一种增加抗氧化物质的抗氧化活性的组合物

摘要

本发明公开了一种增加抗氧化物质的抗氧化活性的组合物。其按照重量％的组成是，组分一：VC重量％含量为90％的维生素C 0.5％～25％；组分二：VE重量％含量为50％的维生素E 0.2％～10％；组分三：高活性氧化性物质65％～99.3％。它以维生素C和维生素E协同，与其他高抗氧化性物质组合，使组合配方显著增强抗氧化性能。

说明书

技术领域

本发明涉及增强抗氧化活性的组合配方，特别是一种增加抗氧化物质的 抗氧化活性的组合物。

背景技术

在了解本发明技术背景前，先简述一下自由基、抗氧化概念及抗氧化性 能评估。

自由基理论自诞生以来已经经过几十年的发展。自由基造成的伤害为许 多疾病的发生和机理提供了新的解释和理论根据。越来越多的研究显示，与 老化相关的疾病、基因的突变如癌症、动脉硬化、冠心病、糖尿病、白内障、 老年痴呆症和关节炎等都与自由基导致的损伤相关。

抗氧化的主要途径就是消除人体过多的自由基。人体内95％以上自由基是 氧自由基，在健康正常情况下，人体内有自身的清除氧自由基的体系可以将 其控制在合理的水平，使其能够发挥有利于人体代谢的作用，即氧自由基的 产生和清除处于一种动态平衡。但是随着人年龄的增加，自身抗氧化能力逐 渐下降，以及环境污染、抽烟、饮酒、X射线、和过度的太阳照射、药物、病 毒感染等外界因素产生的大量氧自由基超过了人体所需的合理水平，从而损 伤细胞，使组织器官机能下降，各种疾病开始慢慢形成。因此每个人随着年 龄增长，都必须从普通食物或保健食品中摄入抗氧自由基的活性成分，保持 氧自由基在体内的平衡。

最常用的抗氧化性评估的方法有：电极电位法、HPLC法、电子自旋共振 仪(ESR)、化学滴定法、化学反应分光光度法和荧光法等。上述这些方法都是 反应样品在终态的抗氧化或抗自由基的能力。

目前国际上比较常用的是荧光衰减法测定样品的氧自由基吸收能力，即 ORAC(Oxygen Radical Absorbance Capacity)法,该方法是通过间接的途径 直接测定氧化过程中产生的自由基，因此能比较客观的反应即时的过氧化程 度。

自1993年建立以来，ORAC方法发展非常迅速，该方法是测定样品过程中 的抗氧化能力，从测定方法简便、测定成本、方法重现性及线性、专一性、 灵敏度等因素考虑，是目前评价抗氧化物质的抗氧化活性的最为简单、准确、 灵敏度高、应用范围广和最具影响力的抗氧化能力研究方法之一。美国食品 和药物管理局(FDA)已将ORAC作为评价食品抗氧化能力的重要标准。

美国农业部(USDA)的研究专家指出：人平均每天至少摄入3227个抗氧 化单位(即ORAC值)，就能够保持氧化和抗氧化之间的平衡。这还没有涉及周 围的环境因素，比如抽烟、粉尘、以及农药、化学药物等。美国每四年公布 一次上千种食品的ORAC值，以供国民选用。国内现有的有较强抗氧化活性 (ORAC值3000umol TE/g以上)的保健品有蓝莓提取物、葡萄籽提取物、优 质蜂胶、高含量茶多酚的茶叶提取物、白藜芦醇、辅酶Q10、枸杞提取物、余 甘子提取物等等。

目前研究较多的是，针对具有抗氧化功能的单一物质，用不同提取方法 或溶剂所得的提取物以及提取成分的抗氧化活性。

在现有保健食品中，即使在产品中组合了多种抗氧化组分，其抗氧化性 能也仅仅是加权总和，没有体现协同作用。

维生素C作为一种较强抗氧化剂,它的最大特性是还原性,通过还原作用 消除有害氧自由基的毒性。其抗氧化作用依靠可逆的脱氢反应来完成。由于 它是供氢体,也可使被氧化的维生素E和巯基恢复成还原型,这是其间接抗氧 化作用。

