磺酰氧基、芳基氨基磺酰氧基、二芳基氨基磺酰氧基、烷基芳基氨基磺酰氧基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳基亚磺酰基、芳基磺酰基、羟基磺酰基、烷氧基磺酰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、二芳基氨基磺酰基或烷基芳基氨基磺酰基；或两个Q1基团(取代以1，2或1，3排列的原子)一起形成亚烃基二氧基(即-O-(CH2)y-O-)、硫代亚烷氧基(即-S-(CH2)y-O-)或亚烃基二硫氧基(即-S-(CH2)y-S-)，其中y是1或2；或两个Q1基团(取代同一个原子)一起形成亚烃基；其中，
R50是羟基、烷氧基、芳烷氧基、烷基、杂芳基、杂环基、芳基或-NR70R71，其中R70和R71各自独立地是氢、烷基、芳烷基、芳基、杂芳基、杂芳烷基或杂环基，或R70和R71一起形成亚烃基、氮杂亚烃基、氧代亚烃基或硫代亚烃基；
R51、R52、R53各自独立地是氢、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基或杂环基烷基；
R60是氢、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基或杂环基烷基；和
R63是烷氧基、芳烷氧基、烷基、杂芳基、杂环基、芳基或-NR70R71。
在某些具体实施方案中，所述化合物选自：
在某些具体实施方案中，所述化合物选自：
在某些具体实施方案中，所述化合物选自：
在某些具体实施方案中，所述化合物选自：
在某些具体实施方案中，所述化合物选自：
在某些具体实施方案中，所述化合物是：
在其它具体实施方案中，所述化合物选自：
在某些具体实施方案中，所述化合物选自：
在某些具体实施方案中，所述化合物选自：
和
2，4-二(3，4-二羟基苄基)-8-甲基-8-氮-二环
[3.3.1]辛-3-酮
在某些具体实施方案中，本发明提供的化合物具有下式：
其中，A1和B1各自独立地选自卤素、假卤素、硝基、+NH3、SO3H、羧基和卤代烷基；和t1和v1都独立地是1到3的整数；和
其余的变量如本说明书的其它部分所述。
在某些具体实施方案中，而t1和v1各自独立地是1或2。在某些具体实施方案中，而t1是1。在某些具体实施方案中，v1是1。
在某些具体实施方案中，所述化合物选自：
其中，变量如本说明书的其它部分所述。
在某些具体实施方案中，所述化合物选自：
其中，A2，A3，B2和B3各自独立地选自Cl、F、氰化物、氰酸盐、硫代氰酸盐、硒腈酸盐、三氟甲氧基、叠氮基、硝基和三氟甲基。
C.化合物的制备
本发明提供的化合物可以通过本领域公知的标准合成方法来制备，本说明书提供了该制备方法的一般流程。下文的实施例描述了典型的具体实施方案，但这些实施例并不意味着限制要求保护的主题的范围。需要说明的是，说明书和下文的实施例仅仅紧随这些实施例之后的权利要求所要求保护的主题的范围和精神的示范性的例子。本领域的普通技术人员根据本说明书能够容易地理解所述权利要求范围内的其它具体实施方案。
制备这些化合物所使用的起始材料和试剂可以从商业提供商处获得，如Aldrich化学公司(Milwaukee，WI)、Bachem(Torrance，CA)，Sigma(St.Louis，MO)或Lancaster合成公司，也可以通过本领域普通技术人员所熟知的方法按下面的参考文献所描述的步骤来制备：Fieser and Fieser’s，Reagents for Organic Synthesis，Vol.1-17，John Wiley和Sons，New York，NY，1991年；Rodd’s，Chemistry of Carbon Compounds，Vol.1-5和同上，Elsevier Science出版商，1989；Organic Reactions，Vol.1-40，John Wiley和Sons，New York，NY，1991年；March J：Advanced Organic Chemistry，第四版，John Wiley和Sons，New York，NY；和Larock：Comprehensive OrganicTransformations，VCH出版商，New York，1989。
在大多数情况下，引进羟基的保护基团并最后将其除去。在Greene等人的Protective Groups in Organic Synthesis，第二版，John Wiley和Sons，New York，1991中描述有合适的保护基团。其它的起始材料或早期的中间体可以用上述材料通过，例如本领与普通技术人员所公知的方法来制备。可以用常规的技术，包括沉淀、过滤、蒸馏、结晶、色谱等方法分离和纯化本发明所提供的起始材料、中间体和化合物。可以使用常规的方法，包括物理常数、光谱方法对化合物进行表征。
本发明提供了制备示例性的化合物的一般反应流程。
i)Achesom等人，J.Med.Chem.(1981)24，1300-1304，描述了使用亚硫酰氯制备苯并噻二唑啉(benxthiadiazolidine)S，S-二氧的如下方法：
ii)Burke等人，JCS Perkin Tansactions(1984)11，1851-4中描述了苯并噻二唑啉S，S-二氧的制备方法，如下：
本发明所提供的又一些化合物可以通过文献所描述如下反应来制备：
参见，Roberts等人，J.O.Chen.(1997)62，568-577。iv)
参见，Hughes等人，J.Med.Chrm.1957)18，1077-1088。
D.药物组合物和给药
本发明所提供的化合物能够用作，例如用于以药学上可接受的无机酸或有机酸的盐的形式给药，或与一种或多种药学上可接受的赋形剂联合使用。短语“药学上可接受的盐”是指在合理的医学评价范围内适于与组织接触使用的而没有不合适的毒性、刺激性、过敏反应等，且具有合理效益/风险比率的那些盐。药学上可接受的盐是本领域公知的。这些盐可以在分离和纯化本发明所提供的化合物的过程的最后原位制备，也可以通过分别使酸性的或碱性的药物底物与合适的碱或酸反应来制备。源于有机酸或无机酸的典型盐包括但不限于氢氯化物、氢溴化物、氢碘化物、乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、葡萄糖酸盐、延胡索酸盐、氢碘化物、乳酸盐、马来酸盐、草酸盐、软酯酸酯、pectinate、琥珀酸盐、酒石酸眼、磷酸盐、谷氨酸盐和重碳酸盐。源于有机碱或无机碱的典型盐包括但不限于锂，钠，钾，钙，镁，铵，单烷基铵如甲葡胺，二烷基铵，三烷基铵，四烷基铵。
在某些具体实施方案中，所述组合物含有本发明所提供的至少基本上纯的化合物。通常，“纯”是指纯度高于95％，而“基本上纯”是指合成的化合物可用于治疗剂量，因而该化合物仅含有通过常规纯化程序不能容易地或不能轻易地去除的杂质。
所述药物组合物的给药方式可以是口服、直肠、静脉内、肌肉内、脑池内、叶鞘内、腹膜内、口腔、皮下、胸骨内、鼻内或局部给药。还可以通过导管，冠状动脉内支架(由细金属丝网组成的小管装置)，生物可降解的多聚物，或生物载体包括但不限于抗体、生物素-抗生物素蛋白复合物等将组合物递送到靶位点。本发明所提供的化合物的局部给药剂型包括粉剂、喷剂、药膏和吸入剂。在无菌的条件下，将活性化合物与药学上可接受的载体和任何需要的保护剂、缓冲液或推进剂混合。本发明还提供了眼用制剂、眼药膏、粉剂和溶液。
为了对特定病人获得有疗效的反应，本发明所提供的药物组合物的活性成分的实际剂量水平和给药方式可以变化。短语“治疗有效量”的本发明所提供的化合物是指当以合理的效益/风险比率应用于任何医学治疗时足以治疗病症的化合物的量。但是，要理解的是本发明所提供的化合物和组合物的总的日使用量应该由参与医生在合理医学判断范围内确定。本发明所提供的化合物的总日剂量为大约0.0001到大约1000毫克/千克/天。对于口服，剂量可以在大约0.001到大约5毫克/千克/天的范围内。如果需要的话，可以将有效日剂量分成多个给药剂量；因而，单一剂量的组合物可以含有可构成日剂量的量，或其多个亚剂量。对于特定的患者而言，特定的治疗有效量水平取决于很多因素，包括治疗的病症和病症的严重性；患者的病史，采用的具体化合物的活性；采用的具体组合物、患者的年龄、体重、总的健康状况、性别和饮食、给药的时间、给药的途径、治疗持续的时间、采用的具体化合物的排出率、与使用的具体化合物联合使用或同时使用的药物等。
本发明所提供的化合物可以与一种或多种非毒性的药学上可接受的稀释药、载体、佐剂和抗菌和抗真菌试剂如羧基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等一起配制。例如，可以通过使用涂层材料如卵磷脂，通过用分散剂维持需要的颗粒大小和通过使用表面活性剂来维持来合适的流动性。在某些情况下，为了延长药物的效果，降低皮下或肌肉注射的药物的吸收率是理想的。这可以通过将水晶的或无定形的药物物质悬浮于像油这样的水溶性较差的载体中来实现。药物的吸收率依赖于它的分解速率，而分解速率依赖于晶体的大小和晶形。要使得注射药物具有延长吸收的形式，可以通过使用吸收延迟的试剂，如单硬脂酸铝或白明胶来实现。
本发明所提供的化合物可以以固体或液体的形式通过肠道或肠胃外方式给药。适合于肠胃外注射的组合物可以包含生理学上可接受的、等渗无菌的水性或非水性溶液、分散液、悬浮液或乳状液和用于在无菌的可注射溶液或分散液中重新配制的无菌干粉。合适的水性和非水性载体、稀释剂、溶剂或赋形剂的例子包括水、乙醇、多羟基化合物(丙烯乙二醇、聚乙烯乙二醇、甘油等)、植物油(如橄榄油)、像油酸乙酯这样的可注射有机酯，和其合适的混合物。这些组合物还可以含有佐剂，如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。除了含有上述活性化合物外，悬浮液还可以含有悬浮试剂，如异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和山梨糖醇酯、微晶纤维素、间氢氧化铝(aluminun metahydroxide)、斑脱土(bentonite)、琼脂和胶黄芪、或它们的混合物。
本发明所提供的化合物也可以通过皮下或静脉内、或肌肉内、或胸骨内、或鼻内注射或灌输给药，或以无菌可注射的水或油的悬浮液的形式通过灌输技术给药。该化合物可以是无菌可注射的水或油的悬浮液的形式。这些悬浮液可以根据本领域公知的方法使用上文所述的湿润剂和悬浮剂进行合适分散来配制。无菌的可注射的制剂也可以是配制于非毒性的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂，如1，3-丁二醇溶液中的无菌的可注射溶液或悬浮液。其中，可使用的可接受的赋形剂和溶剂是水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外，无菌的不挥发性油桶常用作溶剂或悬浮介质。因此，任何无味的不挥发性油都可以常规地使用，包括合成的甘油单或二酯。此外，像油酸这样的脂肪酸也被也可用于制备可注射制剂。可以调整剂量方案以提供最优的治疗反应。例如，每天可服用几个分开剂量，或可以按治疗状况的紧急程度按比例地减少剂量。
可以通过将药物的微胶囊基质置于生物可降解的多聚物，如聚交酯中来制备可注射的制剂形式。根据药物和多聚物的比例和采用的具体化合物的特性，可以控制药物的释放速率。其它的生物可降解的多聚物的实例包括聚原酸酯和酸酐。通过将药物装入与身体组织相容的脂质体或微乳剂中来制备可注射制剂。可注射制剂是无菌的，例如可以通过用除菌滤器过滤或将除菌的试剂加入到无菌的固体组合物中来进行灭菌，所述无菌的固体组合物在使用之前可以溶于或分散于无菌水或其它无菌的可注射介质中。
口服给药的固体剂型包括胶囊、片剂、药丸、粉剂和粒剂。在固体剂型中，所述活性化合物可以至少一种惰性的药学上可接受的赋形剂或载体混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或(a)填料或添加物，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，如羧甲基纤维素、藻酸盐、白明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯树胶；(c)保湿剂，如甘油；(d)分解试剂，如琼脂，碳酸钙马铃薯或木薯淀粉、褐藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；(e)溶液阻滞剂，如石蜡；(f)吸收加速剂，如四铵化合物；(g)润湿剂，如十六烷醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸收剂，如高岭土和斑脱土和(i)润滑剂，如云母、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、硫酸月桂酯钠(sodium lauryl sulfate)和它们的混合物。在胶囊、片剂和药丸的情况下，剂型中还可以包含缓冲试剂。类似形式的固体组合物在软和硬填充的白明胶胶囊中还可以用作填料，用乳糖和高分子量的聚乙二醇等用作赋形剂。
