一种基因敲除选育Lgr6基因缺失型斑马鱼的方法

摘要

本发明涉及基因敲除技术领域，特别是公开了一种基因敲除选育Lgr6基因缺失型斑马鱼的方法，通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，在斑马鱼的Lgr6基因上设计合适的打靶位点，在体外合成的特异性sgRNA和Cas9‑mRNA，显微共注射进入斑马鱼一细胞内，胚胎培养60h后，通过选取胚胎进行基因型分析，从而证实了所选位点的有效性。本发明能更高效且更精确地在生物体基因组中沉默特定基因，且制作简单、成本低，且可同时对靶基因上多个位点进行剪切，沉默任意数目的单个基因。且干扰掉Lgr6基因，并且通过遗传学手段研究其功能，有助于进一步揭示骨骼形态发生的整个过程以及调控这些过程的分子机制，在医学上骨骼疾病病理的理解和新的治疗方案的研发中具有十分重要的意义。