一种角鲨烯油紫锥菊软胶囊及制备方法

摘要

本发明公开了一种角鲨烯油紫锥菊软胶囊及制备方法，其是由以下重量份的组分组成：角鲨烯油50-80、紫锥菊提取物10-40、维生素E2-6、蜂蜡1-4、大豆磷脂1-4。辅料经胶体磨混合均匀后制成软胶囊。本发明的保健食品配方科学合理，制备工艺简单，安全稳定有效，具有增强免疫力功能，适用于免疫力低下者服用。

说明书

技术领域

本发明涉及保健品领域，特别地，涉及一种增强免疫力功能的角鲨烯油紫锥菊软胶囊及制备方法。

背景技术

免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物(病毒、细菌等)；处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。各种原因使免疫系统不能正常发挥保护作用，在此情况下，极易招致细菌、病毒、真菌等感染，因此免疫力低下最直接的表现就是容易生病。因经常患病，加重了机体的消耗，所以一般有体质虚弱、营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等表现。

角鲨烯是一种脂质不皂化物，最初是从鲨鱼的肝油中发现的，1914年被命名为Squalene,其化学名称为2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-三十碳六烯，属开链三萜，又称鱼肝油萜，具有提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性、增强机体免疫能力、护肝、降血脂、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能，是一种无毒性的具有防病治病作用的海洋生物活性物质。

紫锥菊为原产于北美的一种松果菊植物，在美国和欧洲被广泛使用，被普遍认为具有免疫增强作用，含有多种活性成分，包括多糖、黄酮、咖啡酸衍生物、多炔、烷基胺和生物碱等，可刺激人体内白细胞等免疫细胞活力，提高肌体自身免疫力。

蜂蜡为蜜蜂科昆虫中华蜜蜂或意大利蜂分泌的蜡。蜂蜡是一种常用的天然助悬剂。

维生素E是一种脂溶性维生素，又称生育酚，是最常用的抗氧化剂之一，也是人体必需的维生素。

大豆磷脂提取自大豆，是一种天然乳化剂。

紫锥菊产品一般以片剂、胶囊剂等较为常见，固体剂型的吸收利用率较低，将其配合角鲨烯油制成软胶囊，一方面可以发挥紫锥菊和角鲨烯油的协同增效作用，另一方面制成软胶囊后更利于有效成分的吸收利用。

目前，尚未见到以角鲨烯、紫锥菊为主要原料，以蜂胶、维生素E、大豆磷脂为辅料制成软胶囊，作为保健食品的报道。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种角鲨烯油紫锥菊软胶囊及制备方法，本发明具有增强免疫力功能。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一种增强免疫力功能的角鲨烯油紫锥菊软胶囊，其特征在于：其是由以下重量份的组分组成：角鲨烯油50-80、紫锥菊提取物10-40、维生素E2-6、蜂蜡1-4、大豆磷脂1-4。

所述的角鲨烯油紫锥菊软胶囊的制备方法，其特征是：制备步骤如下：

(1)按上述重量份取角鲨烯油、紫锥菊提取物、维生素E、蜂蜡、大豆磷脂；蜂蜡用相当于其3-6倍量的角鲨烯油加热熔化后加入搅拌罐，紫锥菊提取物、维生素E、大豆磷脂和剩余的角鲨烯油也一起加入搅拌罐，搅拌混合后，经胶体磨混合均匀，得料液；

(2)按质量比1:0.4:1称取纯化水、甘油和明胶粉，先将纯化水加热至60-70℃，然后加入甘油，待温度为60-65℃时，加入明胶粉，当明胶粉完全融化后，控制温度为65-70℃，开启真空泵，进行抽真空脱气泡，得胶囊液；

(3)将胶囊液置于压丸机的温胶桶中，料液置于与喷体相连的料液桶中；设定温胶桶的温度为55-65℃；启动压丸机的主机和冷风机，制备胶带将胶带送入压丸机的两模具中间，降下喷体，同时设定喷体温度为35-45℃，开始压丸；打开转笼开关和送风开关，打开输送带，使胶丸进入到定形转笼内定形3-4小时，即可出笼，转入干燥室，在干燥转笼内干燥10-14小时，得角鲨烯油紫锥菊软胶囊。

