一种基于急性排斥反应新机制的VEGF基因结合位点检测方法

摘要

本发明公开了一种基于急性排斥反应新机制的VEGF基因结合位点检测方法，通过肝穿病理活检，采用活检针在B超指引下取右8、9肋间隙穿刺并取样制作含有VEGF基因的DNA溶解液；对DNA溶解液进行扩增并通过PCR仪进行处理；对混合后的溶液进行纯化获得PCR产物；对纯化后的PCR产物进行扩增获得测序PCR体系溶液，并对测序PCR体系溶液进行循环加热处理；向测序PCR体系溶液加注125mmol/LEDTA、3mol/L醋酸钠和无水乙醇并进行震荡离心并去除上清；后向溶液内加注高纯甲酰胺进行震荡溶解并通过定性PCR仪进行变性处理。最后通过测序仪进行检测形成测序序列，从而确定VEGF基因的结合位点；优点是有效解决VEGF基因与活检组织的结合位点无法确定的技术难题，推进肝脏移植过程中对排斥反应的抑制。