红色红曲霉菌株丹溪－1号

摘要

本发明涉及一种微生物，尤其是涉及一种能够获得高r－氨基丁酸和高洛伐他汀含量的红曲霉菌株；该菌株命名为Monascus ruber红色红曲霉丹溪－1号，该菌株已在国家知识产权局指定的保藏单位保藏，保藏日期为2005年6月10日，保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC NO：1405。

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物，尤其是涉及一种能够获得高γ-氨基丁酸和高洛伐他汀含量的红曲霉菌株。

背景技术

γ-氨基丁酸(γ-Aminobuty γic acid，简称GABA)，很早就被发现是脊椎动物交感神经系统细胞结合点的抑制性神经传导物(Inhibitoγy neuγotγansmitteγs)，由于GABA对交感神经系统具有调节作用，因此在脊椎动物之心血管功能扮演重要角色。γ-氨基丁酸也是一种天然非蛋白质氨基酸，普遍存在于自然界动植物中，在人体中，远自1950年医学界就发现GABA存在于人体的小脑皮质和脊髓及视网膜中，而GABA具有降血压的功效也远自50年代末期就被发现。GABA为何可以降血压的机制据推测与GABA可以阻断末梢神经传导活性有关，1960年代，Stanton发现GABA对不同种类动物降血压达20％时所需浓度，每公斤体重的动物，狗需11微克、兔子19微克，猪174微克，对于喂食高盐饮食所引发的高血压老鼠，以每日摄取平均约4毫克GABA，结果显示高血压在4星期后，血压就可降达30mmHg以上显著效果，此外，从70年代至80年代末期还有很多纯GABA氨基丁酸对神经传导系统的医学研究报告，这些研究报告也都证实GABA可以降血压的功效。

目前已知含有GABA的纯天然食品，主要有日本的佳叶龙茶、红曲、发芽米、发酵大豆、桑叶、甲鱼等。但是这些普通的物质中GABA含量较低，不能符合人们对健康的需求。

近年来的研究又发现在红曲发酵过程中能成产生一种很强的降脂活性物质一洛伐他汀，但是现有发酵工艺中采用的红曲菌株产生的洛伐他汀含量太低。

发明内容

本发明针对现有技术中的天然食品GABA含量较低，现有发酵工艺中采用的红曲菌株产生的洛伐他汀含量太低，不能符合人们对健康的需求的缺点；提供一种以大米为基质，从发酵产物中，获得高GABA含量、高洛伐他汀含量的真菌微生物——红色红曲霉菌株丹溪-1号。

本发明所述的红色红曲霉菌株丹溪-1号命名为Monascus ruber红色红曲霉丹溪-1号，筛选于红曲酒糟扩大培养的培养基中，该菌株已在国家知识产权局指定的保藏单位保藏，保藏日期为2005年6月10日，保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC NO：1405。

本发明所述的红色红曲霉菌株丹溪-1号的培养特征如下：

麦芽汁琼脂上30℃培养25天，菌落质地较紧密，毡状平坦，背面有少量放射状辐射纹，扩展生长，边缘平整，菌丝体初期平绒状，落英粉色，老熟后玫瑰粉色；

MEA培养基上30℃培养25天，菌落生长平坦，不规则边缘呈花瓣状，有少量气生菌丝形成，初期金萦黄色，老熟后淡可可棕色；

CYA培养基上30℃培养25天，菌落生长稀薄，白色，背面无放射状褶皱。

以上培养物均没有分泌物及色素生成。

本发明所述的红色红曲霉菌株丹溪-1号的菌株的形态特征：

菌丝体不规则分枝，有隔，产生橙黄色油滴，菌丝直径约3-6μm，分生孢子存在，多单生，洋梨形或球形，14×8-9μm，被子器浅橙色或无色，近球形25-37μm，壁较厚约2-3μm，大多数的被子器内的子囊孢子形成浅橙色或无色，近球形25-37μm，壁较厚约2-3μm，大多数的被子器内的子囊孢子形成欠佳；子囊孢子椭圆形或近球形，光滑，淡黄色，5.0-5.8×4.3-5.2μm，4.6-5.4μm。

