基于CjCas9和VPR核心结构域的融合蛋白、相应的DNA靶向激活系统及其应用

摘要

本发明公开了一种基于CjCas9和VPR核心结构域的融合蛋白、相应的DNA靶向激活系统及其应用，融合蛋白，包括两个异源多肽结构域，其中一个多肽结构域包含具有转录激活活性的VPR蛋白；另一种多肽结构域包含CjCas9蛋白，所述CjCas9蛋白为dCjCas9亚型、mini‑dCjCas9亚型或CjCas9野生型，所述dCjCas9亚型中含有D8A和H559A单位点氨基酸突变；所述mini‑dCjCas9亚型包含D8A单位点氨基酸突变以及大部分HNH结构域的缺失。一种DNA靶向激活系统，包括上述所述的融合蛋白和至少一种向导RNA，所述向导RNA包含针对目的基因启动子区域设计的一段长度为14bp‑22bp的序列和一段80bp的骨架序列。上述所述的DNA靶向激活系统在进行基因的靶向激活中的应用。本发明提供的DNA靶向激活系统具有体积小特异性高，激活效果强易于合成，成本低等优点。