一种靶向杀伤HCV感染细胞的重组细胞凋亡酶-3

摘要

本发明涉及一种靶向杀伤HCV感染细胞的重组细胞凋亡酶-3，简称PTD-rCasp3，它由穿膜结构域PTD、NS5A/NS5B连接序列、大亚基、NS4A/NS4B连接序列与小亚基组成；表达载体是pET28a/PTD-rCasp3。转化大肠杆菌BL21后实现与PTD-rCasp3蛋白表达，用针对His标签的镍金属螯合柱纯化，蛋白裂解后获得纯的PTD-rCasp3蛋白。PTD-rCasp3在体外可以通过基因工程进行大量生产，纯化的蛋白PTD-rCasp3直接加入细胞培养液中就能进入HCV感染细胞内，重组的凋亡酶被切割与活化并引起细胞的凋亡，应用于体内时可以进入HCV感染的肝细胞，从而在感染细胞内NS3/4A蛋白酶的作用下水解、活化细胞凋亡酶，引起凋亡发生和清除HCV感染的肝细胞。