带标记物双引物聚合酶链反应测定方法

摘要

一种带标记物双引物聚合酶链反应测定方法,它包括:模板DNA的制备、PCR扩增、扩增产物的分析,PCR扩增采用双引物,其中生物素可标记内引物或标记在外引物上,荧光素或地高辛标记在内引物上,二对引物同时加入PCR反应液中,第一次为二步法:90—95℃、20秒复性、延伸68—72℃、40—90秒进行10—20循环;第二次为三步法,变性90—95℃、20秒复性37—65℃、20—30秒、延伸72℃、20—30秒进行1—10个循环。方法简便、快速、特异性、灵敏度高,消除了假阳性。