甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或其异构体之一用于刺激、修复或调节皮肤和半粘膜的细胞新陈代谢的美容用途

摘要

本发明涉及甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一通过外部局部途径用于刺激、修复或调节皮肤细胞的新陈代谢的美容用途。

说明书

技术领域

本发明涉及美容活性剂领域，尤其涉及专门作用于皮肤衰老的活性剂。

背景技术

人的皮肤由一些区组成，这些区中的三个覆盖了整个人体，即浅层区(浅 层区为表皮)、真皮、以及深层区(深区为皮下组织)。表皮是一种角质化的分 层的扁平上皮组织。它主要由角化细胞和其它细胞组成且抵靠基底膜上，基底 膜将表皮与真皮隔开。真皮是一种结缔组织。它的结构源自细胞外基质的成分 和成纤维细胞之间的排列和交互作用，该成纤维细胞进行细胞外基质的成分合 成和降解。真皮构成皮肤的主要部分。真皮分为两层，乳头层和网状层。真皮 由胶原纤维、弹性蛋白纤维、糖胺聚糖和蛋白聚糖组成。这些不同的结构形成 了在对皮肤的生物力学性能起到关键作用的复杂网络。最后，下皮，为最深层 区且一般也是皮肤的最厚区，内陷到真皮上，且通过胶原蛋白和弹性蛋白纤维 附着至上面覆盖的真皮上。下皮实质上由专门积累和储存脂肪的细胞，即脂肪 细胞构成。在外皮覆盖层未被角质化的区域中，表皮也被称为粘膜。上皮也包 括在真皮基质中的成纤维细胞。

皮肤组织也包括附属体，例如汗腺、毛囊皮脂腺的毛囊、体毛、头发和指 甲。

在自然衰老和/或光致衰老期间，皮肤、尤其是真皮受到许多变异和各种类 型的损害。特别地，在皮肤上发生许多的不利变化，这些不利变化是由于皮肤 的内稳态功能紊乱造成的，特别是由于成纤维细胞的新陈代谢的功能紊乱造成。 在细胞水平上，通过在真皮的主要细胞类型、特别是成纤维细胞和表皮的主要 细胞类型、例如角化细胞中的生理机能或新陈代谢的不利变化反映衰老。在组 织水平上，衰老通过表皮的构架、真皮的真皮-表皮结合处、以及血液输送和神 经支配系统的破坏，以及各种类型的新陈代谢的减缓而表现出来，例如涉及屏 障功能平衡的那些新陈代谢。

皮肤细胞的细胞、尤其是成纤维细胞的新陈代谢的这种反常，能够通过在 微形貌(microrelief)中的不利变化、皱纹和细线的出现、伴随有紧实度和弹性 的下降的皮肤力学性能的不利变化、或皮肤色泽的不利变化和皮肤的表面年龄 中反映出来。在组织结构上，可以观察到真皮-表皮结合处的扁平化和真皮厚度 的缩减。

此外，皮肤的力学性能的不利变化通过多种次级因素而加重，像多种生理 失调的后果，该生理失调例如新陈代谢疾病、激素分泌过少或激素分泌过剩、 维生素缺乏、或基因表达障碍；环境的冲击，例如污染或辐射；外在因素，例 如烟草、炎症、在体重变化之后的组织的变化、皮下组织的密度变化、怀孕、 肥胖状态、蜂窝组织炎、药物治疗(例如外用的激素)；或细胞外基质的成分的 破坏，例如妊娠纹、疤痕或褥疮引起的细胞外基质的成分的破坏。

另外，在更年期，由于真皮厚度的减小真皮能够受到不利影响，且可观察 到细的表面皱纹和细的表面线。皮肤则呈现出粗糙的皮肤触感和降低的柔软度。

根据上文所述，可理解到这样的重要性：能够具有能够有效地作用于年轻 的皮肤或老年的皮肤的细胞的可利用产品，进而以该产品起作用的方式限制不 利的变化以及皮肤的衰老，尤其是对于成纤维细胞，以预防、减小和/或治疗皮 肤的衰老的迹象。

发明内容

本发明的目的是满足这些需求。

出乎意料地，发明人已经注意到甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构 体之一被证明是特别利于预防或治疗与皮肤衰老相关的失调，无论是时间生物 学的还是光生物学的衰老。