但维生素C不仅有抗氧化作用,在一定条件下也有促氧化作用。抗坏血酸 的烯醇式羟基具有酸性,在过渡族离子(尤其是铁和铜)存在下,会产生OH^-,但 抗坏血酸在清除OH^-的同时,又会产生半脱氢抗坏血酸负离子自由基(A^-),当半 脱氢抗坏血酸负离子自由基(A^-)不能及时清除时,则可诱发一系列自由基连锁 反应,从而使体内的不饱和脂肪酸发生脂质过氧化,对机体造成伤害。减少维 生素C不利作用的方法主要有:①调控维生素C的用量和单位时间给药浓度； ②提供维生素E；③提供GSH；④提供氨基酸。

维生素E是氧自由基直接清除剂，保护细胞膜及细胞内的核酸免受自由基 的攻击。而且维生素E是一种很易被氧化的抗氧化剂，因此具有防止或延长其 它高效抗氧化剂的抗氧化作用，在抗氧化过程中,维生素E提供氢离子,使脂质 过氧化链式反应中断,是最重要的断链型抗氧化剂,而这种断链型抗氧化其自 身是不可逆的，必须另外提供的氢体才能使其还原。维生素E不但有中断氧化 游离基的作用,而且能够猝灭单线态氧,从而提高油的抗氧化能力,所以人体 消耗的不饱和脂肪越多,所需的维生素E就越多,因为这些油需要维生素E提供 抗氧化的保护。

在维生素C、维生素E和其它高效抗氧化剂同时存在下，维生素E可以保护 或延长高效抗氧化剂的抗氧化作用，同时自身被氧化，必须另外提供的氢体 才能使其还原，继续其断链式抗氧化作用。而维生素C正式这种氢体的提供者。 因此，在维生素C、维生素E协同作用中，维生素C为一强还原剂,还原已形成 的生育酚自由基,恢复生育酚清除自由基的活性。而生成的抗坏血酸盐自由基 能被酶系统用NADH或NADPH通过歧化作用和还原作用可逆还原。另外维生素E 能直接接受自由基的氧化,从而预防和消除Fe²⁺和Cu²⁺所引起的维生素C的不良 反应。

发明内容

本发明的目的在于提供一种增加抗氧化物质的抗氧化活性的组合物，主 要解决上述现有技术所存在的问题，它以维生素C和维生素E协同，与其他 高抗氧化性物质组合，使组合配方显著增强抗氧化性能

为实现上述发明目的，本发明的技术方案是：

一种增加抗氧化物质的抗氧化活性的组合物，其特征在于：其按照重量 ％的组成是：

组分一：VC重量％含量为90％的维生素C 0.5％～25％；

组分二：VE重量％含量为50％的维生素E 0.2％～10％；

组分三：高活性氧化性物质65％～99.3％。

所述的增加抗氧化物质的抗氧化活性的组合物，其特征在于：其按照重 量％的组成的优选范围是：

组分一：VC重量％含量为90％的维生素C 1％～5％；

组分二：VE重量％含量为50％的维生素E 0.5％～3％；

组分三：高活性氧化性物质92％～98.5％。

所述的增加抗氧化物质的抗氧化活性的组合物，其特征在于：所述的高 活性氧化性物质是花青素含量≥25％的蓝莓提取物、原花青素含量≥95％的葡 萄籽提取物、符合GBT 24283-2009蜂胶一级品的蜂胶乙醇提取物、EGCG 含量≥80％的茶叶提取物。

本发明的优点如下：

1、本发明为以维生素C和维生素E协同，与其他高抗氧化性物质组合， 使组合配方显著增强抗氧化性能，并以国际公认的ORAC(Oxygen Radical  Absorbance Capacity)方法评估所有样品的抗氧化能力。

