H1N2亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的建立

摘要

利用RT-PCR技术扩增猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/07(H1N2)的8个基因片段，分别克隆到双向转录表达载体PBD上，构建出8个能在哺乳细胞中复制和表达的质粒，纯化质粒，将8个质粒共转染293T细胞，48小时后细胞上清接种9-11日龄SPF鸡胚，成功拯救出有血凝活性的病毒。经序列测定，确定拯救的病毒8个基因片段均来自猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/07(H1N2)基因组。H1N2亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的成功建立为猪流感病毒致病机理、传播机制及病毒基因功能的研究奠定了基础；同时，为H1N2亚型猪流感新型疫苗的研制开辟了新的途径。