СКРЫТЫЕ ГЕТЕРОКАРИОНЫ В ШТАММАХ Sqccharomyces cerevisiae ПСЕВДОПЛЕЙОТРОПНАЯ СУПРЕССИЯ В МНОЖЕСТВЕННО МАРКИРОВАННОМ ШТАММЕ YPH857

摘要

Из множественно маркированного штамма YPH857 с низкой частотой сегрегируют клоны, имеющие фенотип плейотропной супрессии, названный нами Ppsu~+. Эта супрессия распространяется на делеции в генах ТRP1, ЯШ и инсерцию в гене URA3. В отличие от исходной культуры YPH857, которая несет неидентифицированную мутацию резистентности к циклогексимиду, Ррsu~+-клоны проявляют сниженный уровень устойчивости к этому ингибитору белкового синтеза, плохо скрещиваются и способны формировать аски на стандартной среде для споруляции. Сравнительный анализ суммарной ДНК, выделенной из штамма YPH857 и Ррsu~+-сегрегантов, методом гибридизации по Са-узерну свидетельствует в пользу присутствия у последних чужеродного ядра. У Ррsu~+-штаммов помимо делеционных и инсерционной аллелей, типичных для YPH857, обнаружены аллели дикого типа. Кроме того, они содержат 2-мкмДНК Scp3-типа (с делецией одного из двух сайтов узнавания для рестриктазы EcoRI и HpaI-сайта, в то время как 2-мкм ДНК у YPH857 относится к Scpl-типу) и проявляют гетерогенность по наличию одного сайта узнавания EcoRl в гене 5S рибосомальной РНК. Было выдвинуто предположение, что "скрытое" ядро принадлежит маложизнеспособному штамму, выживающему в небольшой части клеток в неэкспрессируемом виде. С низкой вероятностью ядра "скрытого" штамма и YPH857 сливаются, давая способные к споруляции Ррsu~+-клетки. В ряде случаев Ррsu~+-клон оказывается гетерогенен — часть его клеток содержит ядра в неслившемся гетеро-кариотическом состоянии. Это предположение экспериментально подтверждается селекцией на среде с циклогексимидом из Ррsu~+-клонов Сyg~г-колоний с геномом YPH857.