棋盘花碱在制备变态反应性疾病治疗药物中的用途

摘要

本发明属于医药领域，具体涉及棋盘花碱在制备变态反应性疾病治疗药物中的用途。研究显示棋盘花碱对组胺所致血管通透性增加，以及过敏原所致过敏性休克均具有一定的改善效果。其给药途径优选为口服给药或静脉注射给药。

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及棋盘花碱在制备变态反应性疾病治疗药物中的用途。

背景技术

变态反应性疾病也称为过敏性疾病，是过敏性变态反应引发的身体症状。此类疾病通常由人体与抗原物质接触后引发，由于过度的免疫反应，导致生理功能的紊乱或组织损伤。变态反应性疾病的抗原物质即过敏原极为广泛，植物花粉、尘螨、真菌孢子、药物等进入体内均可能诱发急性或慢性变态反应性疾病。如过敏性鼻炎、过敏性哮喘、荨麻疹、湿疹、血管神经性水肿、过敏性胃炎、药疹等等。其中部分变态反应性疾病如药物过敏等发病迅速，且对呼吸、心血管等关键系统有严重影响，容易导致过敏性休克症状。

变态反应性疾病的细胞学发病机制为，抗原进入机体后与附着于肥大细胞、嗜碱性粒细胞的IgE结合，导致细胞释放生物活性物质，引起平滑肌收缩、血管通透性增加等病理变化。此类生物活性物质包括组胺、缓激肽、白三烯、前列腺素等等。

用于变态反应性疾病的药物主要包括：

（1）组胺受体拮抗剂：用于抑制组胺与其受体结合，通过抑制组胺与受体的结合，抑制组胺的生物活性。这类药物属于非特异性异常抗变态反应药，主要有苯海拉明、异丙嗪、氯苯那敏等。该类药物具有较强的中枢神经抑制作用，因此应用受限。第二代抗组胺药物有特非那定、氯雷他定、阿司咪唑等，部分第二代抗组胺药物有明显的心脏毒性。目前第三代组胺药物如非索非那丁、左旋西替利嗪等已经开始上市。

（2）过敏反应介质阻释药：通过稳定肥大细胞的细胞膜，避免抗原与IgE结合导致细胞释放组胺、缓激肽、白三烯等过敏反应介质。此类药物主要包括色甘酸钠、酮替芬等。

（3）白三烯受体拮抗剂：主要用于抑制白三烯释放引发的症状，此类药物主要包括孟鲁斯特、扎鲁斯特等。

（4）抑制免疫反应的药物：通过抑制抗原抗体反应抑制过敏症状，此类药物主要包括肾上腺糖皮质激素、免疫抑制剂等。

（5）降低血管通透性的药物：钙可以降低毛细血管和细胞膜的通透性，因此含钙药物可用于降低血管通透性，抑制过敏诱发的血管渗透性增高。

对于不同的变态反应性疾病其治疗方法存在一定的差异。例如过敏性休克是一种严重的过敏反应，发病急，可出现导致威胁生命的呼吸循环衰竭，死亡率较高。患者往往存在血浆外渗、血容量不足、呼吸衰竭等表现，因此多采用紧急注射肾上腺素阻止过敏介质释放，改善血压；联合注射抗组织胺药物；吸氧等。而非急性变态反应性疾病多采用口服药物进行常规治疗。

除上述人工合成的化学物质外，天然植物中存在的一些活性物质也已被发现具有明确抗变态反应作用。典型的如：

黄酮类药物中的槲皮素、山柰酚能够抑制肥大细胞脱粒，从而发挥抗过敏作用，对过敏性哮喘动物模型具有改善效果。生物碱类药物中苦参碱能明显对抗巴豆油、角叉菜胶诱发的过敏反应。醌类药物中，紫草素能够抑制阻止IgE诱导的组胺释放。除此之外，天然植物中的木兰脂素、姜黄素等也已被发现具有抗过敏作用。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的之一是提供一种天然活性物质的新的用途，具体而言是提供棋盘花碱在制备变态反应性疾病治疗药物中的用途。本发明的技术方案如下：