这是因为，从以下实施例开始，发明人已经出乎意料地发现，甜菊醇、甜 菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一有效地引起成纤维细胞的收缩。成纤维细 胞的这种收缩导致真皮的致密化，出于明显的原因，这可以预防和/或治疗皮肤 的深皱纹和皮肤紧实度的损失，以控制皮肤的内稳态和刺激皮肤的再生，进而 对抗皮肤衰老迹象的出现，无论是自然衰老和/或光致衰老。

因此，根据第一个方面，本发明的主题是甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它 们的异构体之一用于刺激、修复或调节皮肤和半粘膜的细胞的新陈代谢的用途、 特别是美容用途，细胞优选为真皮细胞、特别是成纤维细胞。

术语“新陈代谢”旨在表示，在本发明的含义内，在活细胞内发生的且有 助于细胞的内稳态的分子转换和能量转换，即生物活性和生理平衡的维持。

根据另一方面，本发明的主题是甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构 体之一用于预防和/或治疗皮肤和半粘膜的衰老的迹象的用途、特别是美容用途。

在本发明的含义内，术语“粘膜”尤其表示嘴唇。

在本发明含义内，术语“皮肤衰老的迹象”理解为由于衰老引起的皮肤外 表的任何改变，无论是时间生物学的和/或光致衰老的衰老，例如，皱纹和细线、 干枯的皮肤、松弛的皮肤、消瘦的皮肤、缺乏弹性的和/或紧张性(tonicity)的 皮肤、或缺乏致密性和/或紧实度的皮肤；以及不会通过改变的外表而自动反映 出来的皮肤任何内部的变异，例如，由于暴露在紫外线辐射下而引起的皮肤的 任何内部伤害。

根据发明人的了解，至今还没有描述甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的 异构体之一的抗衰老活性。

诚然，已经提出这些化合物作为甜味剂(EP 1 856 967)或作为在水介质中 不溶或仅仅微溶的化合物的溶解促进剂(WO 2009/126950)。科学文献还表明莱 苞迪苷A可能是这样一种分子，这种分子致力于调节血糖或胰腺细胞的新陈代 谢和治疗糖尿病(Abudula等，Metabolism，2004，53，1378；WO 02/060419)， 提高认知功能(WO 2009/071277)或治疗心血管疾病(WO 2008/134828)。

同样地，一些作者还描述了它们的用途，特别通过调节皮脂腺细胞的新陈 代谢来治疗油性皮肤或痤疮(US 5110 801)或可替选地用于对抗炎症现象(过敏、 皮炎)(JP-08325156-A)。最后，WO 07/094312提出了甜菊苷促进维生素C渗 透到细胞的用途。

然而，迄今为止，除了产生甜的感觉外，还没有证明通过外用途径而得到 的对于真皮细胞(成纤维细胞)或半粘膜的效果。

本发明的另一个主题是甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一的 用于预防、减少和/或治疗皱纹、细线或微形貌的不利变化的用途，特别是美容 用途。

本发明的另一个主题是甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一用 于增强皮肤和半粘膜的力学性能、特别是对抗干枯的、松弛的、肿胀的、凹陷 的和/或消瘦的皮肤，和/或增强和/或修复皮肤的弹性和紧实度的用途，特别是美 容用途。

本发明的另一个主题是甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一用 于预防皮肤和半粘膜在内稳态中的不利变化和/或维持皮肤和半粘膜的内稳态的 用途，特别是美容用途。

本发明的另一个主题是甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一用 于预防和/或治疗与更年期有关的皮肤病症的用途，特别是美容用途。

在本发明的含义内，术语“用于预防”理解为降低、至少部分地降低给定 现象出现的风险的意思，即在本发明中，尤其是上文所限定的老年皮肤细胞新 陈代谢的不利变化和/或皮肤衰老的迹象。

根据另一个方面，本发明的目的在于甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的 异构体之一作为试剂、特别是美容试剂或皮肤病用的试剂，用于刺激、修复或 调节皮肤和半粘膜的细胞的新陈代谢。

本发明的目的还在于甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一用于 预防和/或治疗皮肤或半粘膜的衰老迹象。

本发明的目的还在于甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一作为 试剂、特别是美容试剂或皮肤病用的试剂，用于预防、降低和/或治疗皱纹，细 线或微形貌的不利变化。

本发明的目的还在于甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一作为 试剂，特别是美容试剂或皮肤病用的试剂，用于增强皮肤和半粘膜的力学性能， 特别是对抗干枯的、松弛的、肿胀的、凹陷的和/或消瘦的皮肤，和/或增强和/ 或修复皮肤的弹性和紧实度。