可以使用涂层和外壳，如肠衣(enteric coating)和制药领域公知的其它涂层来制备固体剂型的片剂、糖衣丸、胶囊、药丸和粒剂。它们任选地含有乳浊剂，也可以是组合物而使它们仅仅释放活性成分的，或更优先地在胃肠道的某部分释放，任选地以延迟的方式释放。可以使用的包埋组合物(Embedding composition)的实例包括聚合物质(polymeric substance)和石蜡。片剂含有化合物和与其混合的非毒性的、药学上可接受的、适于制备片剂的赋形剂。这些赋形剂可以是，例如惰性稀释液，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；粒化和分解试剂，例如玉米淀粉或褐藻酸；粘合剂，例如玉米淀粉、白明胶或阿拉伯树胶；和润滑剂，例如硬脂酸镁或硬脂酸或tale。片剂可以没有涂层，也可以用已知的技术对片剂进行涂层以延迟在胃肠道中的分解和吸收，从而提供延长时间内的持续作用。例如，可以采用延时材料，如硬脂酸单甘油脂或二硬脂酸甘油脂。口服使用的制剂也可以是硬的白明胶胶囊，其中所述化合物与惰性固体稀释剂，例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，口服使用的制剂也可以是软的白明胶胶囊，其中所述活性成分与水或油介质，例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。
口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、溶剂、悬浮液、糖浆和西也剂。除活性化合物外，液体剂型可以含有本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，如酒精、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、种子油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙烯甘油和山梨聚糖的脂肪酸酯和它们的混合物。除惰性稀释剂外，口服的组合物还可以含有佐剂，如湿润剂、乳化和悬浮试剂、甜味、调味剂和香味剂。
水性悬浮液含有化合物并混有适于制备水性悬浮液的赋形剂。这种赋形剂是悬浮试剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯树胶；分散和湿润试剂可以是天然存在的磷脂例如卵磷脂，或环氧烷烃与脂肪酸的缩合产物例如硬脂酸聚氧乙烯酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物例如十七烷乙烯氧基十六烷醇，或环氧乙烷与脂肪酸(如己糖醇)的偏酯的缩合产物例如油酸聚氧乙烯山梨糖醇酯，或环氧乙烷与脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物例如单油酸聚氧乙烯山梨聚糖酯。该水性悬浮液还可以含有一种或多种保护剂，例如p-苯甲酸乙酯或正丙酯，或一种或多种着色剂，一种或多种调味剂、或一种或多种甜味剂如蔗糖或糖精。
可以通过将化合物悬浮于植物油，例如花生油、橄榄油、芝麻油、或椰子油；或矿物油，如液体石蜡中来配制油悬浮液。该油悬浮液可以含有增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡(hard paraffin)或十六烷醇。可以添加如下文所述的甜味剂，和调味剂来提供美味的口服制品。这些组合物可以通过加入抗氧化剂，如抗坏血酸维生素C来保存。适于通过加入水来制备水悬浮液的可分散粉剂和粒剂提供活性成分和混合的分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂。上文已描述的合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂的例子。也可以存在其它的赋形剂，例如甜味剂、调味剂。
本发明所提供的化合物也可以是油溶于水的乳剂的形式。所述油相可以是植物油，例如橄榄油或花生油；或矿物油，例如液态石蜡或这些物质的混合物。合适的乳化剂可以是天然存在的树胶，例如阿拉伯树胶或黄蓍胶；天然存在的磷脂，例如大豆、卵磷脂，和或衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯，例如单油酸山梨聚糖，和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯单油酸山梨聚糖(polyoxyethylene sorbitan monooleate)。该乳剂还可以含有甜味剂和调味剂。可以用甜味剂，例如甘油、山梨醇或蔗糖来配制糖浆和西也剂。这种制剂还可以含有润药剂、防腐剂和调味剂和着色剂。
在一个具体实施方案中，为方便给药和统一剂量，将所述化合物配制成剂量单位形式。在本说明书中，剂量单位是指适于需要治疗的患者使用的单一剂量的物理学上分开的单元；每一个单位含有治疗有效量的化合物和至少一种赋形剂。药物产品包括置于容器内的剂量单位形式，该容器上标记或贴有标签以显示理想的治疗方法，如淀粉样变性病，如淀粉样蛋白病(例如阿尔茨海默病或与α-共核蛋白/NAC纤丝形成相关的疾病，如帕金森病)的治疗方法。肠道或阴道内给药的组合物优选是栓剂，其通过将本发明所提供的化合物与合适的非-刺激性赋形剂或载体混合来制备，该赋形剂或载体在室温下为固体，但在体温下为液体，因而在直肠或阴道内溶化并释放出活性化合物，如椰子油、聚乙二醇或栓蜡。
本发明所提供的化合物还可以以脂质体的形式给药。形成脂质体的方法是本领域公知的(Prescott编，Method in Cell Biology，1976，第XIV卷，Academic Press，New York，N.Y.)。脂质体通常来源于磷脂或其它脂质物质，这是本领域公知的。脂质体由单层或多层分散于水介质中的含水液晶形成。任何能够形成脂质体的非毒性的、生理学上可接受的且可代谢的脂质均可以使用。除了本发明所提供的化合物外，本发明的脂质体形式的组合物可以含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂类是天然的和合成的磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)。
本发明所提供的化合物还可以以前体“药物”的形式给药，其中以式1-3所代表的活性药学成分在体内与水解酶，如体内的脂酶和磷酸酶接触而被释放出来。在此使用的术语“药学上可接受的前药”表示本发明所提供的化合物的那些前药，它们均在合理的医学判断的范围内适于与组织接触使用而没有不适当的毒性、刺激性、过敏反应等，具有合理的效益/风险比率，且对目标病症有效。全面的讨论在T.Higuchi和V.Stella(Higuchi，T.和Stella，V.Prodrugs as Novel Delivery Systems，A.C.S.会议系列第14版；EdwardB.Roche编，Bioreversible Carrier in Drug Design，1987，美国药物协会和帕加马出版社)中有提供，其全部引入本文作为参考。
本发明所提供的化合物或其药学上可接受的衍生物可以配制来靶向某一特定的组织、受体、或受治疗的患者的身体的其它区域。许多这样的靶向方法本领域所公知的。所有这样的靶向方法在此都预期用于本发明的组合物中。靶向方法的非限制性实例参见，例如美国专利6,316,652、6,274,552、6,271,359、6,253,872、6,139,865、6,131,570、6,120,751、6,071,495、6,060,082、6,048,736、6,039,975、6,004,534、5,985,307、5,972,366、5,900,252、5,840,674、5,759,542和5,709,874。
在一个具体实施方案中，包含组织靶向脂质体，如肿瘤靶向脂质体的脂质体悬浮液也适合于作为药学上可接受的载体。这可以按本领域的普通技术人员所熟知的方法来制备。例如，可以按美国专利4,522,811中描述的方法制备脂质体制剂。简单地说，脂质体如多层囊泡(MLV’s)(multilamellarvesicle)可以通过将鸡蛋卵磷脂和脑磷脂酰丝氨酸(7∶3的摩尔比)滴在烧瓶的内面上干燥来形成。加入溶于没有二价离子的磷酸缓冲液(PBS)的本发明所提供的化合物的溶液，摇动烧瓶直至脂质薄膜分散。清洗产生的囊泡以除去未形成胶囊的化合物，离心沉淀，然后重悬于PBS中。
制造物
所述化合物或药学上可接受的衍生物可以包装成制造物，该制造物含有包装材料、该包装材料内用于治疗、预防或缓解淀粉样变性病和共核蛋白病的一种或多种症状有效的本发明所提供的化合物或其药学上可接受的衍生物、和标签，该标签标明该化合物或组合物，或其药学上可接受的衍生物是用于治疗、预防或缓解淀粉样变性病和共核蛋白的一种或多种症状的。
本发明所提供的制造物含有包装材料。用于包装药学产品的包装材料是本领域的普通技术人员所熟知的。参见，例如美国专利5,323,907、5,052,558和5,033,252。药学包装材料的实例包括但不限于：硬质泡沫塑料、瓶、管、吸入器、泵、袋、小瓶、容器、注射器、瓶和适于预选制剂和理想给药和治疗方式的任何包装材料。预期本发明所提供的化合物和组合物的许多制剂形式都可用于淀粉样变性病和共核蛋白病的各种治疗。
持续释放制剂
本发明还提供了持续释放制剂，以将所述化合物以高循环水平(10-9到10-4M)递送到需要的靶(例如脑或系统性器官)。在治疗阿尔茨海默病和帕金森病的具体实施方案中，所述化合物的循环水平被维持在高达10-7M。该水平在患者中系统性地循环，或在一个具体实施方案中，存在于脑组织中，和在另一个具体实施方案中，定位于脑或其它组织中的淀粉或α-共核蛋白纤丝沉积中。
应该理解的是，所述化合物的水平在某一段时间内被维持在需要的水平，该水平对于本领域的普通技术人员很容易测定。在一个具体实施方案中，持续释放制剂的给药受到了影响而使治疗化合物在血清中的水平在48到96小时内维持在10-8M到10-6M。
这种持续释放和/或定时释放制剂可以通过使用持续释放递送装置来制备，该递送装置是本领域公知的例如，例如美国专利3,845,770、3,916,899、3,536,809、3,598,123、4,008,719、4,710,384、5,674,533、5,059,595、5,591,767、5,120,548、5,073,543、5,639,476、5,354,556和5,733,566中所公开的递送装置，其各自全部纳入本文作为参考。通过使用例如羟丙甲基纤维素、其它聚合基质、凝胶、渗透膜、渗透性系统、多层涂料、微颗粒、脂质体、微球等，这些药学组合物可以用来提供一种或多种活性化合物的缓慢或持续释放。本领域的普通技术人员所熟知的合适的持续释放制剂，包括本发明所述的那些，可以很容易地选择来与本发明所提供的药物组合物一起使用。因此，在此可以预期适于口服的单元剂型，例如但不限于片剂、胶囊、胶囊锭、囊片、粉剂等适于持续释放。
在一个具体实施方案中，所述持续释放制剂含有活性化合物，例如但不限于微晶纤维素、麦芽糖精、乙基纤维素和硬脂酸镁。如上所述，所有已知的与所公开的化合物的特性相容的封装方法都在本申请的考虑范围之内。通过使用各种厚度的缓慢溶解的聚合物对本发明所提供的药物组合物的颗粒或粒剂进行涂层处理或通过微封装来对该持续释放制剂进行封装。在一个具体实施方案中，用可以使所述药物组合物在给予哺乳动物后大约48到大约72小时时分解的各种厚度(例如，大约1微米到大约200微米)的涂层材料对该持续释放制剂进行封装。在一个具体实施方案中，改涂层材料是可食用添加剂。
在另一个具体实施方案中，所述持续释放制剂是基质分解装置，其通过将药物与缓慢溶解的聚合物载体压成片剂而制备。在一个具体实施方案中，所述涂层颗粒的直径为大约0.1到大约300微米，如美国专利4,710,384和5,354,556所述，其在此全部引为参考。这些颗粒的每一个都是微基质的形式，且所述活性成分均一地分布于整个聚合物中。
为了产生足够的弹性以防止在压缩过程中大量渗漏，公开了在涂层中含有相对高百分含量的可塑剂的持续释放制剂，如美国专利4,710,384所述的制剂，其全部引入本文作为参考。可塑剂的具体量依据所使用的涂料的特性和具体可塑剂而变化。通过测试所形成的片剂的释放特性可以很容易地实验确定可塑剂的含量。如果药剂释放的太快，那么就要使用更多的可塑剂。释放特性也是涂层厚度的函数。当使用大量的可塑剂时，所述涂层的持续释放量减少。因此，可以稍微增加涂层的厚度来补偿可塑剂含量的增加。通常说来，在这种具体实施方案中，可塑剂的存在量为涂层中的持续释放材料的大约15到30％，在一个具体实施方案中为20-25％，且所述涂层的含量为活性材料质量的10-25％，在另一个具体实施方案中为15-20％。任何常规的药学上可接受的可塑剂均可以掺入到所述涂料中。
本发明所提供的化合物可以配制成持续释放的和/或即时释放的制剂。所有持续释放的药学产品都有一个共同的目标就是提高药物疗效使之超过非持续释放的对应的制剂所取得的效果。理想地，最优设计的持续释放制剂在医学治疗中的应用的特征为采用的最少量的药物物质来治愈或控制病症。持续释放的制剂的优点包括：1)延长组合物的活性，2)降低给药频率，3)提高病人的依从性。此外，持续释放制剂能够用来影响开始作用的时间，或其它特征，如组合物的血液水平，因此能够对副作用的发生发挥作用。
本发明所提供的持续释放制剂设计来在最初时释放立即产生所需治疗效果量的治疗组合物，然后逐渐的病继续释放另外量的组合物以在延长的一段时间内维持的这种治疗效果水平。为了维持体内的这种恒定的水平，该治疗组合物必须以一定的速率从剂型中释放，以替代被代谢的和从体内排泄的组合物。
活性成分的持续释放可以用各种诱导剂刺激，例如PH、温度、酶、水、或其它生理状况或化合物。
可以适当地配制口服制剂以使活性化合物能够可控制地持续释放。在一个具体实施方案中，将化合物配制成可控制释放的分散的微颗粒的粉剂，其能容易配制成液体形式。该持续释放的粉剂包括含有活性成分的颗粒和(任选地)至少一种非毒性聚合物赋形剂。
