一株高产L-缬氨酸的谷氨酸棒状杆菌工程菌的构建及其发酵产L-缬氨酸的方法

摘要

一株高产L-缬氨酸的谷氨酸棒状杆菌工程菌的构建及其发酵产L-缬氨酸的方法，属于食品生物工程技术领域。本发明以谷氨酸棒状杆菌ATCC13869为出发菌株，进行基因aceE、alaT和ilvA的敲除组合，获得ATCC13869ΔaceEΔalaTΔilvA突变菌株，命名为WCC003；在WCC003上进行基因lrp1、brnFE和ilvBNC1的表达组合，获得表达组合工程菌WCC003/pJYW-4-ilvBNC1-lrp1-brnFE，其已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCC NO：M2014149；并用该表达组合工程菌发酵生产L-缬氨酸。本发明基于表达调控蛋白Lrp、转运蛋白BrnFE及L-缬氨酸合成途径关键基因ilvBNC1的高产L-缬氨酸的谷氨酸棒状杆菌工程菌，在谷氨酸棒状杆菌中Lrp的有利突变Arg39Trp为本发明首次明确，Lrp和BrnFE用于发酵生产L-缬氨酸也是本发明首次报道。基因lrp1、brnFE和ilvBNC1的表达组合的研究也是本发明首次开创。