一种TEV蛋白酶表达工程菌及其构建和应用

摘要

本发明涉及一种基于基因组的TEV蛋白酶表达体系。本体系是将受T7强启动子驱动的与麦芽糖结合蛋白基因malE融合的TEV蛋白酶基因和氯霉素抗性基因一起通过来源于λ噬菌体的重组酶所介导的同源重组方法整合至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)基因组中，并取代基因组中的malE基因区域而获得。所采用的是大肠杆菌表达菌株CGMCC No.7482。TEV蛋白酶可以采用亲和层析一步纯化，产量可达4.2mg/L。分离纯化TEV蛋白酶具有良好的酶切活性。本TEV蛋白酶表达体系可成为表达和纯化TEV蛋白酶的常规手段。