PIK3CA基因E545K突变数字PCR检测体系的优化方法及检测产品

摘要

本发明涉及一种PIK3CA基因E545K突变数字PCR检测体系的优化方法，检测体系包括上游引物、下游引物、野生型探针、突变型探针、野生型模板和突变型模板；野生型模板是酶切后的正常人体gDNA，突变型模板是酶切后的插入PIK3CA基因E545K突变片段的突变质粒；将突变型模板和野生型模板按一定的拷贝数比例配制成标准品，采用数字PCR以中突变频率标准品为模板进行反应，根据反应数据制作数据统计图，选定野生型的荧光区域和突变型的荧光区域。采用数字PCR以野生型模板为模板进行反应，确定背景阈值。通过本发明的PIK3CA基因E545K突变数字PCR检测体系的优化方法优化后的检测产品准确度更高。