抗氧化物质(或混合物)的ORAC值其实是一种物质属性，在一定的测 定浓度范围内(视仪器的可测定范围及灵敏度以及其他试剂的浓度而定)， 所测得的ORAC值是固定的，应在±15％范围内。

2、本发明组合物能较显著的增强该物质的抗氧化活性，其ORAC值增 加30％左右。

具体实施方式

1、测定条件：测定温度，37℃±1℃；激发光波长，485nm；发射光波长， 538nm；测量时间，40min。

2、试剂配制及测定浓度：

a.磷酸氢钾缓冲液浓度：75mmol/L(pH＝7.4)

b.自由基AAPH(2,2′2偶氮(22甲基丙基脒)·二盐酸盐，2,2’-azobis-2- amidinopropane-dihydrochloride)，测定浓度：15.8～19.5umol/ml，在此浓度 范围内，能根据样品不同强度的抗氧化活性，能使荧光衰减至1％以下。

c.合成荧光素Sodum Fluorescence(3’,6’-dihydroxyspiro [isobenzofuran-1[3H],9’[9H]-xanthen]-3-one，FL)，测定浓度： 0.063-0.067nmol/ml。

d.维生素水溶性类似物(6一经基一2、5、7、8一四甲基色满一一竣酸 (6-hydro-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid，商品名Trolox)，测 定浓度：0.0025～0.005μmol/ml。在此浓度范围内，能与荧光衰减曲线下积分 面积成很好的线性关系。

e.样品测定浓度：0.8～0.85ug/ml。

表1：筛选过程一些关键配比结果汇总表

浓度单位：质量％；ORAC单位：(μmol TE/g)±15％

*与维生素E各低浓度、中浓度和高浓度以及相应葡萄籽提取物浓度组合 的ORAC平均值

**与维生素C各低浓度、中浓度和高浓度以及相应葡萄籽提取物浓度组 合的ORAC平均值

表1结果提供以下信息：

1、葡萄籽提取物与中浓度维生素C和维生素E(发明内容中所述的最佳 组合浓度范围)协同组合的配方，其ORAC平均值比100％葡萄籽提取物的 ORAC值高近1.6倍。与低浓度的维生素C和维生素E(包括在发明内容中 所述的较佳组合浓度范围内)协同与葡萄籽提取物组合配方，其ORAC平均 值比100％葡萄籽提取物的ORAC值高1.34倍。

2、茶叶提取物与中浓度维生素C和维生素E(发明内容中所述的最佳组 合浓度范围)协同组合的配方，其ORAC平均值比100％茶叶提取物的ORAC 值高近1.65倍。与低浓度的维生素C和维生素E(包括在发明内容中所述的 较佳组合浓度范围内)协同与茶叶提取物组合配方，其ORAC平均值比100％ 茶叶提取物的ORAC值高1.18倍。

3、蓝莓提取物与中浓度维生素C和维生素E(发明内容中所述的最佳组 合浓度范围)协同组合的配方，其ORAC平均值比100％蓝莓提取物的ORAC 值高近1.56倍。与低浓度的维生素C和维生素E(包括在发明内容中所述的 较佳组合浓度范围内)协同与蓝莓提取物组合配方，其ORAC平均值比100％ 蓝莓提取物的ORAC值高1.24倍。

4、蜂胶乙醇提取物与中浓度维生素C和维生素E(发明内容中所述的最 佳组合浓度范围)协同组合的配方，其ORAC平均值比100％蜂胶乙醇提取 物的ORAC值高近1.34倍。与低浓度的维生素C和维生素E(包括在发明内 容中所述的较佳组合浓度范围内)协同与蜂胶乙醇提取物组合配方，其ORAC 平均值比100％蜂胶乙醇提取物的ORAC值高1.15倍。