本发明的目的还在于甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一作为 试剂，特别是美容试剂或皮肤病用的试剂，用于预防在皮肤和半粘膜的内稳态 中的不利变化和/或维持皮肤和半粘膜的内稳态。

本发明的目的还在于甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一作为 试剂，特别是美容试剂或皮肤病用的试剂，用于预防和/或治疗与更年期有关的 皮肤病症。

根据另一个方面，本发明的目的在于美容组合物或皮肤病用的组合物，其 包括至少有效量的特别是下述定义的甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构 体之一、以及至少一种另外的活性剂，该另外的活性剂包括甜味剂、氨基酸、 肽、细胞外钙受体的拮抗剂、钙通道的拮抗剂、抗皱活性剂、抗衰老活性剂、 保湿剂、抗氧化剂、光防护剂及其混合物。

根据本发明的另一个方面，本发明的目的在于一种工具箱(kit)，所述工具 箱包括至少一个容器以及至少一个装置，所述至少一个容器含有包括甜菊醇、 甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一的组合物，所述至少一个装置被布置成 可以将所述组合物施加到个体上、和/或增强所述组合物对于个体的有效性、和/ 或促进所述组合物对于个体的表面渗透作用。

从下文所述中显示，所述装置可以适于皮内注射，例如注射器、植入管或 微型操作针。它也可以是超声波装置或离子渗透装置，也可以是光装置或热装 置。

根据另一个方面，本发明的目的在于一种用于刺激、修复或调节皮肤或半 粘膜的细胞的新陈代谢的方法，特别是用于刺激、修复或调节皮肤或半粘膜的 细胞的新陈代谢的美容方法，该方法包括至少一个将有效量的甜菊醇、甜菊醇 糖苷衍生物或它们的异构体之一施用到需要其的个体上的步骤。

根据另一个方面，本发明的目的在于一种用于预防和/或治疗皮肤或半粘膜 的衰老迹象的方法，特别是一种用于预防和/或治疗皮肤或半粘膜的衰老迹象的 化妆方法，该方法包括至少一个将有效量的甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们 的异构体之一施用到需要其的个体上的步骤。

优选地，根据本发明用途的主题的标志是不涉及干细胞因子(SCF)的产生 和/或释放的标志。

从下文所述中显示，甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一可以 通过外部的外用途径施用，通过皮内的、真皮内的或皮下的途径施用，或者通 过口服施用，优选地是通过外部局部途径施用。

甜菊醇

本发明涉及选自甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一的活性剂 的用途。

甜菊醇由式(I)表示：

甜菊醇是甜菊醇糖苷常见的前体。

术语“前体”应理解为是指，在本发明的含义内，参与生成一种或多种其 它化合物的反应的任何化合物。

术语“甜菊醇糖苷衍生物”应理解为是指由式(II)表示的任何化合物：

其中，R1和R2分别位于式(II)的C₁₉碳和C₁₃碳上，彼此独立地代表氢 原子或环化的或非环化的、直链的或支链的糖残基。

优选地，R1和R2不是氢原子。

特别地，R1和R2可以是相同的或不同的，优选不同的，代表由一个或多 个葡萄糖和/或鼠李糖实体(entity)构成的糖残基。

作为这些糖残基的说明且非内在限制，可尤其提到：

-只有一个糖实体，特别是葡萄糖实体，简称Glu；

-两个糖的序列，例如双糖，如两个葡萄糖实体的序列，或，

-三个糖单元序列，例如直链的或支链的、且优选支链的三糖，例如三个葡 萄糖单元形成的支链基团，以及由葡萄糖实体和鼠李糖实体取代的葡萄糖实体 所形成的支链基团。

根据一个具体的可替选形式，R1代表葡萄糖实体。

根据更优选的可替选形式，R1代表葡萄糖单元，R2代表支链三糖。

下表1记录了适用于本发明的式(II)的一些甜菊醇糖苷衍生物的详细结构。

因此，根据本发明的甜菊醇糖苷衍生物可以选自甜菊苷、莱苞迪苷A、莱 苞迪苷C(或杜尔可苷B)、杜尔可苷A、莱苞迪苷B、莱苞迪苷D、莱苞迪苷 E、莱苞迪苷F、甜菊醇双糖苷(steviolbioside)、甜茶苷和它们的混合物。

