СУПРЕССИЯ СДВИГА СЧИТЫВАНИЯ ПРИ ПОДАВЛЕНИИ ТЕРМИНАЦИИ ТРАНСЛЯЦИИ У ДРОЖЖЕЙ Saccharomyces cerevisiae. ЗНАЧЕНИЕ 'ЛОКАЛЬНОГО' КОНТЕКСТА

摘要

Проведено исследование значения глобального и локального контекста мРНК для супрессии мутации типа "сдвиг рамки считывания" Iys2-90 у S. cerevisiae. Для этой цели мы использовали сайт-направленный мутагенез и анализ нуклеотидной последовательности мРНК LYS2. Выявлены черты глобального контекста участка мРНК. LYS2 вблизи вставки лишнего Т (Iys2-90), которые соответствуют критериям, характерным для трансляционного сдвига считывания: 1) потенциальная способность этого участка образовывать вторичную структуру типа псевдоузла, 2) последовательность гептануклеотида CUUUGAC с "голодным" кодоном-нонсенсом UGA в псевдоузле. Выявлены также особенности локального контекста, необходимого для фенотипического проявления трансляционного восстановления рамки считывания в форме супрессии. Две аминокислотные замены, определяемые последовательностью нуклеотидов между вставкой лишнего U и нонсенсом UGA, возникающим через два кодона, не имеют самостоятельного фенотипического проявления. Выявлена зависимость эффективности супрессии сдвига считывания от типа кодона-нонсенса (UGA > UAG > UAA"), находящегося в одном и том же положении после вставки лишнего нуклеотида. При инактивации терминации трансляции нонсенс-супрессия и супрессия сдвигов считывания коррелируют. Эти факты указывают на то, что трансляционный сдвиг считывания при супрессии за счет инактивации фактора терминации трансляции с наибольшей вероятностью происходит на кодоне-нонсенсе. возникшем после вставки лишнего нуклеотида.