所述粉剂能够分散或悬浮在液体载体中，且会在有用的一段时间内维持其持续释放特征。这些分散剂或悬浮液既有化学稳定性，又有分解速率稳定性。该粉剂可以含有赋形剂，该赋形剂包含聚合物，可以是可溶的、不溶的、渗透性的、不渗透性的、或生物可降解的。该聚合物可以是多聚物或共聚物。该聚合物可以是天然的或合成的聚合物。天然的聚合物包括多肽(例如，玉米蛋白)、多聚糖(例如，纤维素)、和褐藻酸。代表性的合成聚合物包括但不限于美国专利5,354,556的第3栏第33-45行所描述的那些聚合物，其在此全部引为参考。特别合适的聚合物包括但不限于美国专利5,354,556第3栏第46行到第4栏第45行所描述的那些聚合物，其在此全部引为参考。
本发明所提供的持续释放组合物可以配制成供肠胃外给药，例如通过肌肉内注射或通过皮下组织和各种体腔和透皮装置移植。在一个具体实施方案中，将肌肉内注射液配制成水或油悬浮液。在水性悬浮液中，持续释放效果部分地是由于所述活性化合物在复合时溶解性降低或分解速率降低。使用油悬浮液和溶液也可以进行相似的方法，其中所述活性化合物的释放速率由油外的该活性化合物向周围的水性介质的分散来测定。只有仅具有油可溶性且具有理想的分散特征的活性化合物才是合适的。可以用于肌肉内注射油包括但不限于：芝麻油、橄榄油、花生油、玉米油、杏仁油、大豆油、棉籽油和蓖麻油。
已发展成熟、能赋予几天到几年的持续释放的药物递送形式是将承载药物的聚合装置植入到皮下或各种体腔内。植入物中使用的聚合材料必须是生物相容的和非毒性的，包括但不限于：水凝胶、硅树脂、聚乙烯、乙烯-乙酸乙烯共聚物或生物可降解的聚合物。
E.化合物的活性评价
通过测定所述化合物导致阿尔茨海默病的预形成淀粉样蛋白纤丝(即由Aβ1-42纤丝组成)、IAPP纤丝和帕金森病NAC纤丝的分解/破坏效率来评价本发明所提供的化合物作为阿尔茨海默病β-淀粉样蛋白(Aβ)纤丝、II型糖尿病IAPP纤丝和帕金森病NAC纤丝的破坏剂和抑制剂的生物学活性。在一项研究中，用硫磺素T荧光计来测定该化合物和EDTA(作为阴性对照)的效果。在这个实验中，硫磺素T专一地结合纤丝淀粉样蛋白，这种结合使485nm的荧光增强，这种增强与存在的纤丝的量成比例。荧光越高，存在的纤丝的量就越多(Naki等人Lab.Invest.65：104-110，1991；Levine III，Protein Sci.，2：404-410，1993；Amyloid：int.J.Exp.Clin.Invest.2：1-6，1995)。
在刚果红结合试验中，对给定的测试化合物改变淀粉样蛋白(Aβ1-42纤丝、IAPP纤丝或NAC纤丝)结合刚果红的能力进行定量。在这个实验中，将Aβ1-42纤丝、IAPP纤丝或NAC纤丝和待测化合物温育3天，然后通过0.2微米的滤膜真空过滤。当用刚果红对滤膜染色后，测定留在滤膜上的Aβ1-42纤丝、IAPP纤丝或NAC纤丝的量。当对滤膜进行合适的清洗后，在存在测试化合物的滤膜上的刚果红颜色的任何减弱(与缺乏测试化合物的淀粉样蛋白的刚果红染色相比)标志着测试化合物减少/改变聚集的和嗜刚果红的Aβ1-42纤丝、IAPP纤丝或NAC纤丝的能力。
F.联合疗法
在另一个具体实施方案中，所述化合物可以与另一种治疗试剂联合给予或依次给予。这样的其它治疗试剂包括用于治疗、预防、或缓解淀粉样变性病和共核蛋白疾病的一种或多种症状的已知药物。这样的治疗试剂包括但不限于：盐酸多奈哌齐(Aracept)、酒石酸卡巴拉汀(Exelon)、盐酸他克林(Cognex)和溴氢加兰他敏(Reminyl)。
G.化合物和组合物的使用方法
本发明所提供的化合物和组合物在治疗、预防、或缓解淀粉样蛋白病或病症的一种或多种症状的方法中是有用的，所述的疾病或病症包括但不限于：与淀粉样纤丝的形成、沉积、聚集、或存留有关的疾病。在一个具体实施方案中，淀粉样蛋白的纤丝选自Aβ淀粉样蛋白、AA淀粉样蛋白、AL淀粉样蛋白、IAPP淀粉样蛋白、PrP淀粉样蛋白、α2-微球淀粉样蛋白、甲状腺素运载蛋白、前白蛋白、和前降血钙素。在某些具体实施方案中，淀粉样蛋白的纤丝是Aβ淀粉样蛋白和IAPP淀粉样蛋白。在某些具体实施方案中，本发明所提供的化合物和组合物被用于治疗、预防、或缓解疾病的一种或多种症状，所述的疾病包括但不限于阿尔茨海默病、唐氏综合症、拳击性失智症、多系统萎缩症、包涵体肌炎、有Dutch型淀粉样蛋白的遗传性脑出血、C型Nieman-Pick病、脑β淀粉样蛋白血管病、和皮层基底膜退化有关的痴呆，II型糖尿病的淀粉样变性病、慢性炎症的淀粉样变性病、恶性和家族性地中海热的淀粉祥变性病、多发性骨髓瘤和B-细胞体液不调的淀粉祥变性病、朊病毒疾病的淀粉样变性病、克-雅氏病、格-史氏综合症、新几内亚震颤病、瘁病、和腕管综合症相关淀粉样变性病、高龄心脏淀粉祥变性病、家族性多发性神经淀粉样变性、以及与内分泌瘤有关的淀粉样变性病。在某些具体实施方案中，所述疾病是阿尔茨海默病或II型糖尿病。
本发明还提供了抑制或阻止α-共核蛋白/NAC纤丝形成的方法，抑制或防止α-共核蛋白/NAC纤丝生长的方法，导致预形成的α-共核蛋白/NAC纤丝和α-共核蛋白/NAC相关蛋白沉积物分解、破坏和/或解聚的方法。
在某些具体实施方案中，通过服用本发明所提供的化合物和组合物来治疗、预防、或减轻其症状的共核蛋白疾病或共核蛋白病包括但不限于与共核蛋白纤丝(包括α-共核蛋白纤丝)的形成、沉积、聚集、或存留有关的疾病。在某些具体实施方案中，这样的疾病包括帕金森病、家族性帕金森病、路易氏小体疾病、阿尔茨海默病的路易氏小体变异、路易氏小体痴呆症、多系统萎缩症、和关岛帕金森病-痴呆综合症。
如下非限制性实施例仅以举例的方式给出，不能认为对所述主题产生任何限制，这些实施例的许多明显变体都可能包含在本发明的精神或范围之内。
实施例
一般试验步骤
将所有的溶剂在使用之前蒸馏，在高达35℃的温度下通过旋转蒸发除去。Merck硅胶60、200-400网孔、43-63微米用于硅胶快速色谱分析。使用Merck DC-plastikfoiien Kieselgel 60 F254进行TLC，先用UV灯显像，然后浸入香兰素溶液(1％香兰素，1％H2SO4的乙醇溶液)中，并加热。质谱被记录在Kratos MS-80仪器上。25℃的NMR谱被记录在varian INOVA-500或VXR-300色谱仪上，1H的频率为500或300MHz，13C的频率为125或75MHz。化学位移以δ刻度的ppm形式给出，参考溶剂的峰值，CHCl3为7.25ppm，CDCl3为77.0ppm，(CH3)2CO为2.15ppm，(CD3)2CO为30.5ppm，或CH3OD为3.30ppm和CD3OD为39.0ppm。
HPLC的条件
分析性HPLC仪器由Waters 717自动取样器、600泵和控制器，和由Omega软件控制的2487UV探测器构成(方法2)，或由Waters717自动取样器、600泵和控制器，和由Omega软件控制的490UV探测器构成(方法1)。使用PR-18半制备性柱子(Phenomenex Prodigy 5mm C18 100A，250×4.6mm)、guard柱(phenomenex Security Guard cartridge，含C18 ODS4×3mm，5mm柱子)(30℃安装)来分析样品。对样品(5mL)进行分析时使用移动相的流速为5.0mL/min，UV探测器为280nm。
溶剂A-CH3CN
溶剂B-含0.1％的TFA的水
方法1
HPLC方法2(化合物DC-0051-B1到DC-0051-B4使用)
方法2使用C18柱子，尺寸为2.1×50mm。运行时间设置为7分钟。移动相包括(A)含0.05％TFA的乙腈、和(B)含0.05％TFA的双蒸水。使用方法2的所有的轮次都采用含量为10％-90％的溶剂A梯度洗脱。
实施例1
3-甲基磺酰氨基-4-羟基苯甲酸3，4-二羟基苯胺(DC-0051-S1，也称为DC-0051-CB)的合成
酰胺DC-0051的甲烷磺酰基氨基衍生物的形成可以按如下步骤来进行：先形成公知的3-硝基-4-甲氧基苯甲酸，然后用3，4-亚甲基二氧苯胺制备前述化合物的苯胺产物，得到3-硝基-4-甲氧基-酰胺。紧接着通过中间体甲磺酰基化进行催化还原得到甲磺酰基酰胺，再使该产物与三溴化硼进行简单反应去甲基化而得到3-甲烷磺酰基氨基-4-羟基苯甲酸3，4-二羟基苯胺(DC-0051-S1；也称为DC-0051-CB)。
A)3-硝基-4-甲氧基苯甲酸
向0℃的p-茴香酸(3g)的无水醋酸(20ml)悬浮液中逐滴加入浓硝酸(6ml)。将产生的澄清的溶液恢复到室温，然后维持30分钟。将混合物倒入冰上(100ml)，过滤形成的白色固体，然后用更多冰冷的水清洗该固体得到产物(2.8g，72％)。
HNMR((CD3)2CO)8.44(1H，d，J2Hz)，8.29(1H，dd，J2，8Hz)，7.51(1H，d，J8Hz)和4.11(3H，s)。
B)3-硝基-4-甲氧基苯甲酸3，4-亚甲基二氧苯胺
将3-硝基-4-甲氧基苯甲酸(1.4g)的亚硫酰氯(10ml)的悬浮液加热回流1小时。在真空下除掉溶剂得到酰基氯的白色固体，将该固体重新溶于干燥的二氯甲烷中(20ml)中，并向其中逐滴加入溶于二氯甲烷(5ml)中的嘧啶(1ml)和3，4-亚甲基二氧苯胺(1g)混合物的溶液中。将该混合物置于室温下24小时，然后加入更多的二氯甲烷(50ml)和盐酸(1M，50ml)，过滤得到沉淀，并用水清洗得到3-硝基-4-甲氧基苯甲酸3，4-亚甲基二氧苯胺(1.72g，72％)。1H NMR((CD3)2CO)9.79(1H，bs，NH)，8.58(1H，d，J2Hz)，8.41(1H，dd，，J2，8Hz)，7.63(1H，d，J2Hz)，7.62(1H，d，J8Hz)，7.35(1H，dd，J2，8Hz)，6.96(1H，d，J8Hz)，6.15(2H，s)和4.22(3H，s)。
C)3-甲基磺酰氨基-4-甲氧基苯甲酸3，4-亚甲基二氧苯胺
将3-硝基-4-甲氧基苯甲酸3，4-亚甲基二氧苯胺(0.44g)的甲醇(20ml)悬浮液与蚁酸(1ml)与碳载氢氧化钯(10％，200mg)在氢环境下搅拌5小时。用棉毛巾过滤该混合物，并在真空下除去溶剂。用柱色谱进行层析，用20-100％的乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗提硅胶而得到纯的酰胺(270mg，68％)。将该产物立即溶于嘧啶(5ml)中，并逐滴加入甲基磺酰氯(0.2ml)，然后将该混合物置于室温下过夜。加入盐酸(1M，100ml)和乙酸乙酯(100ml)，然后干燥有机层，并在真空下蒸发得到粗制品。从二氯甲烷中结晶(Crystallisation)得到3-甲烷磺酰基氨基-4-甲氧基苯甲酸3，4-亚甲基二氧苯胺的白色结晶(155mg，47％)。
1H NMR((CD3)2CO)9.62(1H，bs，NH)，8.07(1H，d，J2Hz)，7.97(1H，bs，NH)，7.87(1H，dd，J2，8Hz)，7.55(1H，d，J2Hz)，7.22(1H，dd，J2，8Hz)，7.21(1H，d，J8Hz)，6.83(1H，d，J8Hz)，6.13(2H，s)，4.14(3H，s)和3.16(3H，s)。
D)3-甲基磺酰基氨基-4-羟基苯甲酸3，4-二羟基苯胺(DC0051-S1)，参见，J.van.Alphen.Rec.trav.Chim.1929，48，1112-23。
在氮环境下，向搅拌的3-甲烷磺酰基氨基-4-甲氧基苯甲酸3，4-亚甲基二氧苯胺(100mg)的无水CH2CL2(20ml)悬浮液中加入三溴化硼(0.2ml)，然后再持续搅拌20小时。小心地加入甲醇(50ml)，然后在真空下蒸发溶剂直到体积为1ml，然后将该步骤重复2次。通过从甲醇中结晶的方式纯化而产生3-甲基磺酰基氨基-4-羟基苯甲酸-3，4-二羟基苯胺(DC0051-A1)(45mg，47％)的淡褐色结晶物。
HNMR((CD3)2CO)9.68(1H，bs，NH)，9.27(1H，bs，NH)，8.03(1H，d，J2Hz)，8.02(1H，bs，OH)，7.91(1H，bs，OH)，7.76(1H，dd，J2，8Hz)，7.75(1H，bs，OH)，7.49(1H，d，J2Hz)，7.10(1H，dd，J2，8Hz)，7.09(1H，d，J8Hz)，6.79(1H，d，J8Hz)和3.05(3H，s)。
M/z337((M-H)，100％)。
HPLC(方法1)21.1分钟
实施例2
3-羟基-4-甲烷磺酰基氨基-N-(3，4-二羟基苯基)苯甲酰胺
(DC0051-S8；也称为DC-0051-DB)
3，4-亚甲基二氧苯胺与3-甲氧基-4-硝基苯甲酸反应生成3-硝基-4-甲氧基-酰胺。通过催化氢化，紧接着立即进行甲磺酰基化产生甲磺酰基氨基。通过与三溴化硼反应去甲基化而得到3-羟基-4-甲烷磺酰基氨基-N-(3，4-二羟基苯基)苯甲酰胺(DC0051-S8；也称为DC-0051-DB)。
A)3-甲氧基-4-硝基-N-(3，4-亚甲基二氧苯基)苯甲酰胺
将3-甲氧基-4-硝基苯甲酸(0.5g)的亚硫酰氯(10ml)悬浮液加热回流1小时。在真空下将溶剂除去得到酰基氯的白色固体。将酰基氯溶于无水的二氯甲烷中(10ml)，并逐滴加入溶于二氯甲烷(5ml)中的嘧啶(0.5ml)和3，4-亚甲基二氧苯胺(0.4g)的混合物的溶液中。将混合物置于室温下24小时，然后加入氯甲烷(50ml)和盐酸(1M，50ml)，过滤产生的沉淀，并用水清洗得到3-甲氧基-4-硝基-N-(3，4-亚甲基二氧苯基)苯甲酰胺(0.43g，54％)。
1H NMR((CD3)2CO)9.79(1H，bs，NH)，8.03(1H，d，J8Hz)，7.98(1H，d，J2Hz)，7.78(1H，dd，J2，8Hz)，7.63(1H，d，J2Hz)，7.32(1H，dd，J2，SHz)，6.93(1H，d，JSHz)，6.11(2H，s)和4.17(3H，s)。