更优选地，根据本发明的甜菊醇糖苷衍生物选自甜菊苷、莱苞迪苷A、莱 苞迪苷C(或杜尔可苷B)、杜尔可苷A和它们的混合物。

还更优选地，根据本发明的甜菊醇糖苷衍生物是莱苞迪苷A。

术语“异构体”旨在表示，在本发明的含义内，至少两种分子具有同样的 实验式但是具有不同的半-展开式或展开式。

优选地，根据本发明的异构体是立体异构体，特别是对映异构体、非对映 异构体和它们的混合物，包括外消旋混合物。

作为根据本发明的异构体，特别提及由下式(III)表示的异甜菊醇：

本发明理所当然地采用有效量的甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构 体以获得预期效果。这个有效量根据不同参数而变化，这些参数特别是针对治 疗的个体的特征、采用的药物剂型、制剂的赋形剂的性质或附加活性剂的存在 的指征。

在本发明的含义内，术语“有效量”应理解为是指在本发明中，产生预期 效果、即用于刺激、修复或调节皮肤细胞(特别是成纤维细胞)的新陈代谢， 或用于预防、降低和/或治疗皮肤衰老的迹象的给定活性剂的足够的且必需的用 量。

本领域技术人员能够通过已知的任何方法确定这一用量，例如通过在体外 试验、离体(ex vivo)试验或活体试验的手段，例如临床试验。

为了给出数量级，相对于组合物的总重量，甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或 它们的异构体可按重量计以0.01％到50％、优选地0.05％到30％、特别地0.1％ 到10％、更优选地0.5％到5％的比例用于所述组合物中。

根据一个优选的实施方式，根据本发明的主要活性剂，即甜菊醇、甜菊醇 糖苷衍生物或它们的异构体之一，采用甜菊属(Stevia)的至少一种植物的提取 物的形式。

根据本发明的主要活性剂以甜菊属的至少一种植物的提取物的形式使用是 尤其有利的，这是因为它使提供一种天然来源的新型的美容活性剂成为可能， 从而满足了消费者在这一方向不断增加的需求。

甜菊属属于菊科(Asteraceae)，菊科汇集了150种到200种的灌木或香草， 它们中的一些含有天然甜味剂。甜菊属植物起源于拉丁美洲的热带地区。

根据本发明，甜菊属植物的提取物可以通过化学方法被改性(因此该提取 物是半合成的)，但是最好是天然的提取物。

在本发明的含义内，甜菊属植物的提取物，可以从所述植物或者源自根据 常规方法培养或通过体内生物工程培养的所述植物的细胞产生的任何植物材料 制备、或通过体外培养产生的任何植物材料制备。

术语“活体培养”应理解为是指任何常规类型的培养，即在露天土壤中或 在温室土壤中，或无土培养。

术语“体外培养”应理解为是指本领域技术人员知晓的使人工获得植物或 植物的一部分成为可能的所有技术。在体外植物细胞的生长过程中，与活体培 养的植物相比，通过物理化学条件强加的选择压力可以获得标准化的可以全年 使用的植物材料。

本发明使用的甜菊属植物的提取物可以从整个植物或该植物的任何一部分 产生的任何植物材料中获得，例如，叶子、茎、花和花梢、种子、芽和根、未 分化的细胞或植物干细胞。

优选地，根据本发明的甜菊属植物的提取物从叶子中获得。

还更优选地，根据本发明的甜菊属植物的提取物来源于甜叶菊(Stevia  rebaudiana(Bertoni))物种的植物，也被称作泽兰属甜菊(Eupatorium  rebaudianum)或“甜的叶子”。

现在，这种物种在不只拉丁美洲的其它州的许多国家培养，特别是在新加 坡、台湾、马来西亚、南韩、中国、以色列、甚至澳大利亚。

优选地，根据本发明的甜菊属植物的提取物是天然提取物。

在本发明中，术语“天然的”旨在表示一种在提取工艺后未被改性的提取 物，尤其通过发酵或化学合成改性。

优选地，根据本发明的甜菊属植物的提取物不是发酵的提取物。

优选地，相对于组合物的总重量，根据本发明的甜叶菊植物的提取物按重 量计以0.00001％到50％、优选0.0001％到10％、更优选0.01％到4％的比例 用在所述组合物中。

甜菊醇已经商业化提供。

作为在本发明中使用的莱苞迪苷A，可特别提到由Blue California以名称 Good’n sweet^TM出售的含有99％莱苞迪苷A的甜菊属植物提取物，以及由成都 华高(Wagott)制药以名称ViaSweet^TM出售的含有莱97％莱苞迪苷A的甜菊属 植物提取物。

