一种草鱼肠系膜脂肪组织高质量总RNA的提取方法

摘要

本发明公开了一种草鱼肠系膜脂肪组织高质量总RNA的提取方法,包括样品液氮速冻，TRIzol试剂裂解与机械匀浆，离心去除油脂层，氯仿分离含RNA水相，异丙醇沉淀和75％乙醇洗涤等步骤。在样品前处理阶段，本发明通过增加取样量至30mg,可提升产量以满足常规分子生物学实验对RNA量的需求；样品采用液氮速冻,无需人工研磨，并将冻样在TRIzol试剂中进行长时间机械匀浆，时长3min,可显著降低RNA降解发生,同时增加2次离心去除油脂层等操作步骤,获得的总RNA纯度和完整性较高。本发明的提取方法有效解决了草鱼脂肪组织RNA提取易降解，产量低等问题，且操作简单，批处理效果稳定，可满足转录组测序等高质量RNA要求的实验，也适用于其它鱼类脂肪组织总RNA的提取。