B)3-甲氧基-4-甲烷磺酰基氨基-N-(3，4-亚甲基二氧苯基)苯甲酰胺
在氢环境下将3-甲氧基-4-硝基-N-(3，4-亚甲基二氧苯基)苯甲酰胺(100mg)的甲醇(20ml)悬浮液与碳载钯(10％，50mg)搅拌18小时。在真空下将溶剂除去得到褐色的胶质物。将残余物溶于嘧啶(0.5ml)中，冷却到0℃加入烷基磺酰氯(0.1ml)，将混合物维持在0℃持续30分钟，然后将温度提高到室温，并持续1小时。加入稀释的盐酸(10ml，1M)和二氯甲烷，分离有机层，在真空下干燥和蒸发得到褐色的胶质产物。用含乙酸乙酯(0-100％)的二氯甲烷通过硅胶上的柱色谱纯化得到3-甲氧基-4-甲烷磺酰基-N-(3，4-亚甲基二氧苯基)苯甲酰胺(65mg，55％)的白色固体。
1H NMR((CD3)2CO)9.52(1H，bs，NH)，8.13(1H，bs，NH)，7.74(1H，d，J2Hz)，7.72(1H，dd，J2，8Hz)，7.64(1H，d，J8Hz)，7.62(1H，d，J2Hz)，7.26(1H，dd，J2，8Hz)，6.91(1H，d，J8Hz)，6.09(2H，s)，4.07(3H，s)和3.16(3H，s)。
C)3-羟基-4-甲烷磺酰基氨基-N-(3，4-烷基二羟基苯基)苯甲酰胺(DC0051-S8)。
在氮环境下，向搅拌的3-甲氧基-4-甲炕磺酰基氨基-N-(3，4-亚甲基二氧苯基)苯甲酰胺(200mg)的干CH2Cl2(20ml)悬浮液中加入三溴化硼(0.3ml)，然后再持续搅拌20小时。小心地加入甲醇(50ml)，然后在真空下蒸发溶剂到体积为1ml，将该步骤再重复2次。用柱色谱进行层析，用含10-20％的甲醇的氯仿洗提硅胶而得到3-羟基-4-甲烷磺酰基-N-(3，4-二羟基苯基)苯甲酰胺(DC51-DB)(65mg，34％)的浅褐色结晶。
1H NMR(CD3OD)7.45(1H，d，J8Hz)，7.40(1H，d，J2Hz)，7.36(1H，dd，J2，8Hz)，7.20(1H，d，J2Hz)，6.88(1H，dd，J2，8Hz)，6.73(1H，d，J8Hz)和2.98(3H，s)。
M/z337((M-H)-，100％)
Hplc(方法1)29.2分钟
实施例3
N-(3-甲烷磺酰基氨基-4-羟基苯基)-3，4-二羟基苯甲酰胺
(DC0051-S6；也称为DC-0051-AE)
将商业可获得的2-甲氧基-5-硝基苯胺与甲基磺酰氯一起处理生成甲磺酰基氨基。催化还原硝基基团生成需要的苯胺基，而与3，4-亚甲基二氧苯甲酰氯缩合生成苯胺。用三溴化硼除去甲氧基和亚甲基二氧基团得到N-(3-甲烷磺酰基氨基-4-羟基苯基)-3，4-二羟基苯甲酰胺(DC0051-S6；也称为DC0051-AE)。
A)2-甲氧基-5-硝基-甲烷磺酰基氨基苯。
向0℃的2-甲氧基-5-硝基苯胺(5g)的嘧啶溶液(25ml)中逐滴加入甲基磺酰氯(3.5ml)，然后加入嘧啶(0.5ml)。将混合物在0℃下保持1小时，然后将温度提高的室温下，并维持2小时。将混合物倒在冰(100g)和稀释的盐酸(3M，100ml)上，过滤形成的固体，然后用水清洗，得到2-甲氧基-5-硝基甲烷磺酰基氨基苯(5.29，71％)白色结晶固体。
1H NMR(CDCl38.39(1H，d，J2Hz)，8.05(1H，dd，J2，8Hz)，6.69(1H，d，J8Hz)和6.98(1H，bs，NH)。
B)2-甲氧基-5-氨基-甲烷磺酰基氨基苯
在氢环境下，室温下将含有碳载钯(10％，100mg)的2-甲氧基-5-硝基-甲烷磺酰基氨基茶(1g)的甲醇(20ml)溶液搅拌48小时。将混合物过滤通过硅藻土，然后蒸发得到2-甲氧基-5-氨基甲烷磺酰基氨基苯的褐色胶质物。在后面的反应中，该化合物不需要纯化直接使用。
C)N-(3-甲烷磺酰基氨基-4-甲氧基苯基)3，4-亚甲基二氧苯甲酰胺。
将3，4-亚甲基二氧苯甲酸(300mg)的亚硫酰氯(10ml)溶液加热回流1小时。真空下除去溶剂得到酰基氯的白色固体。将2-甲氧基-5-氨基甲烷磺酰基氨基苯(来自于上述反应)溶解于嘧啶(20ml)中，并将其逐滴加入到酰基氯中。将混合物置于室温下24小时，然后将其倒入冰和盐酸上(3M，100ml)，过滤沉淀，并用水清洗沉淀，得到N-(3-甲烷磺酰基氨基-4甲氧基苯基)-3，4-亚甲基二氧苯甲酰胺(1.37g，93％)。
1H NMR((CD3)2CO)9.52(1H，bs，NH)，7.88(1H，dd，J2，8Hz)，7.87(1H，d，J2Hz)，7.71(1H，dd，J2，8Hz)，7.59(1H，d，J2Hz)，7.14(1H，d，J8Hz)，7.04(1H，d，J8Hz)，6.20(2H，s)，4.00(3H，s)和3.10(3H，s)。
D)N-(3-甲烷磺酰基氨基-4-羟基苯基)-3，4-二羟基苯甲酰胺
在氮环境下，向搅拌的N-(3-甲烷磺酰基氨基-4-甲氧基苯基)-3，4-亚甲基二氧苯甲酰胺(200mg)的干CH2Cl2(20ml)溶液中加入三溴化硼(0.3ml)，然后再持续搅拌20小时。小心地加入甲醇(50ml)，然后在真空下蒸发直到溶剂为1ml，将该步骤再重复2次。通过柱色谱纯化，用含甲醇(10-20％)的氯仿洗提硅胶而得到N-(3-甲烷磺酰基氨基-4-羟基苯基)-3，4-二羟基苯甲酰胺(62mg，33％)的浅褐色的结晶。
1H NMR((CD3)2CO)7.87(1H，d，J2Hz)，7.70(1H，dd，J2，8Hz)，7.65(1H，d，J2Hz)，7.05(1H，d，J8Hz)，7.00(1H，d，J8Hz)和3.12(3H，s)。
M/z337((M-H)-，100％)
Hplc(方法1)22.1分钟
实施例4
N-(3-羟基-4-甲炕磺酰基氨基苯基)-3，4-二羟基苯甲酰胺
(DC-0051-S7；也称为DC-0051-AF)
将商业可获得的2-甲氧基-5-硝基苯胺与甲基磺酰氯一起处理生成甲磺酰基氨基。硝基基团通过催化氢化还原生成需要的苯胺基，以与3，4-亚甲基二氧苯甲酰氯缩合生成苯胺。用三溴化硼除去甲氧基和亚甲基二氧基团得到N-(3-羟基-4-甲烷磺酰基氨基苯基)-3，4-二羟基苯甲酰胺(DC0051-S7；也称为DC0051-AF)。
A)2-甲氧基-4-硝基-甲烷磺酰基氨基苯
0℃下向2-甲氧基-4-硝基-苯胺(5g)的嘧啶(25ml)溶液中逐滴加入甲基磺酰氯(3.5ml)，再加入嘧啶(0.5ml)。将混合物置于0℃下1小时，然后将温度提高到室温维持2小时。将混合物倒入冰上(100g)和稀释的盐酸(3M，100ml)上，过滤形成的固体，然后用水清洗得到2-甲氧基-4-硝基甲烷磺酰基氨基苯(7.32g，98％)的白色结晶固体。
1H NMR(CDCl3)7.92(1H，dd，J2，8Hz)，7.78(1H，d，J2Hz)，7.64(1H，d，J8Hz)和7.23(1H，bs，NH)。
B)2-甲氧基-4-氨基甲烷磺酰基氨基苯
在氢环境下，室温下将含有碳载钯(10％，100mg)的2-甲氧基-4-硝基-甲炕磺酰基氨基苯(1g)的甲醇(20ml)溶液搅拌48小时。将混合物过滤通过硅藻土，然后蒸发得到2-甲氧基-4-氨基甲烷磺酰基氨基苯的褐色胶质。在后面的反应中，该化合物不经纯化直接使用。
C)N-(3-甲氧基-4-甲烷磺酰基氨基苯基)-3，4-亚甲基二氧苯甲酰胺
将3，4-亚甲基二氧苯甲酸(300mg)的亚硫酰氯(10ml)的悬浮液加热回流1小时。真空下除去溶剂得到酰基氯的白色固体。将2-甲氧基-4-氨基-甲烷磺酰基氨基苯(来自于上述反应)溶解于嘧啶(20ml)中，并逐滴加入到酰基氯中。将混合物置于室温下24小时，然后将其倒入冰和盐酸(3M，100ml)上，过滤沉淀，并用水清洗沉淀，得到N-(3-甲氧基-4-甲烷磺酰基氨基苯基)-3，4-亚甲基二氧苯甲酰胺(1.37g，93％)。
1H NMR((CDCl3)2CO)7.81(1H，d，J2Hz)，7.70(1H，bs，NH)，7.47(1H，d，J8Hz)，7.38(1H，dd，J2，8Hz)，7.34(1H，d，J2Hz)，6.88(1H，d，J8Hz)，6.79(1H，dd，J2，8Hz)，6.63(1H，bs，NH)，6.06(2H，s)3.92(3H，s)和2.91(3H，s)。
D)N-(3-羟基-4-甲烷磺酰基氨基苯基)-3，4-二羟基苯甲酰胺
在氮环境下，向搅拌的N-(3-甲氧基-4-甲烷磺酰基氨基苯基)-3，4-亚甲基二氧苯甲酰胺(200mg)的干CH2Cl2(20ml)溶液中加入三溴化硼(0.3ml)，然后再持续搅拌20小时。小心地加入甲醇(50ml)，然后在真空下蒸发直到溶剂为1ml，将该步骤再重复2次。通过柱色谱纯化，用含甲醇(10-20％)的氯仿洗提硅胶而得到N-(3-羟基-4-甲烷磺酰基氨基苯基)-3，4-二羟基苯甲酰胺(62mg，33％)的浅褐色的结晶。
1H NMR((CD3)2CO)7.86(1H，d，J2Hz)，7.60(1H，d，J2Hz)，7.51(1H，dd，J2，8Hz)，7.40(1H，d，J8Hz)，7.30(1H，dd，J2，8Hz)，7.00(1H，d，J8Hz)和3.06(3H，s)。
M/z 337((M-H)-，100％)
Hplc(方法1)29.5分钟
实施例5
3，4-二甲烷磺酰基氨基-N-(3，4-二甲基磺酰基氨基苯基)苯甲酰胺(被称为DC0051-GH)
酸催化生成3，4-二氨基苯甲酸的甲酯，紧接着进行甲磺酰基化生成二甲磺酰基氨基苯甲酯。然后对该酯进行碱水解，生成需要的3，4-二甲烷磺酰基氨基苯甲酸。对4-硝基-1，2-苯二胺进行甲磺酰基化生成二甲磺酰基氨基产物，再对该产物进行催化氢化生成需要的苯胺。在存在DCC的条件下，上述酸与酰胺缩合生成四磺酰基氨基-酰胺。
A)3，4-二氨基苯甲酸甲酯
小心地向无水甲醇(20ml)中逐滴加入亚硫酰氯(1ml)，边加边搅拌。室温下，加入3，4-二氨基苯甲酸(1g)，边加边搅拌。将混合物加热回流3小时。加入饱和的碳酸氢钠溶液直到混合物变为碱性，然后将混合物抽提到含25％甲醇的氯仿中。干燥抽提物，并在真空下蒸发抽提物得到褐色的结晶固体产物(0.88g，81％)。
1H NMR(CDCl3)7.46(1H，dd，J2，8Hz)，7.40(1H，d，J2Hz)，6.67(1H，d，J8Hz)和3.84(3H，s)。
B)3，4-二甲基磺酰基氨基苯甲酸甲酯。
用甲基磺酰氯(2ml)处理二胺(0.88g)的嘧啶溶液(10ml)。将混合物置于室温下12小时，然后将其倒入冰和盐酸(3M，50ml)上，过滤混合物得到白色结晶固体(0.54g，32％)。
1H NMR((CD3)2SO)9.39(2H，bs)，8.11(1H，d，J2Hz)，7.95(1H，dd，J2，8Hz)，7.75(1H，d，J8Hz)，3.97(3H，s)，3.28(3H，s)和3.17(3H，s)。
C)3，4-二甲基磺酰基氨基苯甲酸
用氢氧化钠溶液(3M，5ml)处理酯(0.5g)的丙酮悬浮液，将产生的橙色溶液置于室温下2小时。加入盐酸水溶液(3M)直到溶液变为酸性，然后将该混合物抽提到含25％甲醇的乙酸乙酯中得到褐色的固体酸(36g，75％)。
1H NMR((CD3)2SO)9.30(2H，bs)，8.10(1H，d，J2Hz)，7.93(1H，dd，J2，8Hz)，7.72(1H，d，J8Hz)，3.27(3H，s)和3.17(3H，s)。
D)3，4-二甲基磺酰基氨基-硝基苯。
用甲基磺酰氯(3ml)在0℃处理二胺(2g)的嘧啶(10ml)溶液。将混合物置于室温下12小时，然后将其倒在冰和盐酸(3M，50ml)上，过滤混合物得到白色结晶固体产物(1.21g，30％)。
1H NMR((CD3)2SO)8.37(1H，d，J2Hz)，8.24(1H，dd，J2，8Hz)，7.86(1H，d，J8Hz)，3.34(3H，s)和3.24(3H，s)。
E)3，4-二甲基磺酰基氨基-苯胺
在氢气环境下将3，4-二甲基磺酰基氨基-硝基苯(1.2g)的甲醇(50ml)溶液与乙酸乙酯(50ml)和碳载钯(10％，10mg)搅拌18小时。过滤通过硅胶土除去催化剂，在真空下除去溶剂得到胺的褐色胶质物。该产物无需进一步的纯化即可使用。
F)N-(3，4-二甲基磺酰基氨基苯基)-3，4-二甲基磺酰基氨基苯甲酰胺(也称为DC0051-GH)
将酸(1.5g)和胺(1.5g)，及DCC(1.5g)的干THF(100ml)悬浮液一起搅拌12小时，然后在真空下除去溶剂。将甲醇(50ml)加入到残余物中，并过滤白色的固体。将残余物悬浮于更多甲醇(50ml)中，紧接着过滤得到白色固体的粗制品。将固体悬浮于丙酮(4×50ml)中，过滤，并在真空下除去溶剂得到滤出液中的白色固体的纯制品。
1H NMR((CD3)2CO)10.03(1H，bs)，8.45(2H，bs)，8.28(1H，d，J2Hz)，8.12(1H，d，J2Hz)，8.09(1H，dd，J2，8Hz)，7.93(1H，dd，J2，8Hz)，7.85(1H，d，J8Hz)，7.63(1H，d，J8Hz)，3.24(3H，s)，3.23(3H，s)，3.19(3H，s)和3.17(3H，s)。
Hplc 30.3分钟。
实施例6
4-羟基-3-甲基磺酰基氨基-N-(3-羟基-4-甲基磺酰基氨基苯基)苯甲酰胺(被称为DC0051-CF)
用甲基磺酰氯处理商业可获得的2-甲氧基-4-硝基苯胺生成甲磺酰基胺(mesylamine)。催化还原硝基基团生成需要的苯胺，以与4-甲氧基-3-硝基苯甲酰氯缩合生成苯胺化合物。通过催化氢化进行还原，紧接着立即进行甲磺酰基化生成甲磺酰基胺。通过与三溴化硼反应去甲基化，生成4-羟基-3-甲基磺酰基氨基-N-(3-羟基-4-甲基磺酰基氨基苯基)苯甲酰胺(DC0051-CF)。
A)2-甲氧基-4-硝基-甲基磺酰基氨基苯