还可涉及在文献WO2003/035090中描述的通过酵母发酵而得到的甜菊属植 物提取物。

根据本发明的主要活性剂(即甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体 之一)的固有性质使得：在根据本发明的组合物中，允许使用由于难于配制、 溶解、以受控方式释放或者矢量化而通常不能够被使用的化合物或活性剂。

因此，如上所述，根据本发明的提取物能够有利地与至少一种附加活性剂 结合，该附加活性剂选自甜味剂、氨基酸(例如甘氨酸)、肽、肌苷或肌苷的衍 生物、鸟苷或鸟苷的衍生物、细胞外钙受体拮抗剂、钙通道拮抗剂、防皱活性 剂、抗衰老活性剂、保湿剂、抗氧化剂、光防护剂、或它们的混合物。

优选地，附加活性剂可以选自甜味剂、氨基酸、肽、肌苷或其衍生物、鸟 苷或其衍生物、细胞外钙受体的拮抗剂、钙通道的拮抗剂和它们的混合物。

优选地，附加活性剂可以选自防皱活性剂、抗衰老活性剂、保湿剂、抗氧 化剂、光防护剂、遮光剂、特别是紫外线遮蔽剂和它们的混合物。

考虑作为附加活性剂的甜味剂可被描述成辅助甜味剂，因此它们必须区别 于根据本发明的主要活性剂。作为辅助甜味剂，可特别提到天然来源的或生物 技术来源的那些辅助甜味剂，例如糖或多糖多元醇或胺化分子，特别是奇异果 甜蛋白或奇异果(Thaumatococcus daniellii)或卡特莫夫果(katemfe)的假种皮 的提取物，或它们的类似物、前体、或合成的或半合成的衍生物。还可提到“高 甜度甜味剂”，例如木糖醇(C₅)、赤藓糖醇(C₄)、三氯蔗糖、新橙皮苷二氢查 耳酮或NHDC(E959)；和“填充型甜味剂”，例如山梨醇、麦芽糖醇、异麦芽 酮糖醇、甘露糖醇、乳糖醇、甘油及其衍生物、果糖及其衍生物、麦芽糖及其 衍生物、蔗糖及其衍生物、葡萄糖及其衍生物、甘露糖及其衍生物、以及简单 的单糖，特别是天然来源的或生物技术来源的。还可提到糖精、乙酰磺胺酸钾 (或安赛蜜K)和环璜酸盐(或环璜酸钠)组成。

术语“氨基酸”应理解为是指，在本发明的含义内，特别是谷氨酸盐或 N-Me-D-天门冬氨酸盐，特别是在WO 2009/071277中所述的，以及在WO  2008/139946中描述的钙受体激活剂。它们也可以是牛磺酸、谷氨酰胺、精氨酸、 瓜氨酸、甘氨酸、丝氨酸和N-乙酰半胱氨酸。

这些附加活性剂的选取和含量特别取决于考虑的施用途径，这落在本领域 技术人员的能力范围内。

相对于包括这些附加活性剂的组合物的总重量，这些附加活性剂按重量计 可以0.001％至50％、优选0.01％至10％、更优选0.01％至5％的含量存在于根据 本发明的组合物中。

组合物

有利地，作为与其他另外的活性剂的混合物或者不作为与其他另外的活性 剂的混合物，根据本发明的活性剂，即甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异 构体之一，可以可被配制在美容组合物或皮肤病用的组合物中。

优选地，本发明的组合物是美容组合物。

根据第一可替选的实施方式，根据本发明的主要活性剂适用于局部施用。

因此，包含根据本发明的主要活性剂的组合物可以是护理皮肤或半粘膜的 产品的形式，例如，用于脸部、唇部、手部、足部、解剖学褶皱部(fold)或身 体的防护、治疗或护理的组合物(例如，日霜、晚霜、卸妆霜、化妆底霜、防 晒组合物、保护或护理的身体乳液、晒后乳液、洗剂、用于皮肤或头皮的凝胶 或泡沫、精华液、粉、面膜、人工晒黑组合物、须后组合物、毛发用组合物， 用于腋窝区的产品、或者卫生和清洁产品)。

