用于免役介导1型糖尿病诊断的自身抗体检测方法

摘要

一种用于免役介导1型糖尿病诊断的自身抗体检测方法，属于生物医学技术领域。本发明包括以下步骤：(1)用逆转录酶对mRNA进行逆转录，再用高保真DNA聚合酶分别合成出目标DNA，用连接酶和蛋白表达质粒进行连接，转化到大肠杆菌内分别表达出目标蛋白；(2)用麦芽糖结合蛋白亲和层析柱及GST亲和层析柱纯化分离出表达蛋白，将每一种纯化了的表达蛋白分成两部分；(3)抗原的包被：将四种抗原混合在包被缓冲液内，在每个酶标孔中加入包被缓冲液，放置；(4)封闭；(5)用双抗原夹心法测定抗体。本发明能够一次检测抗GAD