ВЛИЯНИЕ МУТАЦИЙ В ТРИПЛЕТАХ АТГ ОТКРЫТОЙ РАМКИ СЧИТЫВАНИЯ SUP35 НА ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ ДРОЖЖЕЙ Saccharomyces cerevisiae

摘要

Открытая рамка считывания SUP35, кодирующая жизненно важный фактор терминации трансляции eRF3, содержит три кодона АТГ (АТГ15 АТГ_(124) и АТГ_(254))- Ранее другими авторами выявлены два транскрипта SUP35: основной, соответствующий полноразмерной рамке считывания, и минорный, соответствующий З'-концевому участку SUP35, начинающемуся с третьего кодона АТГ (АТГ_(254)). В настоящей работе мы получили мутации в триплетах АТГ_1 АТГ_(124) иАТГ_(254), а также двойные мутации, объединяющие точковую мутацию в одном из трех триплетов АТГ и делецию сайта связывания с транскрипционным фактором Abfl в промоторе SUP35 (sup35-AAbfl), и анализировали влияние этих мутаций на жизнеспособность дрожжей. Мутации триплетов АТГ_(124) и АТГ_(254)как сами по себе, так и на фоне делеции sup35-DELTA Abfl не влияли на жизнеспособность. Мутация sup35-AGGj (AТГ_1 -> АГГ) приводит к летальности при выращивании клеток на глюкозе в качестве источника углерода. Замена глюкозы на галактозу или голодание по гистидину частично восстанавливает жизнеспособность мутантов sup35-AGG_1, но не двойных мутантов sup35-DELTA Abfl, AGG_1. Восстановление жизнеспособности мутанта sup35-AGG_1 в этих условиях можетобъясняться появлением или увеличением продукции коротких пептидов, синтезирующихся с триплетов мРНК SUP35 АУГ_(124) или АУГ_(254), или увеличением продукции полноразмерного транскрипта SUP35 в сочетании с инициацией трансляции с неканонического кодона АГГ_1. Полученные данные подтверждают, что экспрессию гена SUP35 на уровне транскрипции и/или на уровне трансляции регулируют условия среды.