一种防治不明原因复发性流产的中药及其制备方法

摘要

本发明涉及一种治疗不明原因复发性流产的中药，由以下重量份的药材制备而成：菟丝子12～24份、续断6～12份、桑寄生6～12份、黄芪12～24份、阿胶6～12份、白术6～12份、黄芩6～12份、砂仁6~9份、甘草2~6份；本发明采用水提醇沉的制备方法，提取其中的有效成分，去除无效成分，进一步增加了药物的疗效；本发明全方标本兼顾，共奏补肾固冲、养血安胎之功，从而达到防治URSA的目的。

说明书

技术领域

本发明涉及一种防治不明原因复发性自然流产的药物，具体涉及一种防治不明原因复发性自然流产的中药，本发明还涉及该中药的制备方法。

背景技术

复发性流产( recur rent spontaneous abort ion, RSA)指妊娠 20 周前，连续发生3 次自然流产。RSA中有40%～80% 是不明原因的，称为不明原因复发性流产(unexplained RSA，URSA)，是一种难以治愈的不育症，严重影响妇女生殖健康，患者再次发生自然流产的风险也高达70%～80%。URSA病因复杂，目前治疗主要采用妊娠激素及非特异性的免疫抑制剂方法，疗效尚不满意，且免疫治疗存在一定副作用，如交叉传染、感染、输血反应、过敏反应等，而且方法操作繁琐，多数医院因受条件限制而未能普及。中药安胎治疗，历史悠久，疗效确切，副作用小，与单纯西医治疗相比有明显优势。因此，研发URSA疗效确切且副作用小、价格低廉的中药制剂将为广大URSA患者带来福音，具有重要社会意义和巨大的市场前景。

发明内容

为了解决上述防治复发性自然流产药物疗效不满意的问题，本发明提供了一种防治复发性自然流产的中药及其制备方法。

本发明的技术方案如下：

一种防治URSA的中药，由下列重量份原药材制备而成：

菟丝子12～24份、续断6～12份、桑寄生6～12份、黄芪12～24份、阿胶6～12份、白术6～12份、黄芩6～12份、砂仁6~9份、甘草2~6份。

本发明的优选重量配比为：

菟丝子24份、续断12份、桑寄生12份、黄芪18份、阿胶12份、白术12份、黄芩12份、砂仁9份、甘草6份。

本发明采用如下制备方法：

按重量份称取以上9味药材，浸泡于8倍体积的水中，药物充分浸泡8小时，高压浓缩煎药机120℃煎煮90分钟，滤出药液；再加入5倍体积水，高压浓缩煎药机120℃煎煮90分钟，滤出药液；将两次滤出的药液合并，加热浓缩，浓缩液中加入乙醇至乙醇浓度为60%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清；沉淀中加入乙醇至乙醇浓度为75%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清；沉淀中加入乙醇至乙醇浓度为85%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清。将三次醇沉滤取的上清混匀后真空负压加热回收乙醇，加热浓缩，使其浓度为含生药 3.075～6.150克/毫升。    

本发明可以在浓缩提取物的基础上加入药学上允许的辅料，制成其他的剂型，如丸剂、片剂、胶囊剂、口服液、滴丸、缓控释制剂等多种剂型。

服用方法：口服，一重量份为一剂，日1剂，自妊娠开始服药，连续用药至妊娠3个月。

URSA属中医学“滑胎”范畴，中医认为胎儿居于母体之内，全赖母体肾以系之，气以载之，血以养之，冲任以固之。若母体肾气健壮，气血充实，冲任通胜，则胎固母安；反之，若母体脾肾不足，气血虚弱，冲任损伤，则导致胎元不固而致滑胎；多次流产，反过来更易损伤肾气，加重肾虚，以致屡孕屡堕。因此，肾虚冲任损伤、胎元不固是URSA主要病机，补肾固冲是其基本治则。我们在长期临床经验的基础上，以补肾固冲、养血安胎为治疗原则，配伍中药组方，采用水提醇沉法提取其有效成分，从而达到防治URSA的目的。