本发明的红色红曲霉菌株丹溪-1号分别在麦芽汁琼脂培养基和土豆琼脂培养基上，30℃10天条件下，经数代连续培养，其培养特征及形态特征均无明显变化，该菌的生物性状基本稳定。

本发明所述的红色红曲霉菌株丹溪-1号已于2005年6月10日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为：CGMCCNO：1405，分类命名为：Monascus ruber红色红曲霉丹溪-1号，保藏单位地址：中国.北京.中国科学院微生物研究所，邮政编码：100080

本发明涉及的微生物，该微生物能够以大米作为发酵基质，通过人工纯培养方式，而获得的功能性红曲米，与原来普通的红曲发酵产物相比，γ-氨基丁酸和洛伐他汀的含量都发生了变化。

a.用传统方法酿造的红曲醋，经HPLC检测，总洛伐它汀含量为36mg/L.

b.按上述改进方法制造的红曲降脂醋，经HPLC检测，总洛伐它汀含量为300mg/L.

c.本发明所涉及的红色红曲霉菌株能产生大量的谷氨酸脱羧酶可以利用大米中的谷氨酸使其生成大量的γ-氨基丁酸，经HPLC检测γ-氨基丁酸含量为720mg/kg。

附图说明

图1为本发明所述的红色红曲霉菌株丹溪-1号在麦芽汁琼脂培养基上的菌落图

图2为本发明所述的红色红曲霉菌株丹溪-1号在MEA培养基上的菌落图

图3为本发明所述的红色红曲霉菌株丹溪-1号在CYA培养基上的菌落图

具体实施方式

以下是本发明的具体实施例并结合附图，对本发明的技术方案做进一步的描述，但是本发明并不限于这些实施例

实施例

取丹溪-1号(红色红曲霉菌株丹溪-1号)菌种，在无菌条件下(无菌室或超净工作台)，用接种挑取少许菌种，转接于已灭菌的固体MEA培养基培养皿中，置于培养箱内30℃±1℃活化培养120小时。取出活化120小时的菌种，在无菌条件下，以同样方式接入活化好的菌种到以灭菌的一级固体MEA培养基中，在30℃±1℃培养120小时，即为丹溪-1号一级种子。

采用500毫升玻璃三角瓶，装入配制好的液体MEA培养基100毫升，15磅灭菌30分钟备用。取丹溪-1号一级种子，在无菌条件下，接种于装有100毫升液体MEA培养基500毫升玻璃三角瓶中，一级种子接种量为每个培养皿接五个三角瓶，至30℃±1℃摇床培养120小时后，作为红曲发酵二级种子用。

根据发酵规模大小，发酵料按重量比率，称取大米，充分搅拌，发酵料水分不低于65％。塑料薄膜、牛皮纸封口，置灭菌锅内15磅灭菌60分钟，取出待冷却至30℃，接入液体二级种子，二级种子的接入量为5％(V/W)。摇匀后放置30℃±1℃下，静置发酵25天。在发酵期间，注意发酵室保湿不低于80％相对是读，第5天分别进行摇瓶一次，并注意检查有无染菌现象。

发酵完毕，发酵产物至35～50℃下烘干，得功能性红曲米。

本发明是红色红曲霉菌株丹溪-1号(Monascus ruber)得大米发酵，采用人工固体发酵方法，发酵产物与普通红曲发酵产物比较：用传统方法酿造的红曲醋，经HPLC检测，总洛伐它汀含量为36mg/L；按上述改进方法制造的红曲降脂醋，经HPLC检测，总洛伐它汀含量为300mg/L；本发明所涉及的红色红曲霉菌株能产生大量的谷氨酸脱羧酶可以利用大米中的谷氨酸使其生成大量的γ-氨基丁酸，经HPLC检测γ-氨基丁酸含量为720mg/kg。

综上所述，经过红色红曲霉菌株丹溪-1号(Monascus ruber)发酵得大米可以产生含量较高得洛伐它汀和γ-氨基丁酸；筛选治疗高血脂和高血压药用成分的又一天然微生物药源。

本发明中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。

尽管对本发明已作出了详细的说明并引证了一些具体实例，但是对本领域熟练技术人员来说，只要不离开本发明的精神和范围可作各种变化或修正是显然的。