富硒桑黄的栽培及提取桑黄硒多糖的方法

摘要

本发明涉及药用真菌的栽培方法及应用，具体地说是涉及富硒桑黄的栽培及桑黄硒多糖的提取方法。富硒桑黄母种由马铃薯、琼脂、葡萄糖、豆粉、硫酸镁、硫酸锌、磷酸二氢钾、蛋白胨、色氨酸、6－BA、富硒肥、桑树叶或桑树枝、水构成；富硒桑黄原种是由桑树木屑、硬杂木屑、麦麸、玉米面、豆粉、石膏、硫酸镁、硫酸锌、6－BA、红糖、白灰、磷酸二氢钾、富硒肥、水构成；经接种制成原种、三级种、菌质体，然后由菌质体制成多糖。优点是本培养基的组份为真菌多糖对硒的富集创造了良好的环境，在桑黄的发菌、生殖过程中产生较强抗逆性，使产品的产量和质量均有较大的提高，经试验对比，菌丝体发菌速度比普通培养基快10天，污染率低　　10％，抗癌效力提高30％以上。

说明书

技术领域

本发明涉及药用真菌的栽培方法及应用，具体地说是涉及富硒桑黄的栽培及提取桑黄硒多糖的方法。

背景技术

桑黄是公众所知的抗癌效果很好的真菌中的优良菌种，其药用价值最早记载于李时珍的《木草纲目》中，其子实体价格昂贵，民间常以其子实体入药，以治疗多种疫病。因为桑黄的自然资源严重不足，这给庞大的市场需求造成很大的缺口，供需矛盾相当突出。人工栽培周期长，尚未形成规模，难以为市场提供所需。硒也具有很高药用价值，它是人体生长代谢过程中不可缺少的元素，能够增进生物体的免疫功能、抵抗病毒，预防变异。但是硒只有由无机转化为生物源的有机硒，才具有吸收利用率高、安全无毒的保证，才能发挥它的抗肿瘤等的优良药用价值。然而目前市场上未发现关于菌硒结合的产品，以及富硒桑黄菌种的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种菌硒结合的富硒桑黄的栽培及提取桑黄硒多糖的方法。

富硒桑黄的栽培方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

1)富硒桑黄母种的制备；富硒桑黄母种是由下述成分按重量份配比制成：马铃薯150～250份、琼脂10～30份、葡萄糖10-30份、豆粉5～15份、硫酸镁1～3份、硫酸锌0.5～1.5份、磷酸二氢钾1～10份、蛋白胨1～10份、色氨酸0.5～1.5份、6-BA0.5～1.5份、富硒肥1～5份、桑树叶或桑树枝50～150份、水500～1500份；

制法：马铃薯洗净切片，桑树叶或桑树枝洗净，与其它成分混合，混合均匀后，文火煮熬；琼脂溶解后用8层纱布过滤，滤液分装试管，制成母种培养基，培养基在温度110～130℃、压力0.1～0.15Mpa条件下灭菌20～40分钟，无菌接种桑黄菌株，25℃恒温无光培养15天，即可得到所述母种。

所述的桑黄菌株为采自黑龙江省牡丹江老爷岭林区的野生桑黄子实体。

按上述方法所得的富硒桑黄母种菌丝浓密、粗壮、色泽鲜黄、硒多糖含量高。

2)富硒桑黄原种的制备；富硒桑黄原种是由下述成分按重量份配比制成：桑树木屑30～40份、硬杂木屑30～40份、麦麸10～20份、玉米面2～10份、豆粉1～10份、石膏0.5～1.5份、硫酸镁0.1～1份、硫酸锌0.1～1份、6-BA 0.05～0.15份、红糖0.5～1.5份、白灰0.5～1.5份、磷酸二氢钾0.1～1份、富硒肥0.5～1.5份、水60～70份、PH值为7；

制法：上述成分混合搅拌均匀后装瓶或装袋、封口，在温度120～135℃、压力0.1～0.2Mpa条件下，灭菌2小时，无菌接种富硒桑黄母种，25℃恒温无光培养发酵40～50天，菌丝长满，即得原种。

所得原种子实体规整、粗壮、个体重。

3)三级种的制备；用步骤2)的原种培养基接种原种即制成三级种；

4)菌质体的制备；用步骤2)的原种培养基接种三级种即制成富硒桑黄菌棒，即菌质体或子实体。

所述的富硒肥是指亚硒酸钠、硒酸钠、或硒酸钙中的一种或两种以上。

所述的6-BA是植物生长素，经试验证明该类产品都适用于本菌种栽培。

用所制得的富硒桑黄菌质体提取桑黄硒多糖的方法，其特征在于：将富硒桑黄菌质体或子实体粉碎成粒径为0.2-0.6mm的颗粒，然后用水浸，在温度为70-80℃的条件下充分搅拌后，过滤、浓缩、干燥即制成富硒桑黄多糖。

与现有技术相比，本发明的优点是：本培养基的组份为多糖与硒结合提供了充分的条件，为真菌多糖对硒的富集创造了良好的环境，致使在桑黄的发菌、生殖过程中产生较强抗逆性，减少病害的发生，使产品的产量和质量均有较大的提高，经试验对比，菌丝体发菌速度比普通培养基快10天，污染率低10％，抗癌效力提高30％以上。据此所培养的真菌其显著的药用功效将在实践中进一步显现，若使其作为一种安全有效的补硒剂或医疗保健品发挥作用，将具有更广阔的前景。