本发明方中君药菟丝子补肾益精，固肾安胎；臣药桑寄生、续断补肝肾，固冲任；佐药黄芪、白术、阿胶养血益气，以固胎元，黄芩清热安胎；使药甘草，调和诸药。全方标本兼顾，共奏补肾固冲、养血安胎之功，从而达到防治URSA的目的。本发明制备方法采用了水提醇沉法提取其中的有效成分，去除无效成分，进一步增加了药物的疗效，本发明药物无明显毒副作用，服用时无明显禁忌。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明。

实施例1

菟丝子24g、续断12g、桑寄生12g、黄芪18g、阿胶12g、白术12g、黄芩12g、砂仁9g、甘草6g浸泡于8倍体积的水中，药物充分浸泡8小时，高压浓缩煎药机120℃煎煮90分钟，滤出药液；再加入5倍体积水，高压浓缩煎药机120℃煎煮90分钟，滤出药液；将两次滤出的药液合并，加热浓缩至相对密度1.05-1.10  ，药液中加入乙醇至乙醇浓度为60%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清；沉淀中加入乙醇至乙醇浓度为75%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清；沉淀中加入乙醇至乙醇浓度为85%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清。将三次醇沉滤取的上清混匀后真空负压加热回收乙醇，加热浓缩，至浓度为含生药4.852克/毫升。

实施例2

菟丝子16g、续断8g、桑寄生8g、黄芪16g、阿胶8g、白术8g、黄芩8g、砂仁6g、甘草3g，浸泡于8倍体积的水中，药物充分浸泡8小时，高压浓缩煎药机120℃煎煮90分钟，滤出药液；再加入5倍体积水，高压浓缩煎药机120℃煎煮90分钟，滤出药液；将两次滤出的药液合并，加热浓缩至相对密度1.05-1.10  ，药液中加入乙醇至乙醇浓度为60%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清；沉淀中加入乙醇至乙醇浓度为75%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清；沉淀中加入乙醇至乙醇浓度为85%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清。将三次醇沉滤取的上清混匀后真空负压加热回收乙醇，加热浓缩，至浓度为含生药3.075 克/毫升。

实施例3

菟丝子20g、续断10g、桑寄生10g、黄芪22g、阿胶12g、白术12g、黄芩12g、砂仁9g、甘草4g，浸泡于8倍体积的水中，药物充分浸泡8小时，高压浓缩煎药机120℃煎煮90分钟，滤出药液；再加入5倍体积水，高压浓缩煎药机120℃煎煮90分钟，滤出药液；将两次滤出的药液合并，加热浓缩至相对密度 1.05-1.10 ，药液中加入乙醇至乙醇浓度为60%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清；沉淀中加入乙醇至乙醇浓度为75%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清；沉淀中加入乙醇至乙醇浓度为85%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清。将三次醇沉滤取的上清混匀后真空负压加热回收乙醇，加热浓缩，至浓度为含生药6.150 克/毫升。

实施例4

菟丝子20g、续断10g、桑寄生10g、黄芪20g、阿胶10g、白术10g、黄芩10g、砂仁8g、甘草6g，浸泡于8倍体积的水中，药物充分浸泡8小时，高压浓缩煎药机120℃煎煮90分钟，滤出药液；再加入5倍体积水，高压浓缩煎药机120℃煎煮90分钟，滤出药液；将两次滤出的药液合并，加热浓缩至相对密度1.05-1.10  ，药液中加入乙醇至乙醇浓度为60%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清；沉淀中加入乙醇至乙醇浓度为75%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清；沉淀中加入乙醇至乙醇浓度为85%，充分混匀，沉淀过夜，滤取上清。将三次醇沉滤取的上清混匀后真空负压加热回收乙醇，加热浓缩，至浓度为含生药3.876 克/毫升。