本发明的保健食品配方科学合理，制备工艺简单，安全稳定有效，具有增强免疫力功能，适用于免疫力低下者服用。

本品具有增强免疫力功能，适用于免疫力低下者服用。人体推荐量为每日2.0g/60kg体重。

动物功效实验如下：增强免疫力功能实验设低、中、高三个剂量组(0.167、0.333、0.500g/kg体重)，分别相当于人实际摄入量的5、10、15倍，分别称取供试样品1.67、3.33、5.00g加大豆油至100mL,配置成浓度为0.0167、0.0333和0.0500g/mL样品，小鼠灌胃，灌胃容量按0.1mL/10g体重计。同时设阴性对照组(蒸馏水)和溶剂对照组(大豆油)。连续30天经口给予不同剂量的受试样品。阴性对照组和溶剂对照组给予蒸馏水和大豆油。实验结果表明：分别与水对照组、油对照组比较，受试样品三剂量组小鼠脾淋巴细胞增殖能力均增强，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)；分别与水对照组、油对照组比较，受试样品三剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数均升高，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)。分别与水对照组比较，受试样品三剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率均升高，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)，说明本发明具有增强免疫力功能。

大鼠急性经口毒性试验如下：采用最大耐受剂量法，将样品以20.0g/kg体重剂量对雌雄大鼠(180-220g)各10只经口灌胃染毒。称取样品配成0.5g/mL，按20mL/kg体重二次灌胃给予，间隔4h。染毒后，观察大鼠的一般状况、中毒症状和死亡情况，观察期限两周。试验结果：样品对雌雄大鼠的急性经口的最大耐受剂量均大于20.0g/kg体重。

小鼠急性经口毒性试验如下：采用最大耐受剂量法，将样品以20.0g/kg体重剂量对雌雄小鼠(18-22g)各10只经口灌胃染毒。称取样品配成0.5g/mL，按20mL/kg体重二次灌胃给予，间隔4h。染毒后，观察小鼠的一般状况、中毒症状和死亡情况，观察期限两周。试验结果：样品对雌雄小鼠的急性经口的最大耐受剂量均大于20.0g/kg体重。

小鼠骨髓细胞微核试验如下：将样品分别以2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg三个剂量组，用食用大豆油配置，另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)和阳性对照组(环磷酰胺60mg/kg体重)，每组10只小鼠(25-30g，雌雄各半)，采用间隔24小时给予样品，三个剂量组分别称取样品2.5、5.0和10.0g加食用大豆油至20mL配成0.125、0.25、0.50g/mL，按20mL/kg体重，分别对各组动物灌胃。每日一次，连续2天。末次给样品后6h处死动物，取其胸骨骨髓制片，甲醇固定，Giemsa染色。样品骨髓细胞微核试验结果为阴性。

精子畸形试验如下：设样品2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg体重三个剂量组，用食用大豆油配置，另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)和阳性对照组(丝裂霉素C2.0mg/kg体重)，每组10只雄性小鼠(25-30g)。三个剂量组分别称取样品2.5、5.0和10.0g加食用大豆油至20mL配成0.125、0.25、0.50g/mL，按20mL/kg体重，分别对各组动物灌胃。每日一次，连续5天。于首次给样后第35天，取二侧副睾剪碎，取滤液制片。镜检观察，每鼠计数1000个精子的畸形数。样品精子畸形试验结果阴性。

Ames试验如下：选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA₉₇、TA₉₈、TA₁₀₀、TA₁₀₂，采用平板掺入法，测试剂量为40μg/皿、200μg/皿、1000μg/皿、5000μg/皿。直接计数培养基上各菌株的回变菌落数。检测重复一次。样品Ames试验结果为阴性。

