一种结核杆菌PhoPR基因缺失突变菌株的构建及应用

摘要

本发明公开了一种结核杆菌PhoPR基因缺失突变菌株的构建方法及应用。基于融合PCR技术以及T载体克隆技术，首次构建并鉴定PhoP/PhoR基因的置换型缺失突变载体T‑PhoPR，利用电转化技术使得重组的PhoP/PhoR基因缺失突变载体进入结核分枝杆菌感受态细胞，通过染色体同源重组以及多重筛选、鉴定，首次获得含有卡那霉素抗性基因的结核杆菌PhoPR基因缺失突变菌株。本发明构建的结核杆菌PhoPR基因缺失突变菌株，同时敲除了参与调控MTB感受宿主微环境变化的PhoP基因和PhoR基因，可降低MTB的耐药性，使其对抗结核药物恢复敏感性，为探索MTB PhoP/PhoR双组分系统对结核分枝杆菌耐药性的调控机制提供一定的帮助，为进一步寻找新的抗结核药物作用靶点奠定基础提供依据。