Combiner cristallographie cinetique et spectroscopie optique

摘要

Chaque annee, grace au rayonnement synchrotron, les structures tridimensionnelles d'une myriade demacromolecules biologiques de plus en plus complexes sont determinees par cristallographie aux rayons X. Malgre toute l'importance de ces structures, la seule connaissance de l'organisation spatiale d'une proteine au repos reste souvent insuffisante pour en comprendre la fonction biologique, celle-ci resultant fondamentalement des mouvements conformationnels executes lors du cycle reactionnel. Pour comprendre cette synergie structure-dynamique-fonction, il est essentiel de recourir a la cristallographie cinetique , qui permet d'obtenir les structures de proteines dans differents etats le long de leur cycle reactionnel. De plus, la caracterisation par spectroscopie optique de ces etats s'avere souvent cruciale pour les identifier et en affiner la connaissance. Cet article decrit l'interet de ce couplage cristallographie cinetique/spectroscopie optique in crystallo dans le cas des proteines fluorescentes de la famille GFP, en particulier pour les proteines fluorescentes phototransformables dont la photophysique tres complexe peut etre apprehendee en correlant les structures caracteristiques de chaque etat de fluorescence avec leur signature spectroscopique electronique (absorbance et fluorescence) ou vibrationnelle (Raman). Le cas de la proteine IrisFP, particulierement fascinant, est decrit en detail.