30天喂养试验如下：设低、中、高三个剂量组(0.833、1.67、3.33g/kg体重)，分别相当于人推荐量的25、50、100倍，分别称取供试样品20.0、40.0、80.0g加大豆油至240mL,配置成浓度为0.083、0.167和0.333g/mL的样品，按10mL/kg体重经口灌胃给予，连续30天。另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)，分别给予蒸馏水和食用大豆油，自由饮食，连续喂养30天。SD大鼠100只(55-80g)，雌雄各半，随机分组，单笼饲养。连续观察30天，每周记录体重和进食量，并计算食物利用率，试验期末颈静脉取血进行血液学检查，断头取血进行血生化检查，对每只大鼠进行脏器大体观察，同时取肝、肾、脾、睾丸(卵巢)称重并计算脏体比，并取肝、肾、脾、胃、肠、睾丸(卵巢)进行病理组织学检查。结果：实验动物生长情况良好，血液学检查，生化学检查，主要脏体比及组织学检查结果与对照组相比，均无明显差异。

上述急性毒性试验、微核试验、精子畸形试验、Ames试验、30天喂养试验结果显示本产品安全无毒。

稳定性试验如下：将三批样品按市售包装经37～40℃温度和75％相对湿度条件下放置3个月，于0月、1月、2月、3月分别对三批样品进行全项目检测(包括感官指标、鉴别反应、角鲨烯、紫锥菊苷、总灰分、崩解时限、酸价、过氧化值、铅砷汞、六六六、滴滴涕、净含量负偏差、菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母菌、沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡球菌、乙型溶血性)，检测结果均符合本产品质量标准(企业标准)的规定。

本发明的有益效果是：本发明用角鲨烯油、紫锥菊提取物、维生素E、蜂蜡、大豆磷脂制成人们乐于接受的保健食品，组方合理，既符合医药理论，又有现代药理及临床研究依据；本发明制备的角鲨烯油紫锥菊软胶囊具有增强免疫力功能。

具体实施方式

本发明角鲨烯油紫锥菊软胶囊，其内容物由以下重量百分比的组分组成：角鲨烯油50-80％、紫锥菊提取物10-40％、维生素E2-6％、蜂蜡1-4％、大豆磷脂1-4％。

上述角鲨烯油紫锥菊软胶囊的制备方法，包括如下步骤：

(1)配料：按上述重量配比取角鲨烯油、紫锥菊提取物、维生素E、蜂蜡、大豆磷脂，蜂蜡用3-6质量倍量的角鲨烯油加热熔化后加入搅拌罐，紫锥菊提取物、维生素E、蜂蜡、大豆磷脂和剩余的角鲨烯油也一起加入搅拌罐，搅拌混合后，经胶体磨混合均匀，得料液。

(2)化胶：按质量比1:0.4:1称取纯化水、甘油和明胶，先将纯化水加热至60℃～70℃，然后加入甘油，待温度为60℃～65℃时，加入明胶粉，当明胶粉完全融化后，控制温度为65℃～70℃，开启真空泵，进行抽真空脱气泡，得胶囊液；

(3)压丸：将胶囊液置于压丸机的温胶桶中，料液置于与喷体相连的料液桶中；设定温胶桶的温度为55℃～65℃；启动压丸机的主机和冷风机，制备胶带将胶带送入压丸机的两模具中间，降下喷体，同时设定喷体温度为35℃～45℃，开始压丸；打开转笼开关和送风开关，打开输送带，使胶丸进入到定形转笼内定形3～4小时，即可出笼，转入干燥室，在干燥转笼内干燥10～14小时，得角鲨烯油紫锥菊软胶囊。

