一种江西铅山红芽芋玻璃化法超低温保存脱毒的方法

摘要

江西铅山红芽芋玻璃化法超低温保存脱毒的方法：(1)在显微镜下切取红芽芋单芽长约1mm的茎尖；(2）茎尖在MS+KT2mg/L+NAA0.5mg/L+0.75M蔗糖的固体培养基上预培养3d；(3)茎尖预培养后，采用60％PVS2在25℃脱水60min，再用100％PVS2在0℃脱水90min，更换新的PVS2后直接投入液氮；(4)保存后，茎尖在37℃水浴中化冻。化冻后用MS+KT2mg/L+NAA0.5mg/L+1.2M蔗糖的液体培养基洗涤3次，每次10min。洗涤后的茎尖先暗培养5d(温度为25℃)再转入正常的光周期下(光照时间14h/d，光强约1500-2000lx，培养温度25℃)培养，15d左右茎尖可发育成正常的芽；(5)将萌发的芽转入生根培养基1/2MS+NAA0.1～0.5mg/L中培养，即可得到红芽芋脱毒苗。本发明与现有技术比较，红芽芋试管苗的脱毒率高，而且茎尖取材大、操作简单方便。