RUNX3过表达、PD-1敲减的CAR表达载体的构建方法和应用

摘要

本发明公开了一种RUNX3过表达、PD‑1敲减的CAR表达载体的构建方法和应用，本发明提供了一种RUNX3过表达、PD‑1敲减的CAR慢病毒表达载体的构建和使用方法，本发明提供了利用RUNX3过表达、PD‑1敲减的CAR慢病毒表达载体进行慢病毒包装、浓缩、滴度测定的方法，本发明提供了一种RUNX3过表达、PD‑1敲减的CAR‑Jurkat T细胞，证实了利用该RUNX3过表达、PD‑1敲减的CAR慢病毒表达载体能够生产RUNX3过表达、PD‑1敲减的CAR‑T细胞，PD‑1敲减效率约75％。本发明中过表达RUNX3能帮助实体瘤CAR‑T锚定在肿瘤部位。本发明将RUNX3过表达和PD‑1敲减策略一起加入CAR慢病毒表达载体，并验证了利用该慢病毒表达载体包装的慢病毒能够成功使Jurkat T细胞表达CAR的同时，过表达RUNX3和敲低PD‑1，为后续生产RUNX3过表达、PD‑1敲减的CAR‑T细胞提供了基础。