下面详细说明本发明的具体实施例

实施例1

取角鲨烯油8000g、紫锥菊提取物1000g、维生素E400g、蜂蜡300g、大豆磷脂300g，蜂蜡用1200g角鲨烯油加热熔化后加入搅拌罐，紫锥菊提取物、维生素E、蜂蜡、大豆磷脂和剩余的角鲨烯油也一起加入搅拌罐，搅拌混合后，经胶体磨混合均匀，得料液。称取纯化水2000g、甘油800g和明胶2000g，先将纯化水加热至60℃～70℃，然后加入甘油，待温度为60℃～65℃时，加入明胶粉，当明胶粉完全融化后，控制温度为65℃～70℃，开启真空泵，进行抽真空脱气泡，得胶囊液；将胶囊液置于压丸机的温胶桶中，料液置于与喷体相连的料液桶中；设定温胶桶的温度为55℃～65℃；启动压丸机的主机和冷风机，制备胶带将胶带送入压丸机的两模具中间，降下喷体，同时设定喷体温度为35℃～45℃，开始压丸；打开转笼开关和送风开关，打开输送带，使胶丸进入到定形转笼内定形3～4小时，即可出笼，转入干燥室，在干燥转笼内干燥10～14小时，得角鲨烯油紫锥菊软胶囊。

动物功效实验：设低、中、高三个剂量组(0.167、0.333、0.500g/kg体重)，分别相当于人实际摄入量的5、10、15倍，分别称取供试样品1.67、3.33、5.00g加大豆油至100mL,配置成浓度为0.0167、0.0333和0.0500g/mL样品，小鼠灌胃，灌胃容量按0.1mL/10g体重计。同时设阴性对照组(蒸馏水)和溶剂对照组(大豆油)。连续30天经口给予不同剂量的受试样品。阴性对照组和溶剂对照组给予蒸馏水和大豆油。数据如下：

对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响

组别动物数(只)光密度差值水对照组100.139±0.012油对照组100.147±0.0150.167g/kg100.180±0.0130.333g/kg100.173±0.0110.500g/kg100.182±0.017

对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响

组别动物数(只)吞噬率吞噬指数水对照组1028.1±4.00.59±0.09油对照组1030.4±4.30.64±0.110.167g/kg1034.2±6.80.73±0.080.333g/kg1038.4±6.00.81±0.120.500g/kg1036.5±6.70.76±0.08

实验结果表明：分别与水对照组、油对照组比较，受试样品三剂量组小鼠脾淋巴细胞增殖能力均增强，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)；分别与水对照组、油对照组比较，受试样品三剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数均升高，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)。分别与水对照组比较，受试样品三剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率均升高，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)。说明该样品具有增强免疫力功能。

大鼠急性经口毒性试验：采用最大耐受剂量法，将样品以20.0g/kg体重剂量对雌雄大鼠(180-220g)各10只经口灌胃染毒。称取样品配成0.5g/mL，按20mL/kg体重二次灌胃给予，间隔4h。染毒后，观察大鼠的一般状况、中毒症状和死亡情况，观察期限两周。试验结果：样品对雌雄小鼠的急性经口的最大耐受剂量均大于20.0g/kg体重。

小鼠急性经口毒性试验：采用最大耐受剂量法，将样品以20.0g/kg体重剂量对雌雄小鼠(18-22g)各10只经口灌胃染毒。称取样品配成0.5g/mL，按20mL/kg体重二次灌胃给予，间隔4h。染毒后，观察小鼠的一般状况、中毒症状和死亡情况，观察期限两周。试验结果：样品对雌雄小鼠的急性经口的最大耐受剂量均大于20.0g/kg体重。

小鼠骨髓细胞微核试验：将样品分别以2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg三个剂量组，用食用大豆油配置，另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)和阳性对照组(环磷酰胺60mg/kg体重)，每组10只小鼠(25-30g，雌雄各半)，采用间隔24小时给予样品，三个剂量组分别称取样品2.5、5.0和10.0g加食用大豆油至20mL配成0.125、0.25、0.50g/mL，按20mL/kg体重，分别对各组动物灌胃。每日一次，连续2天。末次给样品后6h处死动物，取其胸骨骨髓制片，甲醇固定，Giemsa染色。样品骨髓细胞微核试验结果为阴性。