棋盘花碱在制备变态反应性疾病治疗药物中的用途。其中所述棋盘花碱英文名为Zygadenine；CAS号：545-45-9。

优选的，所述变态反应性疾病为过敏性皮炎。

优选的，所述变态反应性疾病为过敏所致血管通透性增加。

优选的，所述变态反应性疾病为过敏性休克。

优选的，所述变态反应性疾病治疗药物为外用药物

优选的，所述变态反应性疾病治疗药物为口服药物。

优选的，所述变态反应性疾病治疗药物为静脉注射药物。

当用于治疗过敏性皮炎时，含棋盘花碱的变态反应性疾病治疗药物优选为外用药物，尤其是透皮给药药物。

当用于治疗过敏所致血管通透性增加时，含棋盘花碱的变态反应性疾病治疗药物优选为静脉注射药物或口服药物。

当用于治疗过敏性休克时，含棋盘花碱的变态反应性疾病治疗药物优选为静脉注射药物。

对于给药剂量而言，含棋盘花碱的变态反应性疾病治疗药物的给药剂量以体重60kg计算，为每日1mg～20 mg。当用于过敏性休克治疗时可联合肾上腺素用于紧急治疗。

本发明的另一方面还提供了一种以棋盘花碱为活性成分的抗变态反应药物。

作为一个优选的方案，所述以棋盘花碱为活性成分的抗变态反应为外用药物。

优选的，所述外用药物为外用凝胶制剂。所述外用凝胶制剂由棋盘花碱、卡波姆940、甘油、三乙醇胺、乙二胺四乙酸二钠和蒸馏水制成。

作为另一个优选的方案， 所述以棋盘花碱为活性成分的抗变态反应为口服药物。

优选的，所述口服药物为口服片剂。所述口服片剂由棋盘花碱、羧甲基淀粉钠、淀粉、麦芽糊精、硬脂酸镁和水制成。

作为再一个优选的方案， 所述以棋盘花碱为活性成分的抗变态反应为静脉注射药物。优选的，所述静脉注射药物由棋盘花碱、羟丙基-β-环糊精、乙醇和注射用水制成。

经过实验研究发现，棋盘花碱具有抗过敏作用，对变态反应性疾病如过敏所致血管通透性增加、过敏性休克具有一定的改善作用，有望用于变态反应性疾病的治疗。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明进行进一步说明。

实施例1 棋盘花碱外用凝胶

原辅料：棋盘花碱10g、卡波姆940 20g、甘油450g、三乙醇胺 50g、乙二胺四乙酸二钠0.2g、蒸馏水加至1000g。

制备：称取棋盘花碱10g、乙二胺四乙酸二钠0.2g加适量蒸馏水溶解，加入甘油450g混合，研磨均匀，搅拌下加入卡波姆940 20g，放置过夜充分溶胀，搅拌下缓慢加入三乙醇胺 50g制成凝胶，加水至1000g，分装即可。

实施例2 棋盘花碱口服片剂

原辅料：棋盘花碱200g、羧甲基淀粉钠250g、淀粉400g、麦芽糊精500g、硬脂酸镁10g。

制备：称取棋盘花碱200g、羧甲基淀粉钠250g、淀粉400g、麦芽糊精500g分别研磨，过100目筛；称取硬脂酸镁10g过40目筛；将处方量棋盘花碱、羧甲基淀粉钠、麦芽糊精混合，将淀粉配制成10%淀粉浆，加入棋盘花碱、羧甲基淀粉钠、麦芽糊精混合物制备软材；所得软材过16目筛制粒，70℃干燥后过16目筛整粒，然后加入硬脂酸镁混合均匀后压片。

实施例3 棋盘花碱注射剂

原辅料：棋盘花碱10g，羟丙基-β-环糊精 100g，乙醇50ml、注射用水2000ml。

制备：称取10g棋盘花碱加入50ml乙醇中；称取100 g羟丙基-β-环糊精溶于2000ml注射用水中。将棋盘花碱乙醇混合液加入羟丙基-β-环糊精水溶液中，室温下100转/分钟搅拌3小时，微孔滤膜过滤除去热原，分装为1000支注射剂。

实施例4 棋盘花碱抗被动过敏实验

1.抗血清的制备：

取卵白蛋白溶于生理盐水。取雄性SD大鼠6只，肌注卵白蛋白生理盐水溶液，每只给予卵白蛋白5mg，并每只腹腔注射完全弗氏佐剂0.5ml；隔日1次，共4次。末次致敏后12天采血，2000rpm，离心10分钟，分离血清，-20℃保存。使用前将抗血清用生理盐水稀释成1:2、1:8两个浓度梯度，现用现配。

