一种检测肠出血性大肠杆菌O157:H7活菌的方法

摘要

本发明公开了一种检测肠出血性大肠杆菌O157:H7活菌的方法，本发明是要解决现有实时荧光PCR不能有效区分死菌和活菌，导致对致病菌风险的过高估计的问题。该方法先进行待检样本的前处理；然后处理后的液体样品中加入PMA，控制PMA终浓度为15-20μg/mL，常温下于暗处孵育，卤钨灯照射处理；提取处理后样本的基因组DNA；以提取的样本基因组DNA为模板，进行实时荧光PCR定量检测样本中的目标菌；荧光定量PCR所用的引物、荧光标记探针如SEQ ID NO.1所示。本发明的方法耗时短，约1.5小时即可完成，大大缩短了检测时间。可广泛用于食源性致病菌检测领域。