精子畸形试验：设样品2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg体重三个剂量组，用食用大豆油配置，另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)和阳性对照组(丝裂霉素C2.0mg/kg体重)，每组10只雄性小鼠(25-30g)。三个剂量组分别称取样品2.5、5.0和10.0g加食用大豆油至20mL配成0.125、0.25、0.50g/mL，按20mL/kg体重，分别对各组动物灌胃。每日一次，连续5天。于首次给样后第35天，取二侧副睾剪碎，取滤液制片。镜检观察，每鼠计数1000个精子的畸形数。样品精子畸形试验结果阴性。

Ames试验：选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA₉₇、TA₉₈、TA₁₀₀、TA₁₀₂，采用平板掺入法，测试剂量为40μg/皿、200μg/皿、1000μg/皿、5000μg/皿。直接计数培养基上各菌株的回变菌落数。检测重复一次。样品Ames试验结果为阴性。

30天喂养试验：设低、中、高三个剂量组(0.625、1.25、2.5g/kg体重)，分别相当于人推荐量的25、50、100倍，分别称取供试样品15.0、30.0、60.0g加大豆油至240mL,配置成浓度为0.063、0.125和0.25g/mL的样品，按10mL/kg体重经口灌胃给予，连续30天。另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)，分别给予蒸馏水和食用大豆油，自由饮食，连续喂养30天。SD大鼠100只(55-80g)，雌雄各半，随机分组，单笼饲养。连续观察30天，每周记录体重和进食量，并计算食物利用率，试验期末颈静脉取血进行血液学检查，断头取血进行血生化检查，对每只大鼠进行脏器大体观察，同时取肝、肾、脾、睾丸(卵巢)称重并计算脏体比，并取肝、肾、脾、胃、肠、睾丸(卵巢)进行病理组织学检查。结果：实验动物生长情况良好，血液学检查，生化学检查，主要脏体比及组织学检查结果与对照组相比，均无明显差异。

急性毒性试验、微核试验、精子畸形试验、Ames试验、30天喂养试验结果显示本样品安全无毒。

稳定性试验：将三批样品按市售包装经37～40℃温度和75％相对湿度条件下放置3个月，于0月、1月、2月、3月分别对三批样品进行全项目检测(包括感官指标、鉴别反应、角鲨烯、紫锥菊苷、总灰分、崩解时限、酸价、过氧化值、铅砷汞、六六六、滴滴涕、净含量负偏差、菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母菌、沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡球菌、乙型溶血性)，检测结果均符合本产品质量标准(企业标准)的规定。

实施例2

取角鲨烯油5000g、紫锥菊提取物4000g、维生素E200g、蜂蜡400g、大豆磷脂400g，蜂蜡用2400g角鲨烯油加热熔化后加入搅拌罐，紫锥菊提取物、维生素E、蜂蜡、大豆磷脂和剩余的角鲨烯油也一起加入搅拌罐，搅拌混合后，经胶体磨混合均匀，得料液。称取纯化水2000g、甘油800g和明胶2000g，先将纯化水加热至60℃～70℃，然后加入甘油，待温度为60℃～65℃时，加入明胶粉，当明胶粉完全融化后，控制温度为65℃～70℃，开启真空泵，进行抽真空脱气泡，得胶囊液；将胶囊液置于压丸机的温胶桶中，料液置于与喷体相连的料液桶中；设定温胶桶的温度为55℃～65℃；启动压丸机的主机和冷风机，制备胶带将胶带送入压丸机的两模具中间，降下喷体，同时设定喷体温度为35℃～45℃，开始压丸；打开转笼开关和送风开关，打开输送带，使胶丸进入到定形转笼内定形3～4小时，即可出笼，转入干燥室，在干燥转笼内干燥10～14小时，得角鲨烯油紫锥菊软胶囊。

动物功效实验：设低、中、高三个剂量组(0.167、0.333、0.500g/kg体重)，分别相当于人实际摄入量的5、10、15倍，分别称取供试样品1.67、3.33、5.00g加大豆油至100mL,配置成浓度为0.0167、0.0333和0.0500g/mL样品，小鼠灌胃，灌胃容量按0.1mL/10g体重计。同时设阴性对照组(蒸馏水)和溶剂对照组(大豆油)。连续30天经口给予不同剂量的受试样品。阴性对照组和溶剂对照组给予蒸馏水和大豆油。数据如下：