根据第二可替选的实施方式，根据本发明的主要活性剂适用于口服施用。

因此，本发明的组合物可以采用任何合适的形式提供，特别是以口服液、 饮品、片剂、胶囊(包括硬胶囊)的形式，或者可替选的营养食品或营养补品 的形式。

根据第三可替选的实施方式，根据本发明的主要活性剂适用于皮内施用、 例如真皮内施用、或皮下施用。这种施用可例如通过可能实现皮内注射的装置 (注射器、植入管、贮液器和微型操作针)、或者可替选地通过超声波装置或离 子电渗装置，甚至是光装置或热装置来实施。这种施用也可以通过美塑疗法进 行。

本发明组合物的皮内使用要区别于外科手术，其目的仅是实现皮肤的表面 处理，以达到美学的、防护的、修补的或舒适的目的。换言之，本发明中的皮 内施用途径仅表现为在皮肤的表面渗透，因此不属于医学的、外科的或治疗的 范畴。

可替选地，可以使用局部贴剂以有利于皮内施用。

优选地，根据本发明的主要活性剂用于局部施用，即通过涂敷在所考虑的 角质物质的表面上的施用。

优选地，根据本发明的主要活性剂，当其存在于组合物中时，可以配制在 生理学上可接受的介质中。

在本发明的含义内，术语“生理学上可接受的介质”是用于表示这样一种 介质，其适用于组合物的外用、口服或皮内(例如表皮内的、真皮内的或皮下 的)的施用。

一种生理学上可接受的介质优选是化妆上或皮肤病学上可接受的介质，即 不具有令人不愉快的气味或外观并且与所考虑的施用途径完全相容的介质。

当组合物用于局部施用时，即用于通过涂敷在所考虑的角质物质的表面上 的施用时，当该介质不引起使用者不可接受的刺痛、紧绷或发红时，这样的介 质被认为是生理学上可接受的。

当组合物用于口服施用时，当该介质不引起消化不耐受时，这样的介质可 被认为是生理学上可接受的。

此外，当组合物用于皮内施用时，当该介质不引起使用者经历不愉快的反 应，例如刺痛、紧绷或发红，甚至不引起炎症反应、过敏反应、水肿反应或搔 痒反应时，这样的介质可被认为是生理学上可接受的。

根据本发明的组合物可以采用在化妆品和皮肤病学领域通常使用的任何药 物剂型的形式提供。

特别地，该组合物可具有水溶液、水/醇溶液或油溶液、可选地胶化的形式； 洗剂类型的分散液的形式，可选地两相洗剂或三相洗剂；水包油型乳剂或油包 水型乳剂或多重乳剂的形式；水凝胶的形式；油在水相中的分散液、尤其是使 用小球的分散液的形式，这些小球可能是聚合物粒子，或更好的是离子类型和/ 或非离子类型的脂囊泡；或者可替选地，粉剂形式、精华液形式、糊剂形式、 能够通过擦拭涂抹器而分解的固体块形式、或者能够在皮肤或粘膜上融化的软 贴剂或硬贴剂的形式。它可以有固体的稠度、糊剂的稠度或更大或更小的流体 液体稠度。

关于所考虑的药物剂型，根据本发明的活性剂可以通过常规组分配制。

为了说明这些通常组分且不具有隐含的限制，可尤其提到水、溶剂、挥发 性油或非挥发性油，特别是如在下面详细描述的，蜡类，特别是如下所述，颜 料、填料、表面活性剂、胶凝剂、防腐剂、着色剂、抗氧化剂、紫外线屏蔽剂 和它们的混合物。

当然，本领域技术人员将注意选择可选的附加化合物和/或它们的含量，以 便根据本发明的主要活性剂的有利性能不受到或基本上不受到设想的添加物的 不利影响，以及以便由此产生的组合物的性质与较佳的施用途径相容。

根据本发明的组合物优选以乳剂形式提供，尤其通过水相在油相中的分散 (W/O)或油相在水相中的分散(O/W)而得到的乳剂、或者通过牛奶型的液体 或半液体稠度的分散而得到的乳剂、或通过霜或凝胶类型的软的、半固体的、 或固体的稠度的分散而得到的乳剂；或者，可替选地具有多重乳液(W/O/W或 O/W/O)的形式。这些组合物通过常规方法制备。

