桂竹香外膜蛋白基因克隆的方法

摘要

本发明公开一种桂竹香外膜蛋白基因克隆的方法,该方法包括下列步骤:1)一步法提取桂竹香幼叶总RNA;2)利用RNA直接进行反转录;3)利用同源序列合成探针;4)用地高辛标记探针,噬菌斑原位杂交的方法筛选桂竹香苗期cDNA文库;5)利用PCR的方法快速确定阳性克隆是所筛选的重组子;6)限制酶切分析,Southern杂交分析确定为重组子;7)测序,并通过Bioinfo matics分析,确定该基因为新的未被克隆过的桂竹香外膜蛋白cDNA序列。本发明方法易行,操作简便,效果好。克隆出的桂竹香外膜蛋白的cDNA序列还可应用与研究桂竹香细胞的物质运输,信号传递和细胞代谢等。