对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响

组别动物数(只)光密度差值水对照组100.147±0.010油对照组100.152±0.0130.167g/kg100.182±0.0190.333g/kg100.173±0.0120.500g/kg100.188±0.017

对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响

组别动物数(只)吞噬率吞噬指数水对照组1028.5±4.00.56±0.10油对照组1031.4±4.30.61±0.120.167g/kg1034.5±6.00.80±0.160.333g/kg1040.5±6.40.82±0.120.500g/kg1041.6±5.00.89±0.06

实验结果表明：分别与水对照组、油对照组比较，受试样品三剂量组小鼠脾淋巴细胞增殖能力均增强，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)；分别与水对照组、油对照组比较，受试样品三剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数均升高，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)。分别与水对照组比较，受试样品三剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率均升高，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)。说明该样品具有增强免疫力功能。

大鼠急性经口毒性试验：采用最大耐受剂量法，将样品以20.0g/kg体重剂量对雌雄大鼠(180-220g)各10只经口灌胃染毒。称取样品配成0.5g/mL，按20mL/kg体重二次灌胃给予，间隔4h。染毒后，观察大鼠的一般状况、中毒症状和死亡情况，观察期限两周。试验结果：样品对雌雄小鼠的急性经口的最大耐受剂量均大于20.0g/kg体重。

小鼠急性经口毒性试验：采用最大耐受剂量法，将样品以20.0g/kg体重剂量对雌雄小鼠(18-22g)各10只经口灌胃染毒。称取样品配成0.5g/mL，按20mL/kg体重二次灌胃给予，间隔4h。染毒后，观察小鼠的一般状况、中毒症状和死亡情况，观察期限两周。试验结果：样品对雌雄小鼠的急性经口的最大耐受剂量均大于20.0g/kg体重。

小鼠骨髓细胞微核试验：将样品分别以2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg三个剂量组，用食用大豆油配置，另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)和阳性对照组(环磷酰胺60mg/kg体重)，每组10只小鼠(25-30g，雌雄各半)，采用间隔24小时给予样品，三个剂量组分别称取样品2.5、5.0和10.0g加食用大豆油至20mL配成0.125、0.25、0.50g/mL，按20mL/kg体重，分别对各组动物灌胃。每日一次，连续2天。末次给样品后6h处死动物，取其胸骨骨髓制片，甲醇固定，Giemsa染色。样品骨髓细胞微核试验结果为阴性。

精子畸形试验：设样品2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg体重三个剂量组，用食用大豆油配置，另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)和阳性对照组(丝裂霉素C2.0mg/kg体重)，每组10只雄性小鼠(25-30g)。三个剂量组分别称取样品2.5、5.0和10.0g加食用大豆油至20mL配成0.125、0.25、0.50g/mL，按20mL/kg体重，分别对各组动物灌胃。每日一次，连续5天。于首次给样后第35天，取二侧副睾剪碎，取滤液制片。镜检观察，每鼠计数1000个精子的畸形数。样品精子畸形试验结果阴性。

Ames试验：选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA₉₇、TA₉₈、TA₁₀₀、TA₁₀₂，采用平板掺入法，测试剂量为40μg/皿、200μg/皿、1000μg/皿、5000μg/皿。直接计数培养基上各菌株的回变菌落数。检测重复一次。样品Ames试验结果为阴性。

30天喂养试验：设低、中、高三个剂量组(0.625、1.25、2.5g/kg体重)，分别相当于人推荐量的25、50、100倍，分别称取供试样品15.0、30.0、60.0g加大豆油至240mL,配置成浓度为0.063、0.125和0.25g/mL的样品，按10mL/kg体重经口灌胃给予，连续30天。另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)，分别给予蒸馏水和食用大豆油，自由饮食，连续喂养30天。SD大鼠100只(55-80g)，雌雄各半，随机分组，单笼饲养。连续观察30天，每周记录体重和进食量，并计算食物利用率，试验期末颈静脉取血进行血液学检查，断头取血进行血生化检查，对每只大鼠进行脏器大体观察，同时取肝、肾、脾、睾丸(卵巢)称重并计算脏体比，并取肝、肾、脾、胃、肠、睾丸(卵巢)进行病理组织学检查。结果：实验动物生长情况良好，血液学检查，生化学检查，主要脏体比及组织学检查结果与对照组相比，均无明显差异。

