一种利用数字PCR检测食品中大肠菌群数量的方法

摘要

本发明公开了一种利用数字PCR检测待测食品中大肠菌群数量的方法。该方法包括如下步骤：1）富集待测食品中的细菌，将富集物与DNA结合物共同孵育，获得PCR扩增模板；所述DNA结合物为不能穿过完整的细胞膜，但能与细胞膜受损后暴露出来的DNA结合的物质；2）配制PCR反应体系，进行数字PCR反应；所述PCR反应体系中含有所述PCR扩增模板、大肠菌群通用引物对、荧光染料、dNTP和DNA聚合酶；3）根据反应产生的荧光信号，计算所述待测食品中的大肠菌群数量。本方法无需对食品中细菌进行分离培养，检测时间短至3-4小时；同时减少了背景DNA和基质的干扰，灵敏度低至1个拷贝；且该方法无需设置标准曲线，根据结果可直接判读样品中的大肠菌群数量，大大简化了操作步骤。