因此，相对于组合物的总重量，根据本发明的组合物可有利地含有按重量 计0.1％至99.9％、优选30％至95％的水。

根据本发明的组合物还可有利地含有至少一种油相，该油相在室温和大气 压力下为液态。

相对于组合物的总重量，存在于根据本发明的组合物中油相的量，例如， 按重量计可为0.01％至50％，优选地0.1％至30％。

例如可被用于根据本发明的组合物中的油，可提到动物来源的烃油、植物 来源的烃油、合成酯和合成醚、特别是脂肪酸、矿物来源或合成来源的直链的 或支链的烃、脂肪醇、硅酮油和它们的混合物。

存在于油相中其它的脂肪性物质，例如为蜡和包括8个至30个碳原子的脂 肪酸，例如硬脂酸、月桂酸、棕榈酸和油酸。为了制备具有所期望的性能(如 稠度或质地)的组合物，本领域技术人员可以不同的形式选择这些脂肪性物质。

同样地，根据本发明的组合物可还包含至少一种着色材料，例如，其选自 颜料、珠光剂、染料、效果(effect)材料和它们的混合物。

相对于组合物的总重量，这些着色材料按重量可以0.01％至50％、优选0.01％ 至30％的含量存在。

根据本发明的组合物可额外地含有至少一种填料，特别是相对于组合物的 总重量，该填料的含量按重量计为0.01％至50％、优选0.01％至30％。这些填料 可以是无机的或有机的，它们的选择在本领域技术人员的能力范围内。

如上所述，根据本发明的考虑的活性剂的施用可以通过使用适应于所考虑 的施用方法(即，局部施用、口服施用或皮内施用)的装置来进行。这种装置 的选择，特别是从较佳施用途径类型的观点出发，在本领域技术人员常规知识 的范围内。

除上述描述的装置外，尤其从皮内施用的观点，也可以考虑下面的装置：

-直接局部递送的装置或者利用特定的涂抹器递送的装置，例如皮内的显微 注射装置或简单贴片或离子电渗贴片；

-电的、电磁的或磁性的装置，这些装置使得物理刺激和所述组合物在应用 位置的应用同时发生成为可能；

-致力于产生热和/或冷的装置，从而改变在某些受体处的电信号，例如， 设备；以及

-致力于产生光、激活或抑制某些酶催化系统的装置。

在上述后两个可替选方案中，装置有助于刺激根据本发明的活性剂在所考 虑的施用部位的效力。

因此，本发明的目的还在于一种工具箱，该工具箱包含至少一个容器，该 容器含有组合物，该组合物包括甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之 一；以及至少一个适用于将所述组合物施用到个体的装置，尤其是如上述所述 的装置。

本发明也涉及一种用于刺激、修复或调节皮肤细胞的新陈代谢的美容方法， 特别是成纤维细胞的新陈代谢，该美容方法包括至少一个将至少有效量的甜菊 醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一施用至需要刺激、修复或调节皮肤 细胞的新陈代谢的个体的步骤。

本发明也涉及用于预防和/或治疗皮肤衰老迹象的美容方法，该美容方法包 括至少一个将至少有效量的甜菊醇、甜菊醇糖苷衍生物或它们的异构体之一施 用至需要预防和/或治疗皮肤衰老迹象的个体的步骤。

本发明的化妆方法可以每天进行，例如以每天一次的频率施用或每天分为 两次或三次施用，例如，早晨一次、晚上一次。

在整个说明书中，包括权利要求书中，表达方式“含有一”应当理解为与 “含有至少一”同义，除非另有说明。

表达方式“在...和...之间”和“范围从...到...”应当理解为包含限值，除非 另有说明。

具体实施方式

为了说明的目的给出下述的实施例和图表，且没有本发明的隐含限制。百 分比通过起始材料的重量表达。根据情况而定，化合物以化学名称或CTFA(国 际化妆品成分词典和手册)名称提及。

实施例1：莱苞迪苷A对成纤维细胞收缩的影响

a)测试原理

测试的原理在于研究测试产品即莱苞迪苷A对真皮等同物模型的效果，该 真皮等同物模型通过正常的人类成纤维细胞移植在胶原蛋白基质中构成。

这些条件用于模拟体外的真皮收缩现象。任何收缩是由胶原凝胶的回缩表 示，从而导致在真皮等效物的总表面积的减少。

该表面积的测定使得可以评估预先与真皮等效物接触的物质的收缩的影 响。

b)在试验中使用的产品

所测试的活性剂是由Blue California以名称Good'n sweet^TM出售的含有99％ 的莱苞迪苷A的甜菊属植物提取物。

所用的胶原蛋白为I型(购买的溶液)。它是从小牛的皮革中提取的，并在 +4℃储存在酸性介质中；它通过再加热至37℃，并通过降低酸度而自然聚合。 胶原蛋白预先通过连续的水+醋酸的水浴而进行透析。

