人博卡病毒1型感染性克隆的构建方法及其应用

摘要

本发明公开了一种人博卡病毒1型感染性克隆的构建方法及其应用，属于分子生物学及基因工程领域。将人博卡病毒的ITR区序列分为5个片段，分段连接到去除B19基因、添加多克隆位点的pB19‑4244d载体上，得到人博卡病毒1型感染性克隆。本发明的人博卡病毒1型感染性克隆，可用于制备基因治疗载体。酶切去除人博卡病毒1型感染性克隆的人博卡病毒基因1505nt‑4138nt，插入含启动子、外源基因的DNA片段，获得基因治疗载体。本发明构建的人博卡病毒1型感染性克隆可在细胞上有效复制，构建的人博卡病毒基因治疗载体可表达外源蛋白并对肿瘤细胞有杀伤效应。