具体实施方式

实施例1：

富硒桑黄的栽培方法，该方法包括如下步骤：

1)富硒桑黄母种的制备；富硒桑黄母种是由下述成分按重量份配比制成：马铃薯200份、琼脂20份、葡萄糖20份、豆粉10份、硫酸镁2份、硫酸锌1份、磷酸二氢钾5份、蛋白胨5份、色氨酸1份、6-BA1份、富硒肥2份、桑树叶或桑树枝100份、水1000份；

制法：马铃薯洗净切片，桑树叶或桑树枝洗净，与其它成分混合，混合均匀后，文火煮熬；琼脂溶解后用8层纱布过滤，滤液分装试管，制成母种培养基，培养基在温度110～130℃、压力0.1～0.15Mpa条件下灭菌20～40分钟，无菌接种桑黄菌株，25℃恒温无光培养15天，即可得到所述母种；

2)富硒桑黄原种的制备；富硒桑黄原种是由下述成分按重量份配比制成：桑树木屑35份、硬杂木屑35份、麦麸15份、玉米面6份、豆粉6份、石膏1份、硫酸镁0.5份、硫酸锌0.6份、6-BA 0.1份、红糖1份、白灰1份、磷酸二氢钾0.5份、富硒肥1份、水65份、PH值为7；

制法：上述成分混合搅拌均匀后装瓶或装袋、封口，在温度120～135℃、压力0.1～0.2Mpa条件下，灭菌2小时，无菌接种富硒桑黄母种，25℃恒温无光培养发酵40～50天，菌丝长满，即得原种；

3)三级种的制备；用步骤2)的原种培养基接种原种即制成三级种；

4)菌质体的制备；用步骤2)的原种培养基接种三级种即制成富硒桑黄菌棒，即菌质体或子实体。

所述的富硒肥是指亚硒酸钠、硒酸钠、或硒酸钙中的一种或两种以上。

用所制得的富硒桑黄菌质体提取桑黄硒多糖的方法：将富硒桑黄菌质体或子实体粉碎成粒径为0.2-0.6mm的颗粒，然后用水浸，在温度为70-80℃的条件下充分搅拌后，过滤、浓缩、干燥即制成桑黄硒多糖。

实施例2：

富硒桑黄的栽培方法，该方法包括如下步骤：

1)富硒桑黄母种的制备；富硒桑黄母种是由下述成分按重量份配比制成：马铃薯150份、琼脂30份、葡萄糖30份、豆粉5份、硫酸镁1份、硫酸锌0.5份、磷酸二氢钾10份、蛋白胨10份、色氨酸0.5份、6-BA0.5份、富硒肥1份、桑树叶或桑树枝50份、水500份；

制法：马铃薯洗净切片，桑树叶或桑树枝洗净，与其它成分混合，混合均匀后，文火煮熬；琼脂溶解后用8层纱布过滤，滤液分装试管，制成母种培养基，培养基在温度110～130℃、压力0.1～0.15Mpa条件下灭菌20～40分钟，无菌接种桑黄菌株，25℃恒温无光培养15天，即可得到所述母种；

2)富硒桑黄原种的制备；富硒桑黄原种是由下述成分按重量份配比制成：桑树木屑30份、硬杂木屑30份、麦麸10份、玉米面10份、豆粉10份、石膏1.5份、硫酸镁1份、硫酸锌1份、6-BA 0.15份、红糖1.5份、白灰1.5份、磷酸二氢钾1份、富硒肥1.5份、水70份、PH值为7；

制法：上述成分混合搅拌均匀后装瓶或装袋、封口，在温度120～135℃、压力0.1～0.2Mpa条件下，灭菌2小时，无菌接种富硒桑黄母种，25℃恒温无光培养发酵40～50天，菌丝长满，即得原种；

3)三级种的制备；用步骤2)的原种培养基接种原种即制成三级种；

4)菌质体的制备；用步骤2)的原种培养基接种三级种即制成富硒桑黄菌棒，即菌质体或子实体。

用所制得的富硒桑黄菌质体提取桑黄硒多糖的方法，同实施例1。

实施例3：

富硒桑黄母种是由下述成分按重量份配比制成：马铃薯250份、琼脂10份、葡萄糖10份、豆粉15份、硫酸镁3份、硫酸锌1.5份、磷酸二氢钾1份、蛋白胨1份、色氨酸1.5份、6-BA1.5份、富硒肥5份、桑树叶或桑树枝150份、水1500份；

富硒桑黄原种是由下述成分按重量份配比制成：桑树木屑40份、硬杂木屑40份、麦麸20份、玉米面2份、豆粉1份、石膏0.5份、硫酸镁0.1份、硫酸锌0.1份、6-BA 0.05份、红糖0.5份、白灰0.5份、磷酸二氢钾0.1份、富硒肥0.5份、水60份、PH值为7；

富硒桑黄的栽培方法，具体步骤同实施例1。

用所制得的富硒桑黄菌质体提取桑黄硒多糖的方法，同实施例1。