给药及致敏

取雄性SD大鼠12只，体重200 g～250g，随机分为两组，每组6只，模型组灌胃生理盐水，每日1次，每次1.5ml，连续灌胃7日；治疗组采用棋盘花碱生理盐水混合液灌胃，将棋盘花碱加入生理盐水制成每1.5ml含0.2mg棋盘花碱的混合液，每日灌胃1次，每次1.5ml，连续灌胃7日。于第5次灌胃后2小时将各组动物背部脊柱两侧1.5cm处剪毛，每侧取2点，每点间隔2cm，皮内注射抗血清进行致敏。

其中左侧2点分别注射1:2、1:8的抗血清生理盐水溶液；右侧对应2点分别注射1:2、1:8的抗血清生理盐水溶液。

激发

末次给药后2小时，即致敏48小时后，采用含卵白蛋白的0.5%伊文思兰溶液进行激发，每只大鼠静脉注射含卵白蛋白的0.5%伊文思兰溶液2mL，其中含卵白蛋白5mg。

测定方法

激发30 分钟后处死各组动物，取背部注射位点皮肤，翻转皮肤，检查内侧蓝斑并测量蓝斑直径，不规则蓝斑的直径以长径与短径之和的一半计算。每只大鼠蓝斑直径按照注射位点的浓度梯度进行统计，即同一浓度梯度下的两个注射位点取直径的均值代表该浓度下的蓝斑直径。如每只大鼠背部左右两侧各一个1:2的抗血清用生理盐水注射位点，统计时取其蓝斑直径的均值。

结果

各组大鼠蓝斑直径测定结果见表1。

表1 各组大鼠蓝斑直径

模型组大鼠1:2浓度梯度下的12个蓝斑的直径为1.21±0.07 cm；模型组大鼠1:8浓度梯度下的12个蓝斑的直径为0.62±0.04 cm。该组24个注射位点均有肉眼可见蓝斑。

治疗组大鼠1:8浓度梯度下的12个注射位点中，有2两个无肉眼可见蓝斑。治疗组大鼠1:2浓度梯度下的12个蓝斑的直径为0.67±0.10 cm，1:8浓度梯度下的12个蓝斑的直径为0.21±0.08 cm。

治疗组两个浓度梯度下的蓝斑直径均显著小于模型组（p<0.01），表明在实验剂量及给药时长下，棋盘花碱灌胃给药对大鼠被动过敏具有明显抑制作用。鉴于被动过敏实验的基本原理，即抗原诱发过敏反应，导致组胺等介质释放，血管通透性增加，导致伊文思兰渗漏到组织内，使皮肤出现蓝斑。可见，棋盘花碱灌胃给药对过敏所致血管通透性增加具有抑制效果。

由于过敏性休克的基本病理机制是由于过敏原触发肥大细胞释放组胺等介质，导致血管通透性升高，血液迅速渗透到血管外组织，引发血容量不足、水肿和支气管痉挛。因此，可以合理推测棋盘花碱抑制过敏所致血管通透性增加的作用可用于过敏性休克的治疗。

以下实施例5采用豚鼠初步考察棋盘花碱对过敏性休克的干预效果。

实施例5 棋盘花碱对过敏性休克的干预效果研究

豚鼠，20只，体重250g -350g，随机分为2组，每组10只。

每只豚鼠皮下注射0.1ml小牛血清致敏，致敏15天后心脏注射小牛血清1.0ml激发。

激发后立即进行静脉注射。模型组每只注射生理盐水0.5ml，治疗组注射棋盘花碱生理盐水混合液0.5ml，每只给予棋盘花碱0.1mg。

给药后观察各组豚鼠死亡时间，并进行组间比较。死亡时间以激发完成即心脏注射小牛血清后开始计算。各组动物死亡时间统计结果见表2。

表2各组豚鼠死亡时间统计

结果显示，治疗组动物死亡时间超过10min的动物为60%，模型组死亡时间超过10min的动物10%。其中模型组最短死亡时间不足4分钟，最长死亡时间超过12分钟不足13分钟。治疗组最短死亡时间超过6分钟，最长死亡时间超过15分钟，不足16分钟。两组差异有统计学意义（P<0.05）。说明棋盘花碱单独静脉注射给药有延缓过敏性休克豚鼠死亡时间的趋势。