急性毒性试验、微核试验、精子畸形试验、Ames试验、30天喂养试验结果显示本样品安全无毒。

稳定性试验：将三批样品按市售包装经37～40℃温度和75％相对湿度条件下放置3个月，于0月、1月、2月、3月分别对三批样品进行全项目检测(包括感官指标、鉴别反应、角鲨烯、紫锥菊苷、总灰分、崩解时限、酸价、过氧化值、铅砷汞、六六六、滴滴涕、净含量负偏差、菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母菌、沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡球菌、乙型溶血性)，检测结果均符合本产品质量标准(企业标准)的规定。

实施例3

取角鲨烯油6000g、紫锥菊提取物3000g、维生素E300g、蜂蜡400g、大豆磷脂300g，蜂蜡用1600g角鲨烯油加热熔化后加入搅拌罐，紫锥菊提取物、维生素E、蜂蜡、大豆磷脂和剩余的角鲨烯油也一起加入搅拌罐，搅拌混合后，经胶体磨混合均匀，得料液。称取纯化水2000g、甘油800g和明胶2000g，先将纯化水加热至60℃～70℃，然后加入甘油，待温度为60℃～65℃时，加入明胶粉，当明胶粉完全融化后，控制温度为65℃～70℃，开启真空泵，进行抽真空脱气泡，得胶囊液；将胶囊液置于压丸机的温胶桶中，料液置于与喷体相连的料液桶中；设定温胶桶的温度为55℃～65℃；启动压丸机的主机和冷风机，制备胶带将胶带送入压丸机的两模具中间，降下喷体，同时设定喷体温度为35℃～45℃，开始压丸；打开转笼开关和送风开关，打开输送带，使胶丸进入到定形转笼内定形3～4小时，即可出笼，转入干燥室，在干燥转笼内干燥10～14小时，得角鲨烯油紫锥菊软胶囊。

动物功效实验：设低、中、高三个剂量组(0.167、0.333、0.500g/kg体重)，分别相当于人实际摄入量的5、10、15倍，分别称取供试样品1.67、3.33、5.00g加大豆油至100mL,配置成浓度为0.0167、0.0333和0.0500g/mL样品，小鼠灌胃，灌胃容量按0.1mL/10g体重计。同时设阴性对照组(蒸馏水)和溶剂对照组(大豆油)。连续30天经口给予不同剂量的受试样品。阴性对照组和溶剂对照组给予蒸馏水和大豆油。数据如下：

对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响

组别动物数(只)光密度差值水对照组100.147±0.016油对照组100.153±0.0120.167g/kg100.189±0.0120.333g/kg100.172±0.0130.500g/kg100.190±0.019

对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响

组别动物数(只)吞噬率吞噬指数水对照组1028.6±4.00.59±0.09油对照组1031.2±4.50.64±0.130.167g/kg1037.1±5.90.71±0.050.333g/kg1039.9±6.60.82±0.110.500g/kg1040.4±5.00.83±0.08

实验结果表明：分别与水对照组、油对照组比较，受试样品三剂量组小鼠脾淋巴细胞增殖能力均增强，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)；分别与水对照组、油对照组比较，受试样品三剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数均升高，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)。分别与水对照组比较，受试样品三剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率均升高，差异均有显著性(q检验，P＜0.05)。说明该样品具有增强免疫力功能。

大鼠急性经口毒性试验：采用最大耐受剂量法，将样品以20.0g/kg体重剂量对雌雄大鼠(180-220g)各10只经口灌胃染毒。称取样品配成0.5g/mL，按20mL/kg体重二次灌胃给予，间隔4h。染毒后，观察大鼠的一般状况、中毒症状和死亡情况，观察期限两周。试验结果：样品对雌雄小鼠的急性经口的最大耐受剂量均大于20.0g/kg体重。

