重组红鳍东方鲀抗菌肽Defb-1蛋白的制备方法

摘要

本发明公开一种重组红鳍东方鲀抗菌肽Defb-1蛋白的制备方法，是对其成熟肽编码区进行密码子优化，采用重叠PCR单向延伸方法获得经优化的Defb-1蛋白成熟肽编码序列，连入pET-32a(+)载体，获得重组表达质粒，并转化至大肠杆菌TransB（DE3）感受态细胞中；通过IPTG诱导获得重组蛋白的可溶性表达；利用重组蛋白含有的His标签，对重组蛋白进行鉴定和纯化，可以快速高效获得重组红鳍东方鲀抗菌肽。不仅操作简单，降低制作成本，更主要的是蛋白结构不受破坏，重组蛋白纯度好、得率高且不易降解，适应于工业化生产，表达产物可用于制作饲料添加剂、产品保鲜剂和医药产品等。