猪带绦虫重组双歧杆菌疫苗稳定性的研究方法

摘要

本发明公开了一种猪带绦虫重组双歧杆菌疫苗稳定性的研究方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）分别将猪带绦虫重组质粒pGEX-TSO45W-4B、pGEX-TSOL18和pGEX-TSO45W-4B-TSOL18与B.longum感受态细菌混匀，冰浴后转移至电击杯中，电击完毕后立即将混合液转入到MRS液体培养基的EP管中厌氧培养；将菌液涂布于含氨苄青霉素的MRS琼脂平板上，厌氧培养；（2）挑取上述平板中单个菌落至含氨苄青霉素的MRS液体培养基的EP管中，厌氧培养；将菌液离心，弃上清，沉淀中加入蔗糖溶液重溶菌体沉淀，温浴；抽提质粒为模板，进行PCR鉴定；（3）阳性菌株传代培养的稳定性或阳性菌株不同保存条件的稳定性：取上述鉴定的阳性菌株在MRS培养基中传代，每次传代抽提质粒为模板，进行PCR鉴定；或将上述鉴定的阳性菌株分别放置不同温度不同时间后，取出保存的菌液，抽提质粒，进行电泳鉴定。