0℃向2-甲氧基-4-硝基苯胺(5g)的嘧啶(25ml)溶液中逐滴加入甲基磺酰氯(3.5ml)。将混合物置于0℃下1小时，然后将温度提高到室温，并放置2小时。将混合物倒在冰(100g)和稀释的盐酸(3M，100ml)上，过滤形成的固体，然后用水清洗，并干燥而得到2-甲氧基-4-硝基-甲基磺酰基氨基苯(7.32g，98％)的白色结晶固体。
1H NMR(CDCl3)7.93(1H，dd，J2，8Hz)，7.78(1H，d，J2Hz)，7.65(1H，d，J8Hz)，7.23(1H，bs)，4.00(3H，s)和3.09(3H，s)。
B)2-甲氧基-4-氨基-甲基磺酰基氨基苯
在氢环境下，室温下将2-甲氧基-4-硝基-甲基磺酰基氨基苯(1g)的含碳载钯(10％，100mg)的甲醇溶液(20ml)搅拌48小时。将混合物过滤通过硅藻土，然后将其蒸发得到2-甲氧基-4-氨基-甲基磺酰基氨基苯的褐色胶质物。在后面的反应中，该产物无需纯化即可使用。
C)4-甲氧基-3-硝基-N-(4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基苯基)苯甲酰胺
将4-甲氧基-3-硝基苯甲酸(1g)的亚硫酰氯(20ml)悬浮液加热回流2小时。真空下除去过剩的亚硫酰氯得到酰基氯的白色固体。将酰基氯溶解于干二氯甲烷(25ml)中，并逐滴加入到溶于二氯甲烷(5ml)的嘧啶(1ml)和2-甲氧基-4-氨基-甲基磺酰基氨基苯(0.4g)的混合物中。将混合物置于室温下24小时，然后加入二氯甲烷(50ml)和盐酸(1M，50ml)，过滤沉淀，并用水清洗，得到4-甲氧基-3-硝基-N-(4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基苯基)苯甲酰胺(0.43g，54％)。
1H NMR((CD3)2CO)8.57(1H，d，J2Hz)，8.41(1H，dd，J2，8Hz)，7.89(1H，d，J2Hz)，7.61(1H，d，J8Hz)，7.47(1H，d，J8Hz)，7.40(1H，dd，J2，8Hz)，4.18(3H，s)，4.02(3H，s)和3.03(3H，s)。
D)4-甲氧基-3-甲基磺酰基氨基-N-(3-甲氧基-4-甲基磺酰基氨基苯基)-苯甲酰胺
在氢环境下，将4-甲氧基-3-硝基-N-(4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基苯基)苯甲酰胺(100mg)的甲醇(20ml)与碳载钯(10％，50mg)悬浮液一起搅拌18小时。真空下除去溶剂得到褐色胶质物。将残余物溶解于嘧啶(0.5ml)中并冷却到0℃，此时加入甲基磺酰氯(0.1ml)，将该混合物置于0℃下30分钟，然后将温度提高到室温，并放置1小时。加入稀释的盐酸(10ml，1M)和二氯甲烷，分离有机层，并在真空下干燥和蒸发得到褐色胶质物。通过柱色谱纯化，用含乙酸乙酯(0-100％)的二氯甲烷洗提硅胶得到3-甲基磺酰基氨基-4-甲氧基-N-(3-甲基磺酰基氨基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺(65mg，65％)的白色固体。
1H NMR((CD3)2CO)9.61(1H，bs，NH)，8.11(1H，d，J2Hz)，7.96(1H，bs，NH)，7.90(1H，dd，J2，8Hz)，7.85(1H，d，J2Hz)，7.67(1H，bs，NH)，7.39(1H，d，J8Hz)，7.34(1H，dd，J2，8Hz)，7.23(1H，d，J8Hz)，4.02(3H，s)，3.94(3H，s)，3.04(3H，s)和2.95(3H，s)。
E)4-羟基-3-甲基磺酰基氨基-N-(3-羟基-4-甲基磺酰基氨基苯基)-苯甲酰胺
在氮环境下，向搅拌的3-甲基磺酰基氨基-4-甲氧基-N-(3-甲基磺酰基氨基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺(200mg)的干CH2Cl2(20ml)悬浮液中加入三溴化硼(0.3ml)，然后再持续搅拌20小时。小心地加入甲醇(50ml)，然后在真空下将溶剂蒸发到体积为1ml，将该步骤再重复2次。通过柱色谱纯化，用含甲醇(10-20％)的氯仿洗提硅胶而得到4-羟基-3-甲基磺酰基氨基-N-(3-羟基-4-甲基磺酰基氨基苯基)-苯甲酰胺(62mg，33％)的浅褐色结晶。
1H NMR(CD3OD)7.92(1H，d，J2Hz)，7.68(1H，dd，J2，8Hz)，7.51(1H，d，J2Hz)，7.26(1H，d，J8Hz)，6.99(1H，dd，J2，8Hz)，6.98(1H，d，J8Hz)，2.99(3H，s)和2.92(3H，s)。
Hplc(方法1)29.0分钟
实施例7
3-羟基-4-甲基磺酰基氨基-N-(4-羟基-3-甲基磺酰基氨基苯基)苯甲酰胺(又被称为DC0051-DE)
用甲基磺酰氯处理商业可获得的2-甲氧基-5-硝基苯胺生成甲磺酰基胺。催化还原硝基基团生成需要的苯胺基，以与3-甲氧基-4-硝基苯甲酰氯缩合生成苯胺。通过催化氢化还原，紧接着立即进行甲磺酰基化生成甲磺酰基胺。通过与三溴化硼反应去甲基化生成低产量的3-羟基-4-甲基磺酰基氨基-N-(4-羟基-3-甲基磺酰基氨基苯基)苯基酰胺(DC0051-DE)，和大量的稳定的硼酸盐混合物。
A)2-甲氧基-5-硝基-甲基磺酰基氨基苯
在0℃向2-甲氧基-5-硝基苯胺(5g)的嘧啶(5ml)溶液中逐滴加入甲基磺酰氯(3.5ml)，然后再逐滴加入嘧啶(0.5ml)。将混合物置于0℃下1小时，然后将其放于室温下2小时。将混合物倒在冰(100g)和稀释的盐酸(3M，100ml)上，过滤形成的固体，然后用水清洗得到2-甲氧基-5-硝基-甲基磺酰基氨基苯(5.2g，71％)的白色结晶固体。
1H NMR(CDCl3)8.39(1H，d，J2Hz)，8.05(1H，dd，J2，8Hz)，6.99(1H，d，J8Hz)，6.97(1H，bs，NH)，4.01(3H，s)和3.07(3H，s)。
B)2-甲氧基-5-氨基-甲基磺酰基氨基苯
在氢环境下，将含碳载钯(10％，100mg)的2-甲氧基-5-硝基-甲基磺酰基氨基苯(1g)的甲醇溶液(20ml)在室温下搅拌48小时。过滤混合物通过硅藻土，然后蒸发得到2-甲氧基-5-氨基-甲基磺酰基氨基苯的褐色胶质物。在后面的反应中该物质无需纯化即可使用。
C)3-甲氧基-4-硝基-N-(3-甲基磺酰基氨基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺
将3-甲氧基-4-硝基苯甲酸(1.5g)的亚硫酰氯(25ml)悬浮液加热回流2小时。真空下除去过剩的亚硫酰氯得到白色固体的酰基氯。将酰基氯溶解于干二氯甲烷(50ml)中，然后逐滴加入到溶于二氯甲烷中的嘧啶(1.5ml)和4-甲氧基-3-甲基磺酰基氨基-苯胺(1.8g)混合物的溶液中。将混合物置于室温下24小时，然后加入二氯甲烷(100ml)和盐酸(1M，100ml)，过滤沉淀，并用水清洗得到3-甲氧基-4-硝基-N-(3-甲基磺酰基氨基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺(2.41g，80％)。
1H NMR((CD3)2CO)9.88(1H，bs，NH)，8.03(1H，d，J8Hz)，7.99(1H，d，J2Hz)，7.87(1H，dd，J2，8Hz)，7.86(1H，d，J2Hz)，7.81(1H，dd，J2，8Hz)，7.19(1H，d，J8Hz)，4.17(3H，s)，4.02(3H，s)和3.11(3H，s)。
D)3-甲氧基-4-甲基磺酰基氨基-N-(3-甲基磺酰基氨基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺
在氢环境下，将3-甲氧基-4-硝基-N-(3-甲基磺酰基氨基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺(1.4g)的甲醇悬浮液与碳载钯(10％，50mg)一起搅拌18小时。在真空下除去溶剂得到褐色胶质物。将残余物溶于嘧啶(5ml)中并冷却到0℃后，此时加入甲基磺酰氯(0.5ml)，将混合物置于0℃下再放置2小时，然后将其置于室温下1小时。将混合物倒入冰(50g)和盐酸(3M，50g)上，过滤产生的褐色固体，并用水清洗得到4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基-N(3-甲基磺酰基氨基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺(1.26g，86％)的褐色固体。
1H NMR((CD3)2CO)9.66(1H，bs，NH)，8.11(1H，bs，NH)，7.88(1H，dd，J2，8Hz)，7.87(1H，d，J2Hz)，7.84(1H，bs，NH)，7.79(1H，d，J2Hz)，7.76(1H，dd，J2，8Hz)，7.65(1H，d，J8Hz)，7.17(1H，d，J8Hz)，4.08(3H，s)，4.01(3H，s)，3.16(3H，s)和3.11(3H，s)。
E)3-羟基-4-甲基磺酰基氨基-N-(3-甲基磺酰基氨基-4-羟基苯基)苯甲酰胺
在氮环境下，向搅拌的4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基-N-(3-甲基磺酰基氨基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺(1.25g)的干CH2Cl2悬浮液中加入三溴化硼(1.5ml)，然后再持续搅拌20小时。小心地加入甲醇(50ml)，然后在真空下蒸发溶剂到体积为1ml，将该步骤再重复2次。通过柱色谱纯化，用含甲醇(10-20％)的氯仿抽提硅胶而得到3-羟基-4-甲基磺酰基氨基-N-(3-甲基磺酰基氨基-4-羟基苯基)苯基酰胺(143mg，15％)的白色固体。
1H NMR((CD3)2CO)9.55(1H，bs)，8.82(1H，bs)，7.87(1H，d，J2Hz)，7.73(1H，dd，J2，8Hz)，7.69(1H，d，J2Hz)，7.64(1H，dd，J2，8Hz)，7.59(1H，d，J8Hz)，7.04(1H，d，J8Hz)，3.16(3H，s)和3.12(3H，s)。
Hplc(方法1)29.5分钟。
实施例8
3-羟基-4-甲基磺酰基氨基-N-(3-羟基-4-甲基磺酰基氨基苯基)苯甲酰胺(也称为DC0051-DF)
用甲基磺酰氯处理商业可获得的2-甲氧基-4-硝基苯胺得到甲磺酰基胺。催化还原硝基基团得到需要的苯胺，以与3-甲氧基-4-硝基苯甲酰氯缩合生成苯胺。通过催化氢化还原，紧接着立即进行甲磺酰基化得到甲磺酰基胺。通过与三溴化硼反应去甲基化而得到3-羟基-4-甲基磺酰基氨基-N-(3-羟基-4-甲基磺酰基氨基苯基)苯甲酰胺(DC0051-DF)。
A)2-甲氧基-4-硝基-甲基磺酰基氨基苯
0℃下向2-甲氧基-4-硝基苯胺(5g)的嘧啶溶液(25ml)中逐滴加入甲基磺酰氯(3.5ml)。将该混合物置于0℃下1小时，然后将其置于室温下2小时。将混合物倒在冰(100g)和稀释的盐酸(3M，100ml)上，过滤形成的固体，然后用水清洗并干燥得到2-甲氧基-4-硝基-甲基磺酰基氨基苯(7.32g，98％)的白色结晶固体。
1H NMR(CDCl3)7.93(1H，dd，J2，8Hz)，7.78(1H，d，J2Hz)，7.65(1H，d，J8Hz)，7.23(1H，bs)，4.00(3H，s)和3.09(3H，s)。
B)2-甲氧基-4-氨基-甲基磺酰基氨基苯
在氢环境下，将含碳载钯(10％，100mg)的2-甲氧基-4-硝基-甲基磺酰基氨基苯(1g)的甲醇溶液(20ml)室温下搅拌48小时。过滤混合物通过硅藻土，然后蒸发得到2-甲氧基-4-氨基-甲基磺酰基氨基苯的褐色胶质物。在后面的反应中，该物质无需纯化即可使用。
C)3-甲氧基-4-硝基-N-(4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基苯基)苯甲酰胺
将3-甲氧基-4-硝基苯甲酸(1.5g)的亚硫酰氯(20ml)悬浮液加热回流2小时。真空下除去过剩的亚硫酰氯得到酰基氯的白色固体。将酰基氯(1.64g)的二氯甲烷(50ml)溶液加入到4-甲磺酰基胺基-3-甲氧基苯胺(1.75g)的二氯甲烷(50ml)溶液中，然后再向其中加入嘧啶(1.5ml)。将混合物加热回流2小时，然后将其置于室温下过夜。将产生的混合物加入到二氯甲烷(100ml)和盐酸(3M，50ml)中，过滤产生的沉淀，并用水清洗(100ml)，然后干燥得到3-甲氧基-4-硝基-N-(4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基苯基)苯甲酰胺(2.03g，67％)。
1H NMR((CD3)2CO)9.91(1H，bs，NH)，8.05(1H，d，J8Hz)，7.98(1H，d，J2Hz)，7.90(1H，d，J2Hz)，7.81(1H，bs，NH)，7.80(1H，dd，J2，8Hz)，7.50(1H，d，J8Hz)，7.39(1H，dd，J2，8Hz)，4.18(3H，s)，4.02(3H，s)和3.04(3H，s)。
D)4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基-N-(4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基苯基)苯甲酰胺