从人体皮肤外植体上分离真皮成纤维细胞，将其培养在DMEM培养基中， 其补充有：10％胎牛血清(FCS)、2mM的L-谷氨酰胺、50U/ml青霉素、50μg/ml 链霉素。在第8代时使用它们。

c)方案

一些系列含有正常的人类成纤维细胞的附属的真皮等同物的制备：不经过 任何处理的对照系列以及利用测试化合物处理的系列，每个测试的化合物采用 下述的浓度：0.001mg/ml和0.01mg/ml。

按照Asselineau等在Exp.Cell.Res.，1985、159、第536-539页描述的方法 以及Models in Dermatology，1987、第3卷、第1-7页描述的方法制备真皮等同 物，采用下述比例：

每个真皮等同物的测试方案如下：在添加剂(1％谷氨酰胺、1％非必需氨基 酸、1％丙酮酸钠，1％两性霉素B和1％青霉素/链霉素)、胎牛血清和氢氧化钠 NaOH存在下，将MEM培养基连续地导入存放在碎冰中的50ml离心管内。然 后，以每1ml培养基1.5×10⁵个细胞的浓度加入从人类皮肤外植体分离的成纤 维细胞。

体积/体积为1/1000的胶原蛋白和醋酸的混合物沿管壁缓慢加入，以便观察 带白色的云状物的出现。

然后，将合并的产品仔细混合，并按照每孔中2ml的混合物的比例将其分 布于12孔培养板(Costar类型，编号3512)的孔中。

参照1mg/ml的胶原蛋白的最终浓度，最后细胞浓度为3×10⁴个细胞/真皮 等同物。

将培养板置于37℃含有5％CO₂的保温箱中。

一旦胶原蛋白聚合形成后，真皮等同物留附于培养支撑物上3天然后从支 撑物上脱离，以便收缩开始。从培养箱中取出这些真皮等同物以拍摄图像，用 于达到测量它们的表面积的目的，其中测量每个点(在其分离后0、7、24和48 小时)的收缩动力学。在每个测量点之后要立即把它们放回培养箱。

用莱苞迪苷A处理过的真皮等同物(除了未处理的作对照)从D0，即它们 制备的当天，以选定的浓度通过引入莱苞迪苷A处理。

每个实验条件下，对照试验和莱苞迪苷A的试验进行n＝3次。

改变培养基，格子随后培养7天，在第一天(D1)、第三天(D3)、第四天 (D4)和第七天(D7)进行所述培养板的拍摄。

处理过的(用测试化合物)和对照(无测试化合物)的真皮等同物的自发 收缩的评估通过自发收缩开始后在不同的时间测定它们的表面积而进行。这种 方法与阳性对照并行进行了验证。

格子的表面区域使用NIS-Elements软件(基本版3.10)进行测量。在此， 对于表面积测量，根据下列公式收缩的百分比等于表面积的比值：

收缩％＝(Sp-Si)/Sp×100

其中:‘Sp’代表培养板的孔的表面积；它对应于皮肤等同物收缩之前的总表 面积；

‘Si’代表在收缩动力学的i时刻真皮等同物的表面积。

d)结果

在下表I中描述了所得到的关于在不同测试时间处理的和未处理的真皮等同物 的收缩百分比的结果。该结果相对于对照以％表示。

表1

e)结论

上述结果证明了相对于未处理的对照组，包含99％的莱苞迪苷A的甜菊属 植物提取物(且从而莱苞迪苷A)对真皮等同物的收缩效果。这种效果持续长 达至少培养的7天，从而证明莱苞迪苷在刺激、修复或调节皮肤的老年细胞的 新陈代谢和在预防和/或治疗衰老皮肤迹象的效用。

实施例2：夜用抗衰老乳液

实施例3:整体抗衰老完美凝胶

实施例4：日用护理乳液

实施例5：皮内用的配方

以生理盐水溶液制备含有按重量计0.005％的含有99％的莱苞迪苷A的甜菊 属植物提取物(由Blue California以名称Good’n sweet^TM出售)的溶液，并且将 合并的混合物包装在无菌瓶中。

将溶液单独或者作为与维生素及微量元素制剂的混合物提供，以注入表皮。

实施例6：抗衰老护理粉

实施例7：用于促进皮肤抗衰老防护的饮品