动物实验

（1）药物

取实施例1制备的浓缩液，灭菌后4 ℃冰箱保存，用于小鼠灌胃给药。

（2）小鼠分组与处理

SPF级CBA/J小鼠，雌性，10周龄；SPF级DBA/2小鼠，雄性，10周龄SPF级BALB/c小鼠，雄性，10周龄，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。建立CBA/J（雌）×DBA/2（雄）组合URSA小鼠模型，CBA/J（雌）×BALB/c（雄）组合正常妊娠小鼠模型。雌雄小鼠按2：1比例合笼，自合笼之日起，每天8：00观察阴栓，发见阴栓日确定为妊娠第1天。孕鼠随机分为URSA模型组、中药小、中、大剂量组，各10只。建立CBA/J（雌）×BALB/c（雄）组合正常妊娠小鼠模型，雌雄小鼠按2：1比例合笼，自合笼之日起，每天8：00观察阴栓，发见阴栓日确定为妊娠第1天，孕鼠10只作为正常妊娠对照组。小鼠置于室温24 ℃，相对湿度 60%～65%的超净动物饲养柜内，给予12 h光照，12 h暗室，自由饮水摄食。

URSA模型组及正常妊娠组小鼠每日灌胃生理盐水，中药小、中、大剂量组分别灌胃本发明中药复方提取物（2.05 g·kg^-1·d^-1、10.25 g·kg^-1·d^-1、20.5 g·kg^-1·d^-1），连续灌胃14天。于妊娠第14d 将小鼠处死，观察胚胎发育情况，胚胎丢失率计算参照Clark及赵爱民的文献报道方法。

（3）统计学分析 采用方差分析，P <0.05为差异有统计学意义。

（4）结果  下表1为各组胚胎丢失率对照表。

表1： 各组孕鼠胚胎丢失率对照表 （                                                ±s）

注：与URSA模型组比较，* P <0.05；与正常妊娠组比较，^△P <0.05。

经方差分析，与CBA/J×BALB/c正常妊娠小鼠比较，CBA/J×DBA/2组URSA模型小鼠流产率显著升高（P <0.05）；与CBA/J×DBA/2组URSA模型小鼠比较，中药组小鼠流产率明显价格低（P <0.05），且疗效与中药提取物浓度呈剂量依赖性，提示本发明中药能有效防治URSA模型小鼠胚胎丢失。

临床实验

（1）药物

取实施例3制备的浓缩液，灭菌后4 ℃冰箱保存，

（2）研究对象入选标准

①入选标准：选取 2011年 1 月 2012 年 12月在山东中医药大学附属医院就诊的 URSA患者 60例，均经详细询问病史及常规病因筛查，年龄 23～38 岁，连续自然流产数次≥2 次，最多 5 次，均为早期( < 12 周)流产。所有患者分为中药治疗组 30例和西药治疗组30 例。中药治疗组平均年龄(27.39±5.75)岁，西药治疗组平均年龄(28.06±5.56)岁，2 组年龄经统计学处理，差异无显著性意义( P> 0.05)，具有可比性。

②排除标准：染色体异常；女方生殖道解剖异常；内分泌方面的异常；感染；自身免疫性抗体(如磷脂抗体、子宫内膜抗体、抗核抗体等)为阴性；男方精液质量分析正常及自身抗体阴性。

③治疗方法：中药治疗组口服本发明中药提取物，10ml/次（6.15 g/ml），日2次，连续服用至妊娠3个月。西药治疗组肌注黄体酮注射液（浙江仙琚制药股份有限公司，国药准字H33020829），20mg/次，日1次，连续注射至妊娠3个月。本研究经山东中医药大学附院伦理委员会批准，所有研究对象签署知情同意书。观察2组妊娠情况，并进行统计学分析。

（3）统计学分析 采用X²检验，P <0.05为差异有统计学意义。

（4）结果  下表2为2组妊娠情况对照表。

表2： 各组妊娠情况对照表 （±s）

 例数妊娠成功（例）妊娠失败（例）妊娠成功率（%）中药治疗组3026*4*86.7%西药治疗组30201066.7%

注：与西药治疗组比较，* P <0.05

经X²检验，与西药治疗组比较，中药治疗组妊娠成功例数显著升高（P <0.05），妊娠失败例数显著降低（P <0.05），妊娠成功率明显升高，提示本发明中药防治URSA具有良好临床疗效。