在氢环境下，将悬浮于甲醇(50ml)和乙酸乙酯(50ml)中的3-甲氧基-4-硝基-N-(4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基苯基)苯甲酰胺(2.03g)悬浮液与碳载钯(10％，50mg)一起搅拌18小时。在真空下除去溶剂得到褐色胶质物。将残余物溶于嘧啶(5ml)中并冷却到0℃，此时加入甲基磺酰氯(1ml)，将混合物置于0℃下2小时，然后将其置于室温下1小时。将混合物倒在冰(50g)和盐酸(3M，50g)上，过滤产生的褐色固体，并用水清洗得到4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基-N-(4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基苯基)苯甲酰胺(2.1g，100％)的浅褐色固体。
1H NMR((CD3)2CO)9.69(1H，bs，NH)，8.15(1H，bs，NH)，7.93(1H，d，J2Hz)，7.78(1H，d，J2Hz)，7.76(1H，bs，NH)，7.74(1H，dd，J2，8Hz)，7.66(1H，d，J8Hz)，7.47(1H，d，J8Hz)，7.40(1H，dd，J2，8Hz)，4.09(3H，s)，4.02(3H，s)，3.17(3H，s)和3.03(3H，s)。
E)4-甲基磺酰基氨基-3-羟基-N-(4-甲基磺酰基氨基-3-羟基苯基)苯甲酰胺
在氮环境下，向搅拌的4-甲基磺酰基氨基-3-甲氧基-N-(3-甲基磺酰基氨基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺(2g)的干CH2Cl2悬浮液中加入三溴化硼(2ml)，将产生的橙色悬浮液留置3小时。小心加入甲醇(50ml)，将该溶液搁置过夜。真空下将溶剂蒸发到体积为1ml，然后加入甲醇(50ml)，将该步骤再重复2次。通过柱色谱纯化，用含甲醇(10-20％)的氯仿来洗提硅胶产生4-甲基磺酰基氨基-3-羟基-N-(4-甲基磺酰基氨基-3-羟基苯基)苯甲酰胺(DC0051-DF)(0.74g，40％)的浅褐色胶质物。
1HNMR((CD3)2SO)10.37(1H，bs，NH)，10.21(1H，bs，NH)，10.01(1H，bs，NH)，9.05(1H，bs，OH)，8.76(1H，bs，OH)，7.68(1H，bs)，7.53(1H，bs)，7.51(1H，dd，J2，8Hz)，7.45(1H，d，J8Hz)，7.21(2H，bs)，3.14(3H，s)和3.03(3H，s)。
Hplc(方法1)29.4分钟
实施例9
2-氧-N-(2-氧-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-羰基化物(也称为DC-0051-B1)
通过在1，3-N，N-二异丙基碳二亚胺和1-羟基苯并三唑的存在下，使2-氧-2，3-二氢-1H-苯并咪唑基-5-羧酸与5-氨基-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-5-酮反应来合成氨基化合物。
将1，3-N，N-二异丙基碳二亚胺(0.504g；4mmol)加入到溶于无水的N，N-二甲基甲酰胺(10ml)的2-氧-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-5-羧酸(0.448g；2.5mmol)、5-氨基-2-氧-2，3-二氢-1H-苯并咪唑和1-羟基苯并三唑(0.34g；2.5mmol)的溶液中。在40℃下将反应混合物搅拌12小时。通过过滤反应混合物而分离沉淀产物，接着用N，N-二甲基甲酰胺(3ml)将沉淀清洗3次以上。将产物溶于二甲基亚砜(5ml)中，并通过用乙腈(60ml)稀释溶液以沉淀产物。在真空下过滤和干燥而产生2-氧-N-(2-氧-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-羰基化物(也称为DC-0051-B1)(0.22g；28％)。
1H NMR((CD3)2SO 10.62(1H，s，NH)，10.53(1H，s，NH)，9.98(1H，s，NH)7.65(1H，d，J8Hz)7.55(2H，bs)7.23(1H，d，J8Hz)7.05(1H，d，J8Hz)7.85(1H，d，J8Hz)。
实施例10
N-(3，4-二羟基苯基)-2-氧-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-
甲酰胺(也称为DC-0051-B2)
在丙酮中用碳酸钾作为碱，通过与苄基溴一起回流使3，4-二羟基-1-硝基苯苄基化，用连二亚硫酸钠对上述产物进行还原生成3，4-二苄氧基苯胺。在1-羟基苯并三唑存在下，使用N，N-1，3-二异丙基碳二亚胺将该产物偶联到2-氧-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-5-羧酸上生成氨基化合物。然后在碳载钯存在下通过氢化将该氨基化合物去苄基化。
A)3，4-二苄氧基-1-硝基苯
将碳酸钾(4.14g；30mmol)加入到溶于丙酮(100ml)中的3，4-二羟基-1-硝基苯(1.55g；10mmol)和苄基溴(3.42g；20mmol)的溶液中。将混合物加热回流12小时。减压下除去溶剂后，将残余物分散在乙酸乙酯(150ml)和水(50ml)之间。用水(100ml)清洗乙酸乙酯层，并在硫酸镁上进行干燥。减压下除去溶剂生成2.37g的3，4-二苄氧基-1-硝基苯(产量＝70％)。
1H NMRCDCl37.85(1H，d，J8Hz)7.8(1H，s)7.28-7.50(m，10H)6.95(1H，d，J8Hz)5.24(s，2H)5.21(s，2H)。
B)3，4-二苄氧基苯胺
将连二亚硫酸钠(2g)加入到溶于甲醇(30ml)/氨水(5ml)中的3，4-二苄氧基-1-硝基苯(2.37g)溶液中。室温下搅拌12小时后，在减压下除去溶剂。将残余物分散在乙酸乙酯相(75ml)和水(75ml)相之间。用水(25ml)、盐水(25ml)清洗乙酸乙酯层，并在无水硫酸镁上干燥，在减压下浓缩。通过快速色谱纯化，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗提硅胶而生成1.0g的1-苄氧基-2-甲氧基-5-氨基苯(产量＝47％)。
1H NMRCDCl3 7.27-7.47(10H，m)6.8(1H，d，J8Hz)6.37(1H，s)6.22(1H，d，J8Hz)5.13(2H，s)5.06(2H，s)3.49(2H，bs，NH2)
C)2-氧-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-5-羧基(1-N-3，4-二苄氧基苯基)酰胺
将1，3-N，N-二异丙基碳二亚胺(0.412g；3.27mmol)加入到溶于无水N，N-二甲基甲酰胺(15ml)的2-氧-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-5-羧酸(0.584g；3.27mmol)、3，4-二苄氧基苯胺(1.0g，3.27mmol)和1-羟基苯并三唑(0.442g；3.27mmol)的溶液中。在室温下搅拌16小时后，将混合物倒入水中(150ml)。用1N的盐酸将混合物的PH调到2，并搅拌30分钟。过滤，并用乙酸乙酯(3×10ml)清洗产物得到1.12克2-氧-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-5-羧基(1-N-3，4-二苄氧基苯基)酰胺。
产量＝73.6％。
1H NMR(CD3)2SO 10.5(1H，s，NH)7.65(1H，d，J8Hz)7.6(1H，s)7.2-7.6(m，12H)7.0(2H，d，J8Hz)5.15(4H，s)。
D)N-(3，4-二羟基苯基)-2-氧-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺
在存在10％碳载钯的条件下，以40 Psi的压力将溶于乙酸(100ml)和N，N-二甲基甲酰胺(25ml)混合物中的2-氧-2，3-二氢-1H-苯并咪唑基-5-羧酸(1-N-3，4-二苄氧基苯基)氨基化合物(1.10g)的溶液在室温下氢化12小时。通过过滤除去催化剂后，在减压下除去溶剂。将残余物溶于N，N-二甲基甲酰胺(15ml)，并通过用己烷/乙酸乙酯(1∶1)(100ml)稀释以沉淀产物。过滤得到0.550g的N-(3，4-二羟基苯基)-2-氧-2，3-氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺。产量＝78％。
1H NMR(CD3)2SO 10.94(1H，bs)9.86(1H，s)8.85(1H，bs)7.61(1H，d，J8Hz)7.59(1H，s)7.3(1H，s)7.0(1H，d，J8Hz)6.96(1H，d，J8Hz)6.66(1H，d，J8Hz)M/z(286(M+H+)，308(M+Na+100％)。HPLC(方法2)3.256分钟。
实施例11
3，4-二羟基-N-(2-氧-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)苯甲酰胺(被称为DC-0051-B3)
在酸存在下，通过在甲醇中加热回流来将3，4-二羟基苯甲酸转化成它的甲酯。通过用苄基溴和碳酸钾处理而将二羟基基团转化为苄基醚而得到保护。用氢氧化钠对酯进行水解生成酸，在1-羟基苯并三唑存在下使用N，N-1，3-二异丙基碳二亚胺将该酸偶联到5-氨基-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-5-酮上生成酰胺。在碳载钯存在下通过氢化而使该酰胺去苄基化。
A)3，4-二羟基苯甲酸甲酯
在浓缩的盐酸(0.5ml)的存在下，将3，4-二羟基苯甲酸(2.8g)的甲醇溶液(150ml)加热回流12小时。在减压浓缩后，将残余物溶解于乙酸乙酯(150ml)中，并用水(50ml)、10％碳酸氢钠溶液(50ml)、生理盐水(50ml)清洗，在无水硫酸镁上干燥。在减压下除去溶剂得到2.64g的3，4-二羟基苯甲酸甲酯甲酯(产量＝86.5％)。
1H NMRCDCl37.7(1H，s)7.63(1H，d，J8Hz)6.92(1H，d，J8Hz)5.7(2H，bs)3.92(3H，s)。
B)3，4-二苄氧基苯甲酸甲酯
将碳酸钾(6.5g；47mmol)加入到溶于丙酮(100ml)的3，4-二羟基苯甲酸甲酯(2.6g；15.7mmol)和苄基溴(5.37g；31.4mmol)的溶液中。将反应混合物加热回流12小时。在减压下除去溶剂后，将残余物分散在乙酸乙酯相(150ml)和水相(50ml)中。用水(50ml)清洗乙酸乙酯层，并将其置于无水硫酸钠上进行干燥。减压下除去溶剂得到3.36g的3，4-二苄氧基苯甲酸甲酯(产量＝86.6％)。
1H NMR CDCl37.67(1H，s)7.65(1H，d，J8Hz)7.28-7.50(m，10H)6.95(1H，d，J8Hz)5.24(s，2H)5.21(s，2H)3.89(s，3H)。
C)3，4-二苄氧基苯甲酸
将氢氧化钠(1.2g)的甲醇(100ml)溶液加入到3，4-二苄基苯甲酸甲酯(4.64g)的甲醇(50ml)溶液中，并加热回流4小时。减压下除去甲醇后，将残余物溶解于水中(100ml)，并用乙酸乙酯(2×50ml)清洗。用2N的盐酸将水层酸化到PH2。通过过滤收集沉淀产物，在真空下对产物进行干燥得到2.4g的3，4-苄氧基苯甲酸。(产量＝74％)
1H NMR CDCl3 7.7(2H，b，s)7.27-7.5(10H，m)6.98(1H，d，J8Hz)5.26(2H，s)5.22(2H，s)。
D)3，4-二苄氧基(5-N-2-氧-2，3-二氢-1H-苯并咪唑基)苯甲酰胺。
1，3-N，N-二异丙基碳二亚胺(0.945g；7.5mmol)加入到溶于无水N，N-二甲基甲酰胺(20ml)中的3，4-二苄氧基苯甲酸(1.67g，5mmol)、5-氨基-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-5-酮(0.745g，5mmol)和1-羟基苯并三唑(0.675g，5mmol)溶液中。室温下搅拌16小时后，将反应混合物倒入水中(100ml)。用1N的盐酸将混合物的PH调整到2，并搅拌30分钟。过滤，并用乙酸乙酯(3×10ml)清洗产物得到1.06g的3，4-二苄氧基-(5-N-2-氧-2，3-二氢-1H-苯并咪唑基)苯甲酰胺。(产量＝45.7％)。
1H NMR(CD3)2SO 9.94(1H，s)7.65-7.2(14H，m)7.09(2H，d，J8Hz)5.1(4H，s)。
E)3，4-二羟基-N-(2-氧-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)苯甲酰胺
在10％碳载钯存在下，以40Psi的压力在室温下将3，4-二苄氧基-(5-N-2-氧-2，3-二氢-1H-苯并咪唑基)苯甲酰胺(1.06g；2.28mmol)的乙酸(120ml)溶液氢化12小时。通过过滤除去催化剂后，在减压下除去溶剂。将残余物溶解于N，N-二甲基甲酰胺(15ml)中，用己烷/乙酸乙酯(1∶1)(100ml)稀释以沉淀产物。过滤后得到0.334g的3，4-二羟基-N-(2-氧-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)苯甲酰胺。产量＝50％。