5、而四种抗氧化物质分别与维生素C和维生素E组合在发明内容中所述 的范围之外的配方，都没有因维生素C和维生素E协同而提高该抗氧化物质 抗氧化性能，其ORAC值都低于100％的该抗氧化物质的ORAC值。

表2.几种组合配方的ORAC值测定结果

浓度单位：质量％；ORAC单位：(μmol TE/g)±15％

实施例一,ORAC测定方法

1.磷酸氢钾缓冲液浓度(Ph7.4)：75mmol/L。用于稀释样品及测定时， 用缓冲液测定管定容至2ml。

2.AAPH溶液配制：

精密称取AAPH250.2mg置10ml容量瓶中，用缓冲液定容至刻度，得 25.02mg/ml，测定时吸取0.35ml至2ml测定管。

3.Trolox(水溶性VE对照)配制：

精密称取Trolox10.1mg至10ml容量瓶中，用蒸馏水定容，使用前用缓 冲溶液稀释100倍。得0.04035umol/ml待用。测定时吸取0.2ml至2ml测 定管。

荧光素钠(FL)溶液配制：

精密称取荧光素钠4.80mg置10ml容量瓶中，用蒸馏水定容，使用前用 缓冲溶液稀释2000倍。得0.638nmol/ml。待用。测定时吸取0.2ml至2ml 测定管。

4.样品溶液配制：

精密称取上述样品81.1mg至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容，使用前， 用缓冲液稀释100倍，得8.11ug/ml，待用。测定时吸取0.2ml至2ml测定 管。

测定条件：测定温度，37℃±1℃；激发光波长，485nm；发射光波长， 538nm；测量时间，40min。

测定方法：每个测定管定容2ml。

AAPH+FL+缓冲液作为空白管。

AAPH+FL+Trolox+缓冲液作为对照测管。

AAPH+FL+样品+缓冲液作为测定管。

实施例二,增强型抗氧化组合物一

组合物配方如下：

90％维生素C,2％；50％维生素E,1.5％；葡萄籽提取物(原花青素含量 95％),96.5％。按配方比例分别称取维生素C、维生素E和葡萄籽提取物样品 (精确到0.01g)，混合均匀。

按实施例一测定上述组合物ORAC值为14202μmol TE/g。

结论：该组合物的抗氧化性能较其中的任何单一成分都要高很多，是增 强型抗氧化组合物。

实施例三，增强型抗氧化组合物二

组合物配方如下：茶叶提取物(EGCG含量80％)，95％；90％维生素C,3％； 50％维生素E,2％。按配方比例分别称取维生素C、维生素E和茶叶提取物样 品(精确到0.01g)，混合均匀。

按实施例一测定上述组合物ORAC值为17120μmol TE/g。

结论：该组合物的抗氧化性能较其中的任何单一成分都要高很多，是增 强型抗氧化组合物。

实施例四，增强型抗氧化组合物三

组合物配方如下：蓝莓提取物(花青素含量25％),95％；90％维生素C,3％； 50％维生素E,2％。按配方比例分别称取维生素C、维生素E和蓝莓提取物样品 (精确到0.01g)，混合均匀。

按实施例一测定的ORAC值为10040μmol TE/g。

结论：该组合物的抗氧化性能较其中的任何单一成分都要高很多，是增 强型抗氧化组合物。

实施例五，增强型抗氧化组合物四

组合物配方如下：蜂胶乙醇提取物(按GBT 24283-2009蜂胶一级品要求)， 95％；90％维生素C，1.3％；50％维生素E，0.7％。按配方比例分别称取维生 素C、维生素E和蜂胶提取物品(精确到0.01g)，混合均匀。

按实施例一测定的ORAC值为11090μmol TE/g。

结论：该组合物的抗氧化性能较其中的任何单一成分都要高很多，是增 强型抗氧化组合物。

综上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用来限定本发明的实施范 围。即凡依本发明申请专利范围的内容所作的等效变化与修饰，都应为本发 明的技术范畴。