基于双启动子拯救猪塞尼卡病毒反向遗传操作系统及其建立方法

摘要

本发明属于反向遗传学技术领域，具体涉及一种基于双启动子拯救猪塞尼卡病毒的反向遗传操作系统及其建立方法。本发明分别通过构建SVA通用型反向载体和SVA全基因组重组反向载体，然后基于T7 RNA聚合酶和RNA聚合酶II双转录系统，利用无缝克隆和重叠PCR技术，并在病毒序列两端引入HamRz 和HDVRz序列，建立的高效精确的通用型SVA反向遗传操作系统。该操作系统能够高效精确的实现猪塞尼卡病毒的拯救，获得的重组毒株均未发生突变，遗传稳定性好。