1H NMR(CD3)2SO 10.54(1H，bs)9.78(1H，s)9.41(1H，bs)7.54(1H，s)7.37(1H，s)7.32(1H，d，J8Hz)7.23(1H，d，J8Hz)6.85(1H，d，J8Hz)6.80(1H，d，J8Hz)。
M/z(286(M+H+)100％，308(M+Na+)。HPLC(方法2)2.34分钟。
实施例12
3-羟基-N-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-4-甲氧基苯
甲酰胺(被称为DC-0051-B4)
在丙酮中用碳酸钾作为碱，通过与苄基溴一起回流使3-羟基-4-甲氧基-1-硝基苯苄基化，用连二亚硫酸钠将该产物还原得到3-苄氧基-4-甲氧基苯胺。在酸存在下，通过在甲醇中进行加热回流将4-羟基-3-甲氧基苯甲酸转化成它的甲基酯。使用苄基溴和碳酸钾对羟基进行苄基化。使用氢氧化钠对酯进行水解得到酸。在1-羟基苯并三唑的存在下，使用N，N-1，3-二异丙基碳二亚胺将苯胺和酸偶联起来得到酰胺。最后，在碳载钯存在下，通过氢化将苄基基团除去。
A)1-苄氧基-2-甲氧基-5-硝基苯
将碳酸钾(1.65g，12mmol)加入到2-甲氧基-5-硝基苯酚(1.69g；10mmol)和苄基溴(1.71g；10mmol)的丙酮(60ml)溶液中。将混合物加热回流12小时。减压下除去溶剂，将残余物分散在乙酸乙酯(150ml)相和水(50ml)相中。分离乙酸乙酯层，并用水清洗(2×50ml)，并置于无水硫酸镁上干燥。减压下除去溶剂得到2.5克1-苄氧基-2-甲氧基-5-硝基苯(产量＝96.5％)。
1H NMRCDCl37.95(1H，d，J8Hz)7.81(1H，s)7.3-7.5(5H，m)6.92(1H，d，J8Hz)5.15(2H，s)3.95(3H，s)。
B)1-苄氧基-2-甲氧基-5-氨基苯
将连二硫酸钠(1.5g)加入到溶于甲醇(20ml)/氨水(4ml)混合物中的1-苄氧基-2-甲氧基-5-硝基苯(2.5g)溶液中。室温下搅拌12小时后，在减压下除去溶剂。将残余物分散在乙酸乙酯(75ml)相和水(50ml)相中。用水(25ml)、盐水(255ml)清洗有机层，并置于硫酸镁上干燥和减压浓缩。通过快速色谱纯化，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗提硅胶而得到0.771克1-苄氧基-2-甲氧基-5-氨基苯(产量＝35％)。
1H NMR CDCl3 7.25-7.5(5H，m)6.78(1H，d，J8Hz)6.35(1H，s)6.28(1H，d，J8Hz)5.1(2H，s)3.8(3H，s)。
C)4-羟基-3-甲氧基苯甲酸甲酯
在浓盐酸(0.5ml)存在下，将4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(7.2g)的甲醇(150ml)溶液加热回流12小时。减压下浓缩后，将残余物溶于乙酸乙酯(200ml)中，并用水(50ml)、10％碳酸氢钠溶液(2×50ml)、水(50ml)清洗，并置于无水硫酸镁上干燥。减压下除去溶剂得到得到7.25克4-羟基-3-甲氧基苯甲酸甲酯。(产量＝91.5％)。
1H NMR CDCl3 7.65(1H，d，J8Hz)7.55(1H，s)6.95(1H，d，J8Hz)6.15(1H，bs，-OH)3.95(3H，s)3.9(3H，s)。
D)4-苄氧基-3-甲氧基苯甲酸甲酯
将碳酸钾(3.45g；25mmol)加入到4-羟基-3-甲氧基苯甲酸甲酯(3.6g；20mmol)和苄基溴(3.42g；20mmol)的乙酮溶液(100ml)中。将反应混合物加热回流12小时。减压下除去溶剂后，将残余物分散在乙酸乙酯(150ml)和水(50ml)中。用水(50ml)清洗乙酸乙酯层，并置于无水硫酸钠上干燥。减压除去溶剂得到4.64克4-苄氧基-3-甲氧基苯甲酸甲酯(产量＝86.6％)。
E)4-苄氧基-3-甲氧基苯甲酸
将氢氧化钠(2.0g)的甲醇溶液加入到4-苄氧基-3-甲氧基苯甲酸甲酯(4.64 g)的甲醇(50ml)溶液中，加热回流4小时。减压下除去甲醇后，将残余物溶于水(150ml)中，并用乙酸乙酯(2×50ml)清洗。用2N的盐酸将水层的PH值调整到2。过滤收集沉淀的产物，在真空下干燥得到4.17克4-苄氧基-3-甲氧基苯甲酸。(产量＝74％)。
1H NMRCDCl3 7.7(1H，d，J＝8Hz)7.63(1H，s)7.3-7.5(5H，m)6.92(1H，d，J8Hz)5.25(2H，s)3.98(3H，s)。
F)4-苄氧基-3-甲氧基-N-(3-苄氧基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺
将N，N-1，3-二异丙基碳二亚胺(0.40g，3.36mmol)加入到1-苄氧基-2-甲氧基-5-氨基苯(0.771g，3.36mmol)、4-苄氧基-3-甲氧基苯甲酸(0.87g，3.36mmol)和1-羟基苯并三唑(0.454g，3.36mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(15ml)溶液中，并搅拌12小时。通过用乙酸乙酯/己烷(1∶1)混合物(120ml)进行稀释以沉淀产物，得到1.12克4-苄氧基-3-甲氧基-N-(3-苄氧基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺。产量＝69％。
1H NMR(CD3)2SO 9.93(1H，s)7.29-7.59(14H，m)7.16(1H，d，J8Hz)6.96(1H，d，J8Hz)5.18(2H，s)5.06(2H，s)3.85(3H，s)3.76(3H，s)。
G)3-羟基-N-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-4-甲氧基苯甲酰胺
在10％碳载钯存在下，以40 Psi的压力室温下将溶于N，N-二甲基甲酰胺/甲醇(1∶5，120ml)混合物中的4-苄氧基-3-甲氧基-N-(3-苄氧基-4-甲氧基苯基)苯甲酰胺(1.05g)溶液氢化12小时。过滤除去催化剂，通过快速色谱纯化，用65％乙酸乙酯/己烷洗提硅胶而得到0.26克3-羟基-N-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-4-甲氧基苯甲酰胺。产量＝41.6％。
1H NMR(CD3)2SO 9.73(1H，s)9.62(1H，bs)8.99(1H，bs)7.5(1H，s)7.45(1H，d，J8Hz)7.29(1H，s)7.09(1H，d，J8Hz)6.85(1H，d，J8Hz)3.84(3H，s)3.74(3H，s)
M/z(290(M+H+)，3.12(M+Na+)，100％)。HPLC(方法2)3.86分钟。
实施例13
使用本说明书所述方法相似的方法制备下列化合物：
i)DC-0051-A2，也称为DC-0051-S2
ii)DC-0051-A3，也称为DC-0051-S3
iii)DC-0051-A4，也称为DC-0051-S4
iv)DC-0051-A5，也称为DC-0051-S5
2，4-二(3，4-二羟基苄基)-8-甲基-8-氮杂-二环[3.3.1]庚-3-酮vi)
实施例14
4-羟基-3-甲基磺酰基氨基-N-(4-羟基-3-甲基磺酰基氨基苯基)-苯甲酰胺
硼酸复合物(也称为DC-0051-CE硼酸复合物)
用甲基磺酰氯处理商业可获得的2-甲氧基-5-硝基苯胺生成甲磺酰基胺。然后催化还原硝基基团得到需要的苯胺，它与4-甲氧基-3-硝基苯甲酰氯缩合生成苯胺。通过催化氢化进行还原，接着立即进行甲磺酰基化生成甲磺酰基胺。在通常条件下去甲基化生成所需产品的稳定的硼复合物。
实施例15
本发明所提供的化合物是阿尔茨海默病的Aβ1-42纤丝的有效的破坏剂
发现前述实施例中制备的化合物是阿尔茨海默病的Aβ纤丝的有效的破坏剂/抑制剂。在一系列的研究中，分析了本发明所提供的某些化合物导致阿尔茨海默病的预形成淀粉样蛋白纤丝分解/破坏的效率。
部分A-硫磺素T荧光数据
在一项研究中，用硫磺素T来测定化合物和EDTA(作为阴性对照)的效果。在这个实验中，硫磺素T特异性地与纤丝淀粉样蛋白结合，这种结合使485nm处的荧光增强，这种增强直接与形成的淀粉样纤丝的量成比例。荧光越强，形成的淀粉样纤丝的量就越大(Naki等人，Lab.Invest.65：104-110，1991；Levine III，Protein Science.2：404-410，1993；Amyloid：Int.J.Exp.Clin.Invest.2：1-6，1995)。
在这项研究中，将25μM的预纤丝化Aβ1-42(Bachem Inc)单独、或在一种化合物或EDTA存在下在37℃下温育3天(Aβ与测试化合物的质量比例为1∶1、1∶0.1、1∶0.01或1∶0.001)。当共温育3天后，将50ul的各种温育混合物转移到含有150ul双蒸水和50ul硫磺素T溶液(即溶于250mM，PH 6.8的磷酸缓冲液中的500mM硫磺素T)的96孔板中。使用ELISA板荧光计读取485nm处的荧光(激发波长为444nm)(要减去作为空白对照的单独的溶液或化合物的值)。
3天温育的结果列于下表。例如，在所有测试浓度下EDTA对Aβ1-42纤丝没有引起显著的抑制/破坏，而化合物(DC-0051、Dc-0051-S1、S3、S4、S5、S6、S7、S8和S9)都在某种程度上都导致了预形成的Aβ1-42纤丝发生浓度依赖性破坏/分解(表1)。例如，化合物DC-0051-S8引起了显著(p＜0.01)的抑制，当Aβ∶测试化合物的质量比为1∶0.1时引起了87.9+/-0.78％的抑制，当Aβ∶测试化合物的质量比为1∶0.01时引起了56.0+/-11.32％的抑制(表1)。在同样的条件下(即Aβ∶测试化合物的质量比为1∶0.01)，化合物DC-0051引起了89.5+/-3.26％的破坏，化合物DC-0051-S5引起了80.0+/-0.63％的破坏，而化合物DC-0051-S9引起了84.1+/-4.28％的破坏。这项研究表明本发明所提供的化合物是阿尔茨海默病的Aβ型纤丝的破坏剂/抑制剂，且通常它们以浓度依赖性方式发挥作用。
表1：硫磺素T荧光剂数据-测试化合物对Aβ1-42纤丝的破坏
(对Aβ的抑制％；以给定Aβ∶测试化合物的质量/质量比)
部分B：SDS-PAGE/免疫印迹数据
可以通过涉及使用SDS-PAGE和免疫印迹方法(未显示)的研究来证实Aβ1-42的破坏，甚至是单体的Aβ1-42。在这项研究中，预纤维化的Aβ1-42(25uM)样品单独或在存在化合物或EDTA的情况下在37℃温育3天，每一个样品都有三个重复。然后通过0.2uM的滤膜过滤5微克的每一种样品。将从滤出液中获得的蛋白上样，然后在10-20％的Tris-tricine SDS-PAGE上进行电泳，将蛋白印迹到硝酸纤维素膜上，并用Aβ的抗体(克隆6E10；Senetek)检测。在这项研究中，单独温育、或在存在EDTA时温育3天后，检测Aβ监测到～4Kd的带(即单体Aβ)。例如，当Aβ与化合物DC-0051、DC-0051-S1、DC-0051-S5、DC-0051-S8和DC-0051-S9温育后不能检测到Aβ1-42的单体，这与硫磺素T的荧光数据(上面描述的)有很好的一致性，这些数据表明这些化合物能够导致单体Aβ1-42消失。这项研究证实了这些化合物也能够引起单体Aβ1-42的破坏/去除。
部分C：刚果红结合数据
在刚果红结合试验中，对测试化合物改变淀粉样蛋白(在本例中为Aβ)结合刚果红的能力进行定量。在这个实验中，将Aβ1-42和测试化合物温育3天，然后真空下通过0.2um的滤膜过滤。当用刚果红对滤膜进行染色后，对留在滤膜上的Aβ1-42的量进行定量。合适地清洗滤膜后，存在测试化合物的滤膜上的刚果红颜色的任何减弱(与缺乏测试化合物时淀粉样蛋白刚果红的刚果红染色相比)表示测试化合物减少/改变聚集的和嗜刚果红的Aβ的量的能力。这项特别的实验看来要比硫磺素T荧光计更加严格，与其它的试验相比，该试验更难除去结合在Aβ1-42纤丝上的刚果红，因此存在有效化合物时观察到的抑制％要比其它实验，如硫磺素荧光计时所观察到的抑制％要低。
在一项研究中，测定了在缺乏或存在增加量的化合物或EDTA(Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶0.001、1∶0.01、1∶0.1和1∶1)时Aβ纤丝结合刚果红的能力。3天温育的结果被提供在下面的表2中。尽管EDTA对Aβ1-42结合到刚果红上的能力没有显著的抑制，但化合物(DC-0051、DC-0051-S1、S3、S4、S5、S6、S7、S8和S9)却导致Aβ结合刚果红的浓度依赖性抑制(表2)。例如，当Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶1时，化合物DC-0051-S5导致刚果红结合Aβ1-42的显著(82.3+/-0.59％)抑制，当Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶0.1时导致40.3+/-5.81％的抑制(表2)。在Aβ∶测试化合物的质量比为1∶0.1时，其它良好抑制剂是DC-0051-S1(19.7+/-2.97％的抑制)、C-0051(40.3+/-5.81％的抑制)、DC-0051-S6(17.1+/-4.94％的抑制)、DC-0051-S8(19.8+/-2.43％的抑制)和DC-0051-S9(17.4+/-6.11％的抑制)。
表2：刚果红结合数据-测试化合物对Aβ1-42纤丝的破坏
(Aβ的抑制％；以给定的Aβ∶测试化合物质量/质量比)
实施例16
本发明所提供的其它化合物是阿尔茨海默病Aβ1-42纤丝的有效破坏剂已发现前述实施例中制备的化合物是阿尔茨海默病的Aβ的纤丝的有效破坏剂/抑制剂。在另一系列的试验中，分析了本发明所提供的某些化合物(也称为DC-0051-B2、DC-0051-B3和DC-0051-B4)导致阿尔茨海默病的预形成淀粉样纤丝(即由Aβ1-42构成的纤丝)的分解/破坏的效率。
硫磺素T荧光数据
在一项研究中，用硫磺素T荧光计来测定化合物和EDTA(作为阴性对照)的效果。在这项试验中，硫磺素T特异性地与纤丝淀粉样蛋白结合，这种结合会使485nm处的荧光增强，这种增强直接与形成的淀粉样纤丝的量成比例。荧光越强，形成的淀粉样纤丝的量就越多(Naki等人，Lab.Invest.65：104-110，1991；Levine III，Protein Sci.2：404-410，1993年；Amyloid：Int.J.Exp.Clin.Invest.2：1-6，1995)。
在这项研究中，将25uM的预纤维化Aβ1-42(Bachem Inc)单独、或存在一种化合物(DC-0051-B2、DC-0051-B3或DC-0051-B4)时在37℃下温育3天。当共温育3天后，将50ul的每一种温育混合物转移到含有150ul双蒸水和50ul的硫磺素T溶液(即溶于250mM、PH6.8的磷酸缓冲液的500mM硫磺素溶液)的96孔平板中。使用ELISA平板荧光计读取485nm(444nm的激发波长)处的荧光值，并减去作为对照的单独的溶液或单独的化合物的值。
3天温育的结果见下表。例如，在所有测试的浓度下，EDTA对Aβ1-42纤丝没有显著的抑制或破坏，而化合物(DC-0051-B2、DC-0051-B3和DC-0051-B4)在某种程度上都导致了预形成的Aβ1-42纤丝发生浓度依赖性破坏/分解(表3)。通过硫磺素荧光计试验评价，破坏预形成的Aβ1-42纤丝的最有效的化合物是DC-0051-B2。例如，当Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶0.1时，化合物DC-0051-B2引起了显著(p＜0.01)(65.8+/-2.01％)的抑制，当Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶1时，化合物DC-0051-B2引起了显著的85.5+/-1.27％的抑制(表3)。这项研究表明本发明所提供的其它化物是阿尔茨海默病的Aβ型纤丝的破坏剂/抑制剂，且通常以浓度依赖性方式发挥作用。
表3：硫磺素T荧光数据-测试化合物对Aβ1-42纤丝的破坏
(对Aβ的抑制％；以给定的Aβ∶测试化合物质量/质量比)
实施例17
本发明所提供的化合物是II型糖尿病IAPP纤丝的有效分解剂
前述实施例中制备的化合物发现还是II型糖尿病IAPP纤丝的有效破坏剂/抑制剂。在一系列的试验中，分析了本发明所提供的某些化合物使II型糖尿病的预形成淀粉样蛋白纤丝(例如，由IAPP构成的纤丝)分解/破坏的效率。
部分A-硫磺素T荧光数据
在一项研究中，用硫磺素T荧光计来测定化合物和EDTA的效果(作为阴性对照)。在这个试验中，硫磺素T特异性地与纤丝淀粉样蛋白结合，这种结合引起485nm处的荧光增强，这种增强直接与形成的淀粉样蛋白纤丝的量成比例。荧光越强，形成的淀粉样蛋白纤丝的量就越大(Naki等人，Lab.Invest.，65：104-110，1991；Levine III，Protein Sci.2：404-410，1993；Amyloid：Int.J.Exp.Clin.Invest.2：1-6，1995)。
在该试验中，将25uM的IAPP(Bachem Inc)单独，或在一种化合物或EDTA的存在下(Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶1、1∶0.1、1∶0.01或1∶0.001)在37℃下温育3天。当共温育3天后，将50ul的各种温育混合物转移到含150ul的双蒸水和50ul的硫磺素T溶液(即溶于250mM，PH6.8的磷酸缓冲液中的500mM硫磺素)的96孔平板中。使用ELISA平板荧光剂读取485nm处的荧光，并减去作为空白对照的单独的溶液或单独的化合物的值。
3天的共温育的结果列于下表。例如，在所有测试的浓度下，EDTA对Aβ1-42纤丝没有显著的抑制或分解，而化合物(DC-0051、DC-0051-S1、S3、S4、S5、S6、S7、S8和S9)在某种程度上都使预形成的Aβ1-42纤丝发生浓度依赖性破坏/分解(表4)。例如，当Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶0.1时，化合物DC-0051-S8引起了显著(p＜0.01)(91.4+/-1.06％)的抑制，当Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶0.01时，化合物DC-0051-S8引起了显著(52.2+/-0.45％)的抑制(表4)。在同样的条件(即Aβ∶测试化合物的质量比为1∶0.01)下，化合物DC-0051引起了63.9+/-0.56％的破坏，化合物DC-0051-S1引起了47.2+/-5.48％的破坏，和化合物DC-0051-S3引起了49.3+/-0.65％的破坏。这项研究表明本发明所提供的化合物是II型糖尿病IAPP纤丝的破坏剂/抑制剂，且通常以浓度依赖性方式发挥作用。
表4：硫磺素T荧光数据-测试化合物引起的IAPP纤丝破坏
(对Aβ的抑制％；以给定的Aβ∶测试化合物质量/质量比)
部分B：刚果红结合数据
在刚果红结合试验中，对测试化合物改变淀粉样蛋白(在本实施例中为IAPP)结合刚果红的能力进行定量。在这个实验中，将IAPP和测试化合物温育3天，然后真空下通过0.2um的滤膜过滤。当用刚果红对滤膜进行染色后，对留在滤膜上的IAPP的量进行量化。合适地清洗滤膜后，存在测试化合物的滤膜上的刚果红颜色的任何减弱(与缺乏测试化合物时淀粉样蛋白刚果红的染色相比)代表了测试化合物减少/改变聚集的和嗜刚果红的IAPP的量的能力。这项特别的实验看来要比硫磺素T荧光计更加严格，与其它的试验相比，该试验更难除去结合在IAPP纤丝上的刚果红，因此存在有效化合物时观察到的抑制％要比其它实验，如硫磺素荧光计时所观察到的抑制％要低。
在一项研究中，测定了在缺乏或存在增加量的化合物或EDTA(IAPP∶测试化合物的质量比例为1∶0.001、1∶0.01、1∶0.1和1∶1)时IAPP纤丝结合刚果红的能力。3天温育的结果提供在下表5中。尽管EDTA对IAPP结合刚果红的能力没有显著的抑制，但化合物(DC-0051、DC-0051-S1、S3、S4、S5、S6、S7、S8和S9)却使IAPP结合刚果红发生浓度依赖性抑制(表5)。例如，当IAPP∶测试化合物的质量比例为1∶1时，化合物DC-0051-S8引起了对刚果红结合到IAPP的显著(41.0+/-4.15％)抑制，当Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶0.1时引起了26.7+/-0.82％的抑制(表5)。在IAPP∶测试化合物的质量比为1∶0.1时，其它的良好抑制剂是DC-0051(51.+/-0.63％的抑制)、DC-0051-S1(24.1+/-1.99％的抑制)、DC-0051-S4(22.0+/-0.26％的抑制)、和DC-0051-S9(21.2+/-2.70％的抑制)。
表5：刚果红结合数据-测试化合物引起的IAPP纤丝破坏
(对IAPP的抑制％；以给定的IAPP∶测试化合物的质量/质量比％)
实施例18
本发明所提供的化合物是α-共核蛋白纤丝的有效破坏剂
前述实施例中制备的化合物还发现是α-共核蛋白纤丝的有效破坏剂/抑制剂。在一系列的试验中，分析了本发明所提供的某些化合物使帕金森病的预形成淀粉样蛋白纤丝(例如，由α-共核蛋白构成的纤丝)分解/破坏的效率。
硫磺素T荧光数据
在一个试验中，用硫磺素T荧光计来测定化合物和EDTA(作为阴性对照)的效果。在这个试验中，硫磺素T特异性地与纤丝淀粉样蛋白结合，这种结合就使485nm处的荧光增强，这种增强直接与形成的淀粉样蛋白纤丝的量成比例。荧光越强，形成的淀粉样蛋白纤丝的量就越大(Naki等人，Lab.Invest.，65：104-110，1991；Levine III，Protein Sci.2：404-410，1993；Amyloid：Int.J.Exp.Clin.Invest.2：1-6，1995)。
在该试验中，先将25uM的α-共核蛋白(重组的多肽)与肝素(Sigma)在55℃下温育2天，以引起α-共核蛋白聚集和形成纤丝。肝素是高度硫酸化的粘多糖，已知它能引起淀粉样蛋白的聚集。当α-共核蛋白初步纤丝化后，将α-共核蛋白+肝素单独，或在一种化合物或EDTA的存在下(Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶1、1∶0.1、1∶0.01或1∶0.001)在37℃下温育3天。当共温育3天后，将50ul的每一种温育混合物转移到含150ul的双蒸水和50ul的硫磺素T溶液(即溶于250mM，PH6.8的磷酸缓冲液中的500mM硫磺素)的96孔平板中。使用ELISA平板荧光计读取485nm处的荧光值(444nm的激发波长)，并减去作为空白对照的单独的溶液或单独的化合物的值。
3天温育的结果列于下表。化合物(DC-0051、DC-0051-S1、S3、S4、S5、S6、S7、S8和S9)在某种程度上都引起了预形成的α-共核蛋白纤丝的浓度依赖性破坏/瓦解(表6)。例如，当Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶0.1时，化合物DC-0051-S1引起了显著(p＜0.01)(94.5+/-2.11％)的抑制，当Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶1时，化合物DC-0051-S1引起了显著(99.1+/-0.12％)的抑制(表6)。另一方面，当Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶0.1时，化合物DC-0051-S8引起了显著(p＜0.01)(84.6+/-0.47％)的抑制，当Aβ∶测试化合物的质量比例为1∶1时，化合物DC-0051-S8引起了显著(96.1+/-1.14％)的抑制(表6)。这项研究表明本发明所提供的化合物也是帕金森病α-共核蛋白纤丝的有效破坏剂/抑制剂，且通常以浓度依赖性方式发挥作用。
表6：硫磺素T荧光数据-测试化合物引起的α-共核蛋白纤丝破坏
(对Aβ的抑制％，以给定的Aβ∶测试化合物质量/质量比)
实施例19
本发明所提供的化合物的组合物
本发明所提供的化合物，如前所述，最好是以药物组合物的形式给予。合适的药物组合物和其制备方法都是具有本领域的普通技术人员所熟知的，如Remington：The Science and Practice of Pharmacy，A.Gennaro编，第20版，Lippincott，Williams & Wilkins，Philadelphia，PA等中所述。
代表性的组合物如下：
口服的片剂
本发明所提供的化合物的口服片剂如下制备：
质量百分比
本发明所提供的化合物 10.0
硬脂酸镁 0.5
淀粉 2.0
羟丙甲基纤维素 1.0
微晶纤维素 86.5
将各成分混合均匀，然后在水的帮助下将其制成颗粒，并将颗粒干燥。然后将该颗粒压成大小合适的片剂，以使其提供合适剂量的所述化合物。该片剂任选地通过使用成膜试剂(例如羟丙甲基纤维素)、色素(例如二氧化钛)和可塑剂(例如二乙基邻苯二甲酸酯)的悬液包被，并通过蒸发溶剂以干燥薄膜。薄膜层可以占，例如片剂质量的2-6％。
口服的胶囊
将本实施例前述部分获得的粒剂装入硬的白明胶胶囊中，其大小适于给予预定的剂量。如果需要的话，将胶囊捆扎密封。
软凝胶配方
软凝胶如下配制：
质量百分比
本发明所提供的化合物 20.0
聚乙二醇400 80.0
将所述化合物溶解于或分散于聚乙二醇中，如果需要的话加入增稠剂。将足够提供所需剂量的化合物的配方装入软凝胶中。
肠胃外制剂
肠胃外制剂如下配制：
质量百分比
本发明所提供的化合物 1.0
生理盐水 99.0
将所述化合物溶解于生理盐水中，将获得的溶液灭菌，并装入小瓶、安瓿瓶、和充液注射器中，只要合适。
受控释放的口服制剂
持续释放制剂可以通过美国专利4,710,384的方法来制备，该方法如下：
在修饰的Uni-Glatt粉剂涂布机中将1千克本发明所提供的化合物用Dow10号乙基纤维素涂布。喷涂液是8％的溶于90％丙酮、10％乙醇中的乙基纤维素溶液。加入蓖麻油作为可塑剂，其量为存在的乙基纤维素的20％。喷涂条件如下：1)速度：1升/小时；2)摆动：10-15％；3)入口温度：50℃；4)出口温度：30℃；5)涂料的百分数：17％。筛选出颗粒大小为74到210微米的涂布化合物。注意确保该范围内的不同大小颗粒良好地混合。将400mg涂布了的颗粒与100mg的淀粉混合，用手压迫该混合物得到500mg受控释放的片剂。
要求保护的主题并不限于本说明书所描述的具体实施方案的范围。事实上，根据上述描述，这些具体实施方案和其它具体实施方案的各种修饰对于本领域的普通技术人员来说是显而易见的。这些修饰包含在所附权利要求书的范围之内。本说明书引用了各种公开，其内容全部引为参考。
机译： 取代的N-芳基苯甲酰胺和相关化合物，用于治疗淀粉样疾病和突触核蛋白病
机译： 取代的N-芳基苯甲酰胺和相关化合物可治疗淀粉样疾病和突触核蛋白病
机译： 取代的N-芳基苯甲酰胺和相关化合物，用于治疗淀粉样疾病和突触核蛋白病
