一种重组人可溶性凋亡素2配体的构建与纯化工艺

摘要

本发明涉及一种重组人可溶性凋亡素2配体(rhsApo－2L)的制备方法。rhsApo－2L与hsApo－2L相比，其分子N端多了12个氨基酸，其中包括6个组氨酸，以方便利用镍离子柱进行纯化。本发明利用RT－PCR技术，扩增得到hsApo－2L基因，并将之与原核表达载体pQE－30相连，构建成重组表达质粒，然后转化大肠杆菌M15(pREP4)。重组子经IPTG诱导，rhsApo－2L以可溶性形式表达，表达量占超声上清蛋白总量的20％以上。表达产物经镍离子柱和凝胶排阻层析两步纯化，纯度达95％以上，生物活性与hsApo－2L一致。