对转染后的siRNA进行初步筛选的简易方法

摘要

本发明公开了对转染后的siRNA进行初步筛选的简易方法。首先在细胞培养皿中接种所需数目六倍的PK细胞，所述PK细胞为处于生长期的PK15细胞；然后将上述细胞浸入融合剂中，进行完全培养，保持温度始终保持在35摄氏度；24小时后进行转染；转染前，将转染剂加入至培养皿中，混合振荡，弃清；随后按比例，将siRNA与血清加入至培养皿中，混合均匀5分钟；转染10小时；高速离心；加入预凉的异丙醇，上下翻转混匀即可；引物工作液需要在离心前加入，并且事先需要在零下八十度的条件下保存；高速离心后需要用枪头敲打，洗涤沉淀物。本发明的有益效果是，可以有效鉴定PVCR，同时效果明显，表达清楚、稳定，为下一步能够成功建立模型奠定坚实基础。