小鼠急性经口毒性试验：采用最大耐受剂量法，将样品以20.0g/kg体重剂量对雌雄小鼠(18-22g)各10只经口灌胃染毒。称取样品配成0.5g/mL，按20mL/kg体重二次灌胃给予，间隔4h。染毒后，观察小鼠的一般状况、中毒症状和死亡情况，观察期限两周。试验结果：样品对雌雄小鼠的急性经口的最大耐受剂量均大于20.0g/kg体重。

小鼠骨髓细胞微核试验：将样品分别以2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg三个剂量组，用食用大豆油配置，另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)和阳性对照组(环磷酰胺60mg/kg体重)，每组10只小鼠(25-30g，雌雄各半)，采用间隔24小时给予样品，三个剂量组分别称取样品2.5、5.0和10.0g加食用大豆油至20mL配成0.125、0.25、0.50g/mL，按20mL/kg体重，分别对各组动物灌胃。每日一次，连续2天。末次给样品后6h处死动物，取其胸骨骨髓制片，甲醇固定，Giemsa染色。样品骨髓细胞微核试验结果为阴性。

精子畸形试验：设样品2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg体重三个剂量组，用食用大豆油配置，另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)和阳性对照组(丝裂霉素C2.0mg/kg体重)，每组10只雄性小鼠(25-30g)。三个剂量组分别称取样品2.5、5.0和10.0g加食用大豆油至20mL配成0.125、0.25、0.50g/mL，按20mL/kg体重，分别对各组动物灌胃。每日一次，连续5天。于首次给样后第35天，取二侧副睾剪碎，取滤液制片。镜检观察，每鼠计数1000个精子的畸形数。样品精子畸形试验结果阴性。

Ames试验：选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA₉₇、TA₉₈、TA₁₀₀、TA₁₀₂，采用平板掺入法，测试剂量为40μg/皿、200μg/皿、1000μg/皿、5000μg/皿。直接计数培养基上各菌株的回变菌落数。检测重复一次。样品Ames试验结果为阴性。

30天喂养试验：设低、中、高三个剂量组(0.625、1.25、2.5g/kg体重)，分别相当于人推荐量的25、50、100倍，分别称取供试样品15.0、30.0、60.0g加大豆油至240mL,配置成浓度为0.063、0.125和0.25g/mL的样品，按10mL/kg体重经口灌胃给予，连续30天。另设阴性对照(蒸馏水)、溶剂对照(食用大豆油)，分别给予蒸馏水和食用大豆油，自由饮食，连续喂养30天。SD大鼠100只(55-80g)，雌雄各半，随机分组，单笼饲养。连续观察30天，每周记录体重和进食量，并计算食物利用率，试验期末颈静脉取血进行血液学检查，断头取血进行血生化检查，对每只大鼠进行脏器大体观察，同时取肝、肾、脾、睾丸(卵巢)称重并计算脏体比，并取肝、肾、脾、胃、肠、睾丸(卵巢)进行病理组织学检查。结果：实验动物生长情况良好，血液学检查，生化学检查，主要脏体比及组织学检查结果与对照组相比，均无明显差异。

急性毒性试验、微核试验、精子畸形试验、Ames试验、30天喂养试验结果显示本样品安全无毒。

稳定性试验：将三批样品按市售包装经37～40℃温度和75％相对湿度条件下放置3个月，于0月、1月、2月、3月分别对三批样品进行全项目检测(包括感官指标、鉴别反应、角鲨烯、紫锥菊苷、总灰分、崩解时限、酸价、过氧化值、铅砷汞、六六六、滴滴涕、净含量负偏差、菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母菌、沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡球菌、乙型溶血性)，检测结果均符合本产品质量标准(企业标准)的规定。

以上实施例用来解释本发明，而不是对本发明进行限制，在本发明的精神和权利要求的保护范围内，对本发明做出的任何修改